用于提高CHO细胞的表达效率的CRISPR-Cas13d系统以及重组CHO细胞

摘要

本发明公开了一种用于提高CHO细胞的表达效率的CRISPR‑Cas13d系统以及采用该系统制备得到的重组CHO细胞。本发明提供了用于抑制AMPK基因表达的物质在促进CHO细胞表达外源蛋白中的应用。本发明保护sgRNA_AMPK‑1，其靶序列结合区如序列3中第1至21位核苷酸所示。本发明保护一种特异重组质粒，其表达所述sgRNA_AMPK‑1和Cas13d蛋白。本发明保护表达sgRNA_AMPK‑1和Cas13d蛋白的重组慢病毒。本发明的发明人通过CRISPR/Cas13d系统有效抑制了CHO细胞中的AMPK基因表达，得到了重组CHO细胞,表达外源蛋白的能力极其显著的提高,可以作为生物反应器大大提高生物制品的产量。本发明对于生物制药领域具有巨大的应用前景。