基于淀粉样蛋白实现小分子肽类高效分泌表达的方法及其应用

摘要

本发明公开了一种基于淀粉样蛋白实现小分子肽类高效分泌表达的方法及其应用。该方法包括如下步骤：将自剪切短肽通过一个连接肽与自聚集肽进行拼接，得到融合蛋白；然后将信号肽连接到融合蛋白的N端，得到表达载体I；再将小分子肽类连接到表达载体I上，得到分泌表达载体II；敲除细菌基因组中的csgBAC基因，构建突变株，得到表达宿主；将分泌表达载体II转化到表达宿主中，再将得到的工程菌通过诱导表达，离心收集菌体，加入诱导剂，再离心收集上清，得到小分子肽类。本发明将融合蛋白表达至菌体表面，利用自剪切短肽的自剪切特性，无需细胞破碎、蛋白纯化等繁琐操作，且得到的小分子肽类与化学合成的小分子肽类具有相同的抑菌活性。