一种羊胚胎玻璃化冷冻保存液配方及冷冻方法

摘要

本发明公开了一种羊胚胎玻璃化冷冻液及冷冻方法。该冷冻液包括基础液、蔗糖、乙二醇和丙二醇；其中，基础液由SOF‑HEPES溶液和胎牛血清组成，体积比为6‑9：2‑1；蔗糖在冷冻液中的浓度为0.5‑0.8mol/L；乙二醇在冷冻液中的体积分数为15％；丙二醇在冷冻液中的体积分数为12‑21％。冷冻方法包括下述步骤：将准备冷冻的羊胚胎先放入基础液中，然后移入预平衡液中平衡3‑8min，再转移到羊胚胎玻璃化冷冻液中平衡30‑40s，利用毛细管虹吸的原理，快速吸入OPS管中，快速投入液氮。本方法对绵羊早期胚胎的冷冻效果优于含有DMSO的冷冻保护液，特别是适合于冷冻卵裂期胚胎。