一种基于循环酶修复介导的双信号放大策略检测胸腺嘧啶DNA糖基化酶活性的方法

摘要

本发明公开了一种用于检测胸腺嘧啶DNA糖基化酶活性的方法，通过由胸腺嘧啶DNA糖基化酶引发、酶修复辅助的循环滚环指数扩增和核酸内切酶Ⅳ催化介导的循环切割实现实时检测胸腺嘧啶DNA糖基化酶活性的荧光方法；由于尿嘧啶切除辅助的循环滚环扩增和基于核酸内切酶Ⅳ的循环切割效率都很高，且尿嘧啶介导的指数扩增能极大地抑制非特异性扩增，因此该方法的检测灵敏度很高，经检测，所述方法对胸腺嘧啶DNA糖基化酶的检测下限可达5.6×10^‑7U/μL；同时，本发明利用胸腺嘧啶DNA糖基化酶和尿嘧啶DNA糖基化酶的自身修复特性，使整个修复反应严格按照自然修复机制进行，因此本方案的特异性很高。