构建多西环素调控表达c-met蛋白的大鼠骨髓间充质干细胞细胞株的方法

摘要

本发明公开一种多西环素调控表达c‑met蛋白的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)细胞株的构建方法，即通过构建rtTA基因慢病毒表达载体，并转染到BMSCs中，以获得稳定高效表达rtTA蛋白的BMSCs细胞株(即Tet‑On Advanced BMSCs细胞株)，然后再构建Len‑TRE minCMV‑c‑met/ALB‑GFP慢病毒载体，并转染到Tet‑On Advanced BMSCs中，通过流式细胞仪筛选GFP阳性BMSCs，最终获得GFP（+）Tet‑on‑c‑met BMSCs细胞株；本发明获得的BMSCs细胞株，可以通过加入多西环素诱导表达c‑met蛋白，对于研究该细胞株回输体内治疗肝衰竭，BMSCs顺HGF浓度定向归巢和分化能力，以及该能力与HGF/c‑met轴表达水平之间的量效关系具有重要意义。