一种重组酶复合物及体外同源重组无缝克隆的方法

摘要

本发明涉及一种重组酶复合物，该重组酶复合物来源于大肠杆菌Rec同源重组酶，包括RecE、RecT和Gamma蛋白。本发明还提供了一种体外同源重组无缝克隆的方法，只需将两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合，在该重组酶复合物的催化下，高效率地将目标DNA定向克隆到任意载体的任意位点，克隆阳性率可高达95％以上。本发明的方法尤其适用于DNA大片段的克隆。本发明弥补了传统克隆方法操作繁琐、费时、失败率较高等缺陷，可以为DNA体外重组提供一种快速便捷高效的克隆方法，在细胞学基础研究和工农业生产、医药保健等方面奠定重要的基础。