一种含有更多丝氨酸的谷胱甘肽过氧化物酶GPX1突变体及其制备方法

摘要

一种含有更多丝氨酸的谷胱甘肽过氧化物酶GPX1突变体及其制备方法，属于生物技术领域。先用基因突变或合成法获得突变体基因，再通过营养缺陷型原核表达系统或营养缺陷型和SPP低温联合表达系统，将GPX的催化基团SeCys引入到突变体的底物结合部位，结果赋予其高的GPX的活性；或者先将靶基因连同SeCys插入序列组装到分泌型哺乳类细胞表达载体上，再将SeCys插入序列结合蛋白2组装到胞内型哺乳类细胞表达载体上，将两种载体共转染同一哺乳细胞株，在亚硒酸钠存在下用哺乳细胞合成GPX。本发明方法简单，突变体活力和产量高、稳定性好，避免包涵体复性造成的产率下降和失活，从而解决天然GPX来源有限和性质不稳定问题。