一种基于西班牙盐盒菌和pyrF基因的遗传操作系统及其应用

摘要

本发明公开了一种基于西班牙盐盒菌和pyrF基因的遗传操作系统及其应用。该遗传操作系统包括重组嗜盐古菌和重组质粒载体；重组嗜盐古菌按照包括如下步骤的方法制备得到：使含有SEQ ID NO：1所示蛋白的编码基因的出发嗜盐古菌中的SEQ ID NO：1所示蛋白的编码基因的功能丧失，得到的重组菌为所述重组嗜盐古菌；重组质粒载体中至少含有如下元件：在大肠杆菌中复制所需的复制原点、用于筛选大肠杆菌转化子的抗性选择标记基因的表达盒、SEQ ID NO：1所示蛋白的编码基因的表达盒、供外源基因插入的多克隆位点。该遗传操作系统可作为一个高效的基因敲除系统，可以对Haloarcula hispanica进行广泛的基因功能研究和代谢途径阐明。实验证明，用本发明系统进行遗传转化获得阳性重组子的频率大大提高。