一种以小麦麸皮为原料提取阿拉伯木聚糖的方法、阿拉伯木聚糖和应用

摘要

本发明公开了一种以小麦麸皮为原料提取阿拉伯木聚糖的方法，步骤如下：小麦麸皮清洗多次后，烘干，粉碎过筛备用；提取预处理：进行弱碱处理；挤压膨化；提取处理：利用水提法提取，离心，收集上清液；调整pH，再次离心，收集上清液；将收集的上清液真空浓缩，加入乙醇沉淀至完全，离心，收集沉淀物；复溶后进行透析后除去其中的盐组分；真空浓缩后冷冻干燥，得到阿拉伯木聚糖。本方法在提高提取效率的同时减少了污染，可以充分利用小麦麸皮资源，实现其附加值，变废为宝；提取方法简单，成本低，污染小，且本发明制备的阿拉伯木聚糖具有较高的可溶性膳食纤维水平，具有很好的应用前景。

说明书

技术领域

本发明属于农副产物精深加工技术领域，尤其是一种以小麦麸皮为原料提取阿拉伯木聚糖的方法、阿拉伯木聚糖和应用。

背景技术

膳食纤维是指不能被人体消化道酶分解的植物源食物成分，主要是非淀粉类多醣及木质素等。前期研究表明，可溶性膳食纤维对高血压、高血脂、二型糖尿病以及肥胖等具有较好的缓解作用，并能有效的增强胃肠道免疫和改善肠道健康。随着人们生活水平的提高，三高食品和精细食品在人们日常饮食中的比例不断增加，导致膳食纤维营养素在饮食结构中严重缺失。与此同时，国内糖尿病以及其他心血管疾病的患病率也逐年增加。据国际糖尿病联盟(IDF)2021年发布的最新数据，我国糖尿病患者(20～79岁)已达到1.409亿，其中Ⅱ型糖尿病患者约占90％。同时，我国成年人中糖尿病前期人群高达50.1％，其中每年有5％～10％的患者进展为糖尿病。因此，膳食纤维在食品中的强化添加只管重要，已成为国家和人民的重大需求。

小麦是我国的主要农作物之一，其加工副产物麸皮年产量高达1.3亿吨。作为植物细胞中主要的半纤维素成分(约占细胞干重的35％)，阿拉伯木聚糖(AX)是一种重要的可溶性膳食纤维大量存在于小麦麸皮中。然而，自然界中很大一部分AX未被有效利用，造成很大的资源浪费。因此，以麦麸为原料对AX进行高效提取，将其作为膳食纤维原料强化添加到相关食品、药品中，即可提升人们日常膳食纤维摄入水平。鉴于AX的重要健康作用，国家食品安全风险评估中心已于2022年3月14日针对新食品原料阿拉伯木聚糖公开征求意见，这是2022年首个征求意见的新食品原料。作为功能糖的一种，阿拉伯木聚糖具有多种保健作用，有望在助消化、控血糖、提升免疫、减肥等功能性食品中得到应用。

目前，AX的提取方法主要分为三大类：热水浸提、碱法提取以及酶法提取。由于AX在麸皮中常通过酯键、醚键等共价键与蛋白、淀粉、纤维素等组分紧密结合，游离的AX组分含量较低，而热水浸提只能溶出部分游离的AX成分，因此提取得率一般较低且能耗较高。在大部分基础研究中，研究人员一般通过弱碱小批量提取AX，因弱碱可有效破坏分子间的酯键等共价键，促使结合的AX有效释放，可显著提高提取效率，但此种方法会产生大量的碱废液、且价格昂贵，只适用于AX的少量制备，不利于工业化生产。在部分研究中，木聚糖酶、纤维素酶以及超声波和微波处理也用于辅助提取AX，但同样存在能耗过高、无法达到连续工业化生产的缺陷。因此，开发AX的高效提取制备工艺，对新型膳食纤维原料的开发和农副产物的增值化应用均具有重要意义。

通过检索，发现如下几篇与本发明专利申请相关的专利公开文献：

1、一种阿拉伯木聚糖的制备方法(CN108191996A)，以玉米淀粉加工副产物玉米鼓皮为原料，经过超声波协同微波辅助碱法处理、离心、调节、离心、减压浓缩、醇沉、离心、冻干得到玉米鼓皮阿拉伯木聚糖。本发明在碱法的基础上采用超声协同微波的物理辅助方法，充分利用微波的高穿透力和高加热效率，以及超声波的空化作用，极大程度上提高多糖得率，缩短了生产周期此外本发明的原料来自淀粉加工的副产物，实现了废物利用,并较大程度地增加了经济效益。本发明制备的阿拉伯木聚糖具有一定体外抗氧化活性,有望开发成具有较好抗氧化活性的食品添加剂。

上述公开文献制备的阿拉伯木聚糖，采用了碱法提取，污染较严重，并且会破坏阿拉伯木聚糖的基本分析结构。同时，超声波和微波协同处理要求较高，能耗严重。此外，此中AX的制备方法工艺步骤繁琐，应用范围有限。

2、一种阿拉伯木聚糖的制备方法及产品(CN111574640A)，具体包括以下步骤：(1)对麦麸去淀粉；(2)采用碱提法得到多糖溶液；(3)对多糖溶液进行脱蛋白处理；(4)对脱蛋白的多糖溶液进行酶处理、透析；(5)对透析后的多糖溶液进行酶解；(6)对未经过酶解的多糖溶液和经过酶解的多糖溶液分别进行醇沉分级，得到不同分子量阿拉伯木聚糖；(7)将不同分子量阿拉伯木聚糖进行二次酶处理、二次透析。本发明制备取方法简单可行，能够提高原材料麦麸的利用率，可得到不同级分的阿拉伯木聚糖，结构各异，具有不同程度的降血糖、抗氧化等功能性作用，医药价值高。

上述公开文献制备的阿拉伯木聚糖，采用碱法提取，对环境的影响较大，并且采用了多次酶处理的方法，成本昂贵。此外，分级醇沉的处理方法重复性较差，不能保证产品质量稳定性。

3、一种从小麦麸皮中提取阿拉伯木聚糖和蛋白质纤维的方法(CN104264262B)，提取方法主要包括如下步骤：小麦麸皮初步粉碎，乙醇预处理后，离心所得不溶物，经挤干机初步挤干后，再经超微粉碎，利用复合酶和重力作用，灭酶，上清液和沉淀进行分离，得到富含阿拉伯木聚糖的混合液，上清液经浓缩，有机溶剂沉淀、浓缩干燥得到富含阿拉伯木聚糖的产品，沉淀物真空干燥得到蛋白纤维产品。本发明提供的方法能从粮食加工副产物麸皮中提取附加值高的阿拉伯木聚糖，提取过程中的副产物可作为动物饲料使用，增加了产品的附加值，提高了粮食加工企业的经济效益。

上述公开文献制备的阿拉伯木聚糖，采用了酶法提取，提取成本较高，且阿拉伯木聚糖得率较低，超微粉碎处理能耗高、适用范围有限。小麦麸皮粉碎到一定程度，再细微处理不能很好的提高产品的得率，效率较差。

通过对比，本发明专利申请与上述专利公开文献存在本质的不同。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种以小麦麸皮为原料提取阿拉伯木聚糖的方法、阿拉伯木聚糖和应用。

本发明解决技术问题所采用的技术方案是：

一种以小麦麸皮为原料提取阿拉伯木聚糖的方法，步骤如下：

S1：小麦麸皮清洗多次后，烘干，粉碎过筛备用；

S2：提取预处理：对经过S1处理所得的麦麸进行弱碱处理，得到处理后的麦麸；

S3：对经过S2处理所得的麦麸挤压膨化，得到预处理后的麦麸；

S4：提取处理：将经过S3处理得到的麦麸利用水提法提取，离心，收集上清液；

S5：将S4收集的上清液调整pH，再次离心，收集上清液；

S6：将S5收集的上清液真空浓缩，加入乙醇沉淀至完全，离心，收集沉淀物；

S7：将S6收集的沉淀物复溶后进行透析后除去其中的盐组分；

S8：将经过S7处理得到的产物真空浓缩后冷冻干燥，得到阿拉伯木聚糖。

进一步地，所述步骤S2中弱碱处理为：喷洒麦麸质量2％-5％的NaCO

进一步地，所述步骤S3中在温度为60℃-160℃，水分含量为40％-60％，螺杆转速为50-100rpm的条件下进行挤压膨化。优选温度为100-160℃。水分含量为40％-60％，优选水分含量为40％。螺杆转速为50-100rpm。优选螺杆转速为100rpm。

进一步地，所述步骤S4中利用水提法提取时，麦麸与水的质量比为1：20，温度为100℃，提取时间为24h；离心的转速为4000-5000rpm。优选离心的转速为4500rpm。

进一步地，所述步骤S5中pH为4，离心的转速为4000-5000rpm。优选离心的转速为4500rpm。

进一步地，所述步骤S6中真空浓缩时加温，加温后的温度为60℃，浓缩至体积为原透析液的1/3，乙醇的质量浓度为90％-98％，添加乙醇至溶液中乙醇的质量浓度为70-80％时停止加入乙醇，然后静置8-12小时，离心的转速为4000-5000rpm。优选离心的转速为4500rpm。

进一步地，所述步骤S7中沉淀物复溶时的温度为60℃，复溶时间4-6小，优选为6小时；透析时使用透析袋透析，透析袋选用截留大小为8000-14000Da，透析采用水作为透析液进行清洗，透析三天，隔3-5小时换透析液，直至透析液的电导率与纯水相近或相等。

进一步地，所述步骤S8真空浓缩时加温，加温后的温度为60℃，浓缩至体积为原透析液的1/2。

如上所述的以小麦麸皮为原料提取阿拉伯木聚糖的方法制得的阿拉伯木聚糖。

进一步地，所述阿拉伯木聚糖的总糖含量达75％，其分子量为640kDa，单糖组成为阿拉伯糖、木糖，且其摩尔百分比为46.09％、53.91％；

如上所述的阿拉伯木聚糖在功能性食品制备方面中的应用。

本发明取得的有益效果是：

1、本发明方法是一种以小麦麸皮为原料提取阿拉伯木聚糖的方法，针对目前关于阿拉伯木聚糖常用的水提取法得率较低，碱法提取会破坏阿拉伯木聚糖的结构且污染严重，酶提法价格昂贵的问题，采用碱处理结合挤压膨化技术促进麦麸中阿拉伯木聚糖的释放，在提高提取效率的同时减少了污染，可以充分利用小麦麸皮资源，实现其附加值，变废为宝；提取方法简单，成本低，污染小，且本发明制备的阿拉伯木聚糖具有较高的可溶性膳食纤维水平，具有很好的应用前景。

2、本发明提出了阿拉伯木聚糖的提取方案并测定相关的理化性质。本发明的提取方法能够更好地破坏麸皮表面结构，利于阿拉伯木聚糖的溶出，并且使可溶性膳食纤维含量增多，不溶性膳食纤维含量降低，膳食纤维的得率大大提高。

3、本发明针对目前阿拉伯木聚糖提取的技术缺陷，开发了弱碱喷洒结合挤压膨化预处理，热水浸提AX的高效制备工艺。本发明方法的具体原理为：通过弱碱处理增加麸皮表面的孔隙，促使溶剂进入麸皮内部；通过挤压膨化的高温高压条件，促进麸皮中共价结合的AX转变为游离状态，使其可通过水提法溶出，因此AX的提取的率较高。此外，此工艺中弱碱仅以少量喷洒的方式添加到AX中，几乎不产生碱废液，且挤压膨化工艺处理简便，尤其适用于连续工业化生产。

4、本发明方法较常用的碱法提取方法相比，产生的有机废液会大大减少，本发明采用的是水热浸提的方式，仅仅使用了2％的NaCO

5、本发明方法中当同时使用弱碱喷洒处理、挤压膨化预处理，热水浸提协同提取时，所得阿拉伯木聚糖的得率明显要高于单一处理，或者两因素同时处理时的效果。本发明中只采用热水浸提时，阿拉伯木聚糖得率仅有1.59％，采用挤压膨化预处理后，得率达到了4.23％，而同时采用NaCO3喷洒处理和挤压膨化预处理时，阿拉伯木聚糖的得率是只使用热水浸提的6倍，是仅使用挤压膨化预处理得率的2.5倍，本发明当中同时使用弱碱喷洒处理、挤压膨化预处理，热水浸提协同提取时，阿拉伯木聚糖得率大大提高，且所得阿拉伯木聚糖的得率明显要高于单一处理，由此可以看出，本发明方法中弱碱喷洒处理、挤压膨化预处理，热水浸提具有协同效果，大大提高了得率。

附图说明

图1为本发明中阿拉伯木聚糖提取物的外观图；

图2为本发明中葡萄糖标准曲线；

图3为本发明中阿拉伯木聚糖的分子量测定图。

图4为本发明中阿拉伯木聚糖对淀粉消化特性的影响图；

图5为本发明中阿拉伯木聚糖对面包消化特性的影响图；

图6为本发明中阿拉伯木聚糖对在面包加工中酵解特性变化图。

具体实施方式

为更好理解本发明，下面结合实施例对本发明做进一步地详细说明，但是本发明要求保护的范围并不局限于实施例所表示的范围。

本发明中所使用的的原料，如无特殊说明，均为常规市售产品，本发明中所使用的方法，如无特殊说明，均为本领域常规方法，本发明所使用的各物质质量均为常规使用质量。

一种以小麦麸皮为原料提取阿拉伯木聚糖的方法，步骤如下：

S1：小麦麸皮清洗多次后，烘干，粉碎过筛备用；

S2：提取预处理：对经过S1处理所得的麦麸进行弱碱处理，得到处理后的麦麸；

S3：对经过S2处理所得的麦麸挤压膨化，得到预处理后的麦麸；

S4：提取处理：将经过S3处理得到的麦麸利用水提法提取，离心，收集上清液；

S5：将S4收集的上清液调整pH，再次离心，收集上清液；

S6：将S5收集的上清液真空浓缩，加入乙醇沉淀至完全，离心，收集沉淀物；

S7：将S6收集的沉淀物复溶后进行透析后除去其中的盐组分；

S8：将经过S7处理得到的产物真空浓缩后冷冻干燥，得到阿拉伯木聚糖。

较优地，所述步骤S2中弱碱处理为：喷洒麦麸质量2％-5％的NaCO

较优地，所述步骤S3中在温度为60℃-160℃，水分含量为40％-60％，螺杆转速为50-100rpm的条件下进行挤压膨化。优选温度为100-160℃。水分含量为40％-60％，优选水分含量为40％。螺杆转速为50-100rpm。优选螺杆转速为100rpm。

较优地，所述步骤S4中利用水提法提取时，麦麸与水的质量比为1：20，温度为100℃，提取时间为24h；离心的转速为4000-5000rpm。优选离心的转速为4500rpm。

较优地，所述步骤S5中pH为4，离心的转速为4000-5000rpm。优选离心的转速为4500rpm。

较优地，所述步骤S6中真空浓缩时加温，加温后的温度为60℃，浓缩至体积为原透析液的1/3，乙醇的质量浓度为90％-98％，添加乙醇至溶液中乙醇的质量浓度为70-80％时停止加入乙醇，然后静置8-12小时，离心的转速为4000-5000rpm。优选离心的转速为4500rpm。

较优地，所述步骤S7中沉淀物复溶时的温度为60℃，复溶时间4-6小，优选为6小时；透析时使用透析袋透析，透析袋选用截留大小为8000-14000Da，透析采用水作为透析液进行清洗，透析三天，隔3-5小时换透析液，直至透析液的电导率与纯水相近或相等。

较优地，所述步骤S8真空浓缩时加温，加温后的温度为60℃，浓缩至体积为原透析液的1/2。

如上所述的以小麦麸皮为原料提取阿拉伯木聚糖的方法制得的阿拉伯木聚糖。

较优地，所述阿拉伯木聚糖的总糖含量达75％，其分子量为640kDa，单糖组成为阿拉伯糖、木糖，且其摩尔百分比为46.09％、53.91％；

如上所述的阿拉伯木聚糖在功能性食品制备方面中的应用。

具体地，相关的制备及检测如下：

实施例1

一种以以小麦麸皮为原料提取阿拉伯木聚糖的方法，包括步骤：

S1：小麦麸皮清洗多次后，105℃烘干3小时，粉碎过60目筛备用；

S2：提取预处理：对经过S1处理所得的麦麸喷洒2％麦麸质量的1M NaCO

S3：对经过S2处理所得的麦麸在温度为100℃-160℃，水分含量为40％，螺杆转速为100rpm的条件下挤压膨化，得到预处理后的麦麸；

S4：提取处理：将经过S3处理得到的麦麸与水的比例为1：20，温度为100℃，提取时间为24h，离心的转速为4500rpm，收集上清液；

S5：将S4收集的上清液调整pH＝4，再次离心，离心的转速为4500rpm，收集上清液；

S6：将S5收集的上清液在60℃条件下真空浓缩，使上清液体积蒸发至原体积1/3，加入质量浓度为98％的乙醇，至溶液中乙醇的质量浓度为75％，静置6小时，待絮状沉淀完全后4500rpm离心，收集沉淀物；

S7：将S6收集的沉淀物加入蒸馏水60℃搅拌复溶，复溶完全后装入截留量为8000-14000Da的透析袋，装入量约为透析袋的1/4，透析3天，每隔3h换蒸馏水，截留液电导率与纯水相近时结束；

S8：将经过S6处理得到的产物在60℃条件下真空浓缩，使上清液体积蒸发至原体积1/2冷冻干燥，得到阿拉伯木聚糖。见图1。

实施例2

一种以以小麦麸皮为原料提取阿拉伯木聚糖的方法，包括步骤：

S1：小麦麸皮清洗多次后，105℃烘干3小时，粉碎过60目筛备用；

S2：提取预处理：对经过S1处理所得的麦麸喷洒2％麦麸质量的0.5M NaCO

S3：对经过S2处理所得的麦麸在温度为60℃-120℃，水分含量为40％，螺杆转速为100rpm的条件下挤压膨化，得到预处理后的麦麸；

S4：提取处理：将经过S3处理得到的麦麸与水的比例为1：20，温度为100℃，提取时间为24h，离心的转速为4500rpm，收集上清液；

S5：将S4收集的上清液调整pH＝4，再次离心，离心的转速为4500rpm，收集上清液；

S6：将S5收集的上清液在60℃条件下真空浓缩，使上清液体积蒸发至原体积1/3，加入质量浓度为98％的乙醇，至溶液中乙醇的质量浓度为75％，静置6小时，待絮状沉淀完全后4500rpm离心，收集沉淀物；

S7：将S6收集的沉淀物加入蒸馏水60℃搅拌复溶，复溶完全后装入截留量为8000-14000Da的透析袋，装入量约为透析袋的1/4，透析3天，每隔3h换蒸馏水，截留液电导率与纯水相近时结束；

S8：将经过S6处理得到的产物在60℃条件下真空浓缩，使上清液体积蒸发至原体积1/2冷冻干燥，得到阿拉伯木聚糖。见图1。

实施例3

一种以以小麦麸皮为原料提取阿拉伯木聚糖的方法，包括步骤：

S1：小麦麸皮清洗多次后，105℃烘干3小时，粉碎过60目筛备用；

S2：提取预处理：对经过S1处理所得的麦麸喷洒2％麦麸质量的1M NaCO

S3：对经过S2处理所得的麦麸在温度为100℃-160℃，水分含量为60％，螺杆转速为100rpm的条件下挤压膨化，得到预处理后的麦麸；

S4：提取处理：将经过S3处理得到的麦麸与水的比例为1：20，温度为100℃，提取时间为24h，离心的转速为4500rpm，收集上清液；

S5：将S4收集的上清液调整pH＝4，再次离心，离心的转速为4500rpm，收集上清液；

S6：将S5收集的上清液在60℃条件下真空浓缩，使上清液体积蒸发至原体积1/3，加入质量浓度为98％的乙醇，至溶液中乙醇的质量浓度为75％，静置6小时，待絮状沉淀完全后4500rpm离心，收集沉淀物；

S7：将S6收集的沉淀物加入蒸馏水60℃搅拌复溶，复溶完全后装入截留量为8000-14000Da的透析袋，装入量约为透析袋的1/4，透析3天，每隔3h换蒸馏水，截留液电导率与纯水相近时结束；

S8：将经过S6处理得到的产物在60℃条件下真空浓缩，使上清液体积蒸发至原体积1/2冷冻干燥，得到阿拉伯木聚糖。见图1。

本发明的相关检测如下：

一、阿拉伯木聚糖的纯化及理化分析

1、总糖的测定

表1

配置0.2mg/mL标准溶液，按表1制作标准曲线。称取10mg样品，加入1mL72％的H

2、分子量测定

采用配有示差检测器的高效液相色谱(HPLC)测定多糖样品的分子量及其分布。以不同分子量的葡聚糖作为标准品对样品的分子量进行标定。取2mg多糖样品溶于1mL0.1mol/mL硝酸钠(NaNO

3、单糖组分测定

使用离子色谱仪鉴定样品中单糖组成及各单糖所占比例，包括以下步骤：

称取1～2mg多糖样品于安瓿瓶中，加入1～2ml 2mol/L的三氟乙酸(TFA)，酒精灯封口后在120℃油浴中水解3h，减压旋蒸除去多余的TFA，再加入0.5～2ml的无水甲醇减压旋干，重复5次，最后将产物完全溶解于2ml的超纯水中，混匀，经0.22μ水系滤膜过滤后上样。各标准单糖(鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、半乳糖醛酸，葡萄糖醛酸)进行溶解，然后以同样的条件用气质联用仪进行分析。分析结果表明，阿拉伯木聚糖单糖组成为阿拉伯糖、木糖，且其摩尔百分比为46.09％、53.91％(表2)。

表2本发明中阿拉伯木聚糖的单糖组成

二、本发明方法与常用的阿拉伯木聚糖的提取方法的比较

表3本发明方法较常用的阿拉伯木聚糖的提取方法的比较效果表

通过表3可以看出，本发明方法较常用的碱法提取方法相比，产生的有机废液会大大减少，本发明采用的是水热浸提的方式，仅仅使用了2％的NaCO

三、本发明方法中弱碱喷洒处理、挤压膨化预处理，热水浸提的协同效果

对比例1

对比例1的具体步骤除了表4中所示的不同之外，其余步骤均与实施例1的相同。

表4本发明方法中弱碱喷洒处理、挤压膨化预处理，热水浸提的协同效果表

对比例2

对比例2的具体步骤除了表5中所示的不同之外，其余步骤均与实施例2的相同。

表5本发明方法中弱碱喷洒处理、挤压膨化预处理，热水浸提的协同效果表

对比例3

对比例3的具体步骤除了表6中所示的不同之外，其余步骤均与实施例3的相同。

表6本发明方法中弱碱喷洒处理、挤压膨化预处理，热水浸提的协同效果表

通过表1、表2、表3可以看出，本发明中当同时使用弱碱喷洒处理、挤压膨化预处理，热水浸提协同提取时，所得阿拉伯木聚糖的得率明显要高于单一处理，或者两因素同时处理时的效果。同时通过表1、表2、表3可以看出，本发明中只采用热水浸提时，阿拉伯木聚糖得率仅有1.59％，采用挤压膨化预处理后，得率达到了4.23％，而同时采用NaCO3喷洒处理和挤压膨化预处理时，阿拉伯木聚糖的得率是只使用热水浸提的6倍，是仅使用挤压膨化预处理得率的2.5倍，本发明当中同时使用弱碱喷洒处理、挤压膨化预处理，热水浸提协同提取时，阿拉伯木聚糖得率大大提高，与碱法提取相比得率还要高，但是碱法提取会产生大量碱废液，会对环境产生负面影响，且碱法提取会破会阿拉伯木聚糖的支链，阿魏酸含量会大大降低，对阿拉伯木聚糖的功能特性产生影响，由此可以看出，本发明方法中弱碱喷洒处理、挤压膨化预处理，热水浸提具有协同效果，大大提高了得率，且不会对阿拉伯木聚糖的结构产生影响。

四、AX可抑制面包焙烤和加工过程中淀粉的老化、AX具有显著的抑制面包消化作用(1)差示扫描量热法

样品(150mg)首先与5mL的5g/L胃蛋白酶在0.05MHCl中混合，然后在37℃条件下加入8个玻璃珠振荡孵育30分钟。之后，加入5mL 0.25M乙酸钠缓冲液，然后加入2.5mL酶混合物(将3.0g胰酶分散到20mL水中，搅拌15分钟，然后以1049g离心10分钟收集胰酶上清液。然后将60mg淀粉葡糖苷酶溶解到1.7mL水中添加到15.0mL胰酶上清液中以产生所需的酶混合物)。在37℃下振荡水浴中水解，分别进行0、20、40、60、90、120、180和240分钟，然后立即将样品在无水乙醇中稀释以使酶失活。在9000g离心2分钟后，用购自MegazymeInternational Ireland Ltd.(Bray，Ireland)的D-葡萄糖测定试剂盒(葡萄糖氧化酶/过氧化物酶，GOPOD规格K-GLUK)测量上清液的葡萄糖含量。凝胶体系中水解20和120min的葡萄糖含量分别标记为G

快速消化淀粉(RDS)＝(G

慢消化淀粉(SDS)＝(G

抗性淀粉(RS)＝(TS-RDS-SDS)÷TS×100

式中TS是用于测量的凝胶复合物的总淀粉(TS)含量

实验结果如(图4、图5)所示。由图4可以看出，AX可抑制面包焙烤和加工过程中淀粉的老化。

由图5可以看出，AX具有显著的抑制面包消化作用，且分子量越高的AX对面包的消化抑制作用越强。

(2)酵解特性

培养基配制：①称Na2CO3 400mg、NaCl 900mg、(NH4)2SO4 900mg、K2HPO4 900mg、CaCl2 50mg、MgSO4 50mg、FeSO4·7H2O 20mg、MnSO4·H2O 20mg、ZnSO4·7H2O 20mg、刃天青1mg和CoCl·6H2O 2mg到烧杯中，加995mL纯水，超声溶解，用5M HCl调pH至6.8，加热煮沸，装入1L棕色瓶中，超声30min赶走气泡，充入N2灭菌。②在10mL离心管中称取泛酸盖2mg、烟酰胺2mg、维生素B6 2mg、维生素B2 2mg、维生素B12mg、对氨基苯甲酰酸0.1mg、L-盐酸半胱氨酸100mg，加入4mL蒸馏水。③称取Vc 5mg、叶酸5mg和维生素B12 0.5mg到烧杯，用容量瓶定容到100mL。取1mL③加入②中，过0.22μm的无菌滤膜，滤液为④，将厌氧培养箱打开，放入所需物品，调至无氧状态，将灭菌后的①和④混合。

样品处理方法：在厌氧箱中称取0.2g猪结肠消化物，添加0.2mL 1％的糖溶液。空白组中只添加猪结肠消化物和厌氧培养基。将离心管用封口膜封口，装入厌氧袋中，37℃振荡培养，并分别在0h、12h、24h和48h后取出相应样品，11000rad/min离心20min，上清用于酸碱度、总糖浓度的测定，具体测定方法如下。

1)酸碱度的测定

使用pH测定计进行测定，结果如(图6a)所示。

2)总糖浓度的测定

表1

配置0.2mg/mL标准溶液，按表1制作标准曲线。称取10mg样品，加入1mL 72％的H

从图6可以看出，与直接食用AX相比，添加到面包中的AX在肠道的酵解速度变缓，更利于在结肠远端微生物利用，益生效果增强(图6)。

尽管为说明目的公开了本发明的实施例，但是本领域的技术人员可以理解：在不脱离本发明及所附权利要求的精神和范围内，各种替换、变化和修改都是可能的，因此，本发明的范围不局限于实施例所公开的内容。