一种菌酶协同发酵的高蛋白蛋壳膜粉及其制备方法和应用

摘要

本发明属于饲料添加剂技术领域，具体提供了一种菌酶协同发酵的高蛋白蛋壳膜粉，包括：按质量比计为30‑35％的复合酶制剂、5‑8％的复合菌剂和57‑65％的蛋壳膜；其中所述复合酶制剂包括氨肽酶、细菌碱性蛋白酶和米曲霉中性蛋白酶；所述复合菌剂包括植物乳杆菌、短双歧杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌。本发明通过复合菌剂和复合酶制剂协同作用于蛋壳膜，一方面提高了蛋壳膜的使用效果，减少了蛋壳膜垃圾量。另一方面降低了饲料蛋白原料价格上涨带来的饲料成本的增加。此外，将本发明提供的高蛋白蛋壳膜粉应用于肉鸡饲料中，能改善肉鸡生产性能和血液指标，减低死淘率，具体良好的经济效益。

说明书

技术领域

本发明属于饲料添加剂技术领域，具体涉及一种菌酶协同发酵的高蛋白蛋壳膜粉及其制备方法和应用。

背景技术

蛋壳膜是蛋壳内层的一层薄膜，主要成分是呈网络结构纤维状蛋白。蛋壳膜粉可以稳定和提升关节健康，作为一种膳食钙来源，具有抗炎症和促进伤口愈合的功效，此外，蛋壳膜粉在治疗炎症性肠病中也具有积极的效果。蛋壳膜常被应用于化妆品、个人护理行业和食品行业，但就整体产量而言，得到充分应用的蛋壳膜仍占少数，大多作为废弃物处理，仅在欧洲国家，每年蛋壳垃圾量可达到100万吨，蛋壳膜未得到充分利用，造成大量浪费。

随着这些年养殖规模的逐渐扩大，对蛋白原料的需求也在逐步增加，可供养殖业使用的的鱼粉等动物蛋白和豆粕等植物蛋白逐渐供不应求。当前，饲料蛋白原料价格上涨已成不争的事实。因此，在当前蛋白原料日益紧缺和价格飞涨的情况下，急需寻求蛋白原料的替代品。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术中饲料蛋白原料成本高，资源紧缺的问题。

为此，本发明提供了一种菌酶协同发酵的高蛋白蛋壳膜粉，包括：按质量比计为30-35％的复合酶制剂、5-8％的复合菌剂和57-65％的蛋壳膜；其中所述复合酶制剂包括氨肽酶、细菌碱性蛋白酶和米曲霉中性蛋白酶；所述复合菌剂包括植物乳杆菌、短双歧杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌。

具体的，上述复合酶制剂的制备方法为将氨肽酶、细菌碱性蛋白酶和米曲霉中性蛋白酶添加到培养基中得到复合酶制剂；所述复合酶制剂中氨肽酶的酶活为150-1250U/g，细菌碱性蛋白酶的酶活为150-1250U/g，米曲霉中性蛋白酶的酶活为80-600U/g。

具体的，上述复合菌剂的制备方法为使用生理盐水稀释植物乳杆菌、短双歧杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌得到复合菌剂；所述复合菌剂中植物乳杆菌的活菌数为(0.4-2)×10

本发明还提供了一种菌酶协同发酵的高蛋白蛋壳膜粉的制备方法，包括以下步骤：

(1)蛋壳膜洗净烘干后粉碎、过筛；

(2)向将过筛后的蛋壳膜中加入培养基，灭菌；

(3)向步骤(2)添加有蛋壳膜的培养基中加入复合酶制剂和复合菌剂进行发酵；

(4)发酵结束后，将发酵液过滤、烘干，得到高蛋白蛋壳膜粉。

具体的，上述步骤(2)中培养基为营养肉汤培养基或MRS肉汤培养基。

具体的，上述步骤(2)具体为向过筛后的蛋壳膜中加入培养基，每克蛋壳膜中加3-6ml培养基，灭菌。

具体的，上述步骤(3)发酵条件为35-40℃恒温振荡8-15h。

本发明提供的这种菌酶协同发酵的高蛋白蛋壳膜粉可应用于肉鸡饲料中，添加量为肉鸡基础日粮的0.2-0.6％。

与现有技术相比，本发明具有以下优点和有益效果：

本发明采用天然无公害的生产技术，通过复合菌剂和复合酶制剂协同作用于蛋壳膜，发酵生产高蛋白蛋壳膜粉，一方面提高了蛋壳膜的使用效果，减少了蛋壳膜垃圾量，节能环保，使生物资源得到充分利用，拓展饲料资源。另一方面在当前蛋白原料日益紧缺和价格飞涨的情况下，通过高蛋白蛋壳膜粉部分替代豆粕等饲用蛋白的，降低饲料蛋白原料价格上涨带来的饲料成本的增加，满足养殖业对蛋白原料的需求。此外，将本发明提供的高蛋白蛋壳膜粉应用于肉鸡饲料中，能改善肉鸡生产性能和血液指标，减低死淘率，具体良好的经济效益。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。尽管已经详细描述了本发明的代表性实施例，但是本发明所属技术领域的普通技术人员将理解，在不脱离本发明范围的情况下可以对本发明进行各种修改和改变。因此，本发明的范围不应局限于实施方案，而应由所附权利要求及其等同物来限定。

下面通过具体实施例对本发明的菌酶协同发酵的高蛋白蛋壳膜粉的效果进行研究。

实施例1：

本实施例提供了一种菌酶协同发酵的高蛋白蛋壳膜粉及其制备方法，包括以下步骤：

(1)蛋壳膜洗净烘干，用万能粉碎机粉碎，过120目筛；

(2)精确称取4g过筛后的蛋壳膜，加入到18ml的MRS肉汤培养基中，用棉花塞和牛皮纸封口，121℃灭菌30min；

(3)制备复合酶制剂：称取未处理的复合酶，其中氨肽酶的酶活为2×10

(4)配制复合菌剂：称取未处理的复合菌，其中植物乳杆菌的活菌数为3×10

(5)将步骤(2)添加有蛋壳膜的培养基振荡并预热至37℃，向其中加入2g复合酶制剂和0.4g复合菌剂,封口置于恒温振荡器中37℃恒温振荡发酵12h；

(6)发酵结束后，将发酵液过滤，置于100℃烘箱中烘8h，得到高蛋白蛋壳膜粉。

分别对本实施例制备的高蛋白蛋壳膜粉和未处理的蛋壳膜中蛋白质含量进行检测，以干基计，未处理的蛋壳膜的蛋白含量为84.49％，本实施例制备的高蛋白蛋壳膜粉的蛋白含量为88.55％，相较未处理的蛋壳膜，蛋白含量提高了4.81％。

实施例2：

本实施例采用与实施例1相同的方法制备大量菌酶协同发酵的高蛋白蛋壳膜粉，并将其用于肉仔鸡饲喂，研究高蛋白蛋壳膜粉的饲用效果。

养鸡前做好设备和鸡舍的清洗和消毒工作，鸡舍彻底清洁，待干燥后，用高锰酸钾和甲醛熏蒸。选取1日龄体重接近、健康状况良好的AA肉仔鸡144只，随机分成对照组1、对照组2和实验组，每组3个重复，每个重复16只肉仔鸡(公母各半)，室内保持通风良好，室温维持在22-25℃，肉仔鸡地面平养，自由采食饮水，免疫程序和驱虫程序按照鸡场常规同步进行，保持固定的饲喂时间，每天3次，保证水源充足、干净，其中：

对照组1：饲喂肉鸡基础日粮；

对照组2：饲喂以0.4％的添加量添加有蛋壳膜的基础日粮，蛋壳膜磨成粉状；

实验组：饲喂以0.4％的添加量添加有本实施例制备的高蛋白蛋壳膜粉的基础日粮。

表1各组每千克饲料的营养水平

随时观察、记载各组鸡只的采食和健康状况。

测定生长性能和血液生化指标，结果如表2和表3所示，同行数据肩标小写字母完全不同的，表示差异显著(P＜0.05)，有任何相同小写字母或无字母的表示差异不显著(P＞0.05)。

表2各组生长性能检测指标

与对照组1的基础日粮相比，对照组2的生长性能有一定程度的下降，尤其是死淘率增加了100％。而添加了高蛋白蛋壳膜粉的实验组对生长性能有一定程度的改善，平均末重、平均日采食量、平均日增重分别提高8.29％、4.75％、9.12％，料重比和死淘率分别降低了6.48％、33.33％。与对照组2相比，实验组平均末重、平均日采食量、平均日增重分别提高10.05％(P<0.05)、7.11％、11.5％(P<0.05)，料重比和死淘率分别降低了6.48％、66.67％，表明采用菌酶协同发酵后，蛋壳膜的营养成分利用率得到显著提升。

表3各组血液生化指标

与对照组1相比，对照组2和实验组尿素氮分别降低了14.51％和21.07％(P<0.05)、尿酸分别降低了6.12％和8.32％、葡萄糖分别提高了10.44％(P<0.05)和15.88％(P<0.05)、总蛋白分别提高了3.77％和8.99％(P<0.05)、白蛋白分别提高了3.68％和11.67％(P<0.05)、胆固醇分别提高了11.91％(P<0.05)和15.17％(P<0.05)。与对照组1相比，实验组甘油三酯提高了9.35％(P<0.05)。与对照组2相比，实验组白蛋白和甘油三酯显著提高了7.70％(P<0.05)和16.06(P<0.05)，其他指标差异不显著。

以上例举仅仅是对本发明的举例说明，并不构成对本发明的保护范围的限制，凡是与本发明相同或相似的设计均属于本发明的保护范围之内。