一种基于改良双抗体夹心ELISA法的尖吻蝮蛇蛇毒检测试剂盒的制备方法

摘要

本发明公开了一种基于改良双抗体夹心ELISA法的尖吻蝮蛇蛇毒检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：步骤一：初步提纯，采用饱和硫酸铵方法初步纯化马抗尖吻蝮蛇血浆中的马抗尖吻蝮蛇IgG；步骤二：重复提纯，采用亲和层析法对马抗尖吻蝮蛇IgG进一步层析纯化，收集目标峰对应的抗体，再次过柱层析提纯，得到较纯的马抗尖吻蝮蛇IgG；步骤三：包被抗体，取部分步骤二纯化后的抗体作为包被抗体，包被到48孔板中；步骤四：标记抗体，取部分步骤二纯化后的抗体与辣根过氧化物酶(HRP)进行反应获得辣根过氧化物酶标记抗体(HRP‑IgG)，以此作为夹心抗体；步骤五：包装试剂盒，将步骤三中包被好的48孔板真空密封后与步骤四的夹心抗体装入盒中备用，试剂盒制备完成，可用于检测人或动物血清中是否含有尖吻蝮蛇毒素。