三七中人参潜隐病毒4的实时荧光定量PCR检测方法

摘要

本发明公开了一种三七中人参潜隐病毒4的实时荧光定量PCR检测方法，该方法以染毒三七叶片的cDNA为模板，以PCV4‑cp‑F和PCV4‑cp‑R为引物进行PCR扩增，获得重组质粒标准品pGEM‑T‑PCV4，制备一系列浓度梯度的重组质粒标准品，并以重组质粒标准品为模板，采用特异性引物PCV4‑QF和PCV4‑QR进行实时荧光定量PCR，以不同浓度的质粒标准品的Ct值构建标准曲线；待测样品按照相同条件进行实时荧光定量PCR，通过比对Ct值与标准曲线，实现三七中人参潜隐病毒4的定量检测；该方法具有快速简单、灵敏度高、特异性强等优点，具有很好的应用前景。