用于确定分析物与配体之间的反应的动力学参数的方法

摘要

根据本发明，提供了一种用于确定分析物与配体之间的反应的动力学参数的方法，该方法包括以下步骤：a）使具有分析物浓度（co）的第一体积（V1）的样品流体在第一时间段（t1a）内在流动池（2）的附接有第一配体（4）的测试表面（3）上流动；b）使第一体积（V1’）的缓冲溶液在第一时间段（t1b）内在流动池（2）的测试表面（3）上流动；c）使至少第二体积（V2）的样品流体在第二时间段（t2a）内在测试表面上流动；其中，该第二时间段（t2a）大于第一时间段（t1a），并且其中，第二体积（V2）的样品流体具有与第一体积（V2）的样品流体中的分析物浓度（co）相同的分析物浓度（co）；d）使第二体积（V2’）的缓冲溶液在第二时间段（t2b）内在流动池（2）的测试表面（3）上流动；e）在步骤（a）‑（d）期间使用传感器来测量测试表面（3）上的结合，以获得单一测量结合曲线；f）使具有分析物浓度（co）的第一体积（V1）的样品流体在第一时间段（t1a）内在流动池（2’）的没有第一配体的测试表面（3’）上流动；g）使第一体积（V1’）的缓冲溶液在第一时间段（t1b）内在没有第一配体的测试表面（3’）上流动；h）使至少第二体积（V2）的样品流体在第二时间段（t2a）内在没有第一配体的测试表面（3’）上流动；其中，该第二时间段（t2a）大于第一时间段（t1a），并且其中，第二体积（V2）的样品流体具有与第一体积（V2）的样品流体中的分析物浓度（co）相同的分析物浓度（co）；i）使第二体积（V2’）的缓冲溶液在第二时间段（t2b）内在没有第一配体的测试表面（3’）上流动；j）在步骤（f）‑（i）期间使用传感器来测量没有第一配体的测试表面（3）上的结合，以获得单一参考结合曲线；k）使用单一测量结合曲线和单一参考结合曲线来确定动力学参数。