一种大鼠心肌梗死模型制作方法

摘要

本发明涉及一种大鼠心肌梗死模型制作方法及应用，所述方法为麻醉、插管、连接呼吸机辅助呼吸、尾静脉抽血、凝固、破碎成微小血栓、肋间隙逐层开胸、顺冠脉方向注射血栓至左主干内、观察到大鼠心电图情况。本发明使用自体血栓造成精准栓塞，可以更精确地栓塞目的血管，且自体血栓更能反应模型I型心肌梗死的病理生理状态，无排斥反应，而局部冠脉注射技术，损伤远比结扎小，效果更为确切，死亡率更低。该方法可以在评估治疗心肌梗死药物及评估治疗心肌梗死治疗方法中的应用。

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种大鼠心肌梗死模型制作方法。

背景技术

心肌梗死指心肌长时间缺血引起的心肌细胞丧失，为血液灌注的供与求平衡失调的结果。由于冠状动脉急性闭塞，引起部分心肌因严重持久的缺血而发生局部坏死，临床上包括持久性胸骨后疼痛、休克、发热、白细胞增多、红细胞沉降率增加，以及进行性心电图缺血性、损伤性变化等特征。本病易发生于老年人，患有高血压病、肥胖病、糖尿病及血脂异常、少动的老年人更易患本病。患者通常心前区疼痛时间较长，往往半小时，含用硝酸甘油后疼痛无法缓解，是区别于心绞痛的特征。本病凶险，易发生猝死。因此建立动物急性心肌梗死模型对急性心肌梗死疾病进行研究是很迫切的。

目前已有的急性心肌梗死模型中，比如经典的结扎模型，需要使用针线对局部心肌进行结扎，损伤极大，死亡率较高；或月桂酸钠模型，经主动脉弓或左心室逆行注射，栓塞目标不确切。

本发明为了克服上述缺陷，研究了一种新的大鼠心肌梗死模型制作方法，使用自体血栓造成精准栓塞，可以更精确地栓塞目的血管，且自体血栓更能反应模型I型心肌梗死的病理生理状态，无排斥反应，而局部冠脉注射技术，损伤远比结扎小，效果更为确切，死亡率更低。

发明内容

本发明的目的是提供一种新的大鼠心肌梗死模型制作方法，以克服现有技术中需要使用针线对局部心肌进行结扎，损伤极大，死亡率较高的技术问题；也解决了月桂酸钠模型需经主动脉弓或左心室逆行注射，栓塞目标不确切的技术问题。

本发明所述的一种大鼠心肌梗死模型制作方法具体步骤为：

1)使用水合氯醛，腹腔内注射给药麻醉，固定于小动物手术台后，随后行使用小动物喉镜行气管插管，连接呼吸机辅助呼吸，同时连接小动物生物信号采集与分析系统；

2)尾静脉抽血，加入凝血酶冻干粉，促使其凝固，随后将凝固后血凝快放入装有生理盐水的烧杯中，使用注射器反复抽吸，使之破碎成微小血栓，使用50μl微量注射器抽吸血栓备用；

3)从大鼠左侧胸骨3-5肋间隙逐层开胸，使用2-3个小棉球塞入心脏下方垫高心脏，充分暴露心脏，选择大鼠冠状动脉左主干位置，顺冠脉方向注射血栓至左主干内；

4)观察到大鼠心电图有明显心肌梗死样ST-T改变即为模型制作成功。

优选的，所述水合氯醛的浓度为10％。

优选的，所述注射给药的量为0.3ml/100g。

优选的，所述尾静脉抽血量为1ml。

优选的，加入凝血酶冻干粉的量为50μl。

优选的，顺冠脉方向注射血栓至左主干内其血栓量为25μl或注射血栓至出现明确心肌梗死样心电图改变为止。

本发明所述的大鼠心肌梗死模型制作方法在评估治疗心肌梗死药物中的应用。

本发明所述的大鼠心肌梗死模型制作方法在评估治疗心肌梗死治疗方法中的应用。

有益效果：

现有技术缺陷：目前已有的急性心肌梗死模型中，比如经典的结扎模型，需要使用针线对局部心肌进行结扎，损伤极大，死亡率较高；或月桂酸钠模型，经主动脉弓或左心室逆行注射，栓塞目标不确切。

本发明有益效果：大鼠心肌梗死模型中，使用自体血栓造成精准栓塞，可以更精确地栓塞目的血管，且自体血栓更能反应模型I型心肌梗死的病理生理状态，无排斥反应，而局部冠脉注射技术，损伤远比结扎小，效果更为确切，死亡率更低。

附图说明

图1：未心梗时正常心电图。

图2：心梗后的心电图。

具体实施方式

实施例1大鼠心肌梗死模型制作方法

1)使用10％水合氯醛，按0.3ml/100g，腹腔内注射给药麻醉，固定于小动物手术台后，随后行使用小动物喉镜行气管插管，连接呼吸机辅助呼吸，同时连接小动物生物信号采集与分析系统；

2)尾静脉抽血1ml，加入50μl凝血酶冻干粉，促使其凝固，随后将凝固后血凝快放入装有生理盐水的烧杯中，使用注射器反复抽吸，使之破碎成微小血栓，使用50μl微量注射器抽吸25μl血栓备用；

3)从大鼠左侧胸骨3-5肋间隙逐层开胸，使用2-3个小棉球塞入心脏下方垫高心脏，充分暴露心脏，选择大鼠冠状动脉左主干位置，顺冠脉方向注射25μl血栓至左主干内或注射血栓至出现明确心肌梗死样心电图改变为止；

4)观察到大鼠心电图有明显心肌梗死样ST-T改变即为模型制作成功。

为了进一步验证本发明的可行性，发明人进行了以下验证试验，具体如下：

一、试剂：凝血酶冻干粉(上海长城药业)，水合氯醛(Merck)。

二、仪器及设备：小动物生物信号采集与分析系统BL-420N(泰盟)，小动物呼吸机UY377-DW-3000A(北京海富达)，50ul微量注射器(瑞士hamilton)，小动物喉镜(HUATRAU)，烧杯，止血钳(上海金钟)，眼科剪(上海金钟)，持针器(上海金钟)。

三、步骤：

1)使用10％水合氯醛，按0.3ml/100g，腹腔内注射给药麻醉，固定于小动物手术台后，随后行使用小动物喉镜行气管插管，连接呼吸机辅助呼吸，同时连接小动物生物信号采集与分析系统；

2)尾静脉抽血1ml，加入50μl凝血酶冻干粉，促使其凝固，随后将凝固后血凝快放入装有生理盐水的烧杯中，使用注射器反复抽吸，使之破碎成微小血栓，使用50μl微量注射器抽吸25μl血栓备用。

3)从大鼠左侧胸骨3-5肋间隙逐层开胸，使用2-3个小棉球塞入心脏下方垫高心脏，充分暴露心脏，选择大鼠冠状动脉左主干位置，顺冠脉方向注射25μl血栓至左主干内或注射血栓至出现明确心肌梗死样心电图改变为止。

4)观察到大鼠心电图有明显心肌梗死样ST-T改变即为模型制作成功。

四、结果：

从心电图(见图2)见大鼠下壁出现明显心肌梗死。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作出一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的，因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。