一种绿色荧光蛋白及猪CDX2的猪肠上皮细胞系构建方法

摘要

本发明公开了一种绿色荧光蛋白及猪CDX2的猪肠上皮细胞系构建方法，其包括以下步骤：制备目的DNA片段和载体片段；将制备的目的DNA片段与载体片段连接，并导入HD5α感受态细胞，扩繁并提取质粒；将提取的质粒用慢病毒质粒包被，进行病毒扩繁、IPEC‑J2细胞的转染、筛选和构建成功验证。与现有技术相比，目前尚无CDX2和GFP同时高效、稳定表达的正常肠上皮细胞系，阻碍了CDX2在肠道发育和胃肠道疾病中的作用机制研究，本发明的提出，填补了相应的空白，构建了性质和活力更好的IPEC‑J2为模型构建细胞系，提高了转染效率，表达绿色荧光蛋白GFP，可以在转染过程中对转染效率进行评估，提高了试验效率。