基于磁分离脱氧核酶并循环切割的凝血酶检测方法及凝血酶试剂盒

摘要

本发明公开了一种基于磁分离脱氧核酶并循环切割的凝血酶检测方法及凝血酶试剂盒，凝血酶检测方法包括以下步骤：将磁珠加入偶联缓冲溶液中混匀，离心分离上清后洗涤，加入偶联缓冲溶液和修饰有生物素的凝血酶的DNA储备液离心分离上清后用孵育缓冲溶液洗涤2‑3次得到磁珠分散液，磁珠分散液中磁珠浓度为4‑6mg/mL；将磁珠分散液、凝血酶、修饰有脱氧核酶的凝血酶适配体以及孵育缓冲溶液混合均匀，分离上清且洗涤后将得到的固体溶于酶切缓冲溶液中，得到混合液；将混合液加入含有底物链的酶切缓冲溶液，震荡孵育2.5‑3.5h，磁分离取上清液进行荧光检测，根据检测得到的荧光强度判断凝血酶的含量；抗干扰能力强，灵敏度高。