制备具有高镭-228含量的至少一个发生器的方法

摘要

本发明涉及一种制备具有高镭‑228含量的一个或多个发生器的方法，其中镭‑228来自于包含钍‑232和镭‑228的水溶液。该发生器尤其可用于生产钍‑228，由钍‑228可获得镭‑224，然后可获得铅‑212和铋‑212。因此，该方法和该方法能够制备的发生器可以尤其应用于制备由铅‑212或铋‑212制成的放射性药物，可用于核医学，特别是用于治疗癌症的靶向α放射疗法中。

说明书

技术领域

本发明涉及生产放射性同位素(radioactive isotopes，也称为radioisotopes)的领域。

更具体地，本发明涉及一种由包含钍-232和镭-228的水溶液来制备一个或多个具有高镭-228含量的发生器的方法。

这种或这些发生器尤其可用于生产钍-228，由钍-228可获得镭-224，然后可获得铅-212和铋-212。

因此，该方法和该方法能够制备的发生器可以尤其应用于制备基于铅-212或铋-212的放射性药物，适用于核医学，特别是用于癌症治疗的靶向α放射疗法中。

背景技术

靶向α放射疗法，也称为靶向α疗法，包括注射与载体结合的放射性同位素，其中所述载体诸如为抗体，能够非常精确地靶向癌细胞表面上存在的特定位点。然后，放射性同位素的自然放射性衰变释放出的能量使得能够破坏癌细胞，同时限制对周围健康细胞的损害。

钍-232的一些衰变产物，特别是铅-212和铋-212(铅-212的子体放射性同位素)可用于靶向α疗法，特别是用于治疗胰腺癌、其他腹膜内癌以及黑色素瘤，靶向α疗法已成为临床前测试的主题的疾病，尤其是在美国。

如所附图1所示，其表示钍-232的自然衰变或蜕变链，该链包括铅-212和铋-212：

-铅-212可以由镭-224的放射性衰变产生，

-镭-224可以由钍-228的放射性衰变产生，

-钍-228可以由镭-228的放射性衰变产生，而

-镭-228可以由钍-232的放射性衰变产生，其中钍-232是从矿石(诸如独居石或钍石)中提取的天然钍的主要成分。

可以凭借已知被称为“发生器”来进行铅-212、镭-224和钍-228的生产，该“发生器”即为通常容纳有固体固定相的液相色谱柱，在该固体固定相上选择性地固定母体放射性同位素，并且该固定相定期用液相洗涤，从而使得能够洗脱由母体放射性同位素的放射性衰变形成的子体放射性同位素。

为了制备旨在生产钍-228并因此包含镭-228作为母体放射性同位素的发生器，已知的是使含钍-232和镭-228的天然钍盐的水溶液在其中固体固定相能够相对于钍选择性地保留镭的柱中流通。

能够相对于钍选择性地保留镭的固定相材料例如是由IBC AdvancedTechnologies股份有限公司以牌号AnaLig

从理论上讲，可预计的是，色谱柱的固定相保留镭-228的量会随着在该色谱柱中流通的钍盐溶液的体积的增加而增加，且显然在固定相材料的供应商所标示的该材料对镭-228的理论保留容量的限度内增加。

然而，实际上并非如此，因为随着色谱柱中流通的钍盐溶液的体积的增加，结果导致与钍-232一起洗脱的镭-228的量增加，因此使固定相材料对镭-228的保留率出现降低。

举例来说，对于容纳有36g的AnaLig

因此，固定相材料的有效容量对应于其在给定操作条件下保留镭-228的实际能力，且远小于其供应商所标示的理论保留容量。

其结果是，当色谱柱随后用作钍-228发生器时，如果固定相对镭-228的保留效果更好，则该发生器的生产能力比可能达到的生产能力要低。这一方面导致以下事实：为了得到钍-228而对该发生器进行的随后洗脱导致产生不仅可用钍-228含量较低，而且其中钍-228被稀释的程度较高的洗脱液，并且另一方面导致需要更频繁地更换发生器。

此外，在制备发生器时，必须将未被固定相材料保留的镭-228进行再循环，否则会损失镭。

因此，发明人为自己设定了为这些问题找到解决方案的目标。

更具体地说，他们为自己设定了以下目标：成功增加能够相对于钍选择性地保留镭的固定相材料的有效容量，即增加该材料的单位重量材料中所保留的镭-228的量，或换句话说是由钍-232和镭-228的溶液生产具有高镭-228含量的发生器。

发明内容

该目的通过本发明来实现，本发明提出了一种制备至少一个发生器的方法，所述至少一个发生器容纳有来自包含钍-232和镭-228的水溶液A1的镭-228，该方法包括以下步骤：

a)使体积V1的水溶液A1在第一色谱柱中流通，该第一色谱柱容纳有第一固定相，该第一固定相由相对于钍选择性地保留镭的固体材料组成；

b)用水溶液A2对第一固定相进行至少一次洗涤；

c)用体积V3的包含络合镭-228的试剂的水溶液A3从第一固定相中洗脱镭-228，由此获得包含镭-228络合物的水溶液A4，该体积V3为已经在第一色谱柱中流通过的水溶液A1的体积V1的0.005％和1％之间，优选0.01％和1％之间；

d)通过调节水溶液A4的pH，使水溶液A4中存在的镭-228络合物离解，由此获得包含解络合的镭-228的水溶液A5；

e)将水溶液A5装载到第二色谱柱中，该第二色谱柱容纳有第二固定相，该第二固定相由与第一固定相相同的材料组成；以及

f)用水溶液A6对第二固定相进行至少一次洗涤，由此获得所述至少一个发生器。

根据本发明，包含钍-232和镭-228的水溶液A1优选是通过将天然钍(即从诸如独居石或钍石的钍矿中提取的钍)的盐溶解在水中而获得的水溶液。

该天然钍盐优选为硝酸钍，在这种情况下，水溶液A1包含硝酸。

然而，天然钍盐也可以是硝酸盐以外的盐，诸如氯化钍，在这种情况下，水溶液A1包含盐酸。

根据本发明，构成第一固定相和第二固定相的材料可以是能够相对于钍选择性地保留镭的任何固定相材料。

这种材料可以包括无机的(诸如二氧化硅或氧化铝颗粒或硅胶)、有机的(诸如聚合物)或无机-有机的固体基质，该固体基质通过接枝或浸渍有机分子来官能化，这些有机分子通过离子交换、分子识别或任何其他机制能够相对于水溶液A1中存在的钍离子(Th

它可以尤其由包含二氧化硅颗粒的材料组成，该二氧化硅颗粒接枝有镭的有机配体(例如氧杂穴合剂，oxacryptand)的分子。特别适合于实施根据本发明方法的材料之一例如是由IBC Advanced Technologies股份有限公司以牌号AnaLig

水溶液A1中的硝酸含量优选在固定相材料供应商推荐的酸度范围内，例如对于AnaLig

水溶液A2有利地是包含与水溶液A1相同的酸和相同的酸浓度的酸性水溶液。

因此，如果水溶液A1本身具有0.01mol/L至4mol/L的硝酸浓度，则其优选地由包含这种浓度的硝酸的水溶液组成。

在步骤c)中，凭借包括将通过络合或螯合(在这里，这两个术语被视为同义词)的方式把第一固定相保留的镭-228从第一固定相中分离出的试剂洗脱该镭-228。

根据本发明，该络合剂或螯合剂优选为氨基多元羧酸或氨基多元羧酸盐。

因此，它可以尤其由氨基三乙酸(或NTA)、乙二胺四乙酸(或EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(或DTPA)，或它们的盐之一组成，然而，优选的是EDTA及其盐，诸如其钠盐。

因此，水溶液A3优选为包含EDTA的浓度有利地在0.03mol/L和0.1mol/L之间，并且更优选地等于0.09mol/L的EDTA或其盐的溶液，并且其pH通过加入强碱，诸如氢氧化钠而优选达到10至11的范围内的值。

因此，如此获得的洗脱液或水溶液A4包含其呈络合形式的镭-228。

因此，步骤d)旨在使洗脱液中存在的镭-228络合物离解，以便能够在步骤e)中将包含解络合的镭-228(或换句话说是游离的镭-228)的水溶液装载到第二色谱柱中。

根据本发明，该离解通过调节水溶液A4的pH以使该pH的值达到在该值下络合剂络合镭-228络合的能力降低来进行。

因此，例如，如果络合剂是EDTA或其盐之一，则通过对水溶液A4进行酸化来使该溶液的pH达到至少等于3的值以防止EDTA沉淀，并且达到优选至多等于5的值以使得EDTA相对于镭-228的络合能力充分降低来进行镭-228络合物的离解。在这种情况下，优选的pH值在4和5之间。

该酸化可通过简单地向水溶液A4中加入酸来进行，该酸可以是弱酸，诸如乙酸，但优选地是强酸，诸如硝酸，以限制要加入的酸的体积。

然而，在本发明的范围内，水溶液A4的酸化优选通过用至少一种酸性水溶液对第一固定相进行洗涤并且将由该洗涤产生的水溶液全部或部分加入到水溶液A4中来进行。

更优选地，为了酸化水溶液A4，优选的是对第一固定相进行两次洗涤并且将由这两次洗涤产生的溶液全部或部分加入到水溶液A4中：

-第一次，用pH至少等于3且优选至多等于5，并且理想地等于4.5的缓冲溶液，诸如乙酸钠缓冲溶液；和

-第二次，用有利地包含与水溶液A1和A2相同的酸的酸性水溶液，因此，如果水溶液A1和A2本身具有0.01mol/L至4mol/L的硝酸浓度，则该酸性水溶液优选地是包含这种浓度的硝酸的水溶液。

实际上，按照该过进行是有利的，因为这不仅使得可以酸化水溶液A4，而且通过第一次洗涤还可以除去保留在第一固定相的间隙体积中的游离的EDTA以及

当通过加入由洗涤第一固定相而产生的一个或多个溶液来对水溶液A4进行酸化时，则该方法可以包括在步骤d)和步骤e)之间监测由该酸化得到的水溶液A5的pH，并且如果需要，可将该pH调节至3和5之间，优选4和5之间的值。

在步骤e)中，将水溶液A5装载到第二色谱柱中包括简单地使该混合物在该柱中流通，但是优选以低流速，例如1mL/min至5mL/min进行流通，以利于第二固定相对镭-228的保留。

如上所述，一旦用水溶液A5装载了第二色谱柱，便使该柱中容纳的第二固定相经受水溶液A6的至少一次洗涤(该方法的步骤f))，其中水溶液A6优选地是酸性水溶液。

更优选地，第二固定相经受两次洗涤：

-第一次洗涤是为了除去第二固定相的间隙体积中存在的络合剂，如果络合剂是EDTA，则用例如pH至少等于3，优选至多等于5，并且理想地等于4.5的缓冲溶液，诸如乙酸钠缓冲溶液进行该第一次洗涤；和

-第二次洗涤是为了调整第二固定相，以便随后使用第二色谱柱作为例如钍-228的发生器，并且用有利地包含与水溶液A1、A2和A3相同的酸和相同的酸浓度的酸性水溶液进行该第二次洗涤；因此，如果水溶液A1、A2和A3本身具有0.01mol/L至4mol/L的硝酸浓度，则该酸性水溶液优选地包含这种浓度的硝酸。

根据本发明，只要第一固定相对镭-228的保留率大于或等于阈值，就优选地进行步骤a)。换句话说，一旦第一固定相对镭-228的保留率下降到该阈值以下，就停止步骤a)。

结果，只要第一固定相对镭-228的保留率大于或等于阈值，则来自步骤a)的水溶液A1的体积V1就对应于在该柱中流通的水溶液A1的体积。

优选地，该阈值为80％，并且更优选地为90％。

在根据本发明方法的第一优选实施方式中，使用单个第一色谱柱和单个第二色谱柱，并且：

-凭借第一色谱柱进行步骤a)至步骤d)n次，由此产生n个水溶液A5，其中n为大于或等于2，通常在2和10之间，更优选在4和6之间的整数，这n个水溶液A5独立地收集，或收集在一起以获得水溶液A5的混合物；

-用n个水溶液A5或水溶液A5的混合物进行装载第二色谱柱的步骤e)；和

-用水溶液A6进行洗涤第二固定相的步骤f)，由此获得单个发生器。

在本发明的第二优选实施方式中，使用单个第一色谱柱、m个第二色谱柱和m个第二固定相，并且：

-凭借第一色谱柱进行步骤a)至步骤d)n次，由此产生n个水溶液A5，其中n为大于或等于3，通常在3和10之间，更优选在4和6之间的整数，这n个水溶液A5独立地收集，或收集在一起以获得水溶液A5的混合物；

-用n个水溶液A5或水溶液A5的混合物进行装载m个第二色谱柱的步骤e)，m为大于或等于2但小于n的整数；和

-用水溶液A6进行洗涤m个第二固定相的步骤f)，由此获得m个发生器。

在根据本发明方法的第三优选实施方式中，使用单个第一色谱柱和单个第二色谱柱，并且：

-凭借第一色谱柱进行步骤a)至步骤c)n次，由此产生了n个水溶液A4，其中n为大于或等于2，通常在2和10之间，更优选在4和6之间的整数，这n个水溶液A4独立地收集；

-通过向n个水溶液A4中加入酸来进行步骤d)，由此获得n个水溶液A5；

-用n个水溶液A5进行装载第二色谱柱的步骤e)；和

-用水溶液A6进行洗涤第二固定相的步骤f)，由此获得单个发生器。

在根据本发明方法的第四优选实施方式中，使用单个第一色谱柱和单个第二色谱柱，并且：

-凭借第一色谱柱进行步骤a)至步骤c)n次，由此产生n个水溶液A4，其中n为大于或等于2，通常在2和10之间，更优选在4和6之间的整数，这n个水溶液A4收集在一起以获得水溶液A4的混合物；

-通过向水溶液A4的混合物中加入酸来进行步骤d)，由此获得水溶液A5；

-用水溶液A5进行装载第二色谱柱的步骤e)；和

-用水溶液A6进行洗涤第二固定相的步骤f)，由此获得单个发生器。

在根据本发明方法的第五优选实施方式中，使用单个第一色谱柱、m个第二色谱柱和m个第二固定相，并且：

-凭借第一色谱柱进行步骤a)至步骤c)n次，由此产生n个水溶液A4，其中n为大于或等于3，通常在3和10之间，更优选在4和6之间的整数，这n个水溶液A4独立地收集；

-通过向n个水溶液A4中加入酸来进行步骤d)，由此获得n个水溶液A5；

-用n个水溶液A5进行装载m个第二色谱柱的步骤e)，其中m为大于或等于2但小于n的整数；和

-用水溶液A6进行洗涤m个第二固定相的步骤f)，由此获得m个发生器。

在根据本发明方法的第六优选实施方式中，使用单个第一色谱柱，m个第二色谱柱和m个第二固定相，并且：

-凭借第一色谱柱进行步骤a)至步骤c)n次，由此产生n个水溶液A4，其中n为大于或等于3，通常在3和10之间，更优选在4和6之间的整数，这n个水溶液A4收集在一起以获得水溶液A4的混合物；

-通过向水溶液A4的混合物中加入酸来进行步骤d)，由此获得水溶液A5；

-用水溶液A5进行装载m个第二色谱柱的步骤e)，其中m为大于或等于2但小于n的整数；和

-用水溶液A6进行洗涤m个第二固定相的步骤f)，由此获得m个发生器。

在根据本发明方法的第七优选实施方式中，使用单个第一色谱柱和单个第二色谱柱，并且：

-凭借第一色谱柱和第二色谱柱进行步骤a)至步骤e)n次，其中n为大于或等于2，通常在2和10之间，更优选在4和6之间的整数；和

-用水溶液A6进行洗涤第二固定相的步骤f)，由此获得单个发生器。

在根据本发明方法的第八优选实施方式中，使用单个第一色谱柱和单个第二色谱柱，并且：

-凭借第一色谱柱和第二色谱柱进行a)至f)n次，由此在n次步骤a)至步骤f)之后获得单个发生器，其中n为大于或等于2，通常在2和10之间，更优选在4和6之间的整数。

在根据本发明方法的第九优选实施方式中，使用/个第一色谱柱、/个第一固定相和单个第二色谱柱，并且：

-凭借/个第一色谱柱进行步骤a)步骤至d)n次，由此产生n个水溶液A5，其中n为大于或等于2，通常在2和10之间，更优选为4和6之间的整数，并且/为大于或等于2但小于或等于n的整数，其中这n个水溶液A5独立地收集，或收集在一起以获得水溶液A5的混合物；

-用n个水溶液A5或水溶液A5的混合物进行装载第二色谱柱的步骤e)；和

-用水溶液A6进行洗涤第二固定相的步骤f)，由此获得单个发生器。

在根据本发明方法的第十优选实施方式中，使用/个第一色谱柱、/个第一固定相和单个第二色谱柱，并且：

-凭借/个第一色谱柱进行步骤a)至步骤c)n次，由此产生n个水溶液A4，其中n为大于或等于2，通常在2和10之间，更优选为4和6之间的整数，并且/为大于或等于2但小于或等于n的整数，其中这n个水溶液A4独立地收集；

-通过向n个水溶液A4中加入酸来进行步骤d)，由此获得n个水溶液A5；

-用n个水溶液A5进行装载第二色谱柱的步骤e)；和

-用水溶液A6进行洗涤第二固定相的步骤f)，由此获得单个发生器。

在根据本发明方法的第十一优选实施方式中，使用/个第一色谱柱、/个第一固定相和单个第二色谱柱，并且：

-凭借/个第一色谱柱进行步骤a)至步骤c)n次，由此产生n个水溶液A4，其中n为大于或等于2，通常在2和10之间，更优选为4进而6之间的整数，并且/为大于或等于2但小于或等于n的整数，其中这n个水溶液A4收集在一起以获得水溶液A4的混合物；

-通过向水溶液A4的混合物中加入酸来进行步骤d)，由此获得n个水溶液A5；

-用水溶液A5进行装载第二色谱柱的步骤e)；和

-用水溶液A6进行洗涤第二固定相的步骤f)，由此获得单个发生器。

在根据本发明方法的第十二优选实施方式中，使用/个第一色谱柱、/个第一固定相和单个第二色谱柱，并且：

-借助于/个第一色谱柱和第二色谱柱进行步骤a)至步骤e)n次，由此获得单个第二色谱柱，其中n为大于或等于2，通常在2和10之间，更优选在4和6之间的整数，并且/为大于或等于2但小于或等于n的整数；和

-用水溶液A6进行洗涤第二固定相的步骤f)，由此获得了单个发生器。

在根据本发明方法的第十三优选实施方式中，使用/个第一色谱柱、/个第一固定相和单个第二色谱柱，并且：

-凭借/个第一色谱柱和第二色谱柱进行步骤a)至步骤f)n次，由此获得了单个第二发生器，其中n为大于或等于2，通常在2和10之间，更优选为4和6之间的整数，并且/为大于或等于2但小于或等于n的整数。

应当注意，当第九实施方式至第十三实施方式以整数/等于n来实施时，则这意味着为了进行步骤a)至步骤c)n次或进行步骤a)至步骤d)n次，每次使用不同的第一柱。

无论根据本发明方法的实施方式如何，所获得的发生器优选旨在生产钍-228。

通过阅读以下涉及该方法的两个优选实施方式的补充说明，根据本发明的方法的其他特征和优点将显现。

显然，这些实施方式仅通过举例说明本发明的主题的方式给出，而绝不表示对该主题的限制。

附图说明

图1，如前文所描述，表示钍-232的放射性衰变链。

图2示意性地表示根据本发明的方法的第一实施方式。

图3示意性地表示根据本发明的方法的第二实施方式。

具体实施方式

首先参照图2，其示意性地表示根据本发明方法的第一实施方式。

在该第一实施方式中，该方法旨在制备单个发生器。

该方法首先包括凭借容纳有固定相20的单个第一色谱柱10进行n次以下顺序的步骤a)至步骤d)：

a)只要固定相20对镭-228的保留率至少等于阈值，便使包含钍-232、镭-228和硝酸的水溶液A1在柱10中流通；

b)当镭-228的保留率低于阈值时，用包含硝酸的水溶液A2洗涤固定相20，以从固定相20中除去该固定相的间隙体积中存在的钍-232；

c)用包含EDTA作为络合剂的水溶液A3从固定相20洗脱镭-228，并且将包含

d)通过对固定相20进行两次连续洗涤来离解

其中，n是至少等于2，通常在2和10之间，优选等于4或5的整数。

n次步骤a)至步骤d)中的步骤c)和步骤d)可以使用n个容器30来进行，每个容器用于单个步骤c)和单个步骤d)，在这种情况下，在n次步骤a)至步骤d)的最后步骤d)之后，获得了n个水溶液A5。

替代性地，n次步骤a)至步骤d)中的步骤c)和步骤d)可以使用单个容器30来进行，在这种情况下，在n次步骤a)至步骤d)的最后步骤d)之后，获得了n个水溶液A5的混合物。

然后，该方法包括凭借容纳有固定相50的单个第二色谱柱40进行以下两个步骤：

e)将n个水溶液A5或n个水溶液A5的混合物装载到第二柱40中，以将这些溶液或该混合物中所含的镭-228固定在固定相50上；和

f)对固定相50进行连续两次洗涤，第一次洗涤用酸性pH的缓冲溶液进行以从该固定相中除去EDTA，并且第二次洗涤用包含硝酸的水溶液进行来调整固定相50以便随后使用色谱柱40作为发生器。

在下文中详述的该方法的所有步骤优选在环境温度下，即在20℃至25℃的温度下进行。

*

柱10容纳有由AnaLig

举例来说，该柱具有78.54mL的床体积(或BV)，并且容纳有34g至37g的AnaLig

在进行n次这些步骤的第一步骤a)之前，通过渗入包含0.01mol/L至4mol/L，优选0.05mol/L至1mol/L，更优选0.1mol/L的硝酸的水溶液来调整固定相20。

一旦已经进行了这种调整，就向柱10供给水溶液A1，该水溶液A1通过将天然硝酸钍溶解在水中而获得，并且具有0.01mol/L至4mol/L，优选0.05mol/L至1mol/L，更优选0.1mol/L的硝酸含量。

该水溶液含有优选与镭-228所源自的钍-232处于放射性平衡的镭-228(例如以1MBq/L的速率)。

只要镭-228的保留率大于或等于优选为80％，更优选为90％的阈值，就以通常在10mL/min和100mL/min之间的流速连续向柱10供给水溶液。

当镭-228的保留产率降至低于阈值时，则停止对柱10的供给。

通过测定取自柱10的入口和出口处的水溶液A1的样品中镭-228的活度并应用以下公式来计算保留率(标记为R

其中：

A

A

众所周知，镭-228的活度是间接测定的，即在取样后4天的时间结束时，根据其子体锕-228表现出的活度来计算，其中锕-228本身的活度通过γ光谱法直接在样品中测量。

*

通过使数BV，例如15BV的水溶液A2以例如为40mL/min的流速在柱10中流通来对固定相20进行洗涤，其中该水溶液A2包含0.01mol/L至4mol/L，优选0.05mol/L至1mol/L，更优选0.1mol/L的硝酸。

*

通过使水溶液A3在柱10中流通来从固定相20中洗脱镭-228，其中该水溶液A3包含0.03mol/L至0.1mol/L，优选0.09mol/L的EDTA，并且其pH通过加入强碱，诸如氢氧化钠而达到优选为10至11的值。

对置于在柱10中流通的水溶液A3的BV数进行选择以使得水溶液A3的体积对应于在步骤a)中已经在该柱中流通过的水溶液A1的体积的0.005％至1％，并且优选地0.01％至1％，以实现镭-228的浓缩洗脱，即由镭-228的洗脱产生的水溶液A4中镭-228的活度至少比水溶液A1中的镭-228的活度高100倍。

因此，例如，对于已经在柱10中流通过的1000L至1200L体积的水溶液A1，用数BV(对应于50mL至12L，优选250mL至12L体积)的水溶液A3进行镭-228的洗脱，即例如对于柱10，6BV为具有78.54mL的BV。

为了进行最佳洗脱，优选将水溶液A3分两步置于在柱10中的流通。因此，例如，对于6BV，首先以10mL/min的流速使用2BV，然后在中断20分钟之后，以5mL/min的流速使用剩余的4BV。

然而，完全有可能使水溶液A3连续地(即不设想中断)和/或以单一流速在柱10中流通，该流速可能在1mL/min至30mL/min的范围内。

另一方面，重要的是将水溶液A3的pH保持在至多等于11的值，以最大限度降低使形成固定相20的固体基质的二氧化硅颗粒溶解的风险。

*

如上所述，该步骤包括使固定相20经受两次连续的洗涤，并且将由这两次洗涤获得的溶液收集在容器30中，在该容器30中，在步骤c)中已经收集了包含为

第一次洗涤使得能够从固定相20中除去保留在该固定相的间隙体积中的游离的EDTA以及

该缓冲溶液是例如pH为4.5的乙酸钠缓冲溶液。

第二次洗涤本身使得能够对固定相20进行重新调整以便在以下顺序的步骤a)至步骤d)的实施中重新使用固定相20，并且通过使数BV，例如5BV的其酸度能够纯化固定相20的硝酸水溶液在柱10中流通来进行，但无需将由该第二次洗涤获得的溶液加入到容器30中已经存在的混合物中以将该混合物的pH降低至3以下来防止EDTA沉淀。

因此，该硝酸水溶液优选具有0.1mol/L至1mol/L，更优选为0.1mol/L的硝酸含量。

缓冲溶液和硝酸水溶液柱10中的流通速率有利地为10mL/min，但是可以在1mL/min至60mL/min的范围内。

收集来自这两次洗涤的溶液在搅拌下进行，以使洗涤溶液在它们被收集时与洗脱液混合，从而酸化该洗脱液。

这使得可以降低EDTA对于镭-228的络合能力，从而获得其中镭-228被解络合的水溶液A5。

*

色谱柱40优选是与柱10完全相同，具有相同的BV和相同质量的Analig

在进行步骤e)之前，通过渗入缓冲溶液的溶液来调整固定相50，该缓冲溶液的pH至少等于3以防止n个水溶液A5(如果在n次步骤a)至步骤d)中的步骤c)和步骤d)中使用了n个容器30)或水溶液A5的混合物(如果在n次步骤a)至步骤d)中使用了单个容器30)中存在的EDTA在柱40内沉淀，并且至多等于5。

该缓冲溶液是例如pH为4.5的乙酸钠缓冲溶液。

一旦已经进行了这种调整，并且在任选地将n个水溶液A5或水溶液A5的混合物的pH值调节至至少等于3，优选至多等于5，并且理想地为4至5之后，就将该n个水溶液A5或水溶液A5的混合物装载到柱40中。

该装载通过使n个水溶液A5(一个接一个地注入到柱中)或水溶液A5的混合物以低流速，例如1mL/min至5mL/min的流速在该柱中流通来进行，以有利于AnaLig

*

如上所述，该步骤包括使固定相50经受两次连续的洗涤，第一次洗涤用pH在3和5之间的缓冲溶液，第二次洗涤用硝酸水溶液。

第一次洗涤使得能够从固定相50中除去保留在该固定相的间隙体积中的游离EDTA，并且通过使数BV，例如2.5BV的缓冲溶液在柱40中流通来进行，该缓冲溶液的pH至少等于3以再次防止EDTA在柱40内沉淀，并且至多等于5以防止间隙的EDTA重新络合镭-228。

与步骤d)的第一次洗涤的情况一样，该缓冲溶液是例如pH为4.5的乙酸钠缓冲溶液。

第二次洗涤使得能够调整固定相50，并且通过使数BV，例如3BV的低浓缩的硝酸水溶液，诸如包含0.1mol/L至1mol/L，优选0.1mol/L的硝酸的水溶液在柱40中流通来进行。

柱40中的缓冲溶液和硝酸水溶液的流通速率有利地为5mL/min，但是可以在1mL/min至5mL/min的范围内。

现在参照图3，其表示根据本发明方法的第二实施方式。

该实施方式旨在制备多个发生器，且与图1所示的实施方式的不同之处仅在于：

-步骤a)至步骤d)的次数大于或等于3，通常在3和10之间，更优选在4和6之间；

-用m个第二柱40进行步骤e)和步骤f)，m是大于或等于2但小于步骤a)至步骤d)的次数n的整数。

因此，步骤e)包括将在n次的步骤a)至步骤d)的最后步骤d)之后获得的n个水溶液A5或水溶液A5的混合物以n个水溶液A5或水溶液A5的混合物在m个第二柱40之间优选地等分分布，即以等分数的方式装载到m个第二柱40中。

然后，步骤f)包括对m个固定相50中的每一个进行两次连续的洗涤，第一次洗涤用酸性pH的缓冲溶液以从固定相50中除去保留在这些固定相中的游离EDTA，并且第二次洗涤用包含硝酸的水溶液进行以调整第二固定相50，以便随后使用该m个第二色谱柱40作为发生器。

根据本发明方法的实施例

根据“发明内容”中描述的第十三实施方式来实施根据本发明的方法，以提供容纳有镭-228的单个发生器。

在该实施例中使用了以下：

-三个第一柱10(即，/等于3)和单个第二柱40，每个柱具有78.54mL的BV，每个柱容纳有34g至37g的AnaLig

-每个第一柱10，对应一个容器30(即总共三个容器30)；和

-以下操作参数：

*步骤a)至f)进行的次数n：3，其中，对于每个步骤：

*步骤a)：使1200L的含有1MBq/L镭-228(即对于1200L，1200MBq)和0.1mol/L硝酸的水溶液A1以35mL/min的平均流速在第一柱10中的一个中流通；然后

*步骤b)：使15BV的含有0.1mol/L硝酸的水溶液A2以40mL/min的流速在第一柱10中的一个中流通；然后

*步骤c)：使含有0.09mol/L EDTA且pH为10至11的水溶液A3按照以下顺序在第一柱10中的一个中流通：2BV，以10mL/min的流速；中断20分钟；4BV，以5mL/min的流速；然后

*步骤d)：使5BV的pH为4.5的乙酸钠缓冲溶液以10mL/min的流速，然后使5BV的含有0.1mol/L硝酸的水溶液以10mL/min的流速在第一柱10中的一个中流通，以在每个容器30中收集16BV的含有解络合的镭-228的溶液A5；

*步骤e)：使在步骤d)之后在每个容器30中收集的16BV以5mL/min的流速在单个第二柱40中流通；

*步骤f)：使2.5BV的pH为4.5的乙酸钠缓冲溶液以5mL/min的流速，然后使3BV的含有0.1mol/L硝酸的水溶液以5mL/min的流速在第二柱40中流通。

在步骤a)至步骤f)的重复两次之后，获得了每克AnaLig

这意味着形成固定相50的AnaLig