用于治疗镰状细胞病的PDE9抑制剂

摘要

本公开内容涉及PDE9抑制剂，包含所述PDE9抑制剂的药物组合物。一方面，口服药物组合物包含约100mg至约300mg的6‑[(3S,4S)‑4‑甲基‑1‑(嘧啶‑2‑基甲基)吡咯烷‑3‑基]‑3‑四氢吡喃‑4‑基‑7H‑咪唑并[1,5‑a]吡嗪‑8‑酮(化合物1)或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物；选自按重量计约4％至约6％的预糊化淀粉和/或约15％至约50％的微晶纤维素的填充剂；以及选自按重量计约1％至约2.5％的胶态二氧化硅和/或按重量计约0.5％至约1.5％的硬脂酸镁的加工助剂，所述药物组合物为适于向患者施用的固体片剂形式。在一些实施方案中，如通过USP易碎性和USP崩解测试所确定的，所述组合物具有不超过约0.3％重量损失的易碎性，和小于约15分钟的崩解时间。

说明书

本申请要求于2018年8月31日提交的美国临时申请号62/725,725的权益，其内容通过引用整体并入本文。

技术领域

本公开内容涉及制备和使用包含环鸟苷一磷酸(cGMP)特异性磷酸二酯酶9型抑制剂(以下称为PDE9抑制剂)的药物组合物的方法。

背景技术

镰状细胞病(SCD，也称为镰状细胞性贫血(SCA))是导致血管闭塞过程的遗传性疾病，其造成SCD患者的大部分死亡。SCD疾病是由产生异常镰状血红蛋白(HbS或HbSS)的血红蛋白(HBB)基因中的点突变引起的，异常镰状血红蛋白聚合并生成坚硬且粘性的镰状红细胞。镰状红细胞导致慢性炎症、细胞黏附增加、氧化应激和内皮功能障碍，最终导致血管闭塞过程。

至今还没有SCD的治愈方法。选择项包括输血和用抗癌药剂羟基脲治疗。输血通过增加循环中正常的、非镰状红细胞的数量来纠正贫血。定期输血治疗可以帮助预防高危儿童的中风复发。羟基脲(HU)已被批准用于SCD的治疗，并显示出减少疼痛危象和住院的频率。不幸的是，HU的耐受性通常很差，并且由于担心其对生育和生殖的潜在影响而使得其广泛使用受限；由于其血液学毒性，导致达到和维持有效剂量的挑战；并且需要进行每月监测(Heeney等人，Pediatr Clin North Am.,2008,55(2):483)。事实上，据估计只有1/4的成年患者，甚至可能更少，使用这种药物进行治疗(Stettler等人，JAMA,2015,313:1671)。此外，由于这些挑战，许多患者被给予亚有效剂量的HU。因此，迫切需要可以在全球范围内安全使用的新型、安全、有效的治疗方法，以预防所有年龄段患者的SCD病态并发症。

仍然需要治疗SCD。

发明内容

本公开内容提供了制备和使用化合物1和/或包含化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物的药物组合物以治疗镰状细胞病的方法。

在本文所述的一方面，一种口服药物组合物包含：约100mg至约300mg的6-[(3S,4S)-4-甲基-1-(嘧啶-2-基甲基)吡咯烷-3-基]-3-四氢吡喃-4-基-7H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-酮(化合物1)或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物；选自按重量计约4％至约6％的预糊化淀粉和/或约15％至约50％的微晶纤维素的填充剂；以及选自按重量计约1％至约2.5％的胶态二氧化硅和/或按重量计约0.5％至约1.5％的硬脂酸镁的加工助剂，所述药物组合物为适于向患者施用的固体片剂形式。在一些实施方案中，如通过USP易碎性和USP崩解测试所确定的，所述组合物具有不超过约0.3％的重量损失的易碎性，和小于约15分钟的崩解时间。在一些实施方案中，如通过USP易碎性和USP崩解测试所确定的，所述组合物具有不超过约0.3％重量损失的易碎性或小于约15分钟的崩解时间中的至少一种。在一些实施方案中，所述药物组合物还包含羟丙基纤维素(HPC)。在一些实施方案中，所述羟丙基纤维素(HPC)以按重量计约0.4％至约0.5％的量存在。在一些实施方案中，所述羟丙基纤维素(HPC)以按重量计约0.5％的量存在。在一些实施方案中，所述组合物具有约10kPa的硬度和/或约4.50至约4.80mm的厚度。在一些实施方案中，包含约100mg、200mg或约300mg的化合物1或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物。在一些实施方案中，包含约300mg的化合物1或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物。在一些实施方案中，包含按重量计约5％的预糊化淀粉。在一些实施方案中，包含按重量计约2％的胶态二氧化硅。在一些实施方案中，包含按重量计约1％的硬脂酸镁。在一些实施方案中，所述组合物包含重量比为5:2:1的预糊化淀粉、胶态二氧化硅和硬脂酸镁。在一些实施方案中，还包含选自肠溶衣或

在本文所述的另一方面，一种口服药物组合物包含：约100mg至约300mg的6-[(3S,4S)-4-甲基-1-(嘧啶-2-基甲基)吡咯烷-3-基]-3-四氢吡喃-4-基-7H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-酮(化合物1)或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物；按重量计约5％的预糊化淀粉；按重量计约20％的微晶纤维素；按重量计约2％的胶态二氧化硅；以及按重量计约1％的硬脂酸镁，所述药物组合物为固体片剂形式。在一些实施方案中，如通过USP易碎性和USP崩解测试所确定的，所述组合物具有不超过约0.3％重量损失的易碎性和/或小于约15分钟的崩解时间。在一些实施方案中，还包含按重量计约0.5％的羟丙基纤维素(HPC)。一种口服药物组合物包含6-[(3S,4S)-4-甲基-1-(嘧啶-2-基甲基)吡咯烷-3-基]-3-四氢吡喃-4-基-7H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-酮(化合物1)或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物；所述药物组合物为固体片剂形式。在一些实施方案中，还至少包含填充剂。在一些实施方案中，所述填充剂是微晶纤维素或预糊化淀粉。在一些实施方案中，所述组合物包含按重量计约4％至约6％的预糊化淀粉。在一些实施方案中，所述组合物每片包含约15mg至约25mg的预糊化淀粉。在一些实施方案中，所述组合物还至少包含加工助剂。在一些实施方案中，所述加工助剂是胶态二氧化硅和/或硬脂酸镁。在一些实施方案中，所述组合物包含按重量计约1％至约2.5％的胶态二氧化硅和/或按重量计约0.5％至约1.5％的硬脂酸镁。在一些实施方案中，所述组合物每片包含约6mg至约8mg的胶态二氧化硅和/或约2mg至约4mg的硬脂酸镁。在一些实施方案中，包含微晶纤维素、预糊化淀粉、胶态二氧化硅和硬脂酸镁。在一些实施方案中，还包含选自肠溶衣或

在本文所述的另一方面，一种用于在有需要的受试者中治疗镰状细胞病的方法，包括施用上述任何药物组合物。在一些实施方案中，将所述药物组合物与食物一起服用。在一些实施方案中，将所述药物组合物每天施用一次、每天施用两次或每天施用三次。在一些实施方案中，将所述药物组合物每天施用一次。在一些实施方案中，将所述药物组合物施用至少4周、12周、16周或24周。在一些实施方案中，所述方法还包括施用羟基脲(HU)。在一些实施方案中，所述方法包括每天或每剂量向所述受试者施用约0.3mg/kg受试者体重至约6.0mg/kg受试者体重或约0.3mg/kg受试者体重至约1.0mg/kg受试者体重的化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物。

附图说明

图1示出化合物1减少Townes小鼠肺中的髓样和中性粒细胞炎症标志物。

图2示出了化合物1在体外减少SCD患者中性粒细胞对衬有内皮细胞的微流体腔室的粘附。

图3示出化合物1减少SCD患者中性粒细胞上CD11a、CD11b和CD18整合素的表达。

图4示出了化合物1和羟基脲之间的比较图，示出了化合物1的优异功效。

图5示出了在Townes SCD模型中比较化合物1(30mg/kg)的研究结果。

图6示出了在Townes SCD模型中比较化合物1(30mg/kg)的研究结果。

图7示出了化合物1的临床研究设计。

图8不受限制地描述了屏幕截图的代表性采样，其用于运行被设计为跟踪药物对人的影响的软件的移动设备中。

具体实施方式

磷酸二酯酶(PDE)是降解环核苷酸并因此调节整个身体的第二信使的细胞水平的酶类家族。许多已分别引进临床试验和市场的化合物证明，PDE代表着有吸引力的药物靶标。PDE由21个基因编码，在功能上分为11个家族，这些家族在动力学性质、底物选择性、表达、定位模式、激活、调控因子和抑制剂敏感性方面有所不同。PDE的功能是降解环腺苷一磷酸(cAMP)和/或环鸟苷一磷酸(cGMP)这些环核苷一磷酸，它们是重要的细胞内中介体，参与许多重要过程，包括神经传递的控制以及平滑肌的收缩和松弛。

PDE9是cGMP特异性的(对cAMP，K

在外周，PDE9表达在前列腺、肠、肾和造血细胞中最高，从而实现在各种非CNS适应症中的治疗潜力。

在本公开内容中，包含PDE9抑制剂的药物组合物被设计用于治疗镰状细胞病(SCD)。

在本公开内容的上下文中，如果达到PDE9的50％抑制水平所需的量为10微摩尔或更小，优选小于9微摩尔，诸如8微摩尔或更小，诸如7微摩尔或更小，诸如6微摩尔或更小，诸如5微摩尔或更小，诸如4微摩尔或更小，诸如3微摩尔或更小，更优选2微摩尔或更小，诸如1微摩尔或更小，特别是500nM或更小，则化合物被视为是PDE9抑制剂。在优选的实施方案中，达到PDE9的IC50水平所需的PDE9抑制剂的所需量为400nM或更小，诸如300nM或更小、200nM或更小、100nM或更小、或者甚至80nM或更小，诸如50nM或更小，例如25nM或更小。

在本申请中，符号IC

在一些实施方案中，本公开内容的PDE9抑制剂具有低血脑屏障穿透性或没有血脑屏障穿透性。例如，本公开内容的PDE9抑制剂在脑中的浓度与其在血浆中的浓度之比(脑/血浆比)可小于约0.50、约0.40、约0.30、约0.20、约0.10、约0.05、约0.04、约0.03、约0.02或约0.01。在一些实施方案中，该脑/血浆比是在施用PDE9抑制剂后30min或120min测量的。

在一些实施方案中，PDE9抑制剂可以是WO 2013/053690中公开的任何咪唑并吡嗪酮PDE9抑制剂和/或WO 2013/110768中公开的任何咪唑并三嗪酮PDE9抑制剂，其各自的内容通过引用整体并入本文。

在一些实施方案中，PDE9抑制剂是化合物1或其药学上可接受的盐、共晶体、溶剂化物或多晶型物。WO 2013/053690和WO2017/005786中已经描述了化合物1的外消旋体形态和化合物1的无水形态。在一些实施方案中，PDE9抑制剂是6-[(3S,4S)-4-甲基-1-(嘧啶-2-基甲基)吡咯烷-3-基]-3-四氢吡喃-4-基-7H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-酮(化合物1)，或其药学上可接受的盐或多晶型物。在一些实施方案中，化合物1的无水形态具有以下结构：

6-[(3S,4S)-4-甲基-1-(嘧啶-2-基甲基)吡咯烷-3-基]-3-四氢吡喃-4-基-7H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-酮；式C

本公开内容还提供了一种药物组合物，其包含治疗有效量的任何PDE9抑制剂和药学上可接受的载体或稀释剂。在一些实施方案中，本公开内容提供了药物组合物，其包含治疗有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物，以及药学上可接受的载体或稀释剂或赋形剂。

药学上可接受的盐

本公开内容还包括PDE9抑制剂的盐，通常是药学上可接受的盐。这样的盐包括药学上可接受的酸加成盐。酸加成盐包括无机酸以及有机酸的盐。

合适的无机酸的代表性示例包括盐酸、氢溴酸、氢碘酸、磷酸、硫酸、氨基磺酸、硝酸等。合适的有机酸的代表性示例包括甲酸、乙酸、三氯乙酸、丙酸、苯甲酸、肉桂酸、柠檬酸、富马酸、乙醇酸、衣康酸、乳酸、甲磺酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、草酸、苦味酸、丙酮酸、水杨酸、琥珀酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、酒石酸、抗坏血酸、帕莫酸、双亚甲基水杨酸、乙二磺酸、葡萄糖酸、柠康酸、天冬氨酸、硬脂酸、棕榈酸、EDTA、乙醇酸、对氨基苯甲酸、谷氨酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、茶碱乙酸以及8-卤代茶碱，例如8-溴茶碱等。药学上可接受的无机或有机酸加成盐的其他示例包括在Berge,S.M等人,J.Pharm.Sci.1977,66,2中列出的药学上可接受的盐，其内容通过引用并入于此。

此外，本公开内容的化合物可以以非溶剂化以及溶剂化形式与药学上可接受的溶剂如水、乙醇等一起存在。通常，就本公开内容的目的而言，溶剂化形式被认为等同于非溶剂化形式。

在一些实施方案中，药物组合物包含溶剂化、非溶剂化或结晶形式的化合物1。在一些实施方案中，化合物1以非溶剂化形式存在。在一些实施方案中，化合物1以结晶形式存在。在一些实施方案中，化合物1以一水合物结晶形式存在。

制剂

本公开内容的化合物可以以单剂量或多剂量单独施用或与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂组合施用。根据本公开内容的药物组合物可以与药学上可接受的载体或稀释剂以及任何其他已知的佐剂和赋形剂按照常规技术配制，常规技术诸如在Remington:The Science and Practice of Pharmacy，第22版，Gennaro编著,Mack Publishing Co.,Easton,PA,2013中公开的那些技术。

可以将药物组合物特别地配制用于通过任何合适的途径施用，诸如口服、直肠、鼻、肺、局部(包括颊和舌下)、经皮、脑池内、腹膜内、阴道和肠胃外(包括皮下、肌肉内、鞘内、静脉内和皮内)途径。应当理解，所述途径将取决于待治疗的受试者的总体健康和年龄、待治疗的病况的性质，以及活性成分。在一些实施方案中，药物组合物被配制用于口服施用于受试者。在一些实施方案中，药物组合物被配制为片剂或丸剂。在一些实施方案中，药物组合物被配制为适于口服施用于受试者的固体片剂。

用于口服施用的药物组合物包括固体剂型，诸如胶囊、片剂、糖衣丸、丸剂、锭剂、散剂和颗粒剂。在适当的情况下，根据本领域公知的方法，可将组合物制备为具有包衣如肠溶衣，或者可以将它们配制用于提供活性成分的受控释放，诸如持续释放或延长释放。用于口服施用的液体剂型包括溶液剂、乳剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂，既可以以原样制成，也可以固体形式制成，以便在使用前重构。

用于肠胃外施用的药物组合物包括无菌水性和非水性注射溶液剂、分散剂、混悬剂或乳剂，以及在使用前将在无菌可注射溶液或分散液中重构的无菌散剂。其他合适的施用形式包括但不限于栓剂、喷雾剂、软膏剂、乳膏剂、凝胶剂、吸入剂、皮肤贴剂和埋植剂。

本公开内容还提供了用于制备药物组合物的方法，其包括将治疗有效量的本公开内容的化合物与至少一种药学上可接受的载体或稀释剂混合。

本公开内容的化合物通常用作游离物质或其药学上可接受的盐。通过用药学上可接受的酸处理本公开内容的化合物的溶液或悬浮液，而以常规方式制备此类盐。合适的有机和无机酸的代表性示例如上所述。

对于肠胃外施用，可以使用本公开内容的化合物在无菌水溶液、丙二醇水溶液、维生素E水溶液或者芝麻油或花生油中的溶液。在必要时，应该将这样的水溶液适当地缓冲，并且首先用足够的盐水或葡萄糖使液体稀释剂等渗。水溶液特别适合于静脉内、肌肉内、皮下和腹膜内施用。使用本领域技术人员已知的标准技术，可以容易地将本公开内容的化合物掺入已知的无菌水性介质中。

合适的药物载体包括惰性固体稀释剂或填充剂、无菌水性溶液和各种有机溶剂。固体载体的示例包括乳糖、白土、蔗糖、环糊精、滑石粉、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯树胶、硬脂酸镁、硬脂酸和纤维素的低烷基醚。液体载体的示例包括但不限于糖浆、花生油、橄榄油、磷脂、脂肪酸、脂肪酸胺、聚氧乙烯和水。类似地，载体或稀释剂可以包含本领域已知的任何缓释材料，诸如单独或与蜡混合的单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。然后，可以容易地以适合于所公开的施用途径的各种剂型来施用通过将本公开内容的化合物与药学上可接受的载体结合而形成的药物组合物。制剂可以通过药学领域已知的方法方便地以单位剂型存在。

适用于口服施用的本公开内容的药物组合物可以以离散单位提供(诸如胶囊或片剂)，每个离散单位包含预定量的活性成分和任选合适的赋形剂。此外，可口服制剂可以呈散剂或颗粒剂、在水性或非水性液体中的溶液剂或混悬剂或者水包油或油包水液体乳剂的形态。

如果将固体载体用于口服施用，则可以将制剂压片，以散剂或丸剂形态置于硬明胶胶囊中或者制剂可以呈糖锭或锭剂的形态。固体载体的量将广泛地变化，但是范围将为每剂量单位约25mg至约1g。在一些实施方案中，固体载体将为每剂量单位约10mg至约150mg。在一些实施方案中，固体载体将为约10mg至约20mg、约10mg至约30mg、约10mg至约40mg、约10mg至约50mg、约10mg至约60mg、约10mg至约70mg、约10mg至约80mg、约10mg至约90mg、约10mg至约100mg、约10mg至约125mg、约10mg至约150mg、约20mg至约30mg、约20mg至约40mg、约20mg至约50mg、约20mg至约60mg、约20mg至约70mg、约20mg至约80mg、约20mg至约90mg、约20mg至约100mg、约20mg至约125mg、约20mg至约150mg、约30mg至约40mg、约30mg至约50mg、约30mg至约60mg、约30mg至约70mg、约30mg至约80mg、约30mg至约90mg、约30mg至约100mg、约30mg至约125mg、约30mg至约150mg、约40mg至约50mg、约40mg至约60mg、约40mg至约70mg、约40mg至约80mg、约40mg至约90mg、约40mg至约100mg、约40mg至约125mg、约40mg至约150mg、约50mg至约60mg、约50mg至约70mg、约50mg至约80mg、约50mg至约90mg、约50mg至约100mg、约50mg至约125mg、约50mg至约150mg、约60mg至约70mg、约60mg至约80mg、约60mg至约90mg、约60mg至约100mg、约60mg至约125mg、约60mg至约150mg、约70mg至约80mg、约70mg至约90mg、约70mg至约100mg、约70mg至约125mg、约70mg至约150mg、约80mg至约90mg、约80mg至约100mg、约80mg至约125mg、约80mg至约150mg、约90mg至约100mg、约90mg至约125mg、约90mg至约150mg、约100mg至约125mg、约100mg至约150mg或约125mg至约150mg。在一些实施方案中，固体载体将为约10mg、约20mg、约30mg、约40mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg、约125mg或约150mg。在一些实施方案中，固体载体将为至少约10mg、约20mg、约30mg、约40mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg或约125mg。在一些实施方案中、固体载体将为每剂量单位至多约20mg、约30mg、约40mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg、约125mg或约150mg。在一些实施方案中，固体载体将为每剂量单位约150mg至约1,000mg。在一些实施方案中，固体载体将为约150mg至约175mg、约150mg至约200mg、约150mg至约300mg、约150mg至约400mg、约150mg至约500mg、约150mg至约600mg、约150mg至约700mg、约150mg至约800mg、约150mg至约900mg、约150mg至约1,000mg、约175mg至约200mg、约175mg至约300mg、约175mg至约400mg、约175mg至约500mg、约175mg至约600mg、约175mg至约700mg、约175mg至约800mg、约175mg至约900mg、约175mg至约1,000mg、约200mg至约300mg、约200mg至约400mg、约200mg至约500mg、约200mg至约600mg、约200mg至约700mg、约200mg至约800mg、约200mg至约900mg、约200mg至约1,000mg、约300mg至约400mg、约300mg至约500mg、约300mg至约600mg、约300mg至约700mg、约300mg至约800mg、约300mg至约900mg、约300mg至约1,000mg、约400mg至约500mg、约400mg至约600mg、约400mg至约700mg、约400mg至约800mg、约400mg至约900mg、约400mg至约1,000mg、约500mg至约600mg、约500mg至约700mg、约500mg至约800mg、约500mg至约900mg、约500mg至约1,000mg、约600mg至约700mg、约600mg至约800mg、约600mg至约900mg、约600mg至约1,000mg、约700mg至约800mg、约700mg至约900mg、约700mg至约1,000mg、约800mg至约900mg、约800mg至约1,000mg或约900mg至约1,000mg。在一些实施方案中，固体载体将为约150mg、约175mg、约200mg、约300mg、约400mg、约500mg、约600mg、约700mg、约800mg、约900mg或约1,000mg。在一些实施方案中，固体载体将为至少约150mg、约175mg、约200mg、约300mg、约400mg、约500mg、约600mg、约700mg、约800mg或约900mg。在一些实施方案中，固体载体将为每剂量单位至多约175mg、约200mg、约300mg、约400mg、约500mg、约600mg、约700mg、约800mg、约900mg或约1,000mg。

在一些实施方案中，固体载体将为每剂量单位约10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、55mg、60mg、65mg、70mg、75mg、80mg、85mg、90mg、95mg或约1g。如果使用液体载体，则制剂可以呈糖浆剂、乳剂、软明胶胶囊剂或无菌注射液剂(诸如水性或非水性液体混悬剂或溶液剂)的形态。

在一些实施方案中，固体载体将为每剂量单位约1g至约2g。在一些实施方案中，固体载体将为约1g至约1.1g、约1g至约1.2g、约1g至约1.3g、约1g至约1.4g、约1g至约1.5g、约1g至约1.6g、约1g至约1.7g、约1g至约1.8g、约1g至约1.9g、约1g至约2g、约1.1g至约1.2g、约1.1g至约1.3g、约1.1g至约1.4g、约1.1g至约1.5g、约1.1g至约1.6g、约1.1g至约1.7g、约1.1g至约1.8g、约1.1g至约1.9g、约1.1g至约2g、约1.2g至约1.3g、约1.2g至约1.4g、约1.2g至约1.5g、约1.2g至约1.6g、约1.2g至约1.7g、约1.2g至约1.8g、约1.2g至约1.9g、约1.2g至约2g、约1.3g至约1.4g、约1.3g至约1.5g、约1.3g至约1.6g、约1.3g至约1.7g、约1.3g至约1.8g、约1.3g至约1.9g、约1.3g至约2g、约1.4g至约1.5g、约1.4g至约1.6g、约1.4g至约1.7g、约1.4g至约1.8g、约1.4g至约1.9g、约1.4g至约2g、约1.5g至约1.6g、约1.5g至约1.7g、约1.5g至约1.8g、约1.5g至约1.9g、约1.5g至约2g、约1.6g至约1.7g、约1.6g至约1.8g、约1.6g至约1.9g、约1.6g至约2g、约1.7g至约1.8g、约1.7g至约1.9g、约1.7g至约2g、约1.8g至约1.9g、约1.8g至约2g或约1.9g至约2g。

在一些实施方案中，固体载体将为约1g、约1.1g、约1.2g、约1.3g、约1.4g、约1.5g、约1.6g、约1.7g、约1.8g、约1.9g或约2g。

在一些实施方案中，固体载体将为至少约1g、约1.1g、约1.2g、约1.3g、约1.4g、约1.5g、约1.6g、约1.7g、约1.8g或约1.9g。在一些实施方案中，固体载体将为每剂量单位至多约1.1g、约1.2g、约1.3g、约1.4g、约1.5g、约1.6g、约1.7g、约1.8g、约1.9g或约2g。

.本公开内容的药物组合物可以通过本领域的常规方法制备。例如，可以通过将活性成分与普通的佐剂和/或稀释剂混合，然后在常规压片机中压制混合物来制备片剂。佐剂或稀释剂的示例包括：玉米淀粉、马铃薯淀粉、滑石、硬脂酸镁、明胶、乳糖、树胶等。可以使用通常用于此类目的的任何其他佐剂或添加剂，诸如着色剂、调味剂、防腐剂等，只要它们与活性成分相容即可。

药物组合物包含PDE9抑制剂化合物1。药物组合物包含按重量计至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％的本公开内容的PDE9抑制剂。药物组合物包含按重量计至少约1％至约90％的本公开内容的PDE9抑制剂。药物组合物包含至少约1％至约10％、约1％至约20％、约1％至约30％、约1％至约40％、约1％至约50％、约1％至约60％、约1％至约70％、约1％至约80％、约1％至约90％、约10％至约20％、约10％至约30％、约10％至约40％、约10％至约50％、约10％至约60％、约10％至约70％、约10％至约80％、约10％至约90％、约20％至约30％、约20％至约40％、约20％至约50％、约20％至约60％、约20％至约70％、约20％至约80％、约20％至约90％、约30％至约40％、约30％至约50％、约30％至约60％、约30％至约70％、约30％至约80％、约30％至约90％、约40％至约50％、约40％至约60％、约40％至约70％、约40％至约80％、约40％至约90％、约50％至约60％、约50％至约70％、约50％至约80％、约50％至约90％、约60％至约70％、约60％至约80％、约60％至约90％、约70％至约80％、约70％至约90％或约80％至约90％。药物组合物包含至少约1％、约10％、约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％或约90％。药物组合物包含至少约1％、约10％、约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％或约80％。药物组合物包含按重量计至少或至多约10％、约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％或约90％的本公开内容的PDE9抑制剂。药物组合物包含按重量计至少约90％至约99.9％的本公开内容的PDE9抑制剂。药物组合物包含至少约90％至约91％、约90％至约92％、约90％至约93％、约90％至约94％、约90％至约95％、约90％至约96％、约90％至约97％、约90％至约98％、约90％至约99％、约90％至约99.9％、约91％至约92％、约91％至约93％、约91％至约94％、约91％至约95％、约91％至约96％、约91％至约97％、约91％至约98％、约91％至约99％、约91％至约99.9％、约92％至约93％、约92％至约94％、约92％至约95％、约92％至约96％、约92％至约97％、约92％至约98％、约92％至约99％、约92％至约99.9％、约93％至约94％、约93％至约95％、约93％至约96％、约93％至约97％、约93％至约98％、约93％至约99％、约93％至约99.9％、约94％至约95％、约94％至约96％、约94％至约97％、约94％至约98％、约94％至约99％、约94％至约99.9％、约95％至约96％、约95％至约97％、约95％至约98％、约95％至约99％、约95％至约99.9％、约96％至约97％、约96％至约98％、约96％至约99％、约96％至约99.9％、约97％至约98％、约97％至约99％、约97％至约99.9％、约98％至约99％、约98％至约99.9％或约99％至约99.9％。药物组合物包含至少约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或约99.9％。药物组合物包含至少约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％。药物组合物包含按重量计至少至多约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或约99.9％的本公开内容的PDE9抑制剂。药物组合物包含按重量计至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的本公开内容的PDE9抑制剂。

在一些实施方案中，将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物配制为用于口服施用的药物组合物。例如，它可以是固体片剂形式。用于口服施用的组合物至少包含填充剂和/或加工助剂。加工助剂可以是助流剂或润滑剂。用于口服施用的组合物也可以包含包衣。在一些实施方案中，用于口服施用的组合物包含微晶纤维素和/或预糊化淀粉作为填充剂。在一些实施方案中，用于口服施用的组合物包含胶态二氧化硅和/或硬脂酸镁作为加工助剂。在一些实施方案中，用于口服施用的组合物包含

在一些实施方案中，片剂包含片剂总重量的按重量计约5％至约20％的包衣。在一些实施方案中，片剂包含约0.5％至约10％的包衣。在一些实施方案中，片剂包含约0.5％至约1％、约0.5％至约2％、约0.5％至约3％、约0.5％至约4％、约0.5％至约5％、约0.5％至约6％、约0.5％至约7％、约0.5％至约8％、约0.5％至约9％、约0.5％至约10％、约1％至约2％、约1％至约3％、约1％至约4％、约1％至约5％、约1％至约6％、约1％至约7％、约1％至约8％、约1％至约9％、约1％至约10％、约2％至约3％、约2％至约4％、约2％至约5％、约2％至约6％、约2％至约7％、约2％至约8％、约2％至约9％、约2％至约10％、约3％至约4％、约3％至约5％、约3％至约6％、约3％至约7％、约3％至约8％、约3％至约9％、约3％至约10％、约4％至约5％、约4％至约6％、约4％至约7％、约4％至约8％、约4％至约9％、约4％至约10％、约5％至约6％、约5％至约7％、约5％至约8％、约5％至约9％、约5％至约10％、约6％至约7％、约6％至约8％、约6％至约9％、约6％至约10％、约7％至约8％、约7％至约9％、约7％至约10％、约8％至约9％、约8％至约10％或约9％至约10％的包衣。在一些实施方案中，片剂包含约0.5％、约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％或约10％的包衣。在一些实施方案中，片剂包含至少约0.5％、约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％或约9％的包衣。在一些实施方案中，片剂包含至多约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％或约10％的包衣。在一些实施方案中，片剂包含片剂总重量的按重量计约0.5％、约5％、约10％、约15％或约20％的包衣。

在一些实施方案中，组合物还包含肠溶衣。肠溶衣是应用于口服药物的聚合物屏障，防止其在胃环境中溶解或崩解。片剂、迷你片剂、丸剂和颗粒剂(通常装在胶囊壳中)是最常见的肠溶剂型。大多数肠溶衣的作用是提供一种表面，该表面在胃中发现的强酸性pH下稳定，但在较高pH(碱性pH)下迅速分解。例如，它们不会溶解在胃的胃酸(pH约为3)中，但会溶解在小肠中存在的碱性(pH 7-9)环境中。通过防止药物溶解到胃中，肠溶衣可以保护胃粘膜免受药物本身的刺激作用。当药物到达肠的中性或碱性环境时，其活性成分于是会溶解并变得适于吸收到血流中。用于肠溶衣的材料包括但不限于脂肪酸、蜡、虫胶、塑料和植物纤维。使用的常规材料是膜树脂的溶液。

在一些实施方案中，药物组合物包含填充剂。在一些实施方案中，填充剂是预凝胶化的淀粉。在实施方案中，药物组合物包含药物组合物总重量的按重量计约4％至约6％的预糊化淀粉。在一些实施方案中，药物组合物包含药物组合物总重量的按重量计约4％、约5％或约6％的预糊化淀粉。

在一些实施方案中，填充剂是微晶纤维素。在一些实施方案中，药物组合物包含药物组合物总重量的按重量计约15％至约50％的微晶纤维素。在一些实施方案中，药物组合物包含药物组合物总重量的按重量计约50％、约40％、约30％、约20％或约15％的微晶纤维素。在一些实施方案中，药物组合物包含按重量计约20％的微晶纤维素。

在一些实施方案中，药物组合物包含加工助剂。在一些实施方案中，加工助剂是胶态二氧化硅。在实施方案中，药物组合物包含药物组合物总重量的按重量计约1％至约2.5％的胶态二氧化硅。在一些实施方案中，药物组合物包含药物组合物总重量的按重量计约1％、约1.5％、约2％或约2.5％的胶态二氧化硅。

在一些实施方案中，加工助剂是硬脂酸镁。在实施方案中，药物组合物包含药物组合物总重量的按重量计约0.5％至约1.5％的硬脂酸镁。在一些实施方案中，药物组合物包含药物组合物总重量的按重量计约0.5％、约0.8％、约1.0％、约1.2％或约1.5％的硬脂酸镁。

在一些实施方案中，药物组合物包含重量比为5:2:1的预糊化淀粉、胶态二氧化硅和硬脂酸镁。

在一些实施方案中，包含化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物的药物组合物在受控的室温(20-25℃)下储存。

在一些实施方案中，包含化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物的药物组合物免受光。

在一些实施方案中，药物组合物具有易碎性和/或崩解时间。如本文所公开的，易碎性是片剂在压制后趋于破碎、碎裂或破裂的趋势。易碎性测试是一种测试片剂耐久性的实验室技术。该测试包括使用带挡板的旋转轮在固定时间内反复投下片剂样品。易碎性是通过用于片剂易碎性的USP(美国药典)标准测试来确定的。在一些实施方案中，药物组合物具有不超过片剂的约0.5％重量损失的易碎性。在一些实施方案中，药物组合物具有不超过片剂的约0.4％重量损失的易碎性。在一些实施方案中，药物组合物具有不超过片剂的约0.3％重量损失的易碎性。在一些实施方案中，药物组合物具有不超过片剂的约0.25％重量损失的易碎性。

崩解测试用于测试丸剂形式的药物如何在溶液中崩解。这些测试可以与粉状化合物的体外分解相关，用于质量控制目的。崩解定义为如下一种状态：其中被测试单元的残留物不留在设备的筛网上，或者如果残留物残留，则其由片剂成分部分例如片剂的不溶性包衣，或胶囊壳，或任何融化的脂肪物质的崩解部分的碎片组成。该测试通常是在具有已知吸收问题或已知差的溶解度的产品上进行的。它也可以在缓释或延迟释放的产品，如肠溶衣产品上进行。溶出度测试可以在胶囊剂或片剂上进行。在一些实施方案中，药物组合物的溶出时间不超过15分钟。

在一些实施方案中，药物组合物还包含羟丙基纤维素。羟丙基纤维素是纤维素的衍生物，具有水溶性和有机溶解性。它通常用作药物赋形剂。羟丙基纤维素可用作片剂粘合剂、增稠剂、增粘剂、包衣剂和成膜剂。在一些实施方案中，药物组合物还包含片剂的按重量计约1％至约6％的羟丙基纤维素。在一些实施方案中，药物组合物还包含片剂的按重量计约4％至约5％的羟丙基纤维素。在一些实施方案中，羟丙基纤维素占片剂重量的约4％。在一些实施方案中，羟丙基纤维素占片剂重量的约5％。在一些实施方案中，羟丙基纤维素占片剂重量的约6％。

在一些实施方案中，药物组合物具有片剂硬度和/或片剂厚度。片剂硬度测试，是制药行业使用的一种实验室技术，用于确定片剂的断裂点和结构完整性，并找出片剂在使用前的储存、运输、包装和处理条件下如何变化。片剂的断裂点取决于其形状。在一些实施方案中，片剂的硬度为约10kPa。在一些实施方案中，片剂的厚度为约4.5-5.0mm。在一些实施方案中，片剂的厚度为约4.65-4.85mm。

在一些其他实施方案中，包含化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物的组合物适合于儿科用途，并且可以由儿科镰状细胞性贫血患者服用。

在一些实施方案中，包含化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物的药物组合物与食物一起服用。在一些实施方案中，药物组合物在饭后服用。在一些实施方案中，药物组合物不与食物一起服用。

给药

在一些实施方案中，口服剂量范围为每天每kg体重约0.001至约100mg。在一些实施方案中，口服剂量范围为每天每kg体重约0.01至约50mg。在一些实施方案中，口服剂量范围为每天每kg体重约0.05至约10mg。口服剂量通常以一剂或多剂施用，通常每天施用一至三剂。在一些实施方案中，所述剂量每天一次、两次或三次施用。确切的剂量将取决于施用的频率和方式，所治疗的受试者的性别、年龄、体重和总体健康状况，所治疗的病况的性质和严重程度以及要治疗的任何伴随疾病，以及本领域技术人员显而易见的其他因素。

在一些实施方案中，将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物以每kg受试者体重小于6.0mg或小于约4.0mg的剂量施用于有需要的受试者。在一些实施方案中，将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物以每kg受试者体重约0.1mg至约6.0mg的剂量施用。例如，将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物以每kg受试者体重约0.3至约3.0mg，或约0.3至约1.0mg的剂量施用。患者可以患有镰状细胞病。患者可以是成人(≥18岁)或儿童(<18岁)。在一些实施方案中，患者以每kg受试者体重约0.3mg、约0.2mg、约0.1mg或约0.05mg的剂量接受化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物。在一些实施方案中，患者以每kg受试者体重约1mg接受化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物。在一些实施方案中，患者以每kg受试者体重约3mg接受化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物。在一些实施方案中，患者以每kg受试者体重约6mg接受化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物。

在一些实施方案中，患者以每kg受试者体重约0.1mg接受化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物。

在一些实施方案中，患者以每kg受试者体重约0.3mg接受化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物。

在一些实施方案中，患者以每kg受试者体重约0.5mg接受化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物。

在一些实施方案中，患者以每kg受试者体重约1mg接受化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物。

在一些实施方案中，患者以每kg受试者体重约5mg接受化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物。

在一些实施方案中，患者以每kg受试者体重约10mg接受化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物。

在一些实施方案中，将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物以每天约20mg、约50mg、约100mg、约200mg、约300mg、约400mg、约500mg或约600mg的固定剂量(flat dose)施用于有需要的患者。在一些实施方案中，将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物以约50mg、约100mg、约150mg、约200mg、约250mg、约300mg或约350mg的剂量施用于患者。在一些实施方案中，将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物以约50mg的剂量施用。在一些实施方案中，将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物以约100mg的剂量施用。在一些实施方案中，将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物以约150mg的剂量施用。在一些实施方案中，将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物以约200mg的剂量施用。在一些实施方案中，将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物以约250mg的剂量施用。在一些实施方案中，将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物以约300mg的剂量施用。在一些实施方案中，将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物以约350mg的剂量施用。在一些实施方案中，将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物以约400mg的剂量施用。

在药物组合物的一些实施方案中，将化合物1以每天或每剂的最大剂量施用。在一些实施方案中，每天或每剂施用1g的化合物1或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物的总组合剂量。在一些实施方案中，每天或每剂施用600mg的化合物1或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物的总组合剂量。在一些实施方案中，每天或每剂施用500mg的化合物1或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物的总组合剂量。在一些实施方案中，每天或每剂施用400mg的化合物1或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物的总组合剂量。在一些实施方案中，每天或每剂施用300mg的化合物1或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物的总组合剂量。在一些实施方案中，每天或每剂施用200mg的化合物1或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物的总组合剂量。在一些实施方案中，向患者施用化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物，其中将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物每天施用一次。在一些实施方案中，将药物组合物每天施用两次。

在一些实施方案中，将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物施用于患者，其中将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物与食物一起每天施用一次。已发现食物可以显著减少不良事件情形。当与食物一起服用化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物时，可以减少副作用，如恶心、呕吐和头痛的发生率和严重程度。

在一些实施方案中，向患者施用化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物，其中将化合物1或其药学上可接受的盐或多晶型物每天施用一次持续至少7天、10天、2周、3周、4周、1个月、2个月、3个月、4个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、1年、1.5年或2年。在一些实施方案中，治疗患者3个月。在一些实施方案中，治疗患者6个月。在一些实施方案中，治疗患者1年。在一些实施方案中，治疗患者1.5年。在一些实施方案中，治疗患者2年、3年、4年、5年、5年以上或终生。

在一些实施方案中，药物组合物通过本领域技术人员已知的方法以单位剂型存在。为了说明的目的，用于口服施用的典型单位剂型可以包含约0.01至约1000mg、约0.05至约500mg或约0.5mg至约200mg。

组合治疗

在一个实施方案中，包含本公开内容的化合物的药物组合物与另外的活性剂如羟基脲(HU)组合使用。本公开内容的化合物和另外的活性剂可以同时、依次或以任何顺序施用。本公开内容的化合物和另外的活性剂可以以任何合适的不同的剂量、不同的剂量频率或通过任何合适的不同的途径施用。

如本文所用，术语“同时施用”没有特别限制，并且是指本公开内容的化合物和另外的活性剂基本上同时施用，例如，以混合物或以紧随其后的顺序施用。

如本文所用，术语“依次施用”没有特别限制，并且是指本公开内容的化合物和另外的活性剂不是同时施用，而是一个接一个地或成组地施用，其中施用之间有特定的时间间隔。在本公开内容的化合物与另外的活性剂的各自施用之间的时间间隔可以相同或不同，并且可以选自，例如，2分钟至96小时、1至7天的范围或一、二或三周。通常，施用之间的时间间隔可以在几分钟至几小时，例如2分钟至72小时、30分钟至24小时或1至12小时的范围内。进一步的示例包括24至96小时、12至36小时、8至24小时和6至12小时的范围内的时间间隔。

本公开内容的化合物与另外的活性剂的摩尔比没有特别限制。例如，当本公开内容的化合物和一种另外的活性剂在组合物中组合时，它们的摩尔比可以在1:500至500:1，或1:100至100:1，或1:50至50:1，或1:20至20:1，或1:5至5:1的范围内或为1:1。当本公开内容的化合物和两种或更多种其他活性剂在组合物中组合时，相似的摩尔比适用。本公开内容的化合物可以包含组合物的约1％至10％、或约10％至约20％、或约20％至约30％、或约30％至40％、或约40％至50％、或约50％至60％、或约60％至70％、或约70％至80％、或约80％至90％、或约90％至99％的预定摩尔重量百分比。

PDE9在人造血系统(包括嗜中性粒细胞、网织红细胞和红白血病细胞)中特异性表达。此外，与健康个体相比，SCD患者表现出在网织红细胞和嗜中性粒细胞中显著升高的PDE9表达(Almeida等人,Br J Haematol.2008年9月；142(5),836)。此外，有证据表明PDE9与细胞粘附之间存在联系，因为药理学上的PDE9抑制改善了SCD嗜中性粒细胞增加的粘附性质(Miguel等人,Inflamm Res.2011年7月；60(7),633)。PDE9抑制降低细胞粘附的机制已显示由增加的cGMP和减少的内皮粘附分子表达介导。重要的是，在SCD的动物模型中，PDE9抑制剂介导的细胞黏附减少具有增加细胞存活的功能作用。除了表现出相比于HU减少细胞粘附之外，PDE9抑制还导致胎儿非镰状血红蛋白(HbF)产生增加，这降低了红细胞(RBC)内异常血红蛋白(HbS)的细胞浓度，从而减少了异常血红蛋白聚合及其相关后遗症。大型研究(如镰状细胞病合作研究)以及美国以外的各种患者群体的研究证明了增加HbF在治疗SCD中的重要性，显示HbF是该疾病最重要的修饰因子之一(Alsultan等人,Am JHematol.2013,88(6),531)，并且数据显示HbF的修饰因子改善了其他血液学参数(Akinsheye,Blood,2011,118(1):19)。最后，Almeida及其同事证明，在SCD的小鼠模型中，用HU结合PDE9抑制的治疗导致HU对cGMP增强作用的额外有益放大(Almeida等人,Blood.2012年10月；120(14),2879)。总之，PDE9抑制剂既可以调节胎儿血红蛋白产生的表达，又可以降低细胞黏附，这两种机制对于治疗SCD都很关键。

本公开内容的PDE9抑制剂和羟基脲(HU)通过不同的机制起作用。HU增加一氧化氮(NO)水平，这激活可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)以生成cGMP。本公开内容的PDE9抑制剂通过抑制PDE9酶促活性来阻断cGMP的降解，从而提高cGMP水平。在红细胞谱系中，cGMP与蛋白激酶G(PKG)结合并发出胎儿γ珠蛋白合成的信号，并最终产生HbF。在PDE9表达高的造血细胞中，对PDE9活性的直接抑制增加cGMP水平，从而促进白细胞粘附降低。

本公开内容的一方面提供了使用本公开内容的PDE9抑制剂的方法以及包含本公开内容的PDE9抑制剂的药物组合物。

本公开内容的PDE9抑制剂可用于治疗镰状细胞病或者与镰状细胞病有关的任何疾病和/或症状，诸如贫血、镰状细胞血红蛋白C病(SC)、脉管阻塞性危象、疼痛发作(镰状细胞危象)、脾隔离症危象、急性胸部综合症、再生障碍性危象、溶血性危象、长期疼痛、细菌感染和卒中。

在一个实施方案中，本公开内容的PDE9抑制剂被用于增加受试者中的血红蛋白水平。

在另一个实施方案中，本公开内容的PDE9抑制剂被用于增加受试者的细胞或血浆中的cGMP水平，其中该受试者患有镰状细胞病。该细胞可以是但不限于红细胞和/或白细胞。cGMP水平可增加至少50％、至少100％或至少150％。在一些实施方案中，cGMP水平可以增加至少2倍、3倍、4倍、5倍、10倍、15倍、20倍或25倍。

在另一个实施方案中，本公开内容的PDE9抑制剂被用于增加受试者中的胎儿血红蛋白(HbF)阳性红细胞数，其中该受试者患有镰状细胞病。HbF阳性红细胞数增加至少50％、至少100％或至少150％。在一些实施方案中，HbF阳性红细胞数增加至少2倍、3倍、4倍、5倍、10倍、15倍、20倍或25倍。

在另一个实施方案中，本公开内容的PDE9抑制剂被用于降低受试者中的镰状红细胞百分比(％镰状RBC)、郁滞百分比(％郁滞)，总胆红素或总白细胞计数，其中该受试者患有镰状细胞病。％镰状RBC、％郁滞、总胆红素、总白细胞计数或脾重量减少至少10％、20％、30％、40％、50％、60％或70％。

cGMP水平可通过本领域任何合适的方法例如酶免疫测定来测量。

如本文所用，HbF阳性细胞意指具有HbF的红细胞。HbF阳性细胞可以用本领域任何合适的方法例如电泳和/或比色法从血液样品测量。

如本文所用，镰状红细胞、镰化红细胞意指具有月牙形或镰刀形状的红细胞。％镰状红细胞可以通过本领域任何合适的方法从血液样品测量。

如本文所用，郁滞或微血管郁滞是通过血管的血液或淋巴流的严重减慢或完全停止。％郁滞是静止(无流动)小静脉的数目除以流动的小静脉的数目再乘以100。％郁滞可以通过本领域任何合适的方法来测量。

如本文所用，总胆红素意指未缀合的和缀合的胆红素。总胆红素水平可以通过本领域任何合适的方法从血液样品测量。

如本文所用，总白血球计数或总白细胞计数是一种血液测试，其测量体内白细胞的数目。其可以通过本领域任何合适的方法从血液样品测量。

本公开内容的另一方面提供了将本公开内容的PDE9抑制剂与至少一种其他活性剂组合使用的方法。它们可以同时或依次施用。它们可以作为混合物存在以供同时施用，或者可以各自存在于单独的容器中以供依次施用。

如本文所用，术语“同时施用”无特别限制，意指本公开内容的PDE9抑制剂与至少一种其他活性剂基本上同时施用，例如，作为混合物或以紧随其后的顺序施用。

如本文所用，术语“依次施用”无特别限制，意指本公开内容的PDE9抑制剂与至少一种其他活性剂不同时施用，而是一个接一个或成组地施用，其中施用之间有特定的时间间隔。在本公开内容的PDE9抑制剂与至少一种其他活性剂的分别施用之间的时间间隔可以相同或不同，并且可以选自例如2分钟至96小时、1至7天的范围或者一、二或三周。通常，施用之间的时间间隔可以在几分钟至几小时的范围内，诸如在2分钟至72小时、30分钟至24小时或1至12小时的范围内。其他示例包括在24至96小时、12至36小时、8至24小时和6至12小时的范围内的时间间隔。

本公开内容的PDE9抑制剂与至少一种其他活性剂的摩尔比无特别限制。例如，当本公开内容的PDE9抑制剂和一种其他活性剂在组合物中组合时，它们的摩尔比可以在1:500至500:1、或1:100至100:1、或1:50至50:1、或1:20至20:1、或1:5至5:1的范围内，或为1:1。当本公开内容的PDE9抑制剂与两种或更多种其他活性剂在组合物中组合时，适用相似的摩尔比。本公开内容的PDE9抑制剂可包括组合物的约1％至10％、或约10％至约20％、或约20％至约30％、或约30％至40％、或约40％至50％、或约50％至60％、或约60％至70％、或约70％至80％、或约80％至90％、或约90％至99％的预定摩尔重量百分比。

其他活性剂可以是与本公开内容不同的PDE9抑制剂或HU。其他活性剂还可以是抗生素剂，诸如青霉素、非甾体抗炎药(NSAIDS)如双氯芬酸或萘普生、止痛药如阿片样物质，或者叶酸。

本公开内容的又一方面提供了将本公开内容的PDE9抑制剂与至少一种其他疗法组合使用的方法，该其他疗法诸如但不限于输血、骨髓移植或基因疗法。

本公开内容提供了用于方便和/或有效地实施本公开内容的方法的多种试剂盒和装置。通常，试剂盒将包含足够量和/或数目的组分，以允许使用者对受试者进行多种治疗和/或进行多种实验。

在一个实施方案中，本公开内容提供了用于治疗镰状细胞病的试剂盒，其包含本公开内容的PDE9抑制剂化合物或本公开内容的PDE9抑制剂化合物任选地与任何其他活性剂例如HU、抗生素剂(如青霉素)、非甾体抗炎药(NSAIDS)(如双氯芬酸或萘普生)、止痛药(如阿片样物质)或叶酸的组合。

试剂盒可进一步包括包装和说明和/或递送剂以形成制剂组合物。递送剂可以包括盐水、缓冲溶液或本文公开的任何递送剂。每种组分的量可以变化，以实现一致的可再现的较高浓度的盐水或简单的缓冲液制剂。组分也可以变化，以便增加缓冲液中的PDE9抑制剂化合物在一段时间内和/或在各种条件下的稳定性。

本公开内容提供了可以结合本公开内容的PDE9抑制剂化合物的装置。这些装置包含稳定的药物制剂，可用于即时递送给有需要的受试者，诸如患有镰状细胞病的人类患者。

装置的非限制性示例包括泵、导管、针、经皮贴剂、加压嗅觉递送装置、离子电渗疗法装置、多层微流体装置。该装置可用于按照单次、多次或分开给药方案来递送本公开内容的PDE9抑制剂化合物。所述装置可用于跨生物组织、皮内、皮下或肌肉内递送本公开内容的PDE9抑制剂化合物。适用于递送PDE9抑制剂化合物的装置的更多示例包括但不限于国际公开WO 2014036555中公开的用于膀胱内药物递送的医疗装置；美国公开号20080108697中公开的由I型玻璃制成的玻璃瓶；美国公开号20140308336中公开的药物洗脱装置，其包含由可降解聚合物制成的膜以及活性剂；美国专利号5716988中公开的输注装置，其具有注射微型泵，或含有活性剂的药学稳定制剂的容器；国际公开WO 2015023557中公开的可植入装置，其包含储存器和与储存器流体连通的通道化构件；美国公开号20090220612中公开的具有一个或多个层的基于中空纤维的生物相容性药物递送装置；国际公开WO 2013170069中公开的用于药物递送的可植入装置，其包括具有壳体的长形柔性装置，该壳体限定了容纳固体或半固体形式的药物的储存器；美国专利号7326421中公开的生物可吸收的植入装置，其各自的内容均通过引用整体并入本文。

除非明确指出相反，否则本文中使用的冠词“一个”和“一种”应理解为表示“至少一个”。

如本文所用，短语“和/或”应理解为意指如此结合的要素中的“任一个或两个”，即要素在一些情况下结合存在而在其他情况下分离存在。除非明确指出相反，否则除了由“和/或”从句具体确定的要素之外，其他要素可以任选地存在，无论与那些具体确定的要素相关还是无关。因此，作为非限制性示例，当与开放式语言如“包含”结合使用时，对“A和/或B”的提及在一个实施方案中，可以指A而没有B(任选地包括除B以外的要素)；在另一个实施方案中，可以指B而没有A(任选地包括除A以外的要素)；在又一个实施方案中，可以指A和B两者(任选地包括其他要素)。

如本文所用，“或”应被理解为具有与以上定义的“和/或”相同的含义。例如，当分隔列表中的项目时，“或”或“和/或”应解释为包含性的，即，包括多个要素或要素列表中的至少一个，但也包括多于一个，并且任选地包括额外的未列出的项目。仅明确指出相反的术语，诸如“…中的仅一个”或“…中的恰好一个”，或当“由……组成”在权利要求书中使用时，将指包括多个要素或要素列表中的恰好一个要素。

一般而言，如本文所用，术语“或”当在排他性术语(诸如“任一个”、“…中之一”、“…中的仅一个”或“…中的恰好一个”)之前时，应仅解释为表示排他性替代(即“一个或另一个，但不是两者”)。当在权利要求书中使用时，“基本上由……组成”应具有在专利法领域中所使用的普通含义。

如本文所用，关于一个或多个要素的列表的短语“至少一个”应理解为意指选自要素列表中的任一个或多个要素的至少一个要素，但不一定包括要素列表中具体列出的每个要素中的至少一个，并且不排除要素列表中要素的任何组合。该定义还允许除了短语“至少一个”指代的要素列表中具体确定的要素之外的要素可以任选地存在，无论与那些具体确定的要素相关还是无关。

因此，作为非限制性示例，“A和B中的至少一个”(或等效地，“A或B中的至少一个”，或等效地，“A和/或B中的至少一个”)在一个实施方案中可以指至少一个A，任选地包括多于一个A，而没有B存在(并任选地包括除B以外的要素)；在另一个实施方案中，可以指至少一个B，任选地包括多于一个B，而没有A存在(并任选地包括除A以外的要素)；在又一个实施方案中，可以指至少一个A，任选地包括多于一个A，以及至少一个B，任选地包括多于一个B(并任选地包括其他要素)；等等。

如本文所用，所有过渡短语，如“包含”、“包括”、“携带”、“具有”、“含有”、“涉及”、“持有”等应被理解为开放式的，即意味着包括但不限于。

如美国专利局专利审查程序手册中所述，仅过渡短语“由……组成”和“基本上由……组成”应分别是封闭的或半封闭的过渡短语。

如本文所用，“受试者”或“患者”是指任何哺乳动物(例如人类)，诸如可能易患例如肿瘤发生或癌症等疾病或病症的哺乳动物。示例包括人类、非人类灵长类动物、牛、马、猪、绵羊、山羊、狗、猫或啮齿动物，诸如小鼠、大鼠、仓鼠或豚鼠。在各个实施方案中，受试者是指已经是或将成为治疗、观察或实验的对象的受试者。例如，受试者可以是被诊断患有癌症或以其他方式已知患有癌症的受试者，或者是基于受试者中已知的癌症被选择用于治疗、观察或实验的受试者。

如本文所用，“治疗”是指疾病或病症或其至少一种体征或症状的改善。“治疗”可以指减少疾病或病症的进展，如通过例如至少一种体征或症状的稳定或者通过至少一种体征或症状的进展速度降低所确定的进展速度减低来确定的。在另一个实施方案中，“治疗”是指延迟疾病或病症的发作。

如本文所用，“预防”或“防止”是指降低获得或患有给定的疾病或病症的体征或症状的风险，即，预防性治疗。

如本文所用，短语“治疗有效量”是指包含有效产生期望治疗效果的本教导化合物的化合物、材料或组合物的量。因此，治疗有效量治疗或者预防疾病或病症，例如改善病症的至少一种体征或症状。在各个实施方案中，该疾病或病症是癌症。

不在两个字母或符号之间的破折号(“-”)用于指示取代基的连接点。例如，-CONH

“任选的”或“任选地”意指随后描述的事件或情形可能发生或可能不发生，并且该描述包括该事件或情形发生的情况以及该事件或情形不发生的情况。例如，“任选地取代的芳基”涵盖本文所定义的“芳基”和“取代的芳基”。本领域普通技术人员将理解，对于含有一个或多个取代基的任何基团，此类基团不旨在引入空间上不切实际、合成上不可行和/或固有地不稳定的任何取代或取代模式。

本文的所有数值范围包括所述数值范围内的所有数值和所有数值的范围。作为非限制性示例，(C

此外，虽然阐述本公开内容的广泛范围的数值范围和参数是如上所述的近似值，但在实施例部分中阐述的数值的报告尽可能精确。然而，应当理解，这样的数值固有地包含由测量设备和/或测量技术所导致的某些误差。

缩写和术语列表

ADME：吸收、分布、代谢和排泄

AE：不良事件

AUC

BBB：血脑屏障

C

cGMP：环鸟苷一磷酸

DMSO：二甲基亚砜

DSFC：背部皮肤皱褶小室

F细胞：具有胎儿血红蛋白的血细胞

FIH：人类中首次

FTIR：傅里叶变换红外光谱法

GC：气相色谱法

HBB：血红蛋白亚基β

HbF：胎儿血红蛋白

HBG：γ-珠蛋白基因

HbS：镰状血红蛋白

hERG：人ether-à-go-go相关基因

HPLC：高效液相色谱法

HU：羟基脲

IC：抑制浓度

IC

ICAM-1：细胞间粘附分子-1

ICH：国际协调会议

ICP-MS：电感耦合等离子体质谱法

IV：静脉内

MAD：多剂量递增

MTD：最大耐受剂量

NO：一氧化氮

NOAEL：无明显不良作用水平

PD：药效学

PDE9：磷酸二酯-9

PEG：聚乙二醇

PIC：胶囊中的粉末

PK：药代动力学

PKG：蛋白激酶G

RBC：红细胞

RH：相对湿度

SCD：镰状细胞病

SD：标准偏差

SEM：均值标准误差

sGC：可溶性鸟苷酸环化酶t

TK：毒物动力学

T

VOC：脉管阻塞性危象

WBC：白细胞

w/w％：重量/重量百分比

实施例

应当理解，以下实施例旨在说明而非限制本公开内容。在不脱离本公开内容的精神和范围的情况下，在阅读本公开内容之后，前述描述和示例的各种其他示例和修改对本领域技术人员将是显而易见的，并且旨在使得所有这些示例或修改都包括在所附权利要求书的范围内。本文引用的所有出版物和专利均通过引用以其整体合并于此。

化合物1是WO 2013/053690中公开的6-[4-甲基-1-(嘧啶-2-基甲基)吡咯烷-3-基]-3-四氢吡喃-4-基-7H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-酮的对映异构体。可以通过对根据WO2013/053690(其内容通过引用整体并入本文)中公开的方法制备的6-[4-甲基-1-(嘧啶-2-基甲基)吡咯烷-3-基]-3-四氢吡喃-4-基-7H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-8-酮进行手性选择性纯化来制备化合物1。也可以使用WO 2017/005786(其内容通过引用整体并入本文)中公开的方法制备化合物1。

用于正在进行的临床开发中的化合物1原料药产品是速释片剂。包衣可用于确保不同片剂强度和安慰剂下的外观一致性。

早期的临床研究是在没有赋形剂或加工助剂的情况下，将化合物1原料药直接填充到不透明的白色明胶胶囊(胶囊中的粉末，PIC)中进行的。已经开发了用于口服施用的药物产品的共混有赋形剂的片剂形式，因为这允许扩大制造工艺并确保含量一致性。测试了这些片剂的纯度、效力、溶出度、总需氧微生物计数以及总酵母和霉菌计数的限定极限。此外，还对指定的微生物进行了测试。

每个片剂包含20mg、50mg、100mg或200mg的化合物1原料药(API的一水合物)或安慰剂。代表性的片剂组成如下表1所示。

表1.化合物1 50mg包衣片剂

在加工过程中去除纯化水。

所有片剂被配置为使得片芯的目标重量为400mg，并且包衣片剂的目标重量为440mg。为此，对化合物1和微晶纤维素的量进行了相应的调整。所有其他赋形剂的量保持不变。

制造过程和过程控制的描述

包衣片剂的制造遵循用于共混、压片和包衣的通用程序。

首先通过辊压将化合物1原料药进行处理，以获得适合于进一步共混和加工的更均匀的中间体。使限定量的API在200-300PSI和4.0RPM的辊速下通过辊压机。使经辊压的材料通过20目的筛网，以获得均匀的粒度。将经压制和筛选的API储存在双衬聚乙烯袋中，等待用于片剂制造。

使用16qt.V型外壳共混器将限定量的经辊压API与限定的赋形剂(不包括包衣溶液)混合。以使得在限定的时间段内完成共混器的不少于300转的方式进行共混。从V型外壳共混器中的多个位置取样，以验证共混均匀性。

将经共混的材料储存在双衬聚乙烯袋中的合适的HDPE容器中，等待进一步加工。

在重力进料压片机中进行片剂制造，所述压片机具有11mm的上下平面压片冲头。调节压片机，以满足片剂重量、硬度、厚度、易碎性和崩解性的预定规格，如下定义的。所有片芯都通过金属检测器筛选，并在膜包衣前除尘。

通过将限定量的Opadry II White在纯化水中混合，并将悬浮液混合不少于45分钟来制备均匀的包衣混合物。将片剂装载到锅包衣设备上，并在开始包衣操作前预热至43℃。然后将预热的片剂在以10-15RPM旋转的15英寸包衣锅中进行包衣。包衣悬浮液的喷雾速度控制在10克/分钟，并且入口空气温度保持在40-60℃。

以限定的时间间隔对片剂取样并称重，以确定是否满足期望的目标体重增加(10％)。一旦包衣完成，将包衣的片剂冷却至≤30℃。

将包衣的片剂取样进行释放测试，然后将其转移到用双衬聚乙烯袋双衬的HDPE容器中。

对用于临床试验的片剂进行包装，包括用批号对每个容器进行喷墨标记，以确保识别。通过手动计数将三十三(33)个片剂填装到每个60cc圆形白色HDPE瓶中。在填装每个瓶子之前，由另一个人核实该计数。填装后，将每个瓶子用33mm白色聚丙烯防儿童盖手动关闭，并感应密封。

300mg片剂的开发活动表明，羟丙基纤维素(HPC-SSL-SFP)的添加和微晶纤维素(Avicel PH200)百分比水平的提高导致片剂硬度增加和易碎性测试期间损失减少的可接受结果。然而，添加HPC已将平均崩解时间从不到一分钟增加至约37分钟。在300mg片剂的制剂中，对HPC-SSL-SPF的多个百分比水平进行了评价。评价的制剂如下表2所示。

表2.制剂中使用的HPC-SSL-SPF百分比水平的优化。

评价了不同百分比水平的羟丙基纤维素(HPC-SSL-SFP)的多种制剂，以确定产生可接受结果的制剂。下表3示出了用于开发300mg膜包衣片剂的制剂。

表3.300mg膜包衣片剂的制剂

共混/制粒：

记录了用于开发的赋形剂，用于为2,380个片剂的批次大小。将化合物1原料药辊压。通过20目的手持筛按以下顺序筛选化合物1和所有赋形剂：1)化合物1原料药；2)预糊化淀粉(淀粉1500)；3)胶态二氧化硅(Cab-O-Sil)；以及4)微晶纤维素(Avicel PH200)。

一旦达到目标重量，就建立硬度谱(片剂硬度与崩解时间)并收集样品。将每个样品用于执行片剂物理测试，包括重量、硬度、厚度、崩解性和易碎性。

制程指南：

片剂厚度范围：4.65-4.85mm。

片剂硬度目标：10kP。

易碎性(USP易碎性)：不超过0.3％，无遮盖(no capping)。

崩解(根据USP)：所有片剂在不超过15分钟内完全崩解。

包衣：

将来自开发批次的片剂在目标条件下包衣，以评价片芯承受锅包衣的能力。在将片剂装入包衣锅中之前，用Opadry II，85F18422，White对锅进行喷雾，并使其干燥。操作人员监控喷雾和干燥过程，以确保不发生包衣剥落。这样就形成了薄层的包衣，以防止由于包衣锅引起的片剂缺陷如擦伤。用Opadry II，85F18422，White将片剂包衣至4.8％重量增加。

结果与讨论：

开发活动的目标是开发用于化合物1片剂的制剂，该制剂包含最佳百分比水平的羟丙基纤维素(HPC-SSL-SFP)，产生了可接受的结果。所使用的制剂用于生产具有可接受的硬度、厚度、易碎性和崩解结果的片剂。测试每种制剂的片剂的硬度、厚度、易碎性和崩解性。目标结果：(1)厚度：4.50-4.80mm，(2)易碎性：≤0.3％损失，(3)崩解：≤15分钟，以及(4)约10kPa的硬度。易碎性、崩解性和硬度按照USP配混标准(美国药典和美国国家药品集是测试中公认的标准)进行测试。

所评价的第一制剂含有0.5％羟丙基纤维素(HPC-SSL-SFP)，该制剂示于下表4中。

表4.化合物1 300mg片剂的制剂(0.5％HPC)

将片剂制备为具有目标填充重量420.0mg，厚度范围4.50mm-4.80mm。

为测试崩解时间，将片剂连续浸没在水中，直至6片片剂完全崩解，结果示于下表5中。

表5.崩解时间

目标是使所有片剂在15分钟或更短的时间内完全崩解。根据表5中的数据，所有片剂均在不到15分钟的时间内完全崩解，满足目标时间。使用420.0mg的目标填充重量，压制剩余的片剂共混物。

进行的另一项物理测试是易碎性。易碎性检查片剂压制后片剂破碎、碎裂或破裂的趋势。批次的接受标准是百分比损失为0.3％或更少。易碎性期间收集的数据如下表6所示。

表6.易碎性

0.5％的羟丙基纤维素(HPC-SSL-SFP)百分比水平产生的结果满足批次记录中提供的接受标准。

对使用含有1.5％羟丙基纤维素(HPC-SSL-SFP)的制剂的片剂进行压制，对这些片剂进行物理测试，以查看它们是否也产生了可接受的结果。制剂如下表7所示。

表7.化合物1的制剂，300mg片剂(1.5％HPC)

将片剂连续浸没在水中，直至3片片剂完全崩解。结果示于表8中。

表8.崩解时间

崩解时间均超过了15分钟的接受标准，表明崩解结果失败。崩解时间增加是由羟丙基纤维素(HPC-SSL-SPF)水平增加所致。可以注意到，易碎性后的损失小于0.3％。

物理测试结束后，将片剂进行膜包衣至重量增加约4.8％w/w。在比较了对每种制剂进行的物理测试的结果后，确定了化合物1，300mg片剂(0.5％HPC)产生了片剂的可接受的结果。

多态性单核细胞(PMN)，特别是中性粒细胞在镰状细胞病(SCD)的发病机理中起关键作用，并且已显示活化的中性粒细胞对彼此、血小板和血管内皮的粘附性更强。最近，在患者的临床研究中已经发展了多种靶向结合至内皮细胞的白细胞的药物。化合物1能够增加胎儿血红蛋白在患者源性细胞和SCD鼠模型中的表达，并减少SCD鼠模型中的血管闭塞。在该实施例中，研究了化合物1降低SCD患者的中性粒细胞粘附性质并降低鼠SCD模型中sE-选择素(sE-Sel)和PMN活化标志物的能力。

内皮E-选择素(E-Sel)减慢白细胞滚动，其后是固定的粘附和活化白细胞的迁移。通过酶促切割E-Sel的胞外域产生的sE-Sel血浆水平在SCD患者中升高，这可能是由于其与白细胞的相互作用所介导的。在Townes小鼠模型中，血浆sE-Sel比对照小鼠中可见的水平(57mg/ml)高出144％(139mg/ml)。在用化合物1处理的Townes小鼠中，这明显降低了，其中血浆sE-Sel水平仅比对照小鼠提高了61％(92mg/ml)。

发现化合物1降低了SCD模型中的PMN的循环水平，但在健康动物的长期研究中并未如此。这似乎伴随着化合物1介导的疾病特异性细胞活化降低，包括髓样衍生的髓过氧化物酶(MPO)水平降低了67％，以及肺中的中性粒细胞衍生的精氨酸酶水平降低了26％(图1)。使用先前描述的体外粘附测定模拟血流，其中活化的内皮细胞HMEC-1位于微通道的内表面，从SS(镰状细胞的最常见形式)患者灌注的全血样品显示中性粒细胞聚集并结合至内皮单层。这是通过实时监测微通道中绿色荧光斑片来量化的，因为在灌注步骤之前，将中性粒细胞用特异性的

总之，这些数据表明，化合物1通过靶向中性粒细胞的异常粘附(独立于其在循环中的细胞计数)，从而在SCD中起到减少PBMC介导的病理学的作用。

初级目的：评估化合物1在未接受羟基脲(HU)的镰状细胞性贫血(SCA)成年患者中和在接受稳定剂量HU的成年SCA患者中的安全性和耐受性，镰状细胞性贫血(SCA)被定义为纯合性镰状血红蛋白(HbSS)或镰状β

二级目的：表征化合物1在接受/未接受稳定剂量的HU的SCA成年患者中的药代动力学(PK)谱；表征在接受化合物1之前和之后SCA成年患者中HU的PK谱，以确定是否存在临床相关的PK相互作用。

探索性目的：评估化合物1在接受/未接受稳定HU的SCA成年患者中的药效学(PD)作用；评估化合物1在接受/未接受稳定HU的SCA成年患者中针对SCA相关的临床结果测量的潜在疗效。方法：

这是一项随机、双盲、安慰剂受控的研究，用于评价磷酸二酯酶9(PDE9)抑制剂化合物1的安全性、耐受性、PK和探索性PD以及临床结果，在2个SCA患者群体中，每天施用一次化合物1，持续16至24周：未接受HU的人群(人群A)和根据护理标准当前正在接受稳定剂量HU的人群(人群B)。多达约36位患者被纳入人群A，并且18位患者被纳入人群B。

人群A：在长达4周的筛选期后，人群A中的合格患者(即，未接受HU治疗的患者)接受化合物1或安慰剂，持续共24周。在第1天，将患者随机以1:1:1的比例在第一个12周内每天接受口服30mg、50mg、100mg化合物1或安慰剂；在第二个12周内(第13-24周)，每位患者的剂量可以加倍(即，从50mg至100mg；从100mg至200mg；或安慰剂)。(注意，由于安慰剂和化合物1的所有剂量水平在外观上是相同的，因此剂量递增不影响研究药物的盲性)。在整个研究过程中，约每2周审查所有可用的临床数据，并且只有基于每个患者的个体临床安全性数据的审查得到认可后，才在第85天基于个体患者进行剂量递增。

人群B：在长达4周的筛选后，人群B中的合格患者(即接受稳定HU的患者)进入导入期，并抽取血液样品以表征在不存在化合物1的情况下患者处方剂量HU的PK谱(例如，表征患者的基线HU PK谱)。确定两个完整的基线HU PK谱(至少间隔48小时在10小时内抽取血液样品)。

直到对来自人群A的6位患者的至少4周的安全性数据进行了审查，并确定在人群B中开始给药是安全且适当之后，才开始在人群B中进行化合物1给药。批准开始在人群B中给药后，一旦完成基线HU PK抽血，患者将在第1天以2:1的比例随机分配，以接受口服化合物130mg、50mg或安慰剂持续16周。在第一个4周(第1-4周)，患者根据随机的治疗分配接受研究药物；在接下来的12周(第5-16周)，每位患者的剂量可以加倍(例如，从50mg增至100mg；或安慰剂)。与人群A一样，只有基于每位患者的个体临床安全性数据得到批准后，才在第29天进行剂量递增。

研究设计原理：

这是在患者群体(患有SCA的患者)中的首次研究，因此旨在检查SCA成年患者中剂量范围内的化合物1的安全性、耐受性和PK以及潜在的PD作用和临床疗效。考虑到化合物1，如果获得批准，可以作为单一药剂施用或与HU共同施用的可能性，在未接受HU或已知可调节HbF水平的任何其他治疗的SCA患者(人群A)中，以及在目前正在接受稳定剂量的HU的人群(人群B)中评价化合物1的作用。

可用的非临床和健康志愿者临床数据表明，化合物1在30、50、100和200mg的每日一次剂量下是安全且耐受性良好的，并且当以至少100mg的剂量施用续至少24周时，可能会观察到潜在的临床有益的PD作用。因此，人群A旨在探索患者的PD剂量反应，以及对100mg剂量耐受良好的镰状细胞患者中200mg剂量水平的耐受性。

来自人群B的结果旨在提供关于与HU相伴施用时化合物1的信息，二者均通过增加细胞内cGMP的可替代生化途径提高HbF水平。由于没有临床数据支持化合物1与HU的相伴施用，因此人群B中的患者以人群A中使用的低剂量(30mg或50mg)开始化合物1的给药，并且只有在50mg剂量已安全且耐受持续4周后，才增量至100mg剂量。此外，尽管可用的非临床数据并不表明将HU与化合物1相伴施用会增加化合物1的暴露量，但直到从人群A获得2位患者(每位患者分别为30mg或50mg(人群B中的起始剂量)和100mg(起始剂量的2倍)以及安慰剂)的4周安全性数据后，才开始在人群B中进行给药。

诊断和主要纳入标准：

纳入标准：

每位患者必须满足以下所有标准才能参加研究：1.年龄≥18岁或≤50岁的男性或女性。2.确诊为SCA(HbSS或镰状-β0地中海贫血)。注意，如果尚未在患者记录中存档，则必须通过电泳、HPLC和/或基因分型来确认SCA的诊断。3.HU的使用：对于人群A中的患者：筛查前90天内未接受HU，并且不打算在接下来的6个月内服用HU。对于人群B中的患者：在筛查之前已接受HU持续至少6个月，处于稳定剂量持续至少60天，并且不打算在接下来的6个月内更改剂量水平、剂量方案或停用HU。4.女性患者一定不是怀孕的，并且极不打算怀孕。男性患者必须不打算让伴侣怀孕。

排除标准：

满足以下任何标准的患者被排除在研究范围之外：1.筛查时的总Hb>11.0g/dL或<6g/dL。2.网织红细胞计数<100x 109/L。3.在上年度中，因血管闭塞性危象(VOC)(包括急性胸综合征(ACS)和阴茎异常勃起症)，住院>3次(至少24小时)。4.因无血管性坏死(AVN)以外的任何原因接受慢性门诊阿片类药物治疗(相当于每天≥10mg口服吗啡)。注意：慢性治疗定义为每天连续使用阿片类药物持续≥8周。5.在第1天的60天内输血或献血或献出任何血液产品或正采用慢性输血治疗方案。6.对人类免疫缺陷病毒(HIV)、丙型肝炎(HCV)抗体(除非患者已成功完成药物治疗以治愈/清除HCV)和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)呈阳性。7.对于有生育潜力的女性患者，第1天血清人绒毛膜促性腺激素(hCG)测试阳性(筛查)或尿hCG测试阳性。8.肾小球滤过率估算值(eGFR)<50mL/min，如通过根据使用肌酐、年龄、性别和种族的肾脏疾病饮食调整(MDRD)研究的公式所计算的。9.丙氨酸氨基转移酶(ALT)或天冬氨酸氨基转移酶(AST)>3倍于正常上限(ULN)。10.身体质量指数(BMI)<17.5或>35kg/m2；总体重<50kg。11.在首次服用研究药物之前的7天内使用PDE5抑制剂(包括但不限于西地那非、他达拉非、伐地那非)，或计划在研究期间的任何时间使用。12.在过去1年内由研究者判断的药物或酒精滥用史，或酒精(测醉器)测试呈阳性(筛查或第1天)。13.至少五年未完全缓解的癌症。皮肤鳞状细胞或基底细胞癌、局部子宫颈癌或局部前列腺癌的患者可符合条件，条件是，研究者认为该病况已被充分诊断，并且已确定在临床上可以缓解，并且患者参与研究不会构成安全问题。14.根据研究者的判断，对研究中使用的任何药物或研究药物制剂的任何成分有临床上显著的过敏反应或超敏反应的病史。15.在ECG上，校正后的QT间隔，Fridericia公式(QTcF)在男性中>450ms，在女性中>470ms，或者由研究者确定存在临床显著异常。16.在第1天的4周内有大手术，或在第1天的2周内有小手术的病史。17.在第1天的2周内有任何流感样综合征或其他呼吸道感染，或在第1天的4周内接种减毒活病毒疫苗。18.在第1天的前30天内参与研究性药物或装置的研究。19.在第1天的前30天内使用或计划在研究期间使用已知会强烈抑制或诱导细胞色素P450酶(CYP)的任何药物或物质，包括但不限于西咪替丁、环孢素、红霉素、奥美拉唑、利福平、利托那韦和圣约翰草。如果对是否允许使用某种物质有任何疑问，请查看产品标签(如果适用)并咨询赞助商。20.在第1天前的24小时内食用柚子、柚子汁或柚子产品，或计划在研究期间食用柚子产品。21.在第1天前的30天内使用或计划在研究期间使用的任何CYP3A敏感底物(阿片类药物除外)，包括但不限于阿芬太尼、阿伐那非、布地奈德、丁螺环酮、考尼伐坦、达非那新、地瑞那韦、达沙替尼、决奈达隆、依巴斯汀、依立曲坦、依普利酮、依维莫司、非洛地平、依鲁替尼、茚地那韦、洛美他派、卢拉西酮、马拉维罗克、咪达唑仑、纳洛醇醚、尼索地平、喹硫平、沙奎那韦、西罗莫司、他克莫司、替格瑞洛、替拉那韦(tipranavir)、托伐普坦、三唑仑。22.在第1天前的30天内或计划在研究期间使用已知为P-糖蛋白(P-gp)的重要底物或抑制剂的任何药物或物质，包括但不限于环孢素、洛伐他汀、普萘洛尔、奎尼丁和辛伐他汀。如果对是否允许使用某种物质有任何疑问，请查看产品标签(如果适用)并咨询赞助商。23.研究人员认为，可能对患者的安全产生不利影响，使其不可能完成治疗或随访过程，或损害研究结果评估的其他先前或正在进行的医疗状况、体检结果或实验室异常。

研究产品、剂量和施用方式：

化合物1以50、100或200mg白色片剂形式提供，并且与食物一起口服施用。片剂形式的不同剂量的化合物1在视觉上是相同的。参考治疗、剂量和施用方式：

安慰剂由含有不含化合物1的基质的片剂组成，并且外观与化合物1片剂相同。安慰剂与食物一起口服施用。

治疗持续时间：

对于人群A，研究的总持续时间约为32周，包括长达4周的筛选期、24周的治疗期以及在施用最后一剂研究药物后的4周随访评估。

对于人群B，研究的总持续时间约为32周，包括长达4周的筛选期、约8周的导入期、16周的治疗期以及在施用最后一剂研究药物后的4周随访评估。

终点：

除非另有说明，否则人群A和人群B的终点相同。

初级终点：化合物1的安全性和耐受性，通过以下测量：不良事件(AE)和严重不良事件(SAE)的发生率和严重程度；12导联心电图(ECG)参数从基线的变化、临床实验室测试(化学、血液学、凝血、尿液)和生命体征；体检结果。

二级终点：向SCA的成人患者口服施用后，化合物1的血浆PK谱(人群A和B)；向SCA的成人患者口服施用化合物1之前和之后，HU的血浆PK谱(仅人群B)。

探索性终点：通过以下测量的化合物1PD(也可以测试另外的探索性生物标志物)：总血红蛋白(Hb)水平；HbF值(％)；％F细胞百分比；红细胞溶血指数(未缀合的胆红素、网织红细胞计数、乳糖酶脱氢酶[LDH]和触珠蛋白水平)；可溶性E-选择素(sE-Sel)、可溶性P-选择素(sP-Sel)和可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)；高敏C反应蛋白(hs-CRP)。通过与疼痛有关的测量(疼痛的频率、严重程度和持续时间；疼痛/疲劳对工作/学校和日常生活活动的影响；需要/使用止痛药物；需要专业医疗或卫生保健的SCA有关的事件，包括需要住院或治疗的事件，例如输血)来测量化合物1的临床结果，以及通过成年人镰状细胞生活质量测量信息系统(ASCQ-Me)测量的SCA对身体、社会和情感的影响。

此外，收集单独的血液样品，以通过电泳、高效液相色谱(HPLC)和/或DNA测序(根据需要)以及对可以影响治疗反应的基因(包括但不限于α珠蛋白和BCL11A)进行可能的药物基因组学分析来确认诊断。