一种利用基因编辑鸡生物反应器表达的重组曲妥珠单抗及应用

摘要

一种利用基因编辑鸡生物反应器表达的重组曲妥珠单抗及应用，属于基因工程技术领域。其核苷酸序列如序列表No.1所示，其表达两段氨基酸序列如序列表No.2和No.3所示。根据CRISPR/Cas9基因编辑系统构建了含有该基因的基因敲入载体；在鸡卵清蛋白基因起始位点处筛选高效率的CRISPR/Cas9敲入位点；使用腺病毒载体包装基因编辑工具和上述敲入载体，对发育至2.5天的鸡胚血管进行显微注射，实现在上述敲入位点中的曲妥珠单抗基因定点敲入；鸡胚孵化长大后，将曲妥珠单抗大量表达并分泌至鸡蛋中，实现曲妥珠单抗的高效生产。本发明的曲妥珠单抗生产方法具有成本低，产物活性高的优点，并能有效抑制体外培养的乳腺癌细胞系的生长。