EM菌粉发酵餐厨废水制作萼花臂尾轮虫天然饵料的方法及应用

摘要

本发明属于生物技术领域，具体涉及EM菌粉发酵餐厨废水制作萼花臂尾轮虫天然饵料的方法及应用。本发明先利用EM菌粉发酵餐厨废水获得天然饵料，再利用天然饵料培育萼花臂尾轮虫，该方法不仅可加速餐厨废水中的有机质分解，合成单细胞蛋白，还为轮虫养殖提供了天然饵料，有效培育轮虫，同时解决了餐厨废水污染和轮虫培育问题，具有经济环保的双重效益。

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及EM菌粉发酵餐厨废水制作萼花臂尾轮虫天然饵料的方法及应用。

背景技术

萼花臂尾轮虫，隶属臂尾轮虫科、臂尾轮虫属，是淡水浮游动物的主要类群之一，其在天然水体中分布广、数量大。萼花臂尾轮虫因具有繁殖能力强，世代交替快，运动缓慢等特点，不仅是淡水鱼类及虾、蟹等无脊椎动物幼体的优质饵料，也是水产苗种开食与早期培育阶段的优良饵料。另外，目前使用最好的人工饵料养殖动物的效果仍不及使用活饵料养殖，而在活饵料中又以轮虫为饵料效果最佳。随着淡水养殖鱼类、虾蟹类工厂化育苗及提早繁殖技术的日臻成熟与展开，生产上待解决其幼体期活饵料的供应问题，故淡水轮虫培育的迫切性日益凸出，但这方面的研究才刚刚引起重视，相关报道很少。

随着我国居民生活质量的不断提高，食物浪费现象愈加普遍，致使餐厨垃圾产量大幅度增加。在餐厨垃圾处理过程中，会产生大量餐厨废水。该废水若不经严格处理直接排放，会对生态环境造成严重污染。目前处理餐厨废水的技术有物理法、化学法和生物法，其中生物法因其处理量大，无二次污染，且能产生有价值产物而被广泛应用。餐厨废水中含有丰富的碳氮磷类营养物质，可被微生物利用，合成获得单细胞蛋白，实现其无害化和资源化处理。

EM菌是以乳酸菌、光合细菌、酵母菌、放线菌为主的1O个属80余种微生物复合而成的微生物活性菌剂。EM菌可在生长代谢过程中产生氨基酸、维生素和消化酶等活性物质，不仅可补充动植物在消化酶分泌上的不足，还能提高动植物对恶劣环境的抵抗作用，进而促进动植物生长。

截至目前，尚未有利用菌对餐厨废水进行发酵处理的文献，更未见使用餐厨废水培育轮虫的报道。现有技术中，申请号为CN201510844350.0，它公布了一种萼花臂尾轮虫的连续培养方法，包括了一个以仔鸡粪培养小球藻制作萼花臂尾轮虫天然饵料的操作环节，该方法采用的是小球藻制作饵料，该环节需要日光曝晒，很大程度上受制于天气状况，无法实现真正的“连续培养”。

发明内容

发明目的：本发明旨在提供一种用EM菌粉发酵餐厨废水制作萼花臂尾轮虫天然饵料的方法及应用，本发明利用EM菌发酵餐厨废水，有效分解餐厨废水中的碳氮磷类营养物质，这些营养物质可以源源不断用于合成单细胞蛋白(主要是酵母蛋白)，从而连续为轮虫养殖提供充足的天然饵料，实现全天候培育萼花臂尾轮虫，并且有效提高了轮虫的种群增长密度、抱卵率和体长，具有更强的应用价值。

技术方案：为了达到上述目的，本发明提供了EM菌粉发酵餐厨废水制作天然饵料的方法，包括下述步骤：

(1)对餐厨废水进行灭菌预处理；

(2)将EM菌粉接种至餐厨废水中进行发酵得到天然饵料。

其中，步骤(1)中，所述对餐厨废水的预处理具体步骤为：将采集分离的餐厨废水煮沸15-30min，对餐厨废水进行灭菌处理。

其中，步骤(2)中，所述EM菌粉与餐厨废水质量体积比为0.2-1Og/L。

其中，步骤(2)中，所述发酵条件为常温环境下静置发酵30-48h。

本发明内容包括所述的方法制备得到的天然饵料。

本发明内容还包括所述的天然饵料在培育萼花臂尾轮虫中的应用。

本发明内容还包括一种培育萼花臂尾轮虫的方法，包括以下步骤：

1)将萼花臂尾轮虫接种至养殖容器中；

2)将所述的天然饵料加入轮虫养殖容器中进行培育即得。

其中，步骤1)中，所述萼花臂尾轮虫接种密度为0.5-2ind./mL，所述萼花臂尾轮虫的养殖容器为500-1000mL的容器，天然饵料每日投喂2-3次。

其中，步骤2)中所述萼花臂尾轮虫的培育条件为光照2000-4000lx、昼长比L∶D＝16h∶8h-12h∶12h、温度20-30℃。

有益效果：与现有技术相比，本发明具有以下优点：本发明利用EM菌粉发酵餐厨废水，有效分解餐厨废水中的碳氮磷类营养物质，这些营养物质可以源源不断用于合成单细胞蛋白(主要是酵母蛋白)，为萼花臂尾轮虫提供充足天然饵料，实现全天候培育萼花臂尾轮虫，同时解决了餐厨废水污染和轮虫培育问题，具有经济环保的双重效益。

具体实施方式

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。

本发明实施例与对比例所用的EM菌粉(由乳酸菌、光合细菌、酵母菌、放线菌为主的1O个属80余种微生物复合而成)、酵母菌粉和乳酸菌粉均购自广州致合生物科技有限公司；所采用的餐厨废水来自仲恺农业工程学院(白云校区)饭堂(以下简称为仲恺饭堂)；所培育的萼花臂尾轮虫来自广州市花都区光大藻种。

实施例1

用EM菌粉发酵餐厨废水制作萼花臂尾轮虫饲料的方法及应用，包括以下步骤：

1.对餐厨废水进行预处理：

A.餐厨废水采样分离：在仲恺饭堂采集餐厨固液混合物，用双层纱布进行固液分离，得到滤液，即餐厨废水；

B.餐厨废水灭菌：将所采集分离的餐厨废水置于电热炉进行煮沸15min，对餐厨废水进行灭菌处理。

2.EM菌粉接种至餐厨废水中进行发酵：称取O.1gEM菌粉接种至装有100mL餐厨废水的三角瓶中，搅拌均匀；并将接种EM菌粉后的餐厨废水置于常温环境下静置发酵48h。

3.用发酵后的餐厨废水饲养萼花臂尾轮虫：

A.轮虫的接种：按接种密度为1ind./mL将萼花臂尾轮虫接种至500mL的养殖容器中；

B.轮虫的饲养：取O.1mL发酵后的餐厨废水加入轮虫养殖容器中，在光照40001x、昼长比L∶D＝16h∶8h、温度(25±1)℃条件下进行培养。每日投喂3次，连续投喂8d。

4.测定指标：测定8d后轮虫的种群增长密度、抱卵率和轮虫体长。

用EM菌粉发酵餐厨废水连续饲养萼花臂尾轮虫8d后，轮虫的种群增长密度高达70ind/mL、抱卵率达54％、轮虫体长为201μm。

实施例2

用EM菌粉发酵餐厨废水制作萼花臂尾轮虫饲料的方法及应用，包括以下步骤：

1.对餐厨废水进行预处理：

A.餐厨废水采样分离：在仲恺饭堂采集餐厨固液混合物，用双层纱布进行固液分离，得到滤液，即餐厨废水；

B.餐厨废水灭菌：将所采集分离的餐厨废水置于电热炉进行煮沸15min，对餐厨废水进行灭菌处理。

2.EM菌粉接种至餐厨废水中进行发酵：称取O.1gEM菌粉接种至装有200mL餐厨废水的三角瓶中，搅拌均匀；并将接种EM菌粉后的餐厨废水置于常温环境下静置发酵30h。

3.用发酵后的餐厨废水饲养萼花臂尾轮虫：

A.轮虫的接种：按接种密度为2ind./mL将萼花臂尾轮虫接种至500mL的养殖容器中；

B.轮虫的饲养：取O.1mL发酵后的餐厨废水加入轮虫养殖容器中，在光照40001x、昼长比L∶D＝16h∶8h、温度(25±1)℃条件下进行培养。每日投喂3次，连续投喂8d。

4.测定指标：测定8d后轮虫的种群增长密度、抱卵率和轮虫体长。

用EM菌粉发酵餐厨废水连续饲养萼花臂尾轮虫8d后，轮虫的种群增长密度高达67ind/mL、抱卵率达52％、轮虫体长为197μm。

实施例3

用EM菌粉发酵餐厨废水制作萼花臂尾轮虫饲料的方法及应用，包括以下步骤：

1.对餐厨废水进行预处理：

A.餐厨废水采样分离：在仲恺饭堂采集餐厨固液混合物，用双层纱布进行固液分离，得到滤液，即餐厨废水；

B.餐厨废水灭菌：将所采集分离的餐厨废水置于电热炉进行煮沸15min，对餐厨废水进行灭菌处理。

2.EM菌粉接种至餐厨废水中进行发酵：称取O.1gEM菌粉接种至装有100mL餐厨废水的三角瓶中，搅拌均匀；并将接种EM菌粉后的餐厨废水置于常温环境下静置发酵35h。

3.用发酵后的餐厨废水饲养萼花臂尾轮虫：

A.轮虫的接种：按接种密度为1ind./mL将萼花臂尾轮虫接种至500mL的养殖容器中；

B.轮虫的饲养：取O.1mL发酵后的餐厨废水加入轮虫养殖容器中，在光照40001x、昼长比L∶D＝16h∶8h、温度(25±1)℃条件下进行培养。每日投喂3次，连续投喂8d。

4.测定指标：测定8d后轮虫的种群增长密度、抱卵率和轮虫体长。

用EM菌粉发酵餐厨废水连续饲养萼花臂尾轮虫8d后，轮虫的种群增长密度高达69ind/mL、抱卵率达53％、轮虫体长为199μm。

对比例

用不同种类的菌粉发酵餐厨废水制作萼花臂尾轮虫天然饵料的方法及应用，所用菌粉为EM菌粉(A)、酵母菌粉(B)、乳酸菌粉(C)和复合菌粉(酵母菌粉+乳酸菌粉)(D)，包括以下步骤：

1.对餐厨废水进行预处理：

A.餐厨废水采样分离：在仲恺饭堂采集餐厨固液混合物，用双层纱布进行固液分离，得到滤液，即餐厨废水；

B.餐厨废水灭菌：将所采集分离的餐厨废水置于电热炉进行煮沸15min，对餐厨废水进行灭菌处理。

2.将A-D分别接种至餐厨废水中进行发酵：称取A-D各O.1g分别接种至装有100mL餐厨废水的三角瓶中，搅拌均匀；并将接种A-D后的餐厨废水置于常温环境下静置发酵48h。

3.用发酵后的餐厨废水培育萼花臂尾轮虫：

A.轮虫的接种：按接种密度为1ind./mL将萼花臂尾轮虫接种至500mL的养殖容器中；

B.轮虫的培育：取O.1mL发酵后的餐厨废水加入轮虫养殖容器中，在光照4000lx、昼长比L∶D＝16h∶8h、温度(25±1)℃条件下进行培育。每日投喂3次，连续投喂8d。

4.测定指标：测定8d后轮虫的种群增长密度、抱卵率和轮虫体长。

各组测定结果如表1所示：

表1不同种类高温菌发酵餐厨废水培育轮虫

通过比较不同菌粉发酵餐厨废水培育轮虫，根据结果可知，利用EM菌粉发酵处理餐厨废水培育轮虫的效果优于利用其它菌粉(酵母菌粉、乳酸菌粉、酵母菌粉+乳酸菌粉)发酵处理餐厨废水培育轮虫，说明EM菌粉发酵餐厨废水培育轮虫效果更佳。本发明利用EM菌粉发酵餐厨废水培育萼花臂尾轮虫是可行且效果更为明显。

上述实施例及对比例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。