一种野鸦椿属分类标识化合物及分类应用方法

摘要

本发明涉及一种野鸦椿属分类标识化合物及分类应用方法，其分类标识化合物名称为isbiflorin和biflorin，属色原酮碳苷化合物；该分类标识化合物仅从常绿化类野鸦椿中分离获得，可作准确区分落叶类野鸦椿和常绿野鸦椿，为野鸦椿属科学分类或生产实践中科学种植区划提供好方法，并能有效防止混种造成的严重损失。

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物化学分类的方法，特别是涉及一种植物分类的化学标识物及应用于植物分类的方法。

背景技术

我们查阅了《中国植物志》等相关的文献，发现所有记录的野鸦椿属（

通过长期的野外观测，我们发现野鸦椿有落叶类和常绿类，且他们的物候和表型有明显的区别，落叶野鸦椿主要分布于海拔500-1200m，其叶片纸质，边缘具细锯齿，聚伞花序，果皮软革质，果表皮肋脉明显;落叶类野鸦椿在2月露出叶芽和混合芽；展叶期3-4月，嫩叶红色或绿色，叶缘具细锯齿，嫩枝鲜红或绿色；花期为4月，花后30天果实迅速膨大；6月后果实大小几乎不再变化；6-7月果实逐渐变红，果表皮肋脉逐渐变明显；7-8月：果实成熟并开裂，9月：随着果实的成熟内果皮向外翻转露出成熟的种子。9-12月：叶色逐渐变黄，果和叶逐渐的掉落。而常绿类野鸦椿主要分布在海拔500 m以下的区域，其叶片膜质，边缘具钝锯齿，圆锥花序，果皮革质，外果皮具不明显的肋脉；常绿类野鸦椿一般在3月初的一年生枝上露出叶芽和混合芽，并逐渐膨大；4月进入展叶期：嫩枝绿色；花期为5月，花后30天果迅速膨大；7月后果实大小几乎不变；果实变色为8月；9-10月：果实成熟并开裂，内果皮向外翻转露出成熟的种子；11-3月：果实会逐渐掉落，经常发现3月圆齿野鸦椿枝头依然挂着很多果实。在2016年，为证实落叶类在冬季落叶是否与其冬季寒冷的气候有关，在福建把高海拔地区的落叶野鸦椿的种子播种到低海拔地区，其开花后的果实性状与母株的表型和物候基本一致；而把常绿的圆齿野鸦椿播种到900m左右即出现严重的冻害。尽管如此，目前传统的型态分类学家仍然认为野鸦椿属是单型种属，没有落叶与常绿种害之分；但如果把野鸦椿属定为一个种，生产中必然出现落叶与常绿种混乱采种、育苗、种植的情况，也必然会造成常绿类误种到高山区或引种到江西以北地区种植，从而造成严重冻害或全军覆灭的严重后果。因此，从植物科学分类或生产实践中科学种植区划，都亟需一种区别野鸦椿常绿与落叶分类的方法，以防止混种的现象。

已有文献表明从野鸦椿类植物中，已分离出约150多个化合物，但由于野鸦椿分类混乱，导致分离时的植物取样混乱，因此根本无法用于植物种类分析或分类。发明人所在团队，长期从事常绿类的圆齿野鸦椿资源收集、鉴别、繁育、栽培及化学利用研究，前期完成发明专利ZL201710133629.7，ZL201710135362.5及CN201710394479.5，首次公开了从常绿类圆齿野鸦椿中分离获取isbiflorin和biflorin的方法及检测方法。该方法可快速从圆齿野鸦椿中分离获取并测定isbiflorin和biflorin，该方法为首次从植物中同时测定这两种成分，且操作简单、分离度好，精确度高，用时短。但没有用于落叶野鸦椿的化学成分的分离与测定，也没有意识到其可用于区别鉴定常绿类与落叶类野鸦椿资源。

发明内容

本发明的目的是提供一种野鸦椿属分类标识化合物及分类应用方法。

本发明的目的是以如下方法实现的：

一种野鸦椿属分类标识化合物，其化合物名称为isbiflorin和biflorin，属色原酮碳苷化合物；野鸦椿属的植物可分为落叶类野鸦椿和常绿圆齿野鸦椿，该分类标识化合物仅从常绿化类圆齿野鸦椿中分离获得，可作为该两野鸦椿分类区别的标识物。

一种野鸦椿属分类标识化合物的应用方法，其将常绿类野鸦椿、落叶类野鸦椿的植物体干燥、粉碎，经超声提取，提取液过滤后，高效液相分析即可；超声提最佳工艺条件为超声时间46 min、乙醇体积分数62%、液料比15：1 mL/g；高效液相条件为色谱柱：C18柱为250 mm×4.6 mm、5 μm，以甲醇-水体积比25:75为流动相，流速为1.0 mL/min，检测波长为230±5 nm或254±5 nm或210±5 nm，柱温30℃，化合物isobiflorin和biflorin在该色谱条件下，保留时间分别为8.23 min和10.63 min，两者分离度大于1.5，达到完全分离，符合含量测定要求；该方法仅能从常绿类野鸦椿中分离测定出isobiflorin、biflorin，而落叶野鸦椿中无法测到isobiflorin、biflorin。

采用本发明提供的常绿类野鸦椿与落叶类绿野鸦椿分类化学标志物isbiflorin和biflorin，及其在野鸦椿属的分类应用方法，可以准备无误地区分常绿类野鸦椿与落叶类绿野鸦椿，准确率100%。

下面将结合实施例，对本发明做进一步叙述。

实施例1

收集全国福建、江西、浙江、江苏、云南、贵州、四川等省的野鸦椿350份，记录采集地、按落叶与否区分为两类；从常绿类与落叶类各150份样品中，逐份各取50g植物体干燥、粉碎，经超声提取，提取液过滤后，高效液相分析即可；超声提最佳工艺条件为超声时间46min、乙醇体积分数62%、液料比15：1 mL/g；高效液相条件为色谱柱：C18柱为250 mm×4.6mm、5 μm，以甲醇-水体积比25:75为流动相，流速为1.0 mL/min，检测波长为256 nm，柱温30℃，化合物isobiflorin和biflorin在该色谱条件下，保留时间分别为8.23 min和10.63min，两者分离度大于1.5，达到完全分离，符合含量测定要求；该方法仅能从常绿类野鸦椿中分离测定出isobiflorin、biflorin，而落叶野鸦椿中无法测到isobiflorin、biflorin。说明本发明提供的isbiflorin和biflorin可以作为常绿类与落叶类绿野鸦椿分类化学标志物；应用本发明提供的化学标志物及方法，可以准备无误地区分常绿类野鸦椿与落叶类绿野鸦椿，准确率100%。