复方血栓通软胶囊及复方血栓通软胶囊的质量检测方法

摘要

本发明涉及中药制药技术领域，具体涉及一种复方血栓通软胶囊及复方血栓通软胶囊的质量检测方法，尤其是涉及一种涉及复方血栓通软胶囊及复方血栓通软胶囊中丹酚酸B含量的检测方法。复方血栓通软胶囊包括囊壳和内容物，内容物由有效干膏粉与大豆油、蜂蜡、聚乙二醇组成；有效干膏粉包括三七600‑800份、黄芪200‑300份、丹参100‑200份、玄参200‑300份；有效干膏粉与大豆油的重量比例为3‑5∶5‑7，所述蜂蜡的加入比例为大豆油的4‑6wt%。所述的复方血栓通软胶囊中丹酚酸B含量的检测方法，包括如下步骤：供试品溶液的制备、对照品溶液的制备、采用高效液相色谱法进行测定。

说明书

技术领域

本发明涉及生物提取技术领域，具体涉及一种复方血栓通软胶囊及复方血栓通软胶囊的质量检测方法，尤其是涉及一种复方血栓通软胶囊及复方血栓通软胶囊中丹酚酸B含量的检测方法。

背景技术

目前，心脑血管疾病是一种严重威胁人类，特别是50岁以上中老年人健康的常见病。由于心脑血管疾病具有发病急、来势凶猛的特点，一般的硬胶囊剂和片剂剂型不能达到迅速起效的作用，因此，软胶囊因其能达到迅速起效，而成为治疗心脑血管疾病的主要剂型。目前的复方血栓通内容物在囊壳上被吸附严重，影响内容物的均匀性，同时影响含量检测，造成不稳定，误差大。丹酚酸B为三分子丹参素与一分子咖啡酸缩合而成，是研究较多的丹酚酸之一，对心、脑、肝、肾等器官均具有重要药理作用。现的复方血栓通软胶囊中丹酚酸B含量的检测方法测试结果误差大，对测定结果影响大，其测定有待于进一步改进。

发明内容

为了克服现有技术中存在的缺点和不足，本发明的目的之一在于提供一种复方血栓通软胶囊，该复方血栓通软胶囊的内容物不易被囊壳吸附，内容物分布均匀，有利于对内容物中活性物质的含量进行有效的检测，提高检测精度，保证产品质量，产品稳定性好，其对心脑血管疾病具有良好的疗效。

本发明的另一目的在于提供尤其是复方血栓通软胶囊中丹酚酸B含量的检测方法，用于对复方血栓通软胶囊进行质量检测，该检测方法能够进一步有效控制复方血栓通软胶囊的质量，实现对制剂质量进行全面地评价，从而最大限度地保证了产品质量的稳定性及临床用药的安全性、有效性；该检测方法科学合理，条件可控，专属性强，稳定性高，具有很强的实用性。

本发明的通过下述技术方案实现：一种复方血栓通软胶囊，包括如下重量份的原料：包括囊壳和内容物，所述内容物由有效干膏粉与大豆油、蜂蜡、聚乙二醇组成；有效干膏粉包括以下重量份的药材提取物：三七600-800份、黄芪200-300份、丹参100-200份、玄参200-300份；所述有效干膏粉与大豆油的重量比例为3-5∶5-7，所述蜂蜡的加入比例为大豆油的4-6wt％；囊壳是由按重量份计的明胶0.95-1.05份、甘油0.3-0.5份、水0.8-1.2份制成。

进一步的，所述聚乙二醇的加入比例为大豆油的5-10wt％。

进一步的，所述聚乙二醇为聚乙二醇400。

进一步的，所述有效干膏粉包括以下重量份的药材：三七750份、黄芪240份、丹参150份、玄参240份；所述有效干膏粉与大豆油的重量比例为4∶6，所述蜂蜡的加入比例为大豆油的5wt％，所述聚乙二醇的加入比例为大豆油的8wt％，囊壳是由按重量份计的明胶0.95-1.05份、甘油0.3-0.5份、水0.8-1.2份制成。

本发明还提供一种复方血栓通软胶囊的质量检测方法，即提供上述复方血栓通软胶囊中丹酚酸B含量的检测方法，包括如下步骤：

(1)供试品溶液的制备：取复方血栓通软胶囊，倾出内容物，加入有机溶剂进行超声处理，放冷后，用有机溶剂补足减失的重量，摇匀滤过，即得供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：称取丹酚酸B对照品加甲醇溶液制成对照品溶液；

(3)采用高效液相色谱法进行测定：使用高效液相色谱仪，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-甲醇-甲酸-水为流动相进行梯度洗脱；紫外光检测器波长为286nm；分别吸取所述对照品溶液与所述供试品溶液，为注入液相色谱仪，进行测定，最后计算出供试品中丹酚酸B的含量。

进一步的，所述步骤(1)中，供试品溶液的制备具体为：取复方血栓通软胶囊多粒，软胶囊倾出内容物，混匀后取0.9-1.1g，称量后置具塞锥形瓶中，加入70％甲醇25mL，密塞，称定重量后进行超声处理，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得供试品溶液。

进一步的，所述步骤(1)中，超声处理的功率为280-320W，频率40-50KHz，处理时间为50-70min。

进一步的，所述步骤(1)中，对照品溶液的制备具体为：取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加70％甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液，即得供试品溶液。

进一步的，所述步骤(3)中，高效液相色谱法进行测定采用乙腈-甲醇-甲酸-水为流动相，所述乙腈-甲醇-甲酸-水的重量比为：9-11：29-31：0.8-1.2：58-60为流动相，流速为0.9-1.1mL/min。

进一步的，所述步骤(3)中，高效液相色谱法进行测定采用乙腈-甲醇-甲酸-水为流动相，所述乙腈-甲醇-甲酸-水的重量比为：10：30：1：59为流动相，流速为1mL/min。

本发明的有益效果在于：本发明的复方血栓通软胶囊中，其内容物不易被囊壳吸附，内容物分布均匀，有利于对内容物中活性物质的含量进行有效的检测，提高检测精度，保证产品质量，产品稳定性好，对心脑血管疾病疗效好。

本发明的复方血栓通软胶囊中丹酚酸B含量的检测方法能够进一步有效控制复方血栓通软胶囊的质量，实现对制剂质量进行全面地评价，从而最大限度地保证了产品质量的稳定性及临床用药的安全性、有效性；该检测方法质量检测方法稳定可靠、专属性强、精确度高、重现性好，能全面有效地控制复方血栓通软胶囊的质量，确保临床用药安全性和有效性，更好地满足患者和市场的需要。

附图说明

图1是实施例1中专属性试验的液相色谱仪图；

图2是实施例1中丹酚酸B线性关系图。

具体实施方式

为了便于本领域技术人员的理解，下面结合实施例及附图1～2对本发明作进一步的说明，实施方式提及的内容并非对本发明的限定。

在本发明一种典型的实施方式中，一种复方血栓通软胶囊，包括如下重量份的原料：包括囊壳和内容物，所述内容物由有效干膏粉与大豆油、蜂蜡、聚乙二醇组成；有效干膏粉包括以下重量份的药材提取物：三七600-800份、黄芪200-300份、丹参100-200份、玄参200-300份；所述有效干膏粉与大豆油的重量比例为3-5∶5-7，所述蜂蜡的加入比例为大豆油的4-6wt％；囊壳是由按重量份计的明胶0.95-1.05份、甘油0.3-0.5份、水0.8-1.2份制成。

进一步的，所述聚乙二醇的加入比例为大豆油的5-10wt％。

进一步的，所述聚乙二醇为聚乙二醇400。

进一步的，所述有效干膏粉包括以下重量份的药材：三七750份、黄芪240份、丹参150份、玄参240份；所述有效干膏粉与大豆油的重量比例为4∶6，所述蜂蜡的加入比例为大豆油的5wt％，所述聚乙二醇的加入比例为大豆油的8wt％，囊壳是由按重量份计的明胶0.95-1.05份、甘油0.3-0.5份、水0.8-1.2份制成。

本发明中复方血栓通软胶囊的制备方法参照申请人于2014年提出的专利申请201410847417.1《一种复方血栓通软胶囊及其制备工艺》，不同之处本发明在胶囊内容物的制备步骤中，是将三七干膏粉、剩余药材干膏粉混合均匀后，按重量比加入蜂蜡、大豆油和聚乙二醇400，引用专利申请文件不加聚乙二醇400。

本发明还提供一种上述复方血栓通软胶囊中丹酚酸B含量的检测方法，包括如下步骤：

(1)供试品溶液的制备：取复方血栓通软胶囊，倾出内容物，加入有机溶剂进行超声处理，放冷后，用有机溶剂补足减失的重量，摇匀滤过，即得供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：称取丹酚酸B对照品加甲醇溶液制成对照品溶液；

(3)采用高效液相色谱法进行测定：使用高效液相色谱仪，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-甲醇-甲酸-水为流动相进行梯度洗脱；紫外光检测器波长为286nm；分别吸取所述对照品溶液与所述供试品溶液，为注入液相色谱仪，进行测定，最后计算出供试品中丹酚酸B的含量。

进一步的，所述步骤(1)中，供试品溶液的制备具体为：取复方血栓通软胶囊多粒，软胶囊倾出内容物，混匀后取0.9-1.1g，称量后置具塞锥形瓶中，加入70％甲醇25mL，密塞，称定重量后进行超声处理，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得供试品溶液。

进一步的，所述步骤(1)中，超声处理的功率为280-320W，频率40-50KHz，处理时间为50-70min。

进一步的，所述步骤(1)中，对照品溶液的制备具体为：取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加70％甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液，即得供试品溶液。

进一步的，所述步骤(3)中，高效液相色谱法进行测定采用乙腈-甲醇-甲酸-水为流动相，所述乙腈-甲醇-甲酸-水的重量比为：9-11：29-31：0.8-1.2：58-60为流动相，流速为0.9-1.1mL/min。

实施例1

本实施例中，一种复方血栓通软胶囊，包括如下重量份的原料：包括囊壳和内容物，所述内容物由有效干膏粉与大豆油、蜂蜡、聚乙二醇组成；有效干膏粉包括以下重量份的药材提取物：三七750份、黄芪240份、丹参150份、玄参240份；所述有效干膏粉与大豆油的重量比例为4∶6，所述蜂蜡的加入比例为大豆油的5wt％；囊壳是由按重量份计的明胶1份、甘油0.4份、水1份制成。制得的复方血栓通软胶囊的规格为0.74g。

进一步的，所述聚乙二醇的加入比例为大豆油的5-10wt％。

进一步的，所述聚乙二醇为聚乙二醇400。

1试验材料

1.1仪器：赛默飞U3000液相色谱仪(由LPG-3400SDN输液泵、WPS-3000SL自动进样器、TCC-3000SD柱温箱和VWD-3400RS紫外检测器构成)；电子天平：赛多利斯BP211D、SQP；超声仪：AS10200AD超声波清洗仪；色谱柱：Syncronis C

1.2试剂：乙腈为色谱纯，甲醇为色谱纯及分析纯，水为超纯水，甲酸为分析纯。

1.3对照品：丹酚酸B(含量以94.1％计)购于中国食品药品检定研究院。

1.4供试品：本实施例制得的复方血栓通软胶囊以及丹参阴性样品，均由广东广发制药有限公司生产。

进一步的，所述有效干膏粉包括以下重量份的药材：三七750份、黄芪240份、丹参150份、玄参240份；所述有效干膏粉与大豆油的重量比例为4∶6，所述蜂蜡的加入比例为大豆油的5wt％，所述聚乙二醇的加入比例为大豆油的8wt％，囊壳是由按重量份计的明胶0.95-1.05份、甘油0.3-0.5份、水0.8-1.2份制成。

2试验记录

2.1色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-甲醇-甲酸-水(10：30：1：59)为流动相；流速1ml/min；紫外光检测器波长为：286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000。

2.2对照品溶液的制备取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加70％甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

2.3供试品溶液制备取复方血栓通软胶囊10粒，倾出内容物，混匀，取1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率300W，频率45KHz)60分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。

2.4测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

3方法学验证

3.1准确度试验取已知含量的同一批样品(批号为20191001，每粒含丹酚酸B1.87mg)，取约0.5g，共9份，精密称定，分别精密加入丹酚酸B对照品溶液25ml(低浓度22.7μg/ml，中浓度45.3μg/ml，高浓度79.9μg/ml)，按“2.3”项下的供试品溶液的制备方法制成回收供试品溶液。按“2.1”项下的色谱条件测定，计算丹酚酸B的回收率。结果：丹酚酸B的平均加样回收率为101.3％，RSD为2.0％(n＝9)。说明本方法的准确度较好(见表1)。

表1丹酚酸B准确度(加样回收)试验结果

3.2重复性试验取复方血栓通软胶囊，取约1g，共6份，精密称定，依“2.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件测定，结果见表2。丹酚酸B的平均含量为1.87mg/粒，RSD为1.3％(n＝6)。

表2重复性试验结果

3.3专属性试验吸取对照品溶液、供试品溶液与阴性样品溶液各10μl，注入液相色谱仪，结果表明缺丹参阴性样品无干扰，结果见图1。

3.4线性关系的考察精密称取丹酚酸B(批号为111562-201716)10mg，置10ml容量瓶中，加甲醇适量使溶解，加甲醇至刻度适量，摇匀，得对照品溶液储备液，取该储备液用70％甲醇稀释成相应浓度的对照品溶液。分别吸取相应体积的对照品溶液，注入液相色谱仪，按“2.1”项下的色谱条件测定峰面积，结果见表3。

表3线性关系的考察结果

以进样量(μg)(X)为横坐标，峰面积(Y)为纵坐标，线性回归方程为：丹酚酸B y＝21.821x+0.493，R

3.5耐用性的考察

分别考察了波长、色谱柱、流速、柱温、提取溶剂及超声时间对测定的影响，结果表明(见表4)，采用不同的流速、柱温、色谱柱、波长等，各成分含量测定的结果的RSD均≤2.0％，表面该方法耐用性良好。

表4采用不同的流速、柱温、色谱柱、波长等，各成分含量测定的结果

3.6样品溶液稳定性的考察

对样品溶液(精密度项下)，分别在0h、4h、9h、12h、24h吸取10ul注入液相色谱仪，结果见表5，表明样品溶液在室温放置4h、9h、12h、24h的检测结果与初始值的差异均≤2.0％。

表5样品溶液稳定性验证记录结果

3.7实施例1的样品检测结果(见表6)

表6 6批样品的含量测定结果

实施例2

一种复方血栓通软胶囊，包括如下重量份的原料：包括囊壳和内容物，所述内容物由有效干膏粉与大豆油、蜂蜡、聚乙二醇组成；有效干膏粉包括以下重量份的药材提取物：三七600份、黄芪200份、丹参100份、玄参200份；所述有效干膏粉与大豆油的重量比例为3∶5，所述蜂蜡的加入比例为大豆油的4wt％；囊壳是由按重量份计的明胶0.95份、甘油0.3份、水0.8份制成。

进一步的，所述聚乙二醇的加入比例为大豆油的5wt％。

本实施例的其余内容与实施例1相同，这里不再赘述。

实施例3

一种复方血栓通软胶囊，包括如下重量份的原料：包括囊壳和内容物，所述内容物由有效干膏粉与大豆油、蜂蜡、聚乙二醇组成；有效干膏粉包括以下重量份的药材提取物：三七800份、黄芪300份、丹参200份、玄参300份；所述有效干膏粉与大豆油的重量比例为5∶7，所述蜂蜡的加入比例为大豆油的6wt％；囊壳是由按重量份计的明胶1.05份、甘油0.5份、水1.2份制成。

进一步的，所述聚乙二醇的加入比例为大豆油的10wt％。

本实施例的其余内容与实施例1相同，这里不再赘述。

实施例4

一种复方血栓通软胶囊，包括如下重量份的原料：包括囊壳和内容物，所述内容物由有效干膏粉与大豆油、蜂蜡、聚乙二醇组成；有效干膏粉包括以下重量份的药材提取物：三七650份、黄芪240份、丹参140份、玄参250份；所述有效干膏粉与大豆油的重量比例为3.5∶5.5，所述蜂蜡的加入比例为大豆油的4.5wt％；囊壳是由按重量份计的明胶1份、甘油0.4份、水1份制成。

本实施例的其余内容与实施例1相同，这里不再赘述。

上述实施例为本发明较佳的实现方案，除此之外，本发明还可以其它方式实现，在不脱离本发明构思的前提下任何显而易见的替换均在本发明的保护范围之内。