提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法

摘要

本发明公开了提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法，包括以下重量配比的原料：芽孢杆菌属15%、假单胞菌属15%、荧光假单胞菌65%、黄杆菌属3%、固氮菌属2%，该根际促生菌的培养基具体组成成分有：葡萄糖1‑5g，酵母粉5‑10g，蛋白胨5‑10g，柠檬酸1‑3g，琼脂15‑20g，麦芽糖30‑40g，水1000ml。该提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法，通过将葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、柠檬酸、琼脂和麦芽糖按照不同比例进行混合，再通过加水，进行加热搅拌后得到不同比例的培养基，得到可提高芽苗生长速率的根际促生菌；将多个育苗种子栽培在多个透明玻璃实验管中，且在智能培养皿器中生长，便于人工调节温度和光照强度，可较为准确的测定根际促生菌对植物生长特性及品质的影响。

说明书

技术领域

本发明涉及农业微生物技术领域，具体为提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法。

背景技术

植物根际促生菌(plantgrowthpr omotingrhizobacteria，简称促生菌或PGPR)是指自由生活在土壤或附生于植物根际、茎叶，可促进植物生长及对矿质营养吸收和利用，产生促进植物生长代谢物，抑制有害微生物繁殖的一类细菌的总称。在农业生产中引入植物根际促生菌，对创造良好的根际生态环境、降低化肥与农药的使用、抑制病虫害的发生有重要的作用，在保证现代农业可持续发展的同时又达到增产的目的。因此，筛选出促生效能好的菌株对提高植物产量有着重要意义。

植物根际促生菌是一类可以分泌表面活性剂、植物生长激素如3-吲哚乙酸等物质的有益菌类。部分PGPR菌株不仅可以合成植物类激素IAA，并且可以促进植物的生长和发育。利用植物根际促生菌的作用机制可以改善土壤成分，使得土壤肥力越来越适合植物生长，进一步提高植物修复的效率

目前我国微生物肥料存在根际促生菌纯度不够高，应对不同的育苗品种，导致芽苗生产速率不够明显的问题。

发明内容

（一）解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法，具备针对不同品种的芽苗，可显著提高芽苗生产速率的效果。

（二）技术方案

为实现上述提高芽苗生产速率的目的，本发明提供如下技术方案：提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法，包括提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法，包括以下重量配比的原料：芽孢杆菌属15%、假单胞菌属15%、荧光假单胞菌65%、黄杆菌属3%、固氮菌属2%，所述该根际促生菌的培养基具体组成成分有：葡萄糖1-5g，酵母粉5-10g，蛋白胨5-10g，柠檬酸1-3g，琼脂15-20g，麦芽糖30-40g，水1000ml；

所述提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法包括以下步骤：

S1、制备培养基

将根际促生菌的培养基具体组成成分进行不同比例的调配，得到多个比例不同的培养基。

S2、挑选和催芽育苗种子

将挑选后的多个育苗种子先用清水浸泡种子1-2小时，然后捞出倒入55℃左右温水里浸泡5-10分钟，之后再继续浸种3-4小时，用25℃的温水浸种30分钟后利用1000倍的高锰酸钾或10倍的磷酸三钠溶液浸种20分钟后，反复清洗种子上的药液。或用55℃温水烫种10分钟。种子消毒后用25-30℃温水浸种8-10小时，放入在28-30℃条件下的培养基中进行催芽，2天后即可出齐芽。

S3、育苗种子放置培养基

将步骤S2中催芽后的多个育苗种子栽培在多个透明玻璃实验管中，倒入多个不同比例的培养基中，一一对应，外表面做标记，且培养基放在智能培养皿器中，每天进行有规律的观察育苗种子之间的成长速度。

S4、记录及比较

通过步骤S3中在培养基中培育的多个育苗种子进行数日生长后，测定多个育苗种子之间的高度、品质和根系长势，得到提高芽苗生长速率的有效育苗方法。

优选的，所述根际促生菌的培养基具体组成成分优选为葡萄糖2g，酵母粉5g，蛋白胨10g，柠檬酸2g，琼脂20g，麦芽糖40g，水1000ml。

优选的，所述步骤S2中在温水浸种时，要注意水量，是1份种子2份水，且是要不断、迅速地对温水搅拌，使种子均匀受热，以防烫伤种子，是要不断加热水，保持55℃水温。

优选的，所述S1步骤中培养基配成后需测试并调节pH，还须进行灭菌，通常有高温灭菌和过滤灭菌，培养基由于富含营养物质，易被污染或变质，配好后不宜久置，最好现配现用，且需要较长时间的贮存时候，必须放在3-6℃的冰箱内。

优选的，所述S3步骤中将智能培养皿器内部温度设为25-30℃之间，光照时间为16小时，且每天分均两次对多个育苗种子栽培的多个透明玻璃实验管中倒入相对应的不同比例的培养基。

优选的，所述S4步骤中每隔三天时间进行不同育苗种子的长势比较，及时进行记录。

优选的，所述步骤S1中在制备培养基过程中，泡沫的存在对灭菌处理极不利，因为泡沫中的空气形成隔热层，使泡沫中微生物难以被杀死。因而有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生，或适当提高灭菌温度。

（三）有益效果

与现有技术相比，本发明提供了该提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法，具备以下有益效果：

（1）、该提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法，通过将葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、柠檬酸、琼脂和麦芽糖按照不同比例进行混合，再通过加水，进行加热搅拌后得到不同比例的培养基，进行多个实验，做多个比较，得到可提高芽苗生长速率的纯度高的根际促生菌，可得到广泛使用。

（2）、该提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法，通过将多个育苗种子栽培在多个透明玻璃实验管中，且在智能培养皿器中生长，便于人工调节温度和光照强度，达到想要的效果，不同环境下的生产趋势，进行多个实验得到的结果，多样化，可较为准确的测定根际促生菌对植物生长特性及品质的影响。

具体实施方式

下面将结合本发明的实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例一：

提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法，包括以下重量配比的原料：芽孢杆菌属15%、假单胞菌属15%、荧光假单胞菌65%、黄杆菌属3%、固氮菌属2%，该根际促生菌的培养基具体组成成分有：葡萄糖2g，酵母粉5g，蛋白胨10g，柠檬酸2g，琼脂20g，麦芽糖40g，水1000ml；

提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法包括以下步骤：

S1、制备培养基

将根际促生菌的培养基具体组成成分进行不同比例的调配，得到多个比例不同的培养基。

S2、挑选和催芽育苗种子

将步骤S2中挑选后的多个育苗种子先用清水浸泡种子1-2小时，然后捞出倒入55℃左右温水里浸泡5-10分钟，之后再继续浸种3-4小时，用25℃的温水浸种30分钟后利用1000倍的高锰酸钾或10倍的磷酸三钠溶液浸种20分钟后，反复清洗种子上的药液。或用55℃温水烫种10分钟。种子消毒后用25-30℃温水浸种8-10小时，放入在28-30℃条件下的培养基中进行催芽，2天后即可出齐芽。

S3、育苗种子放置培养基

将催芽后的多个育苗种子栽培在多个透明玻璃实验管中，倒入多个不同比例的培养基中，一一对应，外表面做标记，且培养基放在智能培养皿器中，每天进行有规律的观察育苗种子之间的成长速度。

S4、记录及比较

通过步骤S3中在培养基中培育的多个育苗种子进行数日生长后，测定多个育苗种子之间的高度、品质和根系长势，得到提高芽苗生长速率的有效育苗方法。

实施例二：

提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法，包括以下重量配比的原料：芽孢杆菌属15%、假单胞菌属15%、荧光假单胞菌65%、黄杆菌属3%、固氮菌属2%，该根际促生菌的培养基具体组成成分有：葡萄糖3g，酵母粉8g，蛋白胨8g，柠檬酸1g，琼脂18g，麦芽糖35g，水1000ml；

提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法包括以下步骤：

S1、制备培养基

将根际促生菌的培养基具体组成成分进行不同比例的调配，得到多个比例不同的培养基。

S2、挑选和催芽育苗种子

将挑选后的多个育苗种子先用清水浸泡种子1-2小时，然后捞出倒入55℃左右温水里浸泡5-10分钟，之后再继续浸种3-4小时，用25℃的温水浸种30分钟后利用1000倍的高锰酸钾或10倍的磷酸三钠溶液浸种20分钟后，反复清洗种子上的药液。或用55℃温水烫种10分钟。种子消毒后用25-30℃温水浸种8-10小时，放入在28-30℃条件下的培养基中进行催芽，2天后即可出齐芽。

S3、育苗种子放置培养基

将步骤S2中催芽后的多个育苗种子栽培在多个透明玻璃实验管中，倒入多个不同比例的培养基中，一一对应，外表面做标记，且培养基放在智能培养皿器中，每天进行有规律的观察育苗种子之间的成长速度。

S4、记录及比较

通过步骤S3中在培养基中培育的多个育苗种子进行数日生长后，测定多个育苗种子之间的高度、品质和根系长势，得到提高芽苗生长速率的有效育苗方法。

实施例三：

提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法，包括以下重量配比的原料：芽孢杆菌属15%、假单胞菌属15%、荧光假单胞菌65%、黄杆菌属3%、固氮菌属2%，该根际促生菌的培养基具体组成成分有：葡萄糖1g，酵母粉5g，蛋白胨5g，柠檬酸3g，琼脂15g，麦芽糖30g，水1000ml；

提高芽苗生长速率的根际促生菌育苗方法包括以下步骤：

S1、制备培养基

将根际促生菌的培养基具体组成成分进行不同比例的调配，得到多个比例不同的培养基。

S2、挑选和催芽育苗种子

将挑选后的多个育苗种子先用清水浸泡种子1-2小时，然后捞出倒入55℃左右温水里浸泡5-10分钟，之后再继续浸种3-4小时，用25℃的温水浸种30分钟后利用1000倍的高锰酸钾或10倍的磷酸三钠溶液浸种20分钟后，反复清洗种子上的药液。或用55℃温水烫种10分钟。种子消毒后用25-30℃温水浸种8-10小时，放入在28-30℃条件下的培养基中进行催芽，2天后即可出齐芽。

S3、育苗种子放置培养基

将步骤S2中催芽后的多个育苗种子栽培在多个透明玻璃实验管中，倒入多个不同比例的培养基中，一一对应，外表面做标记，且培养基放在智能培养皿器中，每天进行有规律的观察育苗种子之间的成长速度。

S4、记录及比较

通过步骤S3中在培养基中培育的多个育苗种子进行数日生长后，测定多个育苗种子之间的高度、品质和根系长势，得到提高芽苗生长速率的有效育苗方法。

通过将葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、柠檬酸、琼脂和麦芽糖按照不同比例进行混合，再通过加水，进行加热搅拌后得到不同比例的培养基，进行多个实验，做多个比较，得到可提高芽苗生长速率纯度高的根际促生菌，可得到广泛使用；将多个育苗种子栽培在多个透明玻璃实验管中，且在智能培养皿器中生长，便于人工调节温度和光照强度，达到想要的效果，不同环境下的生产趋势，进行多个实验得到的结果，多样化，可较为准确的测定根际促生菌对植物生长特性及品质的影响。

需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。