减轻烟草或尼古丁戒断症状的方法

摘要

本公开提供了一种在希望戒烟或减少吸烟或尼古丁的个体中减轻或抑制烟草或尼古丁相关戒断症状和缓解戒烟的方法，包括使用益生菌微生物。

说明书

技术领域

本公开涉及一种用于减轻烟草或尼古丁戒断症状并促进戒烟的方法。本公开还涉及包含至少一种乳杆菌属物种(Lactobacillus species)的细菌菌株和可接受的载体的组合物，其用于减轻或抑制由戒断或部分戒断使用烟草或尼古丁引起的症状。本公开还涉及制备此类组合物的方法，以及至少一种乳杆菌属物种的细菌菌株、至少一种双歧杆菌属物种(Bifidobacterium species)的细菌菌株或其混合物用于制备此类组合物的非治疗用途。本公开还涉及包含至少一种乳杆菌属物种的细菌菌株和可接受的载体的组合物用于制备药物的用途，所述药物用于减轻或抑制由戒断或部分戒断使用烟草或尼古丁引起的症状。

背景技术

烟草烟雾对全球健康构成严重威胁。在加拿大，吸烟是可预防的疾病、过早死亡和残疾的主要原因。加拿大统计局(Statistics Canada)估计，近十年来所有死亡中的约21％是由于吸烟引起的，世界卫生组织(WHO)报道全世界每年仅烟草就导致6百万例死亡。

虽然吸烟的危险是众所周知的并有文献记载，但由于尼古丁的成瘾性，吸烟者难以戒除。实际上，尼古丁与烟碱样胆碱能受体(nicotinic cholinergic receptors)相互作用，促进神经递质释放，从而介导烟草使用者中尼古丁的复杂作用(Benowitz,2009)。多巴胺、谷氨酸盐和γ-氨基丁酸的释放在尼古丁依赖的发展中特别重要。这些化学信使参与奖赏行为、焦虑减轻、情绪和食欲调节(Benowitz,2008)。还证明尼古丁诱导对心理应激的下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴反应的降低，以及HPA轴基础活性的降低(Rohleder et al.,2006)。

尼古丁戒断与负面情绪状态有关，包括焦虑和对增加的压力的感知，这可能代表对烟草使用的复发的有力刺激。更特别地，戒烟通常与紧张和不舒服的尼古丁戒断症状有关，包括：抑郁、焦虑、易怒、不安、饥饿、缺乏注意力、对更多尼古丁的渴求和睡眠丧失(Gritz et al.,1991；Hughes,1992)。

为了帮助吸烟者戒烟，制药工业已经开发了不同的药物策略，例如尼古丁替代疗法(NRTs)，以通过替代香烟中的尼古丁来减轻与香烟戒断有关的戒断症状。NRTs可以不同形式商购：口香糖、透皮贴剂、鼻喷雾剂、吸入器、口腔喷雾剂、锭剂和舌下片剂。有充分的文献证明NRTs长期戒断不是非常成功。研究发现93％的使用者在六个月内复发并恢复吸烟(Hughes,1992)。NRT的副作用通常是温和的，并且在使用NRT的局部区域中。NRT的主要副作用是：心悸、胸痛、恶心和/或呕吐(仅口服产品)、消化不良或胃肠不适(口服产品的较高风险)、失眠(贴剂)、口腔和咽喉疼痛(口服产品)、口腔溃疡(口服产品)和咳嗽(口服产品)。

因此，急需安全有效的策略和疗法，其将在试图戒烟的个体中减轻或抑制与烟草或尼古丁戒断相关的症状并增加戒烟计划的有效性。

发明内容

本公开提供了一种用于在希望戒烟或减少吸烟或尼古丁或使用任何烟草产品的个体中减轻或管理与烟草或尼古丁戒断相关的不利症状和缓解戒烟的新方法。本公开提供了一种用于在希望戒烟或减少吸烟或尼古丁或使用任何烟草产品的个体中缓解和/或抑制烟草或尼古丁渴求和/或吸烟戒断症状的方法和组合物。

本公开基于以下发现：益生菌微生物在减轻烟草或尼古丁戒断(或部分戒断)的效果方面出乎意料地有效，促进烟草或尼古丁使用的停止并且促进戒烟。

因此，本发明提供了一种组合物，其包含至少一种乳杆菌属物种的细菌菌株和可接受的载体，用于减轻或抑制由戒断或部分戒断烟草或尼古丁的使用引起的症状。

本发明还提供了一种减轻或抑制由戒断或部分戒断烟草或尼古丁的使用引起的症状的方法，包括向有需要的个体施用一种组合物，该组合物包含治疗有效量的至少一种乳杆菌属物种的细菌菌株。

本发明还提供了一种配制用于减轻或抑制由戒断或部分戒断烟草或尼古丁的使用引起的症状的组合物的方法，其中所述方法包括将至少一种乳杆菌属物种的细菌菌株与可接受的载体混合以制备所述组合物。

本发明还提供了包含至少一种乳杆菌属物种的细菌菌株和可接受的载体的组合物在制备用于减轻或抑制由戒断或部分戒断使用烟草或尼古丁的使用引起的症状的药物中的用途。

本发明还提供了至少一种乳杆菌属物种的细菌菌株、至少一种双歧杆菌属物种的细菌菌株或其混合物在制备用于减轻或抑制由戒断或部分戒断使用烟草或尼古丁引起的症状的组合物中的非治疗性用途。

在本发明的组合物、方法或用途中，至少一种乳杆菌属物种的细菌菌株可以是鼠李糖乳杆菌物种(L.rhamnosus species)。所述至少一种鼠李糖乳杆菌物种的细菌菌株可选自由鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)、鼠李糖乳杆菌HA-114(LHS)、鼠李糖乳杆菌HA-500(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0049(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0343(LHS)和鼠李糖乳杆菌R1039(LHS)组成的组。所述至少一种鼠李糖乳杆菌物种的细菌菌株可以是鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)。

在本发明的组合物、方法或用途中，组合物可以包含至少一种双歧杆菌属物种的细菌菌株。所述至少一种双歧杆菌属物种的细菌菌株可以是长双歧杆菌物种(B.longumspecies)或两歧双歧杆菌物种(B.bifidum species)。所述至少一种双歧杆菌属物种的细菌菌株可以是长双歧杆菌物种。所述至少一种双歧杆菌属菌种的菌株可以是两歧双歧杆菌物种。

在本发明的组合物、方法或用途中，乳杆菌属物种或菌株和双歧杆菌属物种或菌株可以以约100:1至约1:100、约50:1至约1:50、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约9:1至约1:9、约8:1至约1:8、约7:1至约1:7、约6:1至约1:6、约5:1至约1:5、约4:1至约1:4、约3:1至约1:3、约2:1至约1:2或1:1的相互重量比存在或混合。例如，细菌的物种或菌株可以以约4:1的乳杆菌属物种或菌株与双歧杆菌属物种或菌株的相互重量比存在或混合。

在本发明的组合物、方法或用途中，所述组合物可以包含至少一种长双歧杆菌物种的细菌菌株和至少一种两歧双歧杆菌物种的细菌菌株。

在本发明的组合物、方法或用途中，所述至少一种长双歧杆菌物种的细菌菌株可以选自由长双歧杆菌R0175(LHS)和长双歧杆菌HA-135(LHS)组成的组。所述至少一种长双歧杆菌物种的细菌菌株可以是长双歧杆菌R0175(LHS)。

在本发明的组合物、方法或用途中，所述至少一种两歧双歧杆菌物种的细菌菌株可以选自由两歧双歧杆菌R0071(LHS)或两歧双歧杆菌HA-132(LHS)组成的组。所述述至少一种两歧双歧杆菌物种的菌株可以是两歧双歧杆菌R0071(LHS)。

在本发明的组合物、方法或用途中，所述组合物可包含至少一种鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)菌株和至少一种长双歧杆菌R0175(LHS)菌株。在本发明的组合物、方法或用途中，所述组合物可包含至少一种鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)菌株和至少一种两歧双歧杆菌R0071(LHS)菌株。

在本发明的组合物、方法或用途中，所述组合物可包含至少一种鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)菌株、至少一种长双歧杆菌R0175(LHS)菌株和至少一种两歧双歧杆菌R0071(LHS)菌株。

在本发明的组合物、方法或用途中，所述组合物可以与尼古丁替代疗法组合使用，或与尼古丁替代疗法同时或顺序施用，任选地其中所述尼古丁替代疗法是口香糖、透皮贴剂、鼻喷雾剂、吸入器、口腔喷雾剂或舌下片剂/锭剂。

在本发明的组合物、方法或用途中，由戒除或部分戒除烟草或尼古丁的使用引起的症状可以包括抑郁、易怒、焦虑、不安、饥饿、缺乏注意力、失眠、神经性震颤、头晕或对烟草或尼古丁渴望。

在本发明的组合物、方法或用途中，乳杆菌属物种的至少一种细菌菌株、双歧杆菌属物种的至少一种细菌菌株或其混合物可以以每剂量约1×10

在本发明的组合物、方法或用途中，所述组合物可以以冷冻干燥粉末、片剂、胶囊、丸剂、悬浮液、乳液、液体制剂、凝胶或糖浆的形式提供。在本发明的组合物、方法或用途中，所述组合物可以以乳制品、酸奶、凝乳、乳酪、发酵乳、奶粉、奶基发酵产品、冰淇淋、谷物发酵产品、乳基粉、饮料、调味品、肉制品、涂抹食品、馅料、糖霜、巧克力、糖果、焙烤食品、调味酱、汤、果汁或咖啡增白剂的形式提供。

本公开还涉及用于在有需要的个体中，减轻或抑制由戒断或部分戒断烟草或尼古丁的使用引起的症状的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗有效量的益生菌组合物，所述益生菌组合物包含属于乳杆菌属物种、双歧杆菌属物种或其混合物的至少一种细菌菌株。在一个实施方案中，本公开的益生菌组合物包含属于乳杆菌属物种和双歧杆菌属物种的至少一种细菌菌株。在一个实施方案中，至少一种乳杆菌属的细菌菌株属于嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)、短乳杆菌(L.brevis)、保加利亚乳杆菌(L.bulgaricus)、干酪乳杆菌(L.casei)、卷曲乳杆菌(L.crispatus)、德氏乳杆菌(L.delbrueckii)、发酵乳杆菌(L.fermentum)、加氏乳杆菌(L.gasseri)、瑞士乳杆菌(L.helveticus)、乳酸乳球菌(L.lactis)、植物乳杆菌(L.plantarum)、路氏乳杆菌(L.reuteri)、鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)、唾液乳杆菌(L.salivarius)或副干酪乳杆菌物种(L.paracasei)。在另一个实施方案中，至少一种乳酸杆菌属物种的细菌菌株是嗜酸乳杆菌HA-122(LallemandHealth Solutions(“LHS”))，嗜酸乳杆菌R0418(LHS)，短乳杆菌L-brevis HA-112(LHS)，干酪乳杆菌HA-108(LHS)，干酪乳杆菌R0215(LHS)，德氏乳杆菌保加利亚乳杆菌HA-137(LHS)，发酵乳杆菌HA-179(LHS)，瑞士乳杆菌HA-128(LHS)，瑞士乳杆菌HA-501(LHS)，瑞士乳杆菌R0052(LHS)，瑞士乳杆菌Lafti L10 R0419(LHS)，副干酪乳杆菌HA-196(LHS)，副干酪乳杆菌HA-274(LHS)，副干酪乳杆菌Lafti L26 R0422(LHS)，植物乳杆菌R0403(LHS)，植物乳杆菌R0202(LHS)，植物乳杆菌R1012(LHS)，路氏乳杆菌HA-188(LHS)，鼠李糖乳杆菌HA-114(LHS)，鼠李糖乳杆菌HA-500(LHS)，鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)，鼠李糖乳杆菌R0049(LHS)，鼠李糖乳杆菌R0343(LHS)，鼠李糖乳杆菌R1039(LHS)，唾液乳杆菌HA-118(LHS)，唾液乳杆菌R0078(LHS)，保加利亚乳杆菌R0440(LHS)或乳酸乳球菌R1087(LHS)。在又一个实施方案中，至少一种乳杆菌属的细菌菌株属于鼠李糖乳杆菌物种。在另一个实施方式中，至少一种鼠李糖乳杆菌的细菌菌株是鼠李糖乳杆菌HA-114(LHS)、鼠李糖乳杆菌HA-500(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0049(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0343(LHS)或鼠李糖乳杆菌R1039(LHS)。在一个实施方案中，至少一种鼠李糖乳杆菌的细菌菌株是鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)。在另一个实施方案中，至少一种双歧杆菌属的细菌菌株属于两歧双歧杆菌，动物双歧杆菌乳酸亚种(B.animalis subsp.lactis)，短双歧杆菌(B.breve)，长双歧杆菌(B.longum)或长双歧杆菌婴儿亚种(B.longum subsp.infantis)。在另一个实施方案中，双歧杆菌属物种的至少一种细菌菌株是两歧双歧杆菌HA-132(LHS)、两歧双歧杆菌R0071(LHS)、短双歧杆菌HA-129(LHS)、短双歧杆菌R0070(LHS)、婴儿双歧杆菌HA-116(LHS)、婴儿双歧杆菌R0033(LHS)、乳酸双歧杆菌HA-194(LHS)、长双歧杆菌HA-135(LHS)、长双歧杆菌R0175(LHS)或动物双歧杆菌乳酸亚种R0421(LHS)。在另一个实施方案中，双歧杆菌属物种的至少一种细菌菌株属于两歧双歧杆菌或长双歧杆菌物种。在一个实施方案中，两歧双歧杆菌的至少一种细菌菌株是两歧双歧杆菌HA-132(LHS)或两歧双歧杆菌R0071(LHS)。在一个实施方案中，两歧双歧杆菌的至少一种细菌菌株是两歧双歧杆菌R0071(LHS)。在另一个实施方案中，双歧杆菌属物种的至少一种细菌菌株是长双歧杆菌。在一个实施方案中，长双歧杆菌的至少一种细菌菌株是长双歧杆菌HA-135(LHS)或长双歧杆菌R0175(LHS)。在另一个实施方案中，长双歧杆菌的至少一种细菌菌株是长双歧杆菌R0175(LHS)。在进一步的实施方案中，所述益生菌组合物还包含至少一种属于链球菌属(Streptococcus)物种，肠球菌属(Enterococcus)物种，乳球菌属(Lactococcus)物种，芽孢杆菌属(Bacillus)物种或酵母属(Saccharomyces)物种的微生物菌株。在另一个实施方案中，所述益生菌组合物包含至少一种属于乳杆菌(Lactobacillus)物种和双歧杆菌物种的细菌菌株。在一个实施方案中，乳杆菌的至少一种细菌菌株属于鼠李糖乳杆菌物种，所述双歧杆菌的至少一种细菌菌株属于长双歧杆菌或两歧双歧杆菌。在一个实施方案中，所述乳杆菌的至少一种细菌菌株属于鼠李糖乳杆菌物种，所述双歧杆菌的至少一种细菌菌株属于长双歧杆菌。在一个实施方案中，乳杆菌的至少一种细菌菌株属于鼠李糖乳杆菌物种，所述双歧杆菌的至少一种细菌菌株属于两歧双歧杆菌。在一个实施方案中，所述益生菌组合物包含鼠李糖乳杆菌，长双歧杆菌和两歧双歧杆菌的至少一种细菌菌株。在另一个实施方案中，鼠李糖乳杆菌的至少一种细菌菌株是鼠李糖乳杆菌HA-114(LHS)、鼠李糖乳杆菌HA-500(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0049(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0343(LHS)或鼠李糖乳杆菌R1039(LHS)。在一个实施方案中，双歧杆菌的至少一种细菌菌株是双歧杆菌R0011(LHS)。在另一个实施方案中，长双歧杆菌的至少一种细菌菌株是长双歧杆菌HA-135(LHS)或长双歧杆菌R0175(LHS)。在一个实施方案中，长双歧杆菌的至少一种细菌菌株是长双歧杆菌R0175(LHS)。在一个实施方案中，两歧双歧杆菌的至少一种细菌菌株是两歧双歧杆菌HA-132(LHS)或两歧双歧杆菌R0071(LHS)。在一个实施方案中，两歧双歧杆菌的至少一种细菌菌株是两歧双歧杆菌R0071(LHS)。在另一个实施方案中，所述益生菌组合物还包含至少一种属于链球菌属(Streptococcus)物种，肠球菌属(Enterococcus)物种，乳球菌属(Lactococcus)物种，芽孢杆菌属(Bacillus)物种或酵母属(Saccharomyces)物种的微生物菌株。在进一步的实施方案中，至少一种细菌菌株属于乳杆菌属物种，双歧杆菌属物种或其混合物的细菌菌株的剂量以每剂量约1×10

本公开还针对包含属于乳杆菌属物种，双歧杆菌属物种或其混合物的至少一种细菌菌株的益生菌组合物用于缓解或抑制在有需要的个体中由戒断或部分戒断使用烟草或尼古丁引起的症状的用途。

本公开进一步针对包含属于鼠李糖乳杆菌的至少一种细菌菌株，和属于长双歧杆菌，两歧双歧杆菌或其混合物的至少一种细菌菌株的益生菌组合物用于缓解或抑制在有需要的个体中由戒断或部分戒断使用烟草或尼古丁引起的症状的用途。在另一个实施方案中，本公开针对包含属于鼠李糖乳杆菌的至少一种细菌菌株，和属于长双歧杆菌，两歧双歧杆菌或其混合物的至少一种细菌菌株的益生菌组合物用于缓解或抑制在有需要的个体中由戒断或部分戒断使用烟草或尼古丁引起的症状的用途。在进一步的实施方案中，鼠李糖乳杆菌的至少一种细菌菌株是鼠李糖乳杆菌HA-114(LHS)、鼠李糖乳杆菌HA-500(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0049(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0343(LHS)或鼠李糖乳杆菌R1039(LHS)。在另一个实施方案中，长双歧杆菌或两歧双歧杆菌的至少一种细菌菌株是两歧双歧杆菌HA-132(LHS)，两歧双歧杆菌R0071(LHS)，长双歧杆菌HA-135(LHS)或长双歧杆菌R0175(LHS)。

在进一步的实施方案中，本公开针对包含属于鼠李糖乳杆菌的至少一种细菌菌株，和属于长双歧杆菌的至少一种细菌菌株的益生菌组合物用于缓解或抑制在有需要的个体中由戒断或部分戒断使用烟草或尼古丁引起的症状的用途。

在另一个实施方案中，本公开针对包含属于鼠李糖乳杆菌的至少一种细菌菌株，和属于两歧双歧杆菌的至少一种细菌菌株的益生菌组合物用于缓解或抑制在有需要的个体中由戒断或部分戒断使用烟草或尼古丁引起的症状的用途。

在一个实施方案中，由戒断或部分戒断使用烟草或尼古丁引起的症状包括抑郁、易怒、焦虑、坐立不安、饥饿、注意力不集中、失眠、神经性震颤、头晕或对烟草或尼古丁渴望。

本公开还涉及包含属于乳杆菌属物种，双歧杆菌属物种或其混合物的至少一种细菌菌株的益生菌组合物用于缓解或抑制在有需要的个体中由戒断或部分戒断使用烟草或尼古丁引起的症状的用途。在一个实施方案中，本公开的组合物包含属于乳杆菌属物种的至少一种细菌菌株和属于长双歧杆菌或两歧双歧杆菌的所述至少一种细菌菌株。在进一步的实施方案中，本公开的益生菌组合物包含鼠李糖乳杆菌，长双歧杆菌和两歧双歧杆菌的一种细菌菌株。在另一个实施方案中，所述至少一种细菌菌株是鼠李糖乳杆菌HA-114(LHS)、鼠李糖乳杆菌HA-500(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0049(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0343(LHS)、鼠李糖乳杆菌R1039(LHS)、长双歧杆菌HA-135(LHS)、长双歧杆菌R0175(LHS)、两歧双歧杆菌HA-132(LHS)或两歧双歧杆菌R0071(LHS)。在进一步的实施方案中，至少一种属于乳杆菌属物种，双歧杆菌属物种或其混合物的细菌菌株的剂量为每剂量约1×10

在进一步的实施方案中，本公开针对包含属于鼠李糖乳杆菌的至少一种细菌菌株，和属于长双歧杆菌的至少一种细菌菌株的益生菌组合物用于缓解或抑制在有需要的个体中由戒断或部分戒断烟草或尼古丁引起的症状的用途。在另一个实施方案中，所述至少一种细菌菌株是鼠李糖乳杆菌HA-114(LHS)、鼠李糖乳杆菌HA-500(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0049(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0343(LHS)、鼠李糖乳杆菌R1039(LHS)、长双歧杆菌HA-135(LHS)、长双歧杆菌R0175(LHS)。

在另一个实施方案中，本公开针对包含属于鼠李糖乳杆菌的至少一种细菌菌株和属于两歧双歧杆菌的至少一种细菌菌株的益生菌组合物，用于缓解或抑制在有需要的个体中由戒断或部分戒断烟草或尼古丁引起的症状的用途。在另一个实施方案中，所述至少一种细菌菌株是鼠李糖乳杆菌HA-114(LHS)、鼠李糖乳杆菌HA-500(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0049(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0343(LHS)、鼠李糖乳杆菌R1039(LHS)、两歧双歧杆菌HA-132(LHS)或两歧双歧杆菌R0071(LHS)。

附图说明

因此，已经大致描述了本发明的本质，现在将参考附图，附图通过图示示出了本发明的优选实施例，且其中：

图1显示了暴露于尼古丁和烟草提取物24小时后的秀丽隐杆线虫行为毒性。在测定期间，蠕虫也暴露于益生菌。

图2是自我报告为戒断但继续吸烟的参与者、报告吸烟的参与者和通过一氧化碳(CO)呼吸试验(第2周和第4周之间)测定的真正戒断的参与者的百分比的示意图。

具体实施方式

令人惊讶地发现，使用双歧杆菌属、乳杆菌属或其混合物的益生菌培养物有利于帮助缓解或抑制一种或多种戒断症状，这些症状困扰着那些试图消除或减少使用烟草或尼古丁的人。

从以下实施例显而易见，发现益生菌双歧杆菌属，乳杆菌属或其混合物的使用被证明对于减轻烟草或尼古丁戒断(或部分戒断)的症状或促进戒烟特别有用。本发明的方法可以与尼古丁替代疗法(NRT)联合使用。

经历烟草或尼古丁戒断的个体的常见症状包括，例如，抑郁、易怒、焦虑、不安、饥饿、缺乏注意力、失眠、神经性震颤、头晕和对烟草或尼古丁的渴望。除了与戒烟有关的困难之外，个体在试图戒烟时经历的常见副作用是食欲的显著增加，因为他们对焦虑反应是渴求食物。这种增加的饥饿导致体重的不期望的增加。

本文所用的术语“促进戒烟”是指帮助个体戒除或减少吸烟或戒除或减少使用烟草产品。术语“促进戒烟”还指由用本公开的方法治疗的个体吸食的烟草产品的数量的减少。此外，术语“促进戒烟”是指缓解、减少、控制、预防、抑制或治疗与烟草或尼古丁戒断相关的各种症状(包括对食物的渴望)和/或降低对烟草产品或尼古丁的渴望。术语“缓解、减少或预防”旨在指个体所遭受的症状的任何程度的减少。

本文所用的术语“烟草或尼古丁戒断症状”是指与打破吸烟或尼古丁或使用任何烟草产品的习惯或降低吸烟或使用任何烟草产品的频率或强度有关的任何身体或心理反应。

本文所用的术语“有效量”是足以产生预期效果的益生菌量。

如本文所用，术语“益生微生物”是指当以足够量施用时赋予宿主健康益处的活微生物。益生菌必须满足与缺乏毒性、存活力、粘附力和有益效果相关的若干要求。

如本文所用，术语“双歧杆菌”是指双歧杆菌属的成员。这些细菌是革兰氏阳性厌氧菌，其是存在于胃肠道菌群中的细菌的主要菌株之一。双歧杆菌物种的具体实例包括但不限于两歧双歧杆菌，动物双歧杆菌乳酸亚种、短双歧杆菌、长双歧杆菌或长双歧杆菌婴儿亚种。尽管无意将本公开内容限于双歧杆菌的任何特定物种，但是本公开内容的示例性双歧杆菌物种和菌株包括但不限于以下众所周知的菌株：两歧双歧杆菌HA-132(售自Lallemand Health Solutions(“LHS”))、两歧双歧杆菌R0071(LHS)、短双歧杆菌HA-129(LHS)、短双歧杆菌R0070(LHS)、婴儿双歧杆菌HA-116(LHS)、婴儿双歧杆菌R0033(LHS)、乳酸双歧杆菌HA-194(LHS)、长双歧杆菌HA-135(LHS)、长双歧杆菌R0175(LHS)、动物双歧杆菌乳酸亚种R0421(LHS)。在一个实施方案中，双歧杆菌是长双歧杆菌。在一个特别的实施方案中，长双歧杆菌是长双歧杆菌R0175(LHS)。长双歧杆菌R0175(LHS)也称为长双歧杆菌长亚种(subsp.longum)R0175、长双歧杆菌长亚种

如本文所用，术语“双歧杆菌”是指乳杆菌科乳杆菌属的成员。这些细菌是革兰氏阳性兼性厌氧细菌，其代表通常称为“乳酸菌”的细菌类群的主要部分。乳杆菌属物种包括但不限于嗜酸乳杆菌、短乳杆菌、保加利亚乳杆菌、干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、德氏乳杆菌、发酵乳杆菌、加氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、乳酸乳球菌、植物乳杆菌、路氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、唾液乳杆菌或副干酪乳杆菌物种。尽管无意将本公开内容限于乳杆菌的任何特定物种，但是本公开内容的示例性乳杆菌物种和菌株包括但不限于以下众所周知的菌株：嗜酸乳杆菌HA-122(LHS)、嗜酸乳杆菌R0418(LHS)、短乳杆菌HA-112(LHS)、干酪乳杆菌HA-108(LHS)、干酪乳杆菌R0215(LHS)、德氏乳杆菌保加利亚乳杆菌HA-137(LHS)、发酵乳杆菌HA-179(LHS)、瑞士乳杆菌HA-128(LHS)、瑞士乳杆菌HA-501(LHS)、瑞士乳杆菌R0052(LHS)、瑞士乳杆菌Lafti L10 R0419(LHS)、副干酪乳杆菌HA-196(LHS)、副干酪乳杆菌HA-274(LHS)、副干酪乳杆菌Lafti L26 R0422(LHS)、植物乳杆菌R0403(LHS)、植物乳杆菌R0202(LHS)、植物乳杆菌R1012(LHS)、路氏乳杆菌HA-188(LHS)、鼠李糖乳杆菌HA-114(LHS)、鼠李糖乳杆菌HA-500(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0049(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0343(LHS)、鼠李糖乳杆菌R1039(LHS)、唾液乳杆菌HA-118(LHS)、唾液乳杆菌R0078(LHS)、保加利亚乳杆菌R0440(LHS)或乳酸乳球菌R1087(LHS)。在一个实施方案中，乳杆菌是鼠李糖乳杆菌。在另一个实施方案中，鼠李糖乳杆菌是鼠李糖乳杆菌HA-114(LHS)、鼠李糖乳杆菌HA-500(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0049(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0343(LHS)或鼠李糖乳杆菌R1039(LHS)。在特别的实施方案中，鼠李糖乳杆菌是鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)(可互换称为鼠李糖乳杆菌

在一个实施方案中，本公开的一种益生菌微生物(例如菌株)可以单独使用或与一种或多种不同的益生菌微生物组合或联合使用。如本文所用，术语“组合或联合”是指一起、基本上同时或顺序。在一个实施方案中，乳杆菌属或双歧杆菌属的细菌(例如，一种菌株)可以与至少一种来自相同物种的细菌菌株组合或联合使用，而不是与任何其他物种的细菌组合或联合使用。在一些实施方案中，乳杆菌属或双歧杆菌属的至少一种细菌(例如，一种菌株)可以与超过一种来自相同物种的细菌菌株组合或联合使用，而不是与任何其他物种的细菌组合或联合使用。在一个特别的实施方案中，双歧杆菌属的至少一种细菌(例如，一种菌株)与乳杆菌属的至少一种细菌(例如，一种菌株)组合或联合使用。在进一步的实施方案中，鼠李糖乳杆菌可以与两歧双歧杆菌，长双歧杆菌或其混合物组合提供。在一个实施方案中，鼠李糖乳杆菌可以是鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)。两歧双歧杆菌可以是两歧双歧杆菌R0071。在一个特别的实施方案中，长双歧杆菌是长双歧杆菌长亚种并且可以是，例如长双歧杆菌长亚种R0175(LHS)。应当理解，本公开的益生菌可以与其他合适的微生物(例如益生菌细菌的菌株)或酵母组合。合适的微生物的实例是酵母例如酿酒酵母(Saccharomyces)，以及细菌例如丙酸杆菌属(Propionibacterium)、链球菌属(Streptococcus)、肠球菌属(Enterococcus)、乳球菌属(Lactococcus)、芽孢杆菌属(Bacillus)、片球菌属(Pecococcus)、酒球菌属(Oenococcus)或其组合。酿酒酵母物种包括但不限于酿酒酵母(S.cerevisiae)或酿酒酵母布拉迪变种(S.cerevisiae var.boulardii)。合适的益生菌微生物的具体例子有：粪肠球菌(Enterococcus faecium)HA-127(LHS)、粪肠球菌R0026(LHS)、乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp.lactis)HA-136(LHS)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)R1058(LHS)、嗜热链球菌HA-110(LHS)、嗜热链球菌R0083(LHS)、枯草芽孢杆菌HA-124(LHS)、枯草芽孢杆菌R0179(LHS)、费氏丙酸杆菌(Propionibacteriumfreudenreichii)HA-273(LHS)、谢尔曼丙酸杆菌(Propionibacterium shermanii)HA-182(LHS)或乳酸片球菌(Pediococcus acidilacticii)R1001(LHS)。在一些实施方案中，组合使用相同细菌物种的多种菌株。

组合物中每种菌株的菌落形成单位(“cfu”)的有效量将由本领域技术人员确定，并将取决于最终制剂。术语“菌落形成单位”在本文中定义为由琼脂平板上的微生物学计数显示的细菌细胞的数目。例如，在一个实施方案中，总益生菌以每剂约10

当双歧杆菌属的细菌或乳杆菌属的细菌与一种不同的益生菌微生物(例如不同的菌株)组合使用时，该细菌可以能够实现本文所述公开的期望效果的任何比例存在。通常，构成益生菌混合物的细菌物种或菌株以约100:1至约1:100、约50:1至约1:50、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约9:1至约1:9、约8:1至约1:8、约7:1至约1:7、约6:1至约1:6、约5:1至约1:5、约4:1至约1:4、约3:1至约1:3、约2:1至约1:2或1:1之间的相互重量比存在。

例如，当双歧杆菌属的细菌和乳杆菌属的细菌组合使用时，该细菌可以能够实现本文所述公开的期望效果的任何比例存在。通常，乳杆菌属对双歧杆菌属以约100:1至约1:100、约50:1至约1:50、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约9:1至约1:9、约8:1至约1:8、约7:1至约1:7、约6:1至约1:6、约5:1至约1:5、约4:1至约1:4、约3:1至约1:3、约2:1至约1:2或1:1之间的相互重量比存在。

更特别地，当长双歧杆菌与鼠李糖乳杆菌组合使用时，构成混合物的细菌种类或菌株以乳酸菌对双歧杆菌以约100:1至约1:100、约50:1至约1:50、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约9:1至约1:9、约8:1至约1:8、约7:1至约1:7、约6:1至约1:6、约5:1至约1:5、约4:1至约1:4、约3:1至约1:3、约2:1至约1:2或1:1之间的相互重量比存在。

在另一个实施例中，当两歧双歧杆菌与鼠李糖乳杆菌组合使用时，构成混合物的细菌种类或菌株以乳酸菌对双歧杆菌以约100:1至约1:100、约50:1至约1:50、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约9:1至约1:9、约8:1至约1:8、约7:1至约1:7、约6:1至约1:6、约5:1至约1:5、约4:1至约1:4、约3:1至约1:3、约2:1至约1:2或1:1之间的相互重量比存在。

在一个实施方案中，当至少三种或更多种益生菌菌株组合使用时，构成混合物的各菌株的重量比为约100:1至约1:100、约50:1至约1:50、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约9:1至约1:9、约8:1至约1:8、约7:1至约1:7、约6:1至约1:6、约5:1至约1:5、约4:1至约1:4、约3:1至约1:3、约2:1至约1:2或1:1。

虽然可以单独施用本公开的益生菌，但是它们通常作为产品的一部分在载体上或载体中施用，特别是作为食品、膳食补充剂、药物或药物制剂的组分。这些产品通常含有本领域技术人员熟知的其它组分、可接受的赋形剂、载体或适当的添加剂。本文所用的术语“可接受的赋形剂和载体”涉及与制剂中的其它成分相容并且生物学可接受的那些。在一个具体的实施方案中，产品另外含有一种或多种其它活性剂。在另一个实施方案中，所述另外的一种或多种活性剂是不拮抗形成本公开的组合物的菌株的其它益生菌或酵母。根据配方，菌株可以作为纯化的细菌、作为细菌培养物、作为细菌培养物的一部分、作为已经后处理的细菌培养物加入。也可以添加益生元(Prebiotics)。食品、膳食补充剂或药物制剂可以以任何合适的形式制备，所述形式不会负面影响形成组合物的菌株的生物利用度，并且在本领域普通技术人员的范围内。

例如，本公开的益生菌组合物可以被配制成以冻干粉末、片剂、胶囊、丸剂、悬浮液、锭剂、乳剂、液体制剂、凝胶、糖浆等的形式口服施用。

本公开的益生菌组合物可以用作食品中的成分，所述食品例如奶制品、酸奶、凝乳、奶酪(例如夸克、奶油、加工的、软的和硬的)、发酵的奶、奶粉、乳基发酵产品、冰淇淋、谷物发酵食品、乳基粉、饮料、调味品、肉类产品(例如肝酱、法兰克福香肠和萨拉米香肠或肉酱)、酱、馅料、糖霜、巧克力、糖果(例如焦糖、糖果、软糖(fondants)或太妃糖)、烘焙食品(蛋糕、酥皮糕点)、酱和汤、果汁或咖啡增白剂。

益生菌微生物通过在合适的培养基中和在本领域已知的合适条件下培养微生物来产生。益生菌微生物可以单独培养以形成纯培养物，或作为与其它微生物的混合培养物，或通过分别培养不同类型的益生菌微生物然后以所需比例将它们组合。培养至达到预定CFU/g浓度后，回收细胞悬浮液并原样使用或以所需方式处理，例如通过浓缩、喷雾干燥、冻干、平板烘箱干燥或冷冻干燥，以进一步用于制备组合物并可与载体介质混合。有时，益生菌制剂经受固定化或封装过程以便改善保质期。用于固定化或封装细菌的几种技术是本领域已知的。

本公开中使用的益生菌菌株是活细胞的形式。然而，本公开的益生菌菌株也可以是非活细胞的形式，例如杀死的培养物或含有益生菌产生的有益因子的组合物。这可以包括热杀死的微生物或通过暴露于改变的pH、超声处理、辐射或经受压力杀死的微生物。由于非活细胞产品制备更简单，细胞可以容易地掺入商业产品中，并且储存要求的限制比活细胞少得多。

根据本公开，益生菌组合物通常将被施用，使得受试者接受症状改善的有效日剂量。根据需要，日剂量可以以分开的剂量给予，所接受的化合物或药剂的精确量和给药途径取决于根据本领域已知的原理治疗的受试者的一般健康状况。典型的给药方案是每天一次、两次或三次。

本公开的益生菌组合物可以与尼古丁替代疗法联合使用，例如但不限于口香糖、尼古丁透皮贴剂、鼻喷雾剂、吸入器、口腔喷雾剂或舌下片剂/锭剂。在一个实施方案中，尼古丁替代疗法是尼古丁透皮贴剂。

根据专利法中的标准实践，权利要求中的词语“包括”可以被“基本上由组成”或“由组成”代替。

通过参考以下实施例将更容易理解本发明，给出这些实施例是为了说明本发明而不是限制其范围。

实施例

实施例1：两歧双歧杆菌、长双歧杆菌和鼠李糖乳杆菌对施用尼古丁和烟草提取物的秀丽隐杆线虫模型的影响。

目的：

这项研究的目的是评估两歧双歧杆菌、长双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌及其组合对施用尼古丁和烟草提取物的秀丽隐杆线虫行为的影响。

双歧杆菌、长双歧杆菌和鼠李糖乳杆菌的培养物：

鼠李糖乳杆菌R0011菌株在37℃的MRS培养基中厌氧生长过夜。长双歧杆菌R0175在补充了0.05％半胱氨酸的37℃的MRS培养基中厌氧生长过夜。

将R0011和R0175菌株的过夜培养物以及1g两歧双歧杆菌R0071的冻干粉末用M9缓冲液洗涤一次，并在4000rpm离心10分钟后重悬于10ml M9缓冲液中。在流式细胞仪上分析了实验中使用的活细菌细胞的数量，并检测了来自细菌的荧光信号，并确定了每单位体积的计数并调整为2×10

每种细菌菌株的作用都单独或组合进行了测试。将鼠李糖乳杆菌R0011和长双歧杆菌R0175以80:20的比例混合。将鼠李糖乳杆菌R0011和两歧双歧杆菌R0071以80:20的比例混合。对第三种混合物也进行了测试，并将鼠李糖乳杆菌R0011、长双歧杆菌R0175和两歧双歧杆菌R0071以80:10:10的比例混合。

秀丽隐杆线虫的同步：

用秀丽隐杆线虫的野生型株N2进行实验。通过从妊娠成虫中分离卵，将卵收集在M9缓冲液中，在NGM平板中将卵孵化过夜并用M9缓冲液无菌分离L1期蠕虫来同步蠕虫。将L1期蠕虫转移到接种了大肠杆菌菌株OP50的NGM(线虫生长培养基)平板上，并在15℃下孵育4天，直至成虫。

尼古丁和烟草提取物的制备：

将尼古丁二酒石酸二水合物100mM(Acros)在M9缓冲液中稀释至终浓度6.2mM。类似地，将天然烟草提取物(ABT#6079，Advanced Biotech)在M9缓冲液中稀释至终浓度为6.2mM。

测定：

将成年蠕虫在M9缓冲液中洗涤，将250μl蠕虫悬浮液转移至含有或不含尼古丁(若存在，250μl)或烟草提取物(若存在，250μl)和含有或不含益生菌悬浮液(若存在，500μl)的24孔培养板中。首先将益生菌悬浮液加入到孔中，随后加入尼古丁或烟草提取物。每孔至少存在40只蠕虫。将板在20℃下孵育24小时。孵育期后，将每孔中的蠕虫悬液在M9缓冲液中洗涤三次(以1000rpm离心四分钟)。将蠕虫转移到新的24孔培养板中，每个孔中均含有1ml的1％琼脂。使蠕虫平衡45分钟，然后使用Leica EC3照相机记录摆动(thrashing)(游泳)。计算每秒的平均摆动数，然后对所有益生菌菌株和菌株组合作图。

结果和结论：

如图1所示，毫摩尔的尼古丁暴露引起线虫的可逆性麻痹。这表现为与无攻击对照相比，无细菌培养并用纯尼古丁攻击的对照蠕虫的性能下降。鼠李糖乳杆菌R0011、长双歧杆菌R0175、鼠李糖乳杆菌R0011与长双歧杆菌R0175的组合、鼠李糖乳杆菌R0011与两歧双歧杆菌R0071的组合、以及三种益生菌菌株的组合，的共孵育，似乎可以防止暴露于尼古丁二酒石酸二水合物(Acros)引起的游泳速度的减少。这可能通过防止尼古丁的过度神经兴奋和/或加速/帮助暴露后的恢复来实现。

除了尼古丁之外，烟草提取物还含有对蠕虫高毒性的其它成分，并且与用尼古丁进行的测定相比，引起更大的麻痹/死亡(或减少摆动和身体弯曲)(图1)。结果表明，单独的鼠李糖乳杆菌R0011、鼠李糖乳杆菌R0011与长双歧杆菌R0175的组合、鼠李糖乳杆菌R0011与两歧双歧杆菌R0071的组合、以及三种益生菌菌株的组合，均减弱了烟草提取物对秀丽隐杆线虫的毒性作用。

实施例2：评估两种益生菌产品在尼古丁替代疗法期间，管理与戒烟有关的戒断症状方面的有效性的临床试验

目的：

这项临床研究的目的是评估益生菌两歧双歧杆菌、长双歧杆菌长亚种和鼠李糖乳杆菌，在尼古丁替代疗法期间，管理与戒烟有关的戒断症状的功效或潜力。

研究设计：

该研究是双盲、前瞻性、随机、安慰剂对照试验。总研究持续时间为16周。随机化对患者和研究者保持盲目。

研究群体：

选择七十五个年龄在18岁与65岁之间的健康参与者，中度或重度吸烟者进行试验。中度或重度吸烟者由法格斯托姆

该试验具有一个安慰剂对照组(组1)和两个实验处理组(组2和组3)。将受试者分配到下列处理组之一：

组1：安慰剂

组2：益生菌产品1

组3：益生菌产品2

试验产品：

益生菌产品1(鼠李糖乳杆菌R0011和两歧双歧杆菌R0071)：

所研究的益生菌产品1是鼠李糖乳杆菌R0011和两歧双歧杆菌R0071的组合，其形式为用马铃薯淀粉和硬脂酸镁标准化的冻干细菌。在25℃下放置2年后，每个胶囊中总益生菌的浓度为5×10

益生菌产品2(鼠李糖乳杆菌R0011和长双歧杆菌长亚种R0175)：

所研究的益生菌产品2是鼠李糖乳杆菌R0011和长双歧杆菌长亚种R0175的组合，其形式为用马铃薯淀粉和硬脂酸镁标准化的冻干细菌。在25℃下放置2年后，每个胶囊中总益生菌的浓度为5×10

安慰剂含有马铃薯淀粉和硬脂酸镁。两种组合中的益生菌在透明胶囊内呈现为具有米黄色斑点的白色粉末。

治疗施用和程序：

参与者随机分成三组接受益生菌产品之一或安慰剂。已经表明戒断症状在戒除烟草的第一天是重要的。因此，在第0天，参与者在退出日和NRT开始(第2周)之前接受研究产品(IP)2周，以增加检测对戒断症状的作用的潜力。使用尼古丁贴剂(活性成分：尼古丁，以及非药物成分：丙烯酸酯粘合剂、铝化聚酯、硅酮粘合剂)作为NRT。益生菌补充提供14周，即从第0天到第14周，而尼古丁贴剂提供10周，即从第2周到第12周。

三组参与者在16周内随访。所有参与者在第-2天(筛选访问)、在第0天、在第2周(第14天)、在第4周(第28天)、在第12周(第84天)、在第14周(第98天)进行研究访问，并在第16周(第112天)进行随访。在第8周进行一次电话呼叫。

要求参与者完成每日日记以评估对IP和NRT的依从性，评价吸烟的次数，评估戒断症状(使用MPSS)，排便和大便稠度，贯穿整个研究中的每天。在研究期间还对焦虑和抑郁症状、尼古丁上瘾、体重和对食物渴望的进展进行评分。

研究评估：

在研究的整个过程中，参与者完成一份每日报告，以使用情绪和身体症状量表(MPSS)对他们的戒断症状进行评分(Prapavessis et al.2007；Javors et al.2011；Coleman et al.2012)。

MPSS是一个12项目的量表，其可以被分成3个子量表(West,2012)：

-MPSS(M)，评估情绪：抑郁、焦虑、易怒、不安、饥饿、注意力不集中和睡眠不足(失眠)。

-MPSS(C)，评价渴求：每天渴求的数量和渴求强度的紧迫性。

-MPSS(P)，评估身体症状：口腔溃疡、便秘、咳嗽/咽喉痛。

在第2–4周(烟草戒断的头2周)和第12–14周(NRT结束后的头2周)之的间每天，在其它周中的每周，比较各组对应于MPSS(M)子量表的7项之和的MPSS(M)评分。对于每周比较，对各周进行每日评分的平均。还使用基线评级作为协变量在组内按时间比较评分。

此外，进行了以下测试：

医院焦虑和抑郁量表(HADS)。HADS是一种广泛使用的患者自评量表，涉及14个问题(7个“焦虑”和7个“抑郁”问题)，范围从0–42。分数越高，症状越明显。得分7表示没有病症；8至10范围内的分数指示焦虑或抑郁的可能情况；并且，得分≥11表明焦虑或抑郁的确切情况。在每次访问时将执行HADS问卷调查。

法格斯托姆尼古丁依赖性评分表(

呼出空气中的一氧化碳水平。每次访问时使用一氧化碳监测器测量参与者呼出的空气中的一氧化碳，作为戒烟的评估。

唾液可替宁(cotinine)水平。可替宁水平监测可以用于提供吸烟状态的客观定量评估。通过免疫测定确定唾液样品中的可替宁水平。如果参与者唾液中可替宁水平低于10ng/ml，则认为该参与者戒烟(Prapavessis et al.2007；Javors et al.2011；Colemanet al.2012)。

食物渴望的评估。参与者被要求每周使用甜食或馥郁食物的渴求问卷(Questionnaire on Craving for Sweet or Rich Foods)(QCSRF)(Toll et al.,2008)评估他们的食物渴求。QCSRF衡量吸烟者对甜食或馥郁食物的渴望程度。第一个问题是关于“此刻”的渴望，接下来的5个问题与过去的一周有关。所有这六个问题在7点李克特量表上从“根本没有”到“比以前更多”评级。8个其他问题使用7点李克特量表从“强烈不一致”到“强烈一致”评估当前渴望。在每次访问时评估并测量体重的进展。

Bristol粪便量表。Bristol粪便量表是测量患有功能性胃肠疾病的成人的粪便稠度的七点量表。为了评估益生菌和戒烟对每天排便频率的影响，要求参与者每天使用Bristol粪便量表评价他们每次排便的稠度。

微生物群系分析和菌株的持久性。在第0周和第14周结束时收集粪便样本。通过基因型方法确定参与者的微生物群系组成的变化以及益生菌菌株的持久性。

结果：

在第1–2周(基线前–戒烟前和开始NRT之间)直到3–4周(NRT治疗–戒烟期间)，记录第1组(安慰剂-1629)，第2组(益生菌产品1-4682)和第3组(益生菌产品2-8213)之间的得分。情绪和身体症状量表(MPSS(M))的数据分析显示，服用益生菌产品2(鼠李糖乳杆菌R0011和长双歧杆菌长亚种R0175)的参与者，与安慰剂组相比，从基线前到NRT治疗期间戒断症状增幅最低(表1)。更特别地，益生菌产品2的使用导致所有三组中戒断症状的总体差异较小。尽管这些结果没有达到统计学显著性(p＝0.4478)，但它们证明益生菌产品2在减轻戒断症状方面具有更大的功效。总之，益生菌产品2以较高的比例减少抑郁、焦虑和压力，并改善积极情绪。

表1：按处理组划分的戒烟参与者平均MPSS(M)得分的变化(F＝0.8752；p＝0.4478)

如图2所示，两种益生菌产品均可改善参与者在第2周到第4周之间的戒烟。图2是自我报告为戒断但继续吸烟的参与者、报告吸烟的参与者和通过一氧化碳(CO)呼吸试验测定的真正戒断的参与者的百分比的示意图。

此外，在研究结束时(第16周)对三组中每组的剩余七名参与者进行CO呼吸试验，以确定真正戒除的参与者的数量。表2中所示的结果表明，与安慰剂组相比，两种益生菌产品具有更高比例的真正戒断参与者。益生菌产品2在维持戒烟方面也是最有效的。

因此，预期这些益生菌(产品1：鼠李糖乳杆菌R0011和两歧双歧杆菌R0071，以及产品2：鼠李糖乳杆菌R0011和长双歧杆菌长亚种R0175)可用于管理与戒烟相关的戒断症状并维持戒烟。

表2：第16周的戒烟状况

如表3所示，评价渴求的情绪和身体症状量表(MPSS(C))的数据分析证明益生菌产品1和2在降低烟草渴求或吸烟欲望方面是有效的。

表3：按处理组划分的戒烟参与者平均MPSS(C)得分的变化(F＝0.2504；p＝0.7809)

虽然已经结合本发明的具体实施例描述了本发明，但是应当理解，权利要求的范围不应当由在示例中阐述的优选实施例限制，而是应当给予与作为整体的描述一致的最宽泛的解释。

参考文献

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Coleman T,Cooper S,Thornton JG,Grainge MJ,Watts K,Britton J,et al.Arandomized trial ofnicotine-replacement therapy patches in pregnancy.The NewEngland journal of medicine.2012；366(9):808-18.

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West R.Mood and Physical Symptoms Scale 2012.可从国家戒烟与培训中心(National Centre for Smoking Cessation and Training，NCSCT)网站获得。

本发明的其它方面：

1、包含属于乳杆菌属物种、双歧杆菌属物种或其混合物的至少一种细菌菌株的益生菌组合物在缓解或抑制在有需要的个体中由戒断或部分戒断使用烟草或尼古丁引起的症状的用途。

2、如段落1所述的用途，其中所述益生菌组合物包含至少一种属于乳杆菌物种和双歧杆菌物种的细菌菌株。

3、如段落1或2所述的用途，其中所述至少一种乳杆菌属的细菌菌株属于嗜酸乳杆菌、短乳杆菌、保加利亚乳杆菌、干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、德氏乳杆菌、发酵乳杆菌、加氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、乳酸乳球菌、植物乳杆菌、路氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、唾液乳杆菌或副干酪乳杆菌物种。

4、如段落1–3任一所述的用途，其中所述至少一种乳酸杆菌属物种的细菌菌株是嗜酸乳杆菌HA-122(Lallemand Health Solutions(“LHS”))、嗜酸乳杆菌R0418(LHS)、短乳杆菌HA-112(LHS)、干酪乳杆菌HA-108(LHS)、干酪乳杆菌R0215(LHS)、德氏乳杆菌保加利亚乳杆菌HA-137(LHS)、发酵乳杆菌HA-179(LHS)、瑞士乳杆菌HA-128(LHS)、瑞士乳杆菌HA-501(LHS)、瑞士乳杆菌R0052(LHS)、瑞士乳杆菌Lafti L10 R0419(LHS)、副干酪乳杆菌HA-196(LHS)、副干酪乳杆菌HA-274(LHS)、副干酪乳杆菌Lafti L26 R0422(LHS)、植物乳杆菌R0403(LHS)、植物乳杆菌R0202(LHS)、植物乳杆菌R1012(LHS)、路氏乳杆菌HA-188(LHS)、鼠李糖乳杆菌HA-114(LHS)、鼠李糖乳杆菌HA-500(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0049(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0343(LHS)、鼠李糖乳杆菌R1039(LHS)、唾液乳杆菌HA-118(LHS)、唾液乳杆菌R0078(LHS)、保加利亚乳杆菌R0440(LHS)或乳酸乳球菌R1087(LHS)。

5、如段落1–4任一所述的用途，其中所述至少一种双歧杆菌属的细菌菌株属于两歧双歧杆菌、动物双歧杆菌乳酸亚种、短双歧杆菌、长双歧杆菌或长双歧杆菌婴儿亚种，优选地所述至少一种双歧杆菌属的细菌菌株属于两歧双歧杆菌或长双歧杆菌。

6、如段落5所述的用途，其中所述至少一种双歧杆菌属物种的细菌菌株是两歧双歧杆菌HA-132(LHS)、两歧双歧杆菌R0071(LHS)、短双歧杆菌HA-129(LHS)、短双歧杆菌R0070(LHS)、婴儿双歧杆菌HA-116(LHS)、婴儿双歧杆菌R0033(LHS)、乳酸双歧杆菌HA-194(LHS)、长双歧杆菌HA-135(LHS)、长双歧杆菌R0175(LHS)，动物双歧杆菌亚种乳酸乳球菌R0421(LHS)。

7、如段落1–6任一所述的用途，其中所述至少一种乳杆菌物种的细菌菌株属于鼠李糖乳杆菌物种，所述至少一种双歧杆菌的细菌菌株属于长双歧杆菌或两歧双歧杆菌。

8、如段落7所述的用途，其中所述至少一种细菌菌株是鼠李糖乳杆菌HA-114(LHS)、鼠李糖乳杆菌HA-500(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0049(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0343(LHS)、鼠李糖乳杆菌R1039(LHS)、长双歧杆菌HA-135(LHS)、长双歧杆菌R0175(LHS)、两歧双歧杆菌HA-132(LHS)或两歧双歧杆菌R0071(LHS)。

9、如段落1–8任一所述的用途，其中所述至少一种细菌菌株属于乳杆菌属物种，双歧杆菌属物种或其混合物的细菌菌株的剂量以每剂量约1×10

10、如段落1–9中任一所述的用途，其还包括使用尼古丁替代疗法，任选地其中所述尼古丁替代疗法是口香糖、透皮贴剂、鼻喷雾剂、吸入器、口腔喷雾剂或舌下片剂/锭剂。

11、如段落1–10中任一所述的用途，其中由戒除或部分戒除使用烟草或尼古丁所引起的症状包括抑郁、易怒、焦虑、坐立不安、饥饿、注意力不集中、失眠、神经性震颤、头晕或对烟草或尼古丁的渴望。

12、一种用于缓解或抑制在有需要的个体中由戒断或部分戒断使用烟草或尼古丁引起的症状的组合物，其包含至少一种属于乳杆菌属物种、双歧杆菌属物种或其混合物的细菌菌株。

13、如段落12所述的组合物，其中所述组合物包含至少一种属于乳杆菌属物种的细菌菌株，所述至少一种属于双歧杆菌的细菌菌株属于长双歧杆菌或两歧双歧杆菌物种。

14、如段落12所述的组合物，其中所述组合物包含乳杆菌，长双歧杆菌和两歧双歧杆菌的至少一种细菌菌株。如段落12–14任一所述的组合物，其中所述至少一种细菌菌株是鼠李糖乳杆菌HA-114(LHS)、鼠李糖乳杆菌HA-500(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0011(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0049(LHS)、鼠李糖乳杆菌R0343(LHS)、鼠李糖乳杆菌R1039(LHS)、长双歧杆菌HA-135(LHS)、长双歧杆菌R0175(LHS)、两歧双歧杆菌HA-132(LHS)或两歧双歧杆菌R0071(LHS)。

15、如段落12–15任一所述的组合物，其还包括使用尼古丁替代疗法，任选地其中所述尼古丁替代疗法是口香糖、透皮贴剂、鼻喷雾剂、吸入器、口腔喷雾剂或舌下片剂/锭剂。

16、如段落12–16任一所述的组合物，其中由戒除或部分戒除使用烟草或尼古丁引起的症状包括抑郁、易怒、焦虑、坐立不安、饥饿、注意力不集中、失眠、神经性震颤、头晕或对烟草或尼古丁的渴望。