单管同时检测基因的缺失突变和点突变的荧光PCR检测方法

摘要

本发明涉及基因检测技术领域，特别是涉及一种单管同时检测基因的缺失突变和点突变的荧光PCR检测方法，包括如下步骤：筛选出可用的引物和探针，所述引物的Tm值高于探针的Tm值；使用所得引物和探针在单管同一个反应体系之中进行PCR反应；使用仪器检测PCR反应荧光值的变化，分析并采集与设计探针相应的通道荧光信号，根据各荧光通道有无解链峰，以判断受检样本是否存在某种缺失突变；根据各荧光通道解链峰的温度，以判断受检样本是否存在某种点突变。本发明有益效果：只需将受检样本基因组DNA加入到检测试剂中，实现同时对多个缺失突变和点突变的检测，一次性闭管操作，消除PCR产物对实验环境的污染。