一种基于miRNA搭桥对两个互不重叠的扩增引物进行双向延伸检测miRNA的方法

摘要

本发明公开了一种基于miRNA搭桥对两个互不重叠的扩增引物进行双向延伸检测miRNA的方法，属于医学生物技术领域。本发明在检测miRNA时有两条引物：扩增引物1与miRNA的3’端一半的序列互补，含T7启动子和标签序列；扩增引物2与miRNA的5’端一半的序列相同，含标签序列。在逆转录酶作用下依托miRNA搭桥可实现两条扩增引物的双向延伸，形成一个含有标签序列、miRNA、T7启动子的dsDNA分子。该分子在T7聚合酶的作用下转录出含有标签序列及miRNA的RNA分子，可根据标签分子对其进行定性分析。本方法具有高特异、高灵敏和高通量的特点，为以miRNA作为生物标志物的疾病诊断提供技术可能。