一种奶牛溶菌酶基因的原核表达载体构建及其表达方法

摘要

本发明公开一种奶牛溶菌酶基因的原核表达载体构建方法，属于基因工程领域，将奶牛LYZ基因mRNA序列翻译为cDNA序列，其序列如SEQ ID NO.1所示，采用双酶切获得目的片段、pET32a载体片段，将目的片段和pET32a载体片段连接，构建LYZ‑pET32T原核表达载体。本发明通过人工设计并合成LYZ基因CDS序列，将其克隆至表达载体pET32T并转化大肠杆菌TOP10，筛选阳性菌株，经IPTG诱导，初步纯化表达产物，并对其进行SDS‑PAGE分析。本发明成功的构建原核表达载体LYZ‑pET32T，纯化分离得到奶牛溶菌酶蛋白，为后续研究与应用奠定了基础。