使用RNA引导的内切核酸酶在非常规酵母中基因靶向

摘要

本文公开了非常规酵母，其包含至少一种RNA引导的内切核酸酶(RGEN)，所述RNA引导的内切核酸酶包含至少一种不具有5’端的RNA组分。该未封端的RNA组分包含与酵母中的染色体或附加体中的靶位点序列互补的序列。RGEN可结合到，并任选地切割靶位点序列处的一个或两个DNA链。本文的RGEN的示例是Cas9蛋白质与向导RNA的复合物。在某些实施方案中使用核酶以提供缺乏5’端的RNA组分。本文还公开了在非常规酵母中基因靶向的方法。