仙人掌果蔬酶的制备方法及其制得的仙人掌果蔬酶

摘要

本发明涉及果蔬酶制备领域，特别涉及仙人掌果蔬酶的制备方法及其制得的仙人掌果蔬酶。仙人掌果蔬酶的制备方法，包括以下步骤：选取仙人掌和果蔬，将其切碎或切片，得到发酵材料；将菌种与发酵材料混合；按照一层发酵材料一层食用糖分层装入发酵容器中，至占发酵容器体积的1/2-3/4，且最上面一层为食用糖，食用糖的添加量与发酵材料的重量比为0.5-0.6:1；装罐完成后喷洒食用白醋于罐内物料表面，然后密封发酵150-200天即可。本发明提供的仙人掌果蔬酶的制备方法，采用一种或多种益生菌混合发酵改掉了以往自然发酵中不可控的因素，提高了产品的安全性。发酵后得到的物质营养成分丰富，特别是SOD活性高。

说明书

技术领域

本发明涉及果蔬酶制备领域，具体而言，涉及仙人掌果蔬酶的 制备方法及其制得的仙人掌果蔬酶。

背景技术

现代医学研究发现酶是控制人体消化吸收与细胞代谢的关键物 质，但是随着年龄的增长，人体内酶的含量和活性都随之减少和减 低。欧美发达国家早已广泛食用果蔬酶作为人体酶的补充剂，并应 用于医疗、保健、美容等多个领域。适当补充果蔬酶不仅能直接改 善胃肠功能，增加营养提高体质，而且对糖尿病，心脑血管病及肿 瘤等有较好的防治作用。

随着我国经济的发展和食用产品的丰富，人们从饮食中所获取 的脂肪量、热量和糖量也越来越高。如果不注意身体锻炼或不能合 理安排自己的饮食结构，将诱发和导致高血压、高血脂、糖尿病和 肥胖症等疾病。仙人掌不但含有高活性的SOD酶，还富含人体所需 的多种营养成分和微量元素，对人体具有降血糖、抗炎和保护细胞 损伤的作用。它不仅获得了我国传统医学的重视，也得到了世界现 代营养学的开发。但是，仙人掌的种类有250余种，其中可食用的 仅是少数，尤其是具有营养价值，药用价值和开发价值的品种更少。 人们对仙人掌的利用绝大多数还停留在中药配制或人工提炼的水 平。

近几年，也有少数科研工作把它开发成营养保健品，但其生产 工艺绝大多数都采用自然发酵，然后高温浓缩、高温灭菌。SOD酶 属于高温敏感型酶，在高温浓缩、灭菌的过程中其酶活性丧失殆尽。 在制备仙人掌类产品中如何保持SOD酶活性的文献还没见报告。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种仙人掌果蔬酶的制备方法，以 仙人掌、多种新鲜果蔬及中药材为原料，并辅以食用糖和白醋，特 定采用一种或多种益生菌混合发酵，改掉了以往自然发酵中不可控 的因素，提高了产品的安全性，得到的产品营养丰富。

本发明的第二目的在于提供一种所述的仙人掌果蔬酶的制备方 法制得的仙人掌果蔬酶，发酵产物经低温浓缩而获得高活性SOD仙 人掌果蔬酶产品，极大的保留了SOD酶的酶活力和益生菌的活性， 产品不但色泽均匀，酸度适宜，口感醇厚，而且保留了SOD酶的酶 活力和益生菌的活性；此外，产品不添加任何防腐剂，在低温下可 长期保存。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

仙人掌果蔬酶的制备方法，包括以下步骤：

(a)、选取仙人掌和果蔬，将其切碎或切片，得到发酵材料；

(b)将菌种与所述发酵材料混合，所述菌种包括酵母菌群、醋 酸菌群、乳酸菌群、麴菌群中的任一种或多种，每个菌种的浓度为 1×10⁵-9×10⁵CFU/ml，所述菌种的添加量为所述发酵材料体积的 2.5％-3.5％；

(c)、将添加有菌种的发酵材料按照一层发酵材料一层食用糖 分层装入发酵容器中，至占发酵容器体积的1/2-3/4，且最上面一层 为食用糖，所述食用糖的添加量与所述发酵材料的重量比为0.5-0.6: 1；

(d)、装罐完成后喷洒食用白醋于罐内物料表面，然后密封发 酵150-200天即可。

本发明提供的仙人掌果蔬酶的制备方法，以仙人掌和果蔬为原 料，原料中添加特定的益生菌种，以一层发酵材料一层食用糖的方 式，最后喷洒白醋，以防止杂菌生长，控制发酵容器中的物料体积， 确保发酵顺利进行。本发明通过优化发酵液体培养基中，采用一种 或多种益生菌混合发酵改掉了以往自然发酵中不可控的因素，提高 了产品的安全性。发酵后得到的物质营养成分丰富，特别是SOD活 性高。

经多次试验验证，以下的一种或多种菌种进行发酵能取得非常 好的发酵效果。具体地，所述酵母菌群为酿酒酵母菌；

所述醋酸菌群为醋酸醋杆菌、木醋杆菌中的任一种或两种；

所述乳酸菌群为保加利亚乳酸杆菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、 比菲德氏菌、凝结芽孢酸菌中的任一种或多种；

所述麴菌群为白麴菌、红麴菌中的任一种或多种。

经验证，所述菌种为混合菌种时，各菌种按等体积混合而得。

具体地，在步骤(b)中，所述菌种通过二次扩繁而得到，具体 步骤如下：

取原菌种，接种至液体培养基中，培养至对数生长期，获得一 级种子液；

将所述一级种子液按3％的接种量接种到液体培养基中进行第 二次扩繁，培养至细菌数目到达1×10⁵-9×10⁵CFU/ml即可。

即每个菌种均单独培养获得二级种子液，这样培养得到的菌种 活力高，然后以等体积混合即得混合菌种。每个菌种在培养时均按 照各自的培养方法培养即可。

其中，各菌种通过市售购买即可获得。如：酿酒酵母菌、醋酸 醋杆菌、保加利亚乳酸杆菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌可购买于广东 省微生物菌种保藏中心，凝结芽孢酸菌、比菲德氏菌、红麴菌、白 麴菌可购买于江西省食品发酵研究所。

发酵过程中始终做到厌氧，不晃动发酵罐体，务必杜绝杂菌污 染。在装罐后开始发酵的48h内，密切关注罐体发酵情况，若有气 泡产生，提前放气；若有液体随气泡溢出罐体外，及时清理干净。

优选地，所述仙人掌与所述果蔬的重量比为1-3:1。以该配比发 酵效果好，得到的SOD活性高，营养更丰富，酸度适宜，口感更醇 厚。

经多次发酵验证，进一步地，所述果蔬包括枇杷、梅子、凤梨、 红龙果、青木瓜、马铃薯、芋、胡瓜、红萝卜、豆薯、莲藕、芦笋、 芜菁、茄子、苦瓜、小黄瓜、冬瓜、菠菜、桑椹、甘薯叶、甘蓝、 青椒、茼蒿、青花菜、黄豆芽、菱角、番茄、甜柿、荞麦、龙眼、 甘蔗、哈密瓜、柠檬、梨、杨桃、葡萄、葡萄柚、菠萝蜜、西瓜、 香瓜、苹果、百香果、奇异果、草莓、梨、蓝莓、苹果、橙子、香 蕉、猕猴桃、火龙果、石榴、樱桃、水蜜桃、小麦草中的任一种或 多种。这些种类的果蔬能很好的与仙人掌配合，发酵顺利进行，并 且得到的发酵产物酸度适宜，SOD活性高，营养更丰富，口感更醇 厚。添加的果蔬的种类可根据口味的需求进行组合添加。

优选地，所述食用糖为白糖、红糖、冰糖中的任一种或多种。 经验证，采用这几种食用糖发酵得到的发酵产物口味佳，发酵产物 中SOD活性高。

优选地，所述发酵材料还包括中草药，所述中草药包括金线莲、 三七花、绞股蓝、川七籽、生姜、川穹、甘草、生地黄、枸杞、灵 芝中的任一种或多种。

中草药可以与发酵材料一起添加后发酵，也可以将发酵产物与 中草药提取物混合而得产品。中草药的提取物可以采用水提、醇提 等。通过添加特定具有保健功能的中草药，各成分相互配合协同增 强效果，增强了仙人掌果蔬酶的保健功能，拓展了其市场，可以广 泛的应用在医疗、保健、美容行业。

优选地，所述制备方法还包括：将发酵结束后的发酵所得物进 行过滤，得到滤液，将所述滤液进行低温真空浓缩，得到浓缩液， 所述低温真空浓缩条件为：真空度≥0.09MPa，温度≤45℃。

发酵结束后，选用纱布或者过滤机器过滤掉发酵液中的固体颗 粒物质。然后采用特定的低温真空浓缩条件对发酵产物进行浓缩， 极大的保留了SOD酶的酶活力和益生菌的活性。

本发明还提供了所述的制备方法制得的仙人掌果蔬酶，在所述 浓缩液添加食用辅料，即得。

获得的浓缩液根据不同的消费人群添加0-0.4％低聚果糖等食 用辅料。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)本发明提供的仙人掌果蔬酶的制备方法，通过优化发酵 培养基，采用一种或多种益生菌混合发酵改掉了以往自然发酵中不 可控的因素，提高了产品的安全性。发酵后得到的物质营养成分丰 富，特别是SOD活性高，可以广泛的应用在医疗、保健、美容行业。

(2)本发明通过选定特定的菌群，并限定发酵的条件，发 酵效果稳定可控。

(3)本发明通过控制仙人掌与果蔬的重量比例，以及添加 的食用糖的种类等，得到的仙人掌果蔬酶中SOD活性高，营养更 丰富，酸度适宜，口感更醇厚。

(4)本发明通过添加中草药，增强了仙人掌果蔬酶的保健功 能，拓展了其市场。

(5)本发明通过采用特定的低温真空浓缩条件对发酵产物进 行浓缩，极大的保留了SOD酶的酶活力和益生菌的活性。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，以 下将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。

图1为本发明实施例提供的仙人掌果蔬酶的制备方法示意图。

具体实施方式

图1为本发明实施例提供的仙人掌果蔬酶的制备方法示意图。 下面将结合具体的实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是 本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应 视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条 件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者， 均为可以通过市售获得的常规产品。

实施例1

本发明提供的混合发酵制备高活性SOD仙人掌果蔬酶的方 法，采用以下步骤制备：

1.选材选取新鲜的仙人掌、桑椹、火龙果、苹果、猕猴桃、 香蕉、凤梨，洗净，沥干表面水分，待用。

2.混合菌种的制备：

2.1一级种子液的制备：从购买的或保存的菌种中选取酿酒 酵母菌、醋酸醋杆菌、木醋杆菌、保加利亚乳酸杆菌、双歧杆 菌、嗜酸乳杆菌、白麴菌、红麴菌分别接种于液体培养基中；培 养条件为：木醋杆菌、醋酸醋杆菌于30℃，嗜酸乳杆菌、双歧 杆菌、保加利亚乳酸杆菌于37℃，白麴菌、红麴菌、酿酒酵母 菌于25-28℃；分别培养18小时获得一级种子液，待用。

2.2二级种子液制备：按3％的比例取一级种子液于各自液 体培养基中，培养条件同上，培养时间为20小时后，每隔4小 时计数一次，当二级种子液中的细菌数目到达10⁵CFU/ml即可， 停止培养，待接种备用。

2.3混合菌种的配比：每种菌液按照等体积混合，即得混合 菌种。

3.装罐

3.1按照如下重量份称取仙人掌和果蔬：仙人掌90份，桑 椹10份，火龙果5份，苹果5份，猕猴桃5份，香蕉2.5份， 凤梨2.5份，然后将其切碎或切成薄片，混匀，获得混合发酵材 料。

3.2确定每个发酵罐的装料量。按照每罐装料体积为罐体体 积的1/2来确定装料量。

3.3按照每罐混合发酵材料的3％确定混合菌液用量，取 二级种子液混匀后，接种到混合发酵材料中，并使之与材料充 分混合。

3.4按照混合发酵材料：红糖＝1:0.6的比例确定红糖用量， 红糖72份。

3.5按照一层发酵材料一层红糖分层装罐，每一层务必压 结实且最上面一层(即与空气接触的一层)为红糖。

3.6装罐完成后喷洒少量食用白醋于罐内物料表面，以防止 杂菌生长。

4.发酵发酵过程中始终做到厌氧、不晃动发酵罐体，务必 杜绝杂菌污染，发酵180天。在装罐后开始发酵的48h内，密 切关注罐体发酵情况，若有气泡产生，提前放气；若有液体随 气泡溢出罐体外，及时清理干净。

5.浓缩

5.1发酵结束后，选用过滤机器过滤掉发酵液中的固体颗 粒物质。

5.2采用低温真空浓缩。浓缩条件为：真空度＝0.1MPa； 温度＝45℃，浓缩1倍，得到仙人掌果蔬酶浓缩液。观察该浓缩 液得知，该浓缩液色泽均匀，并经多人品尝发现，酸度适宜， 口感醇厚。

实施例2

本发明提供的混合发酵制备高活性SOD仙人掌果蔬酶的方 法，采用以下步骤制备：

1.选材选取新鲜的仙人掌、马铃薯、芋、胡瓜、红萝卜、 豆薯、莲藕、芦笋、芜菁、茄子、苦瓜、小黄瓜、冬瓜、菠菜、 桑椹、甘薯叶、甘蓝、青椒、茼蒿、青花菜、黄豆芽、菱角， 洗净，沥干表面水分，待用。

2.混合菌种的制备：

2.1一级种子液的制备：从购买的或保存的菌种中选取酿酒 酵母菌、白麴菌分别接种于液体培养基中；培养至对数生长期， 获得一级种子液，待用。

2.2二级种子液制备：按4％的比例取一级种子液于各自液 体培养基中，培养条件同上，培养时间为20小时后，每隔4小 时计数一次，当二级种子液中的细菌数目到达10⁵CFU/ml即可， 停止培养，待接种备用。

2.3混合菌种的配比：将菌液按照等体积混合，即得混合菌 种。

3.装罐

3.1按照如下重量份称取仙人掌和果蔬：仙人掌90份，马 铃薯10份、芋10份、胡瓜5份、红萝卜5份、豆薯5份、莲 藕5份、芦笋5份、芜菁5份、茄子3份、苦瓜2份、小黄瓜5 份、冬瓜5份、菠菜1份、桑椹3份、甘薯叶2份、甘蓝2份、 青椒3份、茼蒿5份、青花菜3份、黄豆芽2份、菱角4份， 然后将其切成小颗粒，混匀，获得混合发酵材料。

3.2确定每个发酵罐的装料量。按照每罐装料体积为罐体体 积的3/4来确定装料量。

3.3按照每罐混合发酵材料的3.5％确定混合菌液用量，取 二级种子液混匀后，接种到混合发酵材料中，并使之与材料充 分混合。

3.4按照混合发酵材料：白糖＝1:0.5的比例确定白糖用量。

3.5按照一层发酵材料一层白糖分层装罐，每一层务必压 结实且最上面一层(即与空气接触的一层)为白糖。

3.6装罐完成后喷洒少量食用白醋于罐内物料表面，以防止 杂菌生长。

4.发酵发酵过程中始终做到厌氧、不晃动发酵罐体，务必 杜绝杂菌污染，发酵150天。在装罐后开始发酵的48h内，密 切关注罐体发酵情况，若有气泡产生，提前放气；若有液体随 气泡溢出罐体外，及时清理干净。

5.浓缩

5.1发酵结束后，选用过滤机器过滤掉发酵液中的固体颗 粒物质。

5.2采用低温真空浓缩。浓缩条件为：真空度＝0.1MPa； 温度＝45℃，浓缩1倍，得到仙人掌果蔬酶浓缩液。观察该浓缩 液得知，该浓缩液色泽均匀，并经多人品尝发现，酸度适宜， 口感醇厚。

6.将绞股蓝与适量水煎熬，过滤，即获得绞股蓝提取液。

7.添加辅料

将浓缩液和绞股蓝提取液混合，添加0.4％低聚果糖，装瓶， 即得成品，低温保存即可。

实施例3

本发明提供的混合发酵制备高活性SOD仙人掌果蔬酶的方 法，采用以下步骤制备：

1.选材选取新鲜的仙人掌、柠檬、梨，沥干表面水分，待 用；

选取甘草、枸杞、灵芝，去杂，备用；

2.混合菌种的制备：

2.1一级种子液的制备：从购买的或保存的菌种中选取嗜酸 乳杆菌和双歧杆菌分别接种于液体培养基中；培养条件为：于 37℃分别培养18小时获得一级种子液，待用。

2.2二级种子液制备：按2.5％的比例取一级种子液于各自 液体培养基中，培养条件同上，培养时间为20小时后，每隔4 小时计数一次，当二级种子液中的细菌数目到达10⁵CFU/ml即 可，停止培养，待接种备用。

2.3混合菌种的配比：每种菌液按照等体积混合，即得混合 菌种。

3.装罐

3.1按照如下重量份称取仙人掌和果蔬：仙人掌90份，柠 檬15份、梨30份，然后将柠檬切成薄片，梨切碎，然后加入 甘草2份、枸杞3份、灵芝1份，混匀，获得混合发酵材料。

3.2确定每个发酵罐的装料量。按照每罐装料体积为罐体体 积的3/4来确定装料量。

3.3按照每罐混合发酵材料的2.5％确定混合菌液用量，取 二级种子液混匀后，接种到混合发酵材料中，并使之与材料充 分混合。

3.4按照混合发酵材料：冰糖＝1:0.5的比例确定冰糖用量。

3.5按照一层发酵材料一层冰糖分层装罐，每一层务必压 结实且最上面一层(即与空气接触的一层)为冰糖。

3.6装罐完成后喷洒少量食用白醋于罐内物料表面，以防止 杂菌生长。

4.发酵发酵过程中始终做到厌氧、不晃动发酵罐体，务必 杜绝杂菌污染，发酵200天。在装罐后开始发酵的48h内，密 切关注罐体发酵情况，若有气泡产生，提前放气；若有液体随 气泡溢出罐体外，及时清理干净。

5.浓缩

5.1发酵结束后，选用过滤机器过滤掉发酵液中的固体颗 粒物质。

5.2采用低温真空浓缩。浓缩条件为：真空度＝0.1MPa； 温度＝45℃，浓缩1倍，得到仙人掌果蔬酶浓缩液。观察该浓缩 液得知，该浓缩液色泽均匀，并经多人品尝发现，酸度适宜， 口感醇厚。

实施例4

本发明提供的混合发酵制备高活性SOD仙人掌果蔬酶的方 法，采用以下步骤制备：

1.选材选取新鲜的仙人掌、哈密瓜、菠萝蜜、葡萄柚、苦 瓜、小黄瓜、冬瓜，洗净，沥干表面水分，待用。

2.混合菌种的制备：

2.1一级种子液的制备：从购买的或保存的菌种中选取酿酒 酵母菌、比菲德氏菌、凝结芽孢酸菌；分别培养至对数生长期 获得一级种子液，待用。

2.2二级种子液制备：按3％的比例取一级种子液于各自液 体培养基中，培养条件同上，培养时间为20小时后，每隔4小 时计数一次，当二级种子液中的细菌数目到达10⁵CFU/ml即可， 停止培养，待接种备用。

2.3混合菌种的配比：每种菌液按照等体积混合，即得混合 菌种。

3.装罐

3.1按照如下重量份称取仙人掌和果蔬：仙人掌90份，哈 密瓜10份，菠萝蜜10份，葡萄柚10份，苦瓜5份，小黄瓜10 份，冬瓜5份，然后将其切碎，混匀，获得混合发酵材料。

3.2确定每个发酵罐的装料量。按照每罐装料体积为罐体体 积的1/2来确定装料量。

3.3按照每罐混合发酵材料的3％确定混合菌液用量，取 二级种子液混匀后，接种到混合发酵材料中，并使之与材料充 分混合。

3.4按照混合发酵材料：白糖＝1:0.6的比例确定白糖用量。

3.5按照一层发酵材料一层白糖分层装罐，每一层务必压 结实且最上面一层(即与空气接触的一层)为白糖。

3.6装罐完成后喷洒少量食用白醋于罐内物料表面，以防止 杂菌生长。

4.发酵发酵过程中始终做到厌氧、不晃动发酵罐体，务必 杜绝杂菌污染，发酵150天。在装罐后开始发酵的48h内，密 切关注罐体发酵情况，若有气泡产生，提前放气；若有液体随 气泡溢出罐体外，及时清理干净。

5.浓缩

5.1发酵结束后，选用过滤机器过滤掉发酵液中的固体颗 粒物质。

5.2采用低温真空浓缩。浓缩条件为：真空度＝0.1MPa； 温度＝40℃，浓缩1倍，得到仙人掌果蔬酶的浓缩液。观察该浓 缩液得知，该浓缩液色泽均匀，并经多人品尝发现，酸度适宜， 口感醇厚。

6.添加辅料

在上一步获得的浓缩液中添加0.4％低聚果糖。

7.装瓶，得到成品，可低温保存2年。

实施例5

本发明提供的混合发酵制备高活性SOD仙人掌果蔬酶的方 法，采用以下步骤制备：

1.选材选取新鲜的番茄、甘薯叶、甘蓝、青椒、茼蒿、青 花菜，洗净，沥干表面水分，待用；

选取川七籽、生姜、川穹，去杂，备用；

2.混合菌种的制备：

2.1一级种子液的制备：从购买的或保存的菌种中选取红麴 菌接种于液体培养基中，培养至对数生长期，获得一级种子液， 待用。

2.2二级种子液制备：按2.5％的比例取一级种子液于各自 液体培养基中，培养条件同上，培养时间为20小时后，每隔4 小时计数一次，当二级种子液中的细菌数目到达10⁵CFU/ml即 可，停止培养，待接种备用。

3.装罐

3.1按照如下重量份称取仙人掌和果蔬：仙人掌90份，番 茄20份，甘薯叶10份，甘蓝10份，青椒10份，茼蒿10份，青 花菜10份，然后将其切碎或切成薄片，加入川七籽5份，生姜 3份，川穹2份，混匀，获得混合发酵材料。

3.2确定每个发酵罐的装料量。按照每罐装料体积为罐体体 积的1/2来确定装料量。

3.3按照每罐混合发酵材料的3％确定混合菌液用量，取 二级种子液混匀后，接种到混合发酵材料中，并使之与材料充 分混合。

3.4按照混合发酵材料：红糖＝1:0.6的比例确定红糖用量。

3.5按照一层发酵材料一层红糖分层装罐，每一层务必压 结实且最上面一层(即与空气接触的一层)为红糖。

3.6装罐完成后喷洒少量食用白醋于罐内物料表面，以防止 杂菌生长。

4.发酵发酵过程中始终做到厌氧、不晃动发酵罐体，务必 杜绝杂菌污染，发酵160天。在装罐后开始发酵的48h内，密 切关注罐体发酵情况，若有气泡产生，提前放气；若有液体随 气泡溢出罐体外，及时清理干净。

5.浓缩

5.1发酵结束后，选用过滤机器过滤掉发酵液中的固体颗 粒物质。

5.2采用低温真空浓缩。浓缩条件为：真空度＝0.1MPa； 温度＝35℃，浓缩1倍，得到仙人掌果蔬酶浓缩液。观察该浓缩 液得知，该浓缩液色泽均匀，并经多人品尝发现，酸度适宜， 口感醇厚。

6.添加辅料

在上一步获得的浓缩液中添加0.4％低聚果糖。

7.装瓶，得到成品，可低温保存2年。

实验例1

取实施例1-5制得的仙人掌果蔬酶浓缩液进行SOD酶活性 测定，测定采用南京建成生物工程研究所的总超氧化物歧化酶 (T-SOD)试剂盒进行，具体测定步骤按试剂盒的操作步骤进 行。测得的数据如表1所示。

表1SOD酶活性测定数据

组别 SOD酶活(U/ml) 实施例1 462 实施例2 392 实施例3 382 实施例4 451 实施例5 409

从表1可以看出，本发明实施例制得的仙人掌果蔬酶中的 SOD酶活性高。

尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到， 在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和 修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的 所有这些变化和修改。