肾功能障碍的生物标志物

摘要

本发明涉及用于在物理创伤、低血压、败血症和/或败血性休克综合征后的受试者中预测肾功能障碍的发展的方法，其中所述方法包括下述步骤：a.确定在物理创伤之后、低血压事件之后、败血症之后、和/或败血性休克综合征之后从受试者采集的样品中存在的抗炎细胞因子的水平；b.基于在步骤a)中确定的抗炎细胞因子的所述水平预测肾功能障碍在所述受试者中的发展。

说明书

本发明涉及用于预测肾功能障碍的发展的方法，以及涉及用于进行这 种预测的试剂盒。

物理创伤除对身体的直接负面影响(例如由外科手术或汽车撞击导致 的损害、或者由外科程序例如通过心-肺机械的血液转流导致的损害)之外， 遭受物理创伤的受试者经常发展急性肾功能障碍。类似的急性肾功能障碍 的其它原因包括延长的低血压状态(例如与肠黏膜缺血和从内脏到循环系 统的内毒素易位关联)、败血症和败血性休克综合征。

在具有正常肾功能的患者的人群中，在与标准或基线GFR比较，肾小 球滤过率(GFR)下降的基础上进行创伤后的、低血压诱发的、败血症诱发 的、和/或败血性休克综合症诱发的肾功能障碍的诊断；如例如通过MDRD 测试(下面进一步解释)来测量。基于这些测量的诊断或预后的限制在于， 得出MDRD估计的GFR值下降通常花费若干天。当检测到GFR下降时， 经常太迟而不能开始治疗措施来避免肾功能的进一步恶化。例如围术期医 生或重症监护医师面临的挑战是在这些功能障碍出现之前48小时鉴定肾 功能障碍的生物标志物(即此时依然存在在特护病房采取预防措施的可能 性；例如对这些患者运行超常血压，这是其本身对手术后的情形并非没有 风险的介入，除非通过例如可以通过根据本发明的测试鉴定的即将发生的 肾衰竭的更大风险的存在来证明有理)。

许多文献记载对身体的创伤诱发急性的(经常是瞬变的)血浆促炎响 应。已经示出该急性的血浆促炎响应的量级与创伤后肾功能障碍相关 (Gormley等,Anesthesiology,2000,93)。类似的急性的肾毒性的促炎反应 的其他原因包括延长的低血压状态(与肠粘膜缺血和从内脏到循环的内毒 素易位关联)、或者败血症和败血性休克综合症，其全部通常在由在血液 中的促炎介质的急性增加为特征的系统炎症反应(SIRS)之后或与其关联。 当从血液过滤时这些急性的促炎反应如何损伤肾小管的机制是由 Chatterjee提供的，Chatterjee证明了在体外应用于细胞培养物中的近端小 管的TNF-α导致细胞损伤(Markewitz,J Clin Invest 1993；91；Chatterjee 等,Exp Nephrol 1999；7:438-8)。以炎症性细胞因子IL-1β、TNF-α和IFN-γ 的组合攻击后，体外近端肾小管细胞展示诱导型NO合酶诱导的时间依赖 性增加和对应的NO产生至细胞毒性浓度，该效应被L-NMMA抑制 (Chatterjee等,Exp Nephrol 1999；7:438-8)。利用TNF-α和INF-γ刺激大鼠 肾上皮细胞显著地增加诱导型一氧化氮合酶mRNA的水平(Markewitz,J  Clin Invest 1993；91)。

大量的出版物示出，尿抗炎细胞因子的水平示出创伤后的显著增加， 以及实际上在促炎反应的水平中反映前述增加。见例如：Gormley等. Cytokine,Jan 2002,2117(2)。另外，已经被证明，抗炎细胞因子的创伤后 增加的量级与肾损伤和功能障碍的量级相关。见例如：Litalien等,Pediatr. Nephrol.,Nov 1999,13(9)；Gretchen等,Anesthesiology,Nov 2000，Gormley 等,Anesthesiology,2000,93,和欧洲专利公布号1962092A(Renovar,Inc.)。 从前述出版物的这些结果的呈现明显地，相对大的创伤后抗炎细胞因子水 平被提出作为肾功能障碍的直接成比例的标志物。

其他的研究改为提出，通过测量从物理创伤之前到物理创伤之后的抗 炎细胞因子的水平的变化可以确定肾功能障碍。该分析清晰地要求在物理 创伤事件之前和之后采样和估计抗炎细胞因子水平。

当发明人分析大群的创伤后受试者的抗炎细胞因子反应时，他们惊奇 地发现，那些受试者的一个群体仅呈现物理创伤后的相对低的抗炎细胞因 子水平，与之前报告的以及大部分受试者所经历的预期的大的抗炎细胞因 子水平不同。对该子组的进一步分析惊奇地发现，相较于物理创伤后示出 预期的大的抗炎细胞因子水平的那些成员，这些成员们处于发展肾功能障 碍的高风险。该发现与之前公认的大的创伤后尿抗炎细胞因子的水平与肾 损伤和功能障碍的量级相关的结论相反。

发明人的令人惊讶的发现还证明，人们可以通过仅在单点即在物理创 伤以后采样和分析抗炎细胞因子来预测肾功能障碍。因而这样的分析的执 行比指示创伤之前和之后的抗炎细胞因子的水平的改变都需要测量的研 究简单。当在非预期的事件例如汽车碰撞导致的物理创伤之后试图预测肾 功能障碍的发展时，即当不可能测量创伤之前的抗炎细胞因子水平时，仅 测量创伤后抗炎细胞因子水平尤其有利。

通过广泛的试验，发明人提供了证据支持该概念：通过监测创伤后的 或低血压的受试者的抗炎细胞因子的低水平、或者患有败血症或败血性休 克综合征的受试者的抗炎细胞因的低水平，人们可以获得肾功能障碍的预 后方法。

相应地，在本发明的第一方面，提供一种用于在物理创伤、低血压、 败血症和/或败血性休克综合征后预测受试者中的肾功能障碍的发展的方 法，其中所述方法包括下述步骤：

a.确定物理创伤之后、低血压事件之后、败血症之后、和/或败血性 休克综合征之后从受试者中采集的样品中存在的抗炎细胞因子的水 平；

b.基于在步骤a)中确定的抗炎细胞因子的水平预测肾功能障碍在 受试者中的发展。

本发明的方法预测受试者在事件后(即物理创伤后，低血压事件之后， 或者在败血症或败血性休克综合征的发展之后)发展肾功能障碍的可能 性。因而该方法是预后方法。当受试者具有通过步骤a)确定的低于抗炎细 胞因子的正常水平的抗炎细胞因子的水平时，他们可被确定具有发展肾功 能障碍的大于正常的可能性。当受试者具有通过步骤a)确定的高于抗炎细 胞因子的正常水平的抗炎细胞因子的水平时，他们可被确定具有发展肾功 能障碍的低于正常的可能性。

抗炎细胞因子的正常水平是由对照组的个体呈现的事件后水平，对照 组的个体在物理创伤后、低血压事件之后或期间、败血症之后或期间、和 /或败血性休克综合征之后或期间的第五天不具有肾功能障碍。全部的对照 个体将由于前述事件而维持一定程度的亚临床肾损伤，但是不会具有临床 显著的肾损伤。确定个体是否具有肾功能障碍是充分在本领域技术人员的 能力范围内的临床问题。但是，出于清楚的目的，通过排泄代谢产物的能 力的减弱来表征肾功能障碍，所述代谢产物是系统地累积的并是通过临床 上病理的肾功能测试(在正在进行的状态中，肾功能可能是严重肾衰竭、 尿毒症或慢性肾损伤)可检测的。例如，下面描述确定肾功能的MDRD 方法。对照组可以经历与被诊断的受试者相同或相似的事件(即相同或相 似的创伤、低血压事件、败血症、和/或败血性休克综合征)。对照组可以 包括30个或更多个体。对照组可以包括300个或更多个体。

可以预先确定正常水平(即正常的事件后水平)。出于清楚的目的而不 是想要进一步限制，IL1ra的正常水平可以是22700pgml^-1或以上。TNFsr2 的正常水平可以是20000pgml^-1或以上。TNFsr1的正常水平可以是20000 pgml^-1或以上。

具有在步骤a)中确定的逐步地少于100％的抗炎细胞因子正常水平的 抗炎细胞因子水平的受试者处于发展肾功能障碍的逐步大于正常的风险 (progressively greater than normal risk)。因而，当在步骤a)确定的抗炎细 胞因子水平是正常水平的95％或更少、90％或更少、80％或更少、70％或 更少、60％或更少、50％或更少、40％或更少、30％或更少、20％或更少、 10％或更少时，受试者处于发展肾功能障碍的逐步大于正常的风险。这样 的受试者可以处于在物理创伤之后5天、在低血压事件之后或期间、在败 血症之后或期间、和/或在败血性休克综合征之后或期间具有肾功能障碍的 大于正常的风险。

如果在步骤a)中确定的IL1ra的水平少于12000pgml^-1，将预测受试者 将发展肾功能障碍。如果在步骤a)中确定的TNFsr2的水平少于11500 pgml^-1，将预测受试者将发展肾功能障碍。

可以通过物理创伤、低血压、败血症和/或败血性休克综合征后诱发的 促炎反应进一步表征通过这些事件诱发的肾功能障碍。这样的炎症反应通 常遵循传统的全身炎症反应(systemic inflammatory response,SIRS)的模 式。这样，将根据本发明预后的肾功能障碍可以是通过急性的(可能是瞬 时的)尿促炎反应(例如，IL-18和/或中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋 白(NGAL)的升高的尿水平)诱发的那些肾功能障碍。

要预后的肾功能障碍可以是早期肾功能障碍、晚期肾功能障碍或一般 性肾功能障碍。早期肾功能障碍发生在诱发肾功能障碍的事件的两天内。 晚期肾功能障碍发生在这种事件后5天或更迟。肾功能障碍可以被限定为 从正常的肾小球滤过率下降25％或更多。正常的肾小球滤过率是事件前速 率。可以根据MDRD研究组公式建立肾小球滤过率。肾功能障碍的这样 的急性的形式可以与自身免疫介导的慢性肾功能障碍区分开，自身免疫介 导的慢性肾功能障碍是一种与共存的自身免疫状况平行的经延长的时期 在临床上明显的状况(即因为已经很好地建立肾功能障碍，不要求生物标 志物预测几天后发生的肾功能障碍的发展)。

从受试者采集的样品可以是能够被用于分析其内的抗炎细胞因子的水 平的任何样品。例如，该样品可以是尿样、血样或血浆样品。特别优选的 是尿样。

步骤a)中分析的样品可以在事件(即物理创伤、低血压事件、败血 症发作和/或败血性休克综合征的发作)24小时内从受试者中获得。最佳 地在事件的12至24小时内获得样品。

步骤a)之前可以有从受试者获取样品的步骤。

本发明的对受试者中肾功能障碍的发展的预测基于对在列举的事件之 后的样品中存在的抗炎细胞因子的水平的确定。结果，应当清楚的是，在 列举的事件之后的样品中存在的抗炎细胞因子的水平可以是为了进行根 据本发明的预测所要求确定的唯一的细胞因子水平。因而也是清楚的是， 本发明的方法不要求为了进行根据本发明的预测而确定在列举的事件之 前的样品中存在的抗炎细胞因子的水平。

物理创伤是施加到身体上的外力对身体的影响，例如：通过外科手术 或通过对身体的撞击或切割(例如可能在汽车碰撞过程中经历的)导致的 损伤，或者；当血液与心肺旁路机的外表面交互时对血液的影响。由物理 创伤导致的肾功能障碍可以是手术后肾功能障碍。手术后肾功能障碍可以 在心脏、心血管或心肺手术之后。

个体是否具有低血压是临床问题并且因而充分在本领域普通技术人员 能力范围内。然而，为了避免疑问，成年人中的低血压可以被限定为收缩 压<80mmHg，或者平均动脉压(MAP)<50mmHg。低血压可以是延长的， 例如超过2小时。

个体是否具有败血症是临床问题并且因而充分在本领域普通技术人员 能力范围内。然而，为了避免疑问，如果严重怀疑或证明感染并且满足下 面的两个或更多个全身炎症反应综合征(SIRS)标准，可以考虑存在败血 症：

1.心率>每分钟90次(心跳过速)；

2.体温<36℃(97°F)或者>38℃(100°F)(低体温或发烧)

3.呼吸率>每分钟20次呼吸，或者，对于血液气体，P_aCO₂少于 32mmHg(4.3kPa)(呼吸急促或由于换气过度而低碳酸血)；以及

4.白细胞计数<4,000细胞/mm³或者>12,000细胞/mm³(<4x10⁹或>12x10⁹细胞/L)，或者大于10％带型。

个体是否有败血性休克是临床问题并且因而充分在本领域普通技术 人员能力范围内。然而，为了避免疑问，通过下面两个标准的存在可以限 定败血性休克：

1.通过阳性的血培养物的感染的证据；和

2.难治性低血压—尽管有充分的液体复苏和心输出量时的低血 压。在成人中，它被限定为在要求的使复苏的强心支持的建立之前收缩压 <90mmHg，或者MAP<60mmHg，或者收缩压从基线减少40mmHg。在 儿童中，它是BP<正常血压的2SD。

个体是否有SIRS是临床问题并且因而充分在本领域普通技术人员能 力范围内。然而，为了避免疑问，当存在下面的两个或更多个时诊断SIRS：

1.心率>每分钟90次；

2.体温<36或>38℃；

3.呼吸急促(高呼吸率)>每分钟20次呼吸或者，对于血液气体， P_aCO₂<4.3kPa(32mm Hg)

4.白细胞计数<4000细胞/mm³或者>12000细胞/mm³(<4x10⁹或> 12x10⁹细胞/L)，或者大于10％的未成熟中性粒细胞的存在。

抗炎细胞因子可以是体内能够抑制炎症反应的任何细胞因子并且可 以在样品(例如尿)中检测到。抗炎细胞因子可以是在肾组织中局部释放 的抗炎细胞因子。抗炎细胞因子可以是TNFsr1、TNFsr2或者IL-1ra。

该方法可以包含对多于一种类型的抗炎细胞因子的水平的分析。例 如，根据本发明的方法还可以包括下述步骤：

a’)确定在物理创伤后、低血压事件后、败血症后、和/或败血性休 克综合征后从受试者采集的样品中存在的一种或更多种其他抗炎细胞因 子的水平；

b’)基于在步骤a)和a”)中确定的抗炎细胞因子的水平预测发展中 的肾功能障碍在受试者中的发展。

当(i)通过步骤(a)确定的抗炎细胞因子水平低于正常水平，并且(ii) 通过步骤(a’)确定的抗炎细胞因子的水平低于正常水平，受试者发展肾功能 障碍的风险更大。

在这样的方法中可以使用前述抗炎细胞因子的任何组合。例如，在步 骤a)中确定的抗炎细胞因子可以是IL-1ra，且在步骤a’)中确定的一种或 更多种抗炎细胞因子可以是TNFsr2。

已经鉴定了即将发生的肾功能障碍的促炎标志物；促炎介质NGAL和 IL-18(Mishra等,Lancet,2005；365:1231-38)。在儿童的尿中的这些物质的 升高已经与几天后发展肾功能障碍的增高的风险关联。但是，基于通过本 发明人提供的假设确定，个体仅具有升高的促炎反应可能不足以建立发展 肾功能障碍的风险。

本方法可以包含一种(或多于一种类型)的抗炎细胞因子和一种或更 多种促炎介质的水平的事件后的分析。

促炎介质可以是能够诱发体内炎症反应的任何介质，其与肾功能障碍 的发展有关，并且其可以在尿中检测到。促炎介质可以是IL-18和/或 NGAL。

在本发明的另一方面，提供一种在前述权利要求的方法中使用的试剂 盒，其中该试剂盒包括：

(a)一种或更多种试剂，所述一种或更多种试剂用于检测一种或更多 种抗炎细胞因子的量；

(b)说明书，所述说明书用于使用所述一种或更多种试剂来检测所 述一种或更多种抗炎细胞因子。

所述试剂盒还包括用于检测一种或更多种促炎介质的一种或更多种 试剂，和用于使用所述一种或更多种试剂来检测所述一种或更多种促炎介 质的说明书。

所述试剂盒还可以包括用于使用对所述一种或更多种抗炎细胞因子 的检测来获得肾功能障碍的预后的说明书。该说明书可以根据在本发明的 第一方面中提供的肾功能障碍的预后的步骤。该试剂盒还可以包括用于使 用对所述一种或更多种促炎介质的检测来获得对肾功能障碍的预后的说 明书。由于说明书和试剂要能够被使用以便实践根据本发明的第一方面在 上面描述的方法，当上下文允许时，本发明的第一方面的所有特征可以包 含在本发明的第二方面中。结果，例如，在本发明的第一方面中提及的抗 炎细胞因子(或其组合)和促炎介质可以是在本发明的第二方面中在上面 列举的那些。

在本发明的第三方面中，提供一种治疗由物理创伤、低血压、败血症 和/或败血性休克综合征诱发的肾功能障碍的方法，其中所述方法包括下述 步骤：(i)根据本发明的第一方面的任何方法预后肾功能障碍；以及(ii) 当鉴定出受试者处于发展肾功能障碍的增加的风险时，应用治疗措施来治 疗或消除将要发生的肾功能障碍。该方法超出目前的治疗干预措施的优点 是在可以防止完全肾衰竭的阶段施用治疗。在步骤(ii)中应用的治疗措 施可以是：保持超常血压；确保足够的组织氧传递；施用类固醇；肾替代 疗法；透析；或者其任何组合。该发明的另一优点是允许重症监护管理人 员在患者的重症监护期间较早鉴定在重症监护中可能花比本来预料的更 长时间的那些个体，提供对人员部署的更早计划。

上面提供了许多列举，其中提供了本发明的各个方面的任选的特征。 列举的各个成员被单独地涵盖作为本发明的潜在特征。

现在将参考附图通过例子的形式描述本发明，其中：

图1示出术后尿TNFsr2的接收机/操作特征(receiver/operator  characteristics,ROC)曲线，示出区分具有和不具有肾功能障碍的患者的灵 敏度和特异性，所述肾功能障碍通过在术后第5天MDRD eGFR从术前值 下降超过25％定义。

图2示出术后尿IL1ra的接收机/操作特征(ROC)曲线，示出区分具 有和不具有肾功能障碍的患者的灵敏度和特异性，所述肾功能障碍通过在 术后第5天MDRD eGFR从术前值下降超过25％定义。

图3示出说明在下面介绍的研究中的每一天具有正常肾功能(NF)、 或者通过从那一天的基线的超过25％的MDRD下降定义的肾功能障碍 (RD)、或者其肾功能数据未知(NK)的患者的数量的表格。

试验方法

经历选择性心脏外科手术的四百零八个连续的患者(consecutive  patients)被研究。这些患者从Royal Victoria Hospital Belfast in Northern  Ireland的心脏外科病房(n＝304)和Papworth Hospital NHS Foundation Trust  in Cambridge,England的心脏外科病房(n＝104)招募。接收到当地伦理委 员会批准并且得到书面的患者知情同意书。排除准则包括依赖术前透析的 肾衰竭、严重的肾疾病((eGFR<40ml min^-1))或糖尿病。术前血管紧张 素转换酶(ACE)抑制剂治疗的患者没有被从该研究中排除。在两个中心 的麻醉操作都基于异丙酚和芬太尼的使用。在大部分患者中使用异氟烷作 为辅助的麻醉剂或者来控制血压。潘可龙被用来提供肌肉松弛。利用吗啡 输注来术后止痛。

在408个选择性心脏外科手术患者中，测量术后24小时的尿IL1ra和 TNFsr2。在根据存在或不存在肾功能障碍而分组的患者中比较对每种细胞 因子的术后尿反应，所述肾功能障碍被定义为在以下时期内发生估计的肾 小球滤过率(eGFR)从基线下降超过25％(如通过肾疾病饮食修改 (modification of diet in renal disease,MDRD)的方法计算的)：(1)术后前 24和(2)48小时内(早期肾功能障碍)、(3)在术后第五天(晚期肾功 能障碍)或者(4)在术后5天时期内的任何时间(早期和晚期结合)。

细胞因子分析(ELISA)

通过R&D系统Quantikine固相ELISA技术测量细胞因子。该系统由 以下组成：共轭物、标准、试验稀释剂、校准物稀释剂(calibrator diluent)、 洗涤缓冲液浓缩物、颜色试剂A、颜色试剂B和停止液。在开始试验前试 剂应当处于室温。微量培养板包括96个孔。该微量培养板包被有捕获抗 体。对各个孔，添加试验稀释剂。一式两份的标准和样品被添加到板中并 且在室温下培养2h。通过捕获抗体(固定的抗体)结合样品中存在的任何 分析物。在培养后，对板吹气和利用供应的洗涤缓冲液洗涤板四次来洗掉 任何未结合的材料。洗涤后，向板中添加辣根蛋白酶(HRP)标记的检测 抗体(共轭物)并且在室温下进一步培养。再一次，在培养后，对板吹气 和洗涤板4次。洗掉任何未结合的检测抗体。在下一步骤中，制备的底物 溶液四甲基联苯胺(TMB)被添加到孔中并且蓝颜色与在样品中存在的分 析物成比例地显现。在20分钟培养后，颜色(蓝)与细胞因子浓度成比 例地显现。为了分析，颜色显现被停止，将孔中的颜色变为黄色。颜色在 450nm的吸光度被测量，其在酶标仪中读取。

在心肺转流术或血管形成术终止之后24小时得到用于尿IL-1ra和 TNFsr2测量的尿样。

肾功能障碍的测量

在1989年，Kopple等作为肾疾病饮食修改研究组的成员发布了他们 在95个患者中调查营养状况对慢性肾机能不全的影响的发现。只有轻微 的膳食蛋白质限制的控制饮食对肾疾病的进展的影响与改变蛋白质限制 的程度和减少的磷摄入量的3种研究饮食比较。作者发现，营养失调和较 低能量摄入为特征的患者具有较低的GFR水平。存在一些性别差异，男性 示出在GFR和手臂肌肉面积和百分比标准体重之间的关联，尤其在试验饮 食开始时。对女性，GFR与膳食能量摄入关联[Kopple等,Kidney lnt Suppl  1989；27]。该研究从MDRD组的合理发展是以下想法：对患者的年龄体重、 性别和种族与血清肌酸酐一起的分析将允许估计GFR。该假设承认，单独 血清肌酸酐浓度不足以反应肾功能并且应当考虑与在Kopple的研究中鉴 定为影响肾功能的因素一起考虑。

为了开发预测公式，在基线时期包含1628名患者，其中1070名是随 机选择的作为训练样本，其中剩余的558名患者构成验证样本。然后作者 对训练样本使用逐步回归来开发公式，该公式然后被测试并且与Cockcroft 和Gault公式以及在验证样本中的肌酐清除率测量比较。

人们发现，若干测量的变量与较低的GFR关联。这些包括较高的血清 肌酸酐、较高的血清尿素和较低的血清白蛋白水平浓度。与较低GFR关联 的独立变量包括较老的年龄组、女性性别和非黑色种族(对所有因素P< 0.001)。

多重回归模型解释在验证样本中的GFR的对数中的90.3％的变量。测 量的肌酐清除率过高估计GFR达19％，并且通过Cockcroft-Gault公式预 测的肌酐清除率过高估计GFR达16％。调节该过高估计之后，通过测量 的肌酐清除率或Cockcroft-Gault公式预测的GFR的对数的变量的百分比 分别是86.6％和84.2％。

从下面的公式计算MDRD研究组估计的GFR：

X＝32788x肌酸酐-1.154x年龄-0.203x常量，其中对白种男性常量 是1，女性是0.724，以及对非裔美国人是1.21。

从上面的公式计算在当前研究中MDRD估计的GFR。根据上述公式 在术前0天和术后1、2和5天计算MDRD GFR。对各个单独的术后天以 及所有术后天一起，患者可以被划分成正常的和异常的肾功能组，其中“正 常的”和“异常的”是通过分别地维持MDRD GFR的下降小于或大于基线的 25％的那些来定义的。

然后概括来说，对于术后，细胞因子值被在正常和异常组之间比较， 其中正常和异常是根据下面提及的4个定义限定的。

定义1：“异常”被定义为具有第1天MDRD从基线下降>25％(早期 肾功能障碍)。

定义2：“异常”被定义为具有第2天MDRD从基线下降>25％(早期 肾功能障碍)。

定义3：“异常”被定义为具有第5天MDRD从基线下降>25％(晚期 肾功能障碍)。

定义4：“异常”被定义为在第1、2和5天中具有至少一个MDRD值 从基线下降>25％(一般性肾功能障碍)。

统计方法

数量的变量被概括为平均数和标准偏差，除了具有严重偏态分布的那 些，对其使用中位数和四分位范围。对数量的变量使用独立的样品Z检验 或Mann-Whitney U检验，以及对类别变量使用卡方检验或费希尔精密检 验(Fisher’s exact test)来得到组之间的比较。使用接收机-操作特征(ROC) 曲线来检查细胞因子测量区分在术后时期具有和不具有肾功能障碍的患 者的能力。该曲线下的面积提供区分能力的量度；值1指示完美的区分而 值0.5指示没有比偶然更大的区分能力。

结果

1.肾功能障碍的患者的数量和他们的特征

图3中示出在术后1、2和5天发展肾功能障碍的患者的数量。表1 示出根据是否存在肾功能障碍分类的患者的特征，肾功能障碍通过在术后 5天时期内的任何时间从基线eGFR下降>25％定义。在体重增加、男性性 别或未曾进行术内多巴胺输注的患者中，肾功能障碍的可能性更大(表1)。 对术后用于出血/心脏压塞的再次胸骨切开或术后肾上激素输注的要求与 肾功能障碍关联。肾功能障碍的发展显著地延长在重症监护/加护病房中的 停留时间(表1)。

*P＜0.05**P<0.01；#在362名CPB患者中；在359名阻断患者中中位数(四分位范围)

表1。该表格示出具有和不具有肾功能障碍的患者在术前和术后的特 征，肾功能障碍被定义为在术后期间的任何时间从基线eGFR下降>25％ (平均数+/-SD或n(％))。在本表中使用的缩写：标准偏差(SD)；新鲜 冰冻血浆(FFP)红细胞压积(PRBC)；主动脉内的气囊泵(IABP)；心 脏外科重症监护病房(CSICU)；心肺分流术(CPB)；血管紧张素转换酶 抑制剂(ACEI)；血管紧张素-2(AG-II)。

2.细胞因子结果

表2中示出了细胞因子结果。在发展晚期(第5天)肾功能障碍的那 些患者中存在显著较低的术后24小时尿IL1ra和TNFsr2水平(表2)。在 图1和图2中示出的相关接收机操作特征(ROC)曲线中示出在预测第5 天(晚期)肾功能障碍中比正常的术后尿IL1ra和TNFsr2水平更低的相对 值。

3.讨论

本研究的主要发现是：

如果患者被分组成在术后第五天具有和不具有肾功能障碍的患者，相 比正常肾功能组，异常肾功能障碍组具有显著地降低的24小时尿IL1ra和 TNFsr2。

表2：表格示出，在术后任何时间(任何MDRD>25％下降)以及在术 后第1天(MDRD D1>25％下降)、第2天(MDRD D2>25％下降)以及第 5天(MDRD D5>25％下降)，根据MDRD估计的从术前基线的25％eGFR 百分比下降分类的患者中，术后24小时的尿细胞因子浓度(中位数和四 分位范围IQR)(*P<0.05)。