半巢式聚合酶链反应酶切分型快速检测军团菌及其应用

摘要

本发明公开了一种半巢式聚合酶链反应酶切分型快速检测军团菌及其应用。检测方法是：首先，增加一对引物Leg 226F和Leg 226R；接着，以386bp扩增片段为模板，进行第二次PCR扩增，得226bp片段产物；最后，对226bp的PCR扩增产物作琼脂糖凝胶电泳分析，选阳性者用FastDigestTaa I核酸内切酶作酶切分型，观察酶切分型结果。该检测方法可用于临床痰液标本的军团菌快速检测与分型，也可用于环境水样本的军团菌快速检测与分型，还可用于临床标本如支气管灌洗液的军团菌快速检测与分型。本发明半巢式PCR-酶切分型检测军团菌的方法具有简便、快速，敏感性和特异性高，可直接用于临床标本检测。