利考非隆的胆碱盐和氨丁三醇盐

摘要

本发明涉及利考非隆的胆碱盐和氨丁三醇盐。

说明书

发明描述

本发明涉及利考非隆的碱加成盐，它们的制备方法，含这种盐的药物 制剂及其用途。

利考非隆是环氧合酶和5-脂肪氧合酶的有前景抑制剂的INN命名，其 适于治疗类风湿病和预防性治疗变态反应引发的障碍，关于这点，例如参 见Drugs of the Future 1995，20(10)：1007-1009。此外，利考非隆具有软骨 保护(WO-A 03/020267)、胃保护(WO-A 03/097041)和抗肿瘤性能(WO-A 08/012110)。

所述参考文献均没有描述利考非隆的盐。仅提到以下通式代表的稠合 吡咯可形成碱加成盐，例如与无机碱如氢氧化钠或钾，或与有机碱如单-、 二-或三乙醇胺等的盐：

利考非隆的溶解度和因此它的生物利用率相当低。而且，当在升高的 温度下储存几周时利考非隆经受降解。

本发明的目的是提供在溶解度方面改进的利考非隆的另一形式。另一 目的是提供在稳定性方面也改进的利考非隆形式。

现在令人惊讶地发现这些目的通过利考非隆的胆碱，特别是氨丁三醇 盐实现。

因此，本发明涉及：

(i)式I的6-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-7-苯基-2，3-二氢-1H-吡咯里嗪-5-基乙酸 胆碱盐：

(ii)式II的6-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-7-苯基-2，3-二氢-1H-吡咯里嗪-5-基乙 酸氨丁三醇盐：

附图简述

这些显示在下图中：

图1(A)实施例1A中制备的胆碱盐和(B)实施例1B中制备的胆碱盐的X射 线粉末衍射图；

图2实施例1B中制备的胆碱盐的IR光谱；

图3实施例2中制备的氨丁三醇盐的X射线粉末衍射图；

图4实施例2中制备的氨丁三醇盐的IR光谱；和

图5在升高的温度下储存(A)4周和(B)8周以后，利考非隆、利考非隆胆碱 盐(实施例1B中制备的)和利考非隆氨丁三醇盐(实施例2中制备的)中 已知和未知杂质之和。

本发明胆碱盐可通过它们的X射线衍射图(粉末衍射图)表征。根据一 个实施方案，本发明涉及胆碱盐的两种结晶形式a)和b)，其X射线衍射图 具有用Bruker-AXS D8 Advance粉末X射线衍射仪(Bruker-AXS， Karlsruhe德国)使用单色CuKα1辐射和Vantac探测器测定的以下特征 2θ(±0.2)值(值以°2θ(±0.2)表示)：

a)8.7，12.3，13.8，14.2，14.5，15.5，18.6，21.5；或

b)9.0，9.4，12.5，15.4，16.2，17.1，20.0，20.3，21.6。

根据具体实施方案，本发明涉及具有图1A或图1B所示X射线衍射 图的胆碱盐。

本发明胆碱盐也可通过它们的IR光谱表征。根据一个实施方案，本 发明涉及在IR光谱中峰值在1580±0.5和峰值在1358±0.5cm^-1的胆碱盐。 根据具体实施方案，本发明涉及具有图2所示IR光谱的胆碱盐。

胆碱盐可如下制备：在50℃下将利考非隆溶于无水乙醇中，将胆碱在 甲醇中的溶液加入溶解的利考非隆中，同时加热至65℃，蒸发一部分溶剂， 同时使混合物冷却，加入二乙醚并回收沉淀物。

作为选择，胆碱盐可如下制备：在75℃下将利考非隆溶于无水乙醇中， 将胆碱在水中的溶液加入溶解的利考非隆中，同时保持75℃的温度，在回 流下搅拌，使混合物冷却至35℃，在15分钟内加入第一份二乙醚，同时 保持35℃的温度，在30分钟内加入第二份二乙醚，同时保持35℃的温度， 在2小时内将悬浮液冷却至23℃，在该温度下搅拌约15小时，在2小时 内将悬浮液进一步冷却至-13℃，在该温度下搅拌约2小时，并回收沉淀物。

本发明氨丁三醇盐可通过它们的X射线衍射图(粉末衍射图)表征。根 据一个实施方案，本发明涉及氨丁三醇盐，其X射线衍射图具有用 Bruker-AXS D8 Advance粉末X射线衍射仪(Bruker-AXS，Karlsruhe德 国)使用单色CuKα1辐射和Vantac探测器测定的以下特征2θ(±0.2)值(值 以°2θ(±0.2)表示)：8.5，9.1，9.8，11.0，12.8，17.5，17.9，21.3，22.0， 23.3，24.0和31.6。根据具体实施方案，本发明涉及具有图3所示X射线 衍射图的氨丁三醇盐。

氨丁三醇盐也可通过它们的IR光谱表征。根据一个实施方案，本发 明涉及IR光谱的峰值在1650±0.5和峰值在1379±0.5cm^-1的氨丁三醇盐。 根据具体实施方案，本发明涉及具有图4所示IR光谱的氨丁三醇盐。

氨丁三醇盐可如下制备：将利考非隆溶于无水乙醇中，在47℃下将氨 丁三醇加入溶解的利考非隆中，在该温度下搅拌约1小时，加入二异丙醚， 同时保持47℃的温度，在3小时内将悬浮液冷却至27℃，在该温度下搅拌 约1小时，在1小时内将悬浮液进一步冷却至-13℃，在该温度下搅拌约2 小时并回收沉淀物。

当与游离酸以及与氨丁三醇盐比较时，本发明胆碱盐显示出改进的溶 解度。当在适度升高的温度下储存几周时，利考非隆胆碱盐比游离酸更稳 定。

当与游离酸比较时，本发明氨丁三醇盐显示出改进的溶解度。当在升 高的温度下储存几周时，利考非隆氨丁三醇盐比游离酸和胆碱盐更稳定。

已证明本发明利考非隆盐为强效的环氧合酶和/或脂肪氧合酶抑制剂。

它由于对酶环氧合酶(CO)和脂肪氧合酶(LO)(IC₅₀LO/IC₅₀CO～1)的 强止痛作用和类似抑制作用而值得注意。因此它们可用于治疗与花生四烯 酸代谢改变相关的障碍。应特别提到类风湿病和防治变态反应引发的障碍。 因此，本发明利考非隆盐代表有效的消炎药、止痛药、退热药和抗过敏药 且具有抗支气管收缩剂的活性，还可用于预防血栓形成及预防过敏性休克 和脓毒性休克以及用于治疗皮肤病障碍如银屑病、荨麻疹、过敏性和非过 敏性来源的急性和慢性皮疹。另外，它们可用于治疗高胆固醇血症。

本发明利考非隆盐可作为单一的治疗活性成分或作为与其它治疗活性 成分的混合物给药。它们可直接给药，但它们通常以药物组合物的形式， 即作为活性成分与一种或多种可药用赋形剂，尤其是载体、稀释剂和/或添 加剂的混合物给药。化合物或组合物可例如经肠如口服或直肠给药，或者 胃肠道外如皮下或肌肉内给药，但它优选为口服剂量形式。

药物组合物和药物载体或稀释剂的性质取决于所需的给药模式。口服 组合物可为例如片剂或胶囊的形式，且可包含常用赋形剂如粘合剂(例如糖 浆、阿拉伯胶、明胶、山梨醇、黄芪胶或聚乙烯吡咯烷酮)、填料(例如乳 糖、糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨醇或甘氨酸)、润滑剂(例如硬脂酸镁、 滑石、聚乙二醇或二氧化硅)、分解质(例如淀粉)或润湿剂(例如月桂基硫酸 钠)。口服液体产品可以为含水或含油悬浮液、溶液、乳液、糖浆、酏剂或 喷雾剂等的形式，或可以为用水或其它合适载体重建的干粉形式。这种液 体产品可包含常用添加剂如悬浮剂、香料、稀释剂或乳化剂。具有常用药 物载体的溶液或悬浮液可用于胃肠道外给药。

本发明利考非隆盐特别适于制备用于胃肠道外给药的利考非隆溶液。 例如该盐可作为粉末提供，在给药以前将其溶于合适的溶剂中。合适的溶 剂是本领域中熟知的，包括例如具有10％乙醇的0.9％盐水。另外，溶液 可含其它辅助剂如常用于胃肠道外配制剂的那些，例如糖醇等。

用利考非隆治疗通过将有效量的利考非隆(通常根据药物实践配制)给 药于待治疗个体，优选哺乳动物，特别是人而进行。是否适应这种治疗和 它的进行形式取决于个体情况并服从医学评估(诊断)，其考虑到存在的病 征、症状和/或机能不良，及发展特殊病征、症状和/或机能不良的风险， 和其它因素。

治疗通常通过单日或多日给药，任选与其它活性成分或含活性成分的 产品一起或交替进行，使得以约10-约2000mg，特别是10-约1000mg的 日剂量供给待治疗个体。

以下实施例说明本发明而不限制它。

X射线粉末衍射图记录在Bruker-axs D8 Advance粉末X射线衍射仪 (Bruker-AXS，Karlsruhe，德国)上。在测量期间，样品架在平行于其表面 的平面中以20rpm旋转。测量条件如下：辐射：Cu Kα，Source 40kV/40mA， 发散狭缝0.6mm，防散射狭缝5.59mm，探测器狭缝10.28mm，起始角2°， 结束角55°，步进0.016°2θ。使用程序EVA(Bruker-AXS，Karlsruhe，德 国)评估原始数据。

IR光谱记录在装配有精确耐久性Diamond ATR装置的Thermo  Nicolet’s Avatar 330FT-IR上直接测量(测量模式：范围4000.0-500.0cm^-1， 探测极限(绝对值)0.075；敏感性50)。

实施例1

A.制备6-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-7-苯基-2，3-二氢-1H-比咯里嗪-5-基乙酸胆 碱盐

将0.25摩尔(94.97g)利考非隆在50℃下溶于1,050ml乙醇中。加入 74.02ml胆碱在甲醇中的45％溶液(相当于0.2625摩尔胆碱)，将该混合物 加热至65℃并保持在该温度下30分钟。其后，除去油浴并通过蒸发除去 约950ml溶剂。加入500ml二乙醚并过滤白色沉淀物，用200ml二乙醚洗 涤并在30℃下在真空中干燥。

收率：97.9g(＝81％)，化学纯度(HPLC)：99.7％(水含量：2.2％)

胆碱盐的X射线衍射图显示于图1A中。

B.制备6-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-7-苯基-2，3-二氢-1H-比咯里嗪-5-基乙酸胆 碱盐

将利考非隆(2.45kg)在乙醇(6.6L)中浆化。将浆料加热至75℃。引入 50％含水胆碱(1.65kg)，同时保持75℃的温度，将管线(line)用乙醇(3.2L) 冲洗。将所得溶液在回流(77℃)下搅拌30分钟，经0.3μm筒式过滤器过滤 并将过滤器用温乙醇(2.5L)冲洗。将溶液冷却至35℃，在15分钟内加入二 乙醚(19.3L)，同时保持35℃的温度。在30分钟内加入二乙醚(30.9L)，同 时保持35℃的温度。在2小时内将悬浮液冷却至23℃，在该温度下搅拌约 15小时，将该悬浮液在1小时内进一步冷却至-13℃并在该温度下搅拌2 小时。将产物离心分离，将滤饼用冷二乙醚(7.7L)洗涤。将湿滤饼在约30℃ 下干燥72小时。

收率：2.7kg(＝87％)，化学纯度(HPLC)：99.84％(水含量：3.5％)

胆碱盐的X射线衍射图和IR光谱分别显示于图1B和2中。

实施例2

制备6-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-7-苯基-2，3-二氢-1H-吡咯里嗪-5-基乙酸氨丁 三醇盐

将利考非隆(2.25kg)在乙醇(59.2L)中浆化。将浆料加热至47℃直至溶 解。引入氨丁三醇(0.79kg)，同时保持47℃的温度，将所得浆料在47℃下 搅拌1小时。在15分钟内加入二异丙醚(14.8L)，同时保持47℃的温度。 在3小时内将悬浮液冷却至27℃，在该温度下搅拌约1小时，将该悬浮液 在1小时内进一步冷却至-13℃并在该温度下搅拌2小时。将产物离心分离， 将滤饼用冷二异丙醚(7.1L)洗涤。将湿滤饼在约80℃下干燥15小时。

收率：2.73kg(＝92％)，化学纯度(HPLC)：＞99.9％(水含量：0.1％)

氨丁三醇盐的X射线衍射图和IR光谱分别显示于图3和4中。

实施例3

包含6-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-7-苯基-2，3-二氢-1H-吡咯里嗪-5-基乙酸胆碱 盐的药物组合物

以常规方式制备含以下成分的片剂：

127.2mg利考非隆-胆碱盐(相当于100mg利考非隆游离酸)

20mg羧甲基纤维素钠

90mg微晶纤维素

116mg Sepistab

16mg Kolidon

5mg Talkum

3mg硬脂酸镁

以常规方式制备含以下成分的片剂：

63.6mg利考非隆-胆碱盐(相当于50mg利考非隆游离酸)

8mg Kollidon VA 64

120mg Pharmaburst

25mg Kollidon CL

290mg甘露醇

5mg硬脂酸镁

实施例4

包含6-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-7-苯基-2，3-二氢-1H-吡咯里嗪-5-基乙酸氨丁 三醇盐的药物组合物

以常规方式制备含以下成分的片剂：

131.9mg利考非隆-氨丁三醇盐(相当于100mg利考非隆游离酸)

20mg羧甲基纤维素钠

88mg微晶纤维素

100mg Sepistab

16mg Kolidon

5mg Talkum

3mg硬脂酸镁

以常规方式制备含以下成分的片剂：

65.95mg ML3000-胆碱盐(相当于50mg利考非隆游离酸)

8mg Kollidon VA 64

120mg Pharmaburst

25mg Kollidon CL

290mg甘露醇

5mg硬脂酸镁

实施例5

与6-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-7-苯基-2，3-二氢-1H-吡咯里嗪-5-基乙酸相比，

6-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-7-苯基-2，3-二氢-1H-吡咯里嗪-5-基乙酸胆碱盐和

6-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-7-苯基-2，3-二氢-1H-吡咯里嗪-5-基乙酸氨丁三醇 盐的溶解度

5.1.在2-吡咯烷酮中的溶解度

将约500mg利考非隆(游离酸)或对应盐(实施例1A和2)悬浮于1ml 2- 吡咯烷酮中并混合30分钟。将温度保持在25℃。在离心分离以后，通过 具有UV探测的HPLC测定上清液中利考非隆的浓度。

表1

  化合物   溶解度[mg/mL]   利考非隆(游离酸)   47   利考非隆氨丁三醇盐   66   利考非隆胆碱盐   274

5.2.在禁食状态下模拟肠液(Fasted State Simulated Intestinal  Fluid(FaSSIF))中的溶解度

根据文献(例如Marques M，Dissolution Technologies，2004年5月) 制备FaSSIF。通过将1.74g NaOH颗粒、19.77g Na₂HPO₄^·H₂O和30.93g NaCl溶于5L水中而制备参考FaSSIF。使用1N NaOH将pH值调整至6.5。 通过将3.3g牛磺胆酸钠溶于500ml参考FaSSIF中而制备即用FaSSIF。 然后加入11.8ml 100mg/ml卵磷脂在二氯甲烷中的溶液，其后将溶剂二氯 甲烷在40℃下在真空下除去。其后将清澈溶液转移至2L量瓶中并用参考 FaSSIF补偿体积。

用利考非隆(游离酸)、利考非隆氨丁三醇盐(实施例2)和利考非隆胆碱 盐(实施例1A)进行溶解度研究。将试样放在烧杯中，加入FaSSIF和磁性 搅拌棒，使用磁搅拌器搅拌该混合物。在15分钟以后取出试样，过滤并通 过HPLC分析清澈滤液以测定利考非隆的浓度。

在100ml FaSSIF和30ml FaSSIF中进行溶出试验。选择较小体积以 模拟药物与肠液体积之间的生理比。

^＊：指的是利考非隆(游离酸)

实施例6

与6-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-7-苯基-2，3-二氢-1H-吡咯里嗪-5-基乙酸相比，

6-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-7-苯基-2，3-二氢-1H-吡咯里嗪-5-基乙酸胆碱盐和

6-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-7-苯基-2，3-二氢-1H-吡咯里嗪-5-基乙酸氨丁三醇 盐的稳定性

将原料(a)利考非隆、(b)利考非隆胆碱盐(实施例1A)和(c)利考非隆氨 丁三醇盐(实施例2)储存在40、50、60和70℃以及在40℃下具有75％相 对湿度的开口容器中。在储存4和8周以后分析试样。应用有效方法以量 化五种已知杂质以及未知杂质。结果显示于图5A和5A中。