一种野生型p53蛋白的分离纯化方法

摘要

本发明属于生物医药制品以及临床检测等相关领域，主要涉及一种野生型p53蛋白分离纯化的新方法。本发明的野生型p53蛋白的分离纯化方法，包括p53基因的克隆、构建重组表达质粒和蛋白诱导表达及纯化，基于原核系统诱导表达，超声裂解菌体，利用镍柱亲和层析来分离纯化所得裂解上清中的p53蛋白。本发明从原核系统诱导表达，超声裂解的菌体上清中利用镍柱亲和层析来分离纯化得到较大浓度的活性目的蛋白。本发明中没有进行包涵体的变性和复性，而是直接从超声裂解的上清中纯化蛋白，使得目的蛋白的活性得到了最大程度的保持，并通过优化诱导表达以及纯化方案使得目的蛋白的得率较之现有方法也有了较大的提高。