在5位上被取代的(氮杂)吲哚衍生物、包含它的药物组合物、中间体化合物及其制备方法

摘要

在式(Ⅰ)的5位上被取代的(氮杂)吲哚衍生物：

说明书

本发明涉及在5位上被取代的(氮杂)吲哚衍生物、包含它的药物组合物、中间体化合物及其制备方法。

更具体地说，本发明涉及在5位上被取代的(氮杂)吲哚衍生物，它对mPGES-1具有抑制活性。

已知前列腺素(PG)是合成并且释放入胞外空间、然后进入血浆、尿和其他生物流体的氧化脂肪酸。

它们是重要的生物调节剂、而且是调节胞内反应和细胞间通讯的炎症介体。

前列腺素E₂(PGE₂)具有调节肾功能、血管内平衡、骨重建、诱导发热、胃肠道功能和妊娠的重要生理作用。除这些生理功能外，PGE₂前列腺素作为急性炎症的有效介体起作用(诱导痛觉过敏、血管扩张和流体从血管释放：VaneJ.R.和Botting R.M.1997“Anti-inflammatorydrugs and their mechanism of action”Inflamm.Re s.47(2)：p·78)和慢性炎症。特别地，PGE₂前列腺素特别在关节炎症病理情况中大量存在。PGE₂前列腺素还在疼痛中起作用并且是有效的发热剂(AyoubS.S.等人，2004“Aceta-minophen-induced hypothermia in mice ismediated by a prostaglandin endoperoxide synthase 1gene-derived protein”，PNAS 101：11165-11169；Ivanov A.等人，2002“Prostaglandin E₂-synthesizing enzymes in fever：differential transcriptional regulation”，Am.J.Physiol.Regul·Integr.Comp.Physiol.283：R1104-R1117)。

负责合成PGE₂前列腺素的酶是前列腺素E合酶(PGES)，它将通过环加氧酶作用由花生四烯酸形成的内过氧化物PGH₂转化成PGE₂。在胞质级分和各种细胞类型中结合的膜中发现PGES。

已经鉴定了三种酶形式(Kudo I.等人，2005“Prostaglandin Esynthase，a terminal enzyme for prostaglandin E₂ biosynthesis”，Journal of Biochemistry and Molecular Biology 38，633-638)；其中微粒体PGES-1(mPGES-1)是膜结合酶，它需要谷胱甘肽作为其活性的必需辅因子。

mPGES-1表达由促炎刺激物例如IL-1β或LPS诱导(Proc.Natl.Acad.Sci.96：7220，1999)。它与COX-2共同定位于内质网和核被膜上(Lazarus M.等人，2002“Biochemical characterization ofmouse microsomal prostaglandin E synthase-1 and itscolocalization with cyclooxygenase-2 in peritonealmacrophages”Arch.Biochem.Biophys.397：336；Murakami M.等人，2000“Regulation of prostaglandin E2 biosynthesis byinducible membrane-associated prostaglandin E2 synthase thatacts in concert with cyclooxygenase-2”J.Biol.Chem.275：32783；Yamagata K.等人，2001“Coexpression of microsomal-typeprostaglandin E synthase with cyclooxygenase-2 in brainendothelial cells of rats during endotoxin-induced fever”J.Neurosci.15；21(8)：2669-77)。尽管两种酶(COX-2和mPGES-1)具有功能相关性且共表达，但是其在几种细胞系统中的诱导比例不同，从而显示了不同的调节诱导机理(J.Immunol.167：469，2001)。

已经证实抑制酶COX-2的药物有效缓解慢性炎症病理情况例如关节炎中的炎症和疼痛，而其延长应用可以诱导细胞因子例如TNFα和IL-1β过度产生导致的组织损害(Stichteno th D.O.2001“Microsomalprostagland in E synthase is regulated by proinflammatorycytokines and glucocorticoids in primary rheumatoid synovialcells”J.Immunol.167：469)。此外，这些药物延长应用与心血管副作用相关。这导致大量选择性COX-2抑制剂从市场上撤回和修订全部类型的这些药物的适应征。

近期研究努力定向于通过研究mPGES-1抑制剂克服COX-2抑制剂的副作用，目的在于研发在治疗炎症和疼痛中具有活性的药物(B.Samuelsson等人，“Membrane Prostaglandin E Synthase-1：A NovelTherapeutic Target”Pharmacol.Rev.59：207-224，2007)。

此外，大量研究证实PGE₂前列腺素是促进肿瘤的因子(L.R.Howe，“Inflammation and breast cancer.Cyclooxygenase/prostaglandinsignaling and breast cancer”，Breast cancer research 2007，9：210，Castellone M.D.等人，2005“Prostaglandin E₂ promotes coloncancer growth through a novel Gs-Axin-B-catenin”，Science 310，1504-1510；Mehrotra S.，等人，2006“Microsomal prostaglandin E₂in breast cancer：a potential target for therapy”，J.Pathol.208(3)：356-63；Nakano等人，2006“Induction of macrophagicprostaglandin E2 synthesis by glioma cells”J.Neurosurgery104(4)，574-582)，这些因子涉及血管发生、细胞增殖和细胞迁移功能。还发现选择性FANS和COX-2抑制剂通过抑制PGE₂抑制各种类型的肿瘤，包括结肠直肠、食管、乳腺、肺和膀胱肿瘤。来源于COX-2的PGE₂前列腺素通过结合实际受体和活化控制细胞增殖、迁移、细胞凋亡和血管发生的信号诱导肿瘤生长(Wang D.等人，2006“Prostaglandin and cancer”Gut.55(1)：115-22；Han C.等人，2006“Prostaglandin E₂ receptor EPl transactivates EGFR/MET receptortyrosine kinases and enhances invasiveness in humanhepatocellular carcinoma cells”，Journal of Cellular Physiology207：261-270)。

目前已经发现了在5位上被取代的对mPGES-1具有选择性抑制活性的(氮杂)吲哚衍生物。术语“(氮杂)吲哚衍生物”指定表示下文式(Ⅰ)范围内的化合物，其中由吲哚环表示的母核可以在任选地被氮原子取代的4、6和7位上具有一个或多个碳原子和在2-位和3-位碳原子之间具有单或双键。

本发明在第一个方面中涉及在5位上被取代的(氮杂)吲哚衍生物：

式(Ⅰ)

其中：

X是卤素原子或(C₁-C₃)烷基、三氟甲基、硝基、氨基、氰基、二(C₁-C₃)烷基氨基、羟基、(C₁-C₃)烷氧基、苯基或(C₁-C₃)烷基苯基；

Y和Z可以相同或不同，是氢或卤素原子或(C₁-C₃)烷基、三氟甲基、硝基、氨基、二(C₁-C₃)烷基氨基、羟基、(C₁-C₃)烷氧基、苯基、COOH、(C₁-C₃)烷基-COOH、(C₂-C₃)烯基-COOH、COOR，其中R是直链或支链(C₁-C₆)烷基或羟基烷基、CONH₂、SO₂CH₃、SO₂NHCH₃或NHSO₂CH₃基团；

G1、G2和G3可以相同或不同，是氮原子或CH基团；

R1是(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₇)环烷基、(C₁-C₆)烷基OR^I、(CH₂)_nNR^IIR^III、(CH₂)_nCONR^IIR^III、(CH₂)_nCOR^I、(CH₂)_nCOOR^II、(CH₂)_nOCOR^I、SO₂R^I、(CH₂)_nNR^IISO₂R^I、(CH₂)_nSO₂R^I基团，其任选地被1-3个羟基取代，其中n是1-6的整数，R^I是(C₁-C₃)烷基或(C_1-C₃)烷基OH基团，且R^II和R^III可以相同或不同，是氢原子或(C₁-C₃)烷基；

W是σ键或(C₁-C₆)烷基、(C₂-C₆)烯基、O(C₁-C₆)烷基、O(C₂-C₆)烯基、C(O)NH、(CH₂)_pCO(CH₂)_q或(CH₂)_pC(OH)(CH₂)_q基团，其中p和q可以相同或不同，是0-3的整数；

R2是苯基、吡啶或(C₃-C₇)环烷基基团，其任选地被1-3个取代基取代，所述取代基可以相同或不同，由L-M基团表示，其中L是σ键或(C₁-C₆)烷基、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基、O(C₁-C₆)烷基、O(C₂-C₆)烯基、O(C₂-C₆)炔基，且M是氢或卤素原子或OH、CF₃、NO₂、CN、COOR^II、SO₂NHR^II、CH₂CONR^IIR^III、NR^IIR^III、SO₂R^IV、NHSO₂R^IV、POR^IVR^V或OPOR^IVR^V基团，其中R^II和R^III可以相同或不同，具有上述含义，且R^IV和R^V可以相同或不同，是(C₁-C₃)烷基，

条件是

当G1、G2和G3都是CH基团时，R1是(C₁-C₆)烷基或(C₃-C₇)环烷基，其任选地被1-3个羟基取代，W是σ键，且2位和3位碳原子之间的键是双键，

R2不是苯基或吡啶基团，其任选地被1-3个取代基取代，所述取代基可以相同或不同，选自卤素、任选地被羟基取代的(C₁-C₆)烷基、三氟甲基、硝基、氨基、二(C₁-C₃)烷基氨基、羟基、(C₁-C₃)烷氧基、COOH、COOR^II、SO₂CH₃、SO₂NHCH₃、NHSO₂CH₃、POR^IVR^V、OPOR^IVR^V、(C₁-C₆)烷基-COOH和(C₂-C₆)烯基-COOH，

且条件是

当G1是N且G2和G 3是CH基团时，R2不是二价芳族基团，其被一个L-M基团取代，该基团表示为O(C₁-C₆)烷基、O(C₂-C₆)烯基和O(C₂-C₆)炔基；

及其生理学上可接受的加成盐、立体异构体、对映异构体、水合物、溶剂合物和多晶型物。

2位和3位碳原子之间的虚线意指这种键可以是单或双键。可以存在于式(Ⅰ)化合物上的各种烷基链可以是直链或支链的。

就一些取代基而言，本发明式(Ⅰ)的化合物可以包含不对称碳原子且由此可以是立体异构体和对映异构体形式。这种取代基的典型实例是2-丁醇、2-甲基丁基、2-丁酸、2-甲基丙酸和1，2-戊二醇。

优选卤素是溴、氯或氟。

X的优选含义是卤素、(C₁-C₃)烷基、三氟甲基、硝基、氰基和(C₁-C₃)烷氧基。X的特别优选的含义是Cl、Br、F、三氟甲基和硝基。

Y和Z的优选含义是H、卤素、硝基、COOH、(C₁-C₃)烷基、三氟甲基和(C₁-C₃)烷氧基。Y和Z的特别优选含义是H、Cl、Br、F、三氟甲基、硝基、COOH、甲基、乙基、甲氧基和乙氧基。

R1的优选含义是(C₁-C₃)烷基、(C₁-C₃)烷基OR^I、(CH₂)_nNR^IIR^III、(CH₂)_nCONR^IIR^III、(CH₂)_nCOR^I、(CH₂)_nCOOR^II、(CH₂)_nOCOR^I、SO₂R^I、(CH₂)_nNR^IISO₂R^I、(CH₂)_nSO₂R^I基团，其任选地被1-3个羟基取代，其中n是1-4的整数，R^I是(C₁-C₃)烷基或(C₁-C₃)烷基OH基团，且R^II和R^III可以相同或不同，是氢原子或(C₁-C₃)烷基。

R1的特别优选含义是(C₁-C₃)烷基、(C₁-C₃)烷基OR^I、(CH₂)_nCONR^IIR^III、(CH₂)_nCOR^I、(CH₂)_nCOOR^II、(CH₂)_nOCOR^I、SO₂R^I、(CH₂)_nNR^IISO₂R^I、(CH₂)_nSO₂R^I基团，其任选地被1-3个羟基取代，其中n是1-3的整数，R^I是CH₃、C₂H₅、CH₂OH或C₂H₄OH基团，且R^II和R^III可以相同或不同，是氢原子或CH₃、C₂H₅基团。

W的优选含义是σ键或(C₁-C₃)烷基、(C₂-C₄)烯基、O(C₁-C₃)烷基、O(C₂-C₃)烯基、C(O)NH、(CH₂)_pCO(CH₂)_q或(CH₂)_pC(OH)(CH₂)_q基团，其中p和q可以相同或不同，是1-3的整数。

W的特别优选含义是σ键或CH₂、C₂H₄、CH＝CH、OCH₂、OC₂H₄、OCH＝CH、C(O)NH、(CH₂)_pCO(CH₂)_q或(CH₂)_pC(OH)(CH₂)_q基团，其中p和q可以相同或不同，是1-2的整数。

R2的优选含义是苯基、吡啶或(C₃-C₇)环烷基基团，其任选地被1-2个取代基取代，所述取代基可以相同或不同，由L-M基团表示，其中L是σ键或(C₁-C₃)烷基、(C₂-C₄)烯基、(C₂-C₄)炔基、O(C₁-C₃)烷基、O(C₂-C₄)烯基、O(C₂-C₄)炔基，且M是氢或卤素原子或CF₃、CN、COOR^II、SO₂NHR^II、CH₂CONR^IIR^III、NR^IIR^III、SO₂R^IV、NHSO₂R^IV、POR^IVR^V或OPOR^IVR^V基团，其中R^II和R^III可以相同或不同，是氢原子或(C₁-C₃)烷基，且R^IV和R^V可以相同或不同，是(C₁-C₃)烷基。

R2的特别优选含义是苯基、吡啶或(C₃-C₇)环烷基基团，其任选地被1个取代基取代，所述取代基由L-M基团表示，其中L是σ键或CH₂、C₂H₄、CH＝CH、C≡C、OCH₂、OC₂H₄、OCH＝CH、OC≡C基团，且M是氢或卤素原子或CF₃、CN、COOR^II、SO₂NHR^II、CH₂CONR^IIR^III、NR^IIR^II、SO₂R^IV、NHSO₂R^IV、POR^IVR^V或OPOR^IVR^V基团，其中R^II和R^III可以相同或不同，是氢原子或CH₃、C₂H₅基团，且R^IV和R^V可以相同或不同，是CH₃或C₂H₅基团。

基团W-R2的第一个特别优选的含义是，其中W是σ键或CH₂或C₂H₄基团，R2是任选地被1-3个取代基取代的苯基，所述取代基可以相同或不同，选自Br、Cl和F原子和CH₃、C₂H₅、OCH₃、OC₂H₅、CN、CH₂CN和CH₂CONH₂基团。

基团W-R2的第二个特别优选的含义是，其中W是σ键或CH₂或C₂H₄基团，R2是任选地被1-3个取代基取代的吡啶基团，所述取代基可以相同或不同，选自Br、Cl和F原子和CH₃、C₂H₅、OCH₃、OC₂H₅、CN、CH₂CN和CH₂CONH₂基团。

基团W-R2的第三个特别优选的含义是，其中W是σ键或CH₂或C₂H₄基团，R2是任选地被1-3个取代基取代的环己基，所述取代基可以相同或不同，选自Br、Cl和F原子和CH₃、C₂H₅、OCH₃、OC₂H₅、CN、CH₂CN和CH₂CONH₂基团。

根据取代基性质的不同，式(Ⅰ)的化合物可以与生理学上可接受的有机或无机酸或碱形成加成盐。

生理学上可接受的无机酸的典型实例是盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸和硝酸。

生理学上可接受的有机酸的典型实例是乙酸、抗坏血酸、苯甲酸、柠檬酸、富马酸、乳酸、马来酸、甲磺酸、草酸、对-甲苯磺酸、苯磺酸、琥珀酸、单宁酸和酒石酸。

生理学上可接受的无机碱的典型实例是：氨、钙、镁、钠和钾。

生理学上可接受的有机碱的典型实例是：精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、N-甲基葡糖胺、葡萄糖胺、葡萄糖、组氨酸、N-(2-羟基乙基)哌啶、N-(2-羟基乙基)吡咯烷、异丙基胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺和氨丁三醇。

本发明在第二个方面中涉及式(Ⅰ)的在5位上被取代的(氮杂)吲哚衍生物及其生理学上可接受的加成盐、立体异构体、对映异构体、水合物、溶剂合物和多晶型物的制备方法：

式(Ⅰ)

其中X、Y、Z、G1、G2、W、G3、R1和R2具有上述给出的含义该方法通过下列步骤进行：

a)使式(Ⅱ)的化合物：

其中

X、Y和Z具有上述给出的含义，且

Q是卤素原子或羟基，

与式(Ⅲ)的化合物反应：

其中：

G1、G2、G3、R1、R2和W具有上述给出的含义，

得到式(Ⅰ)的化合物：

式(Ⅰ)

其中：

X、Y、Z、G1、G2、G3、R1、R2和W具有上述给出的含义，且

b)如果有此需要，则形成来自步骤(a)的式(Ⅰ)的化合物的生理学上可接受的加成盐。

根据第一个实施方案，上述步骤(a)通过根据标准技术使其中Q是Cl的式(Ⅱ)的化合物与式(Ⅲ)的胺在适宜酸受体的存在下反应进行。

根据第二个实施方案，上述步骤(a)通过根据标准技术使其中Q是OH的式(Ⅱ)的化合物与式(Ⅲ)的胺在适宜偶合剂的存在下反应进行。

此外，步骤(a)的反应还可以通过预先连接式(Ⅲ)的化合物与制备树脂例如由Polymer Laboratories生产的PL-FMP树脂在固相中进行。在这种情况中，裂解步骤在步骤(a)后进行，其中从树脂中分离得到的式(Ⅰ)的化合物。这种裂解步骤使用常规技术进行例如用三氟乙酸处理。

当想要式(Ⅰ)的化合物具有2-位和3-位碳原子之间的单键时，还原步骤在步骤(a)后进行。这种还原步骤使用常规技术进行例如在强酸的存在下用锡处理。

当R1表示为(CH₂)nCOOR^II基团，R^II是烷基时，相应的酸，其中R^II是氢原子，可以通过水解、根据标准技术例如在强碱如NaOH的存在下得到。

式(Ⅲ)的中间体化合物是新颖的。

本发明的第三个方面还涉及式(Ⅲ)的化合物：

其中：

G1、G2和G3可以相同或不同，是氮原子或CH基团；

R1是(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₇)环烷基、(C₁-C₆)烷基OR^I、(CH₂)_nCONR^IIR^III、(CH₂)_nCOR^I、(CH₂)_nCOOR^II、(CH₂)_nOCOR^I、SO₂R^I、(CH₂)_nNR^IISO₂R^I、(CH₂)_nSO₂R^I基团，其任选地被1-3个羟基取代，其中n是1-6的整数，R^I是(C₁-C₃)烷基或(C₁-C₃)烷基OH基团，并且R^II和R^III可以相同或不同，是氢原子或(C₁-C₃)烷基；

W是σ键或(C₁-C₆)烷基、(C₂-C₆)烯基、O(C₁-C₆)烷基、O(C₂-C₆)烯基、C(O)NH、(CH₂)_pCO(CH₂)_q或(CH₂)_pC(OH)(CH₂)_q基团，其中p和q可以相同或不同，是0-3的整数；且

R2是苯基、吡啶或(C₄-C₇)环烷基基团，其任选地被1-3个取代基取代，所述取代基可以相同或不同，由L-M基团表示，其中L是σ键或(C₁-C₆)烷基、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基、O(C₁-C₆)烷基、O(C₂-C₆)烯基、O(C₂-C₆)炔基和M是氢或卤素原子或OH、CF₃、NO₂、CN、COOR^II、SO₂NHR^II、CH₂CONR^IIR^III、NR^IIR^III、SO₂R^IV、NHSO₂R^IV、POR^IVR^V或OPOR^IVR^V基团，其中R^II和R^III可以相同或不同，具有上述含义，且R^IV和R^V可以相同或不同，是(C₁-C₃)烷基，

条件是

当G1、G2和G3都是CH基团时，R1是(C₁-C₆)烷基或(C₃-C₇)环烷基，其任选地被1-3个羟基取代，W是σ键，且2位和3位碳原子之间的键是双键，

R2不是苯基或吡啶基团，其任选地被1-3个取代基取代，所述取代基可以相同或不同，选自卤素、任选地被羟基取代的(C₁-C₆)烷基、三氟甲基、硝基、氨基、二(C₁-C₃)烷基氨基、羟基、(C₁-C₃)烷氧基、COOH、COOR^II、SO₂CH₃、SO₂NHCH₃、NHSO₂CH₃、POR^IVR^V、OPOR^IVR^V、(C₁-C₆)烷基-COOH和(C₂-C₆)烯基-COOH，

且条件是

当G1是N且和G2和G 3是CH基团时，R2不是二价芳族基团，其被一个L-M基团取代，该基团表示为O(C₁-C₆)烷基、O(C₂-C₆)烯基和O(C₂-C₆)炔基。

R1的优选的含义是(C₁-C₃)烷基、(C₁-C₃)烷基OR^I、(CH₂)_nCONR^IIR^III、(CH₂)_nCOR^I、(CH₂)_nCOOR^II、(CH₂)_nOCOR^I、SO₂R^I、(CH₂)_nNR^IISO₂R^I、(CH₂)_nSO₂R^I基团，其任选地被1-3个羟基取代，其中n是1-4的整数，R^I是(C₁-C₃)烷基或(C₁-C₃)烷基OH基团，且R^II和R^III可以相同或不同，是氢原子或(C₁-C₃)烷基。

R1的特别优选的含义是(C₁-C₃)烷基、(C₁-C₃)烷基OR^I、(CH₂)_nCONR^IIR^III、(CH₂)_nCOR^I、(CH₂)_nCOOR^II、(CH₂)_nOCOR^I、SO₂R^I、(CH₂)_nNR^IISO₂R^I、(CH₂)_nSO₂R^I基团，其任选地被1-3个羟基取代，其中n是1-3的整数，R^I是CH₃、C₂H₅、CH₂OH或C₂H₄OH基团，且R^II和R^III可以相同或不同，是氢原子或CH₃、C₂H₅基团。

W的优选的含义是σ键或(C₁-C₃)烷基、(C₂-C₄)烯基、O(C₁-C₃)烷基、O(C₂-C₃)烯基、C(O)NH、(CH₂)_pCO(CH₂)_q或(CH₂)_pC(OH)(CH₂)_q基团，其中p和q可以相同或不同，是1-3的整数、

W的特别优选的含义是σ键或CH₂、C₂H₄、CH＝CH、OCH₂、OC₂H₄、OCH＝CH、C(O)NH、(CH₂)_pCO(CH₂)_q或(CH₂)_pC(OH)(CH₂)_q基团，其中p和q可以相同或不同，是1-2的整数。

R2的优选含义是苯基、吡啶或(C₄-C₇)环烷基，其任选地被1-2个取代基取代，所述取代基可以相同或不同，由L-M基团表示，其中L是σ键或(C₁-C₃)烷基、(C₂-C₄)烯基、(C₂-C₄)炔基、O(C₁-C₃)烷基、O(C₂-C₄)烯基、O(C₂-C₄)炔基，且M是氢或卤素原子或CF₃、CN、COOR^II、SO₂NHR^II、CH₂CONR^IIR^III、NR^IIR^III、SO₂R^IV、NHSO₂R^IV、POR^IVR^V或OPOR^IVR^V基团，其中R^II和R^III可以相同或不同，是氢原子或(C₁-C₃)烷基和R^IV和R^V可以相同或不同，是(C₁-C₃)烷基。

R2的特别优选含义是苯基、吡啶或(C₄-C₇)环烷基，其任选地被1个取代基取代，该取代基由L-M基团表示，其中L是σ键或CH₂、C₂H₄、CH＝CH、C≡C、OCH₂、OC₂H₄、OCH＝CH、OC≡C基团，且M是氢或卤素原子或CF₃、CN、COOR^II、SO₂NHR^II、CH₂CONR^IIR^III、NR^IIR^III、SO₂R^IV、NHSO₂R^IV、POR^IVR^V或OPOR^IVR^V基团，其中R^II和R^III可以相同或不同，是氢原子或CH₃、C₂H₅基团，且R^IV和R^V可以相同或不同，是CH₃或C₂H₅基团。

基团W-R2的第一个特别优选的含义是，其中W是σ键或CH₂或C₂H₄基团，R2是任选地被1-3个取代基取代的苯基，所述取代基可以相同或不同，选自Br、Cl和F原子、CH₃、C₂H₅、OCH₃、OC₂H₅、CN、CH₂CN和CH₂CONH₂基团。

基团W-R2的第二个特别优选的含义是，其中W是σ键或CH₂或C₂H₄基团，R2是任选地被1-3个取代基取代的吡啶基团，所述取代基可以相同或不同，选自Br、Cl和F原子、CH₃、C₂H₅、OCH₃、OC₂H₅、CN、CH₂CN和CH₂CONH₂基团。

基团W-R2的第三个特别优选的含义是，其中W是σ键或CH₂或C₂H₄基团，R2是任选地被1-3个取代基取代的环己基，所述取代基可以相同或不同，选自Br、Cl和F原子、CH₃、C₂H₅、OCH₃、OC₂H₅、CN、CH₂CN和CH₂CONH₂基团。

对本发明式(Ⅰ)的化合物的生物学特性研究证实它具有令人意外的抑制mPGES-1的选择性特性和对炎性痛显著的镇痛活性。

本发明的第四个方面涉及药物组合物，其包含有效量的式(Ⅰ)的化合物或其生理学上可接受的加成盐、立体异构体、对映异构体、水合物、溶剂合物或多晶型物和至少一种药学可接受的惰性成分。

在本说明书和权利要求中，术语“有效量”意指在具体疾病的至少一种症状和参数中得到可感觉到的改善的用量。

本发明的药物组合物可以用于治疗或预防与前列腺素E₂(PGE₂)产生相关的疾病例如炎症性过程、疼痛、肿瘤、神经变性疾病和动脉粥样硬化。

有利的是，本发明的药物组合物可以用于治疗慢性炎性病理学情况例如关节炎或肿瘤、特别是结肠直肠、食管、乳腺、非和膀胱肿瘤中的疼痛。

优选将本发明的药物组合物制备成适宜剂型，其包含有效剂量的至少一种式(Ⅰ)的化合物或其生理学上可接受的加成盐、立体异构体、对映异构体、水合物、溶剂合物或多晶型物和至少一种药学可接受的惰性成分。

适宜的剂型的实例是用于口服给药的片剂、胶囊、包衣片、颗粒、溶液和糖浆剂；用于局部给药的霜剂、软膏剂和杀菌硬膏剂；用于直肠给药的栓剂和用于通过注射或喷雾或眼部给药的无菌溶液。

所述剂型还可以包含其他常用成分，例如：防腐剂、稳定剂、表面活性剂、缓冲剂、用于调节渗透压的盐、乳化剂、甜味剂、着色剂、矫味剂等。

如果特定疗法有需要，则本发明的药物组合物可以包含其他药理学活性成分，其同时给药是有益的。

式(Ⅰ)的化合物或其生理学上可接受的加成盐、立体异构体、对映异构体、水合物、溶剂合物或多晶型物和至少一种药学可接受的惰性成分在本发明药物组合物中的用量可以在宽范围内改变，这取决于已知的因素例如所治疗疾病的类型、疾病的严重性、患者体重、剂型、选择的给药途径、每日给药的数量和选择的式(Ⅰ)化合物的效力。然而，最佳用量易于和通常由本领域技术人员确定。

典型地，式(Ⅰ)的化合物或其生理学上可接受的加成盐、立体异构体、对映异构体、水合物、溶剂合物或多晶型物和至少一种药学可接受的惰性成分在本发明药物组合物中的用量使得它提供0.0001-100mg/kg/天且甚至更优选0.01-10mg/kg/天的给药水平。

显然，本发明的药物制剂不一定需要包含全量的式(Ⅰ)的化合物，因为所述有效量可以通过给予多个剂量的本发明药物组合物得以附加。

可以根据制药化学工作者众所周知的技术制备本发明的药物组合物包括混合、制粒、压制、溶解、灭菌等。

下列实施例用于进一步示例本发明，但不用来限定它。

实施例1

中间体化合物的制备

a)1-乙基-2-(4-甲基苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-胺

在搅拌的同时向2-氨基-3-溴-5-硝基吡啶(1.2g，5.5mmol)在无水THF(23ml)中的溶液中加入PdCl2(52mg，0.29mmol)、1，1′-双(二叔丁基膦基)二茂铁(D-tBPF，0.17g，0.39mmol)、二异丙基胺(0.81g，8.0mmol)和CuI(22mg，0.11mmol)。在2.25小时内向该混合物中滴加4-乙炔基甲苯(1.0ml，7.9mmol)。在真空中通过C盐过滤由此得到的混合物，用EtOAc将残余物洗涤几次。

在蒸发溶剂后，通过硅胶柱色谱法纯化残余物(Et₂O/正己烷，Et₂O30％→60％)，得到5-硝基-3-(苯基乙炔基)吡啶-2-胺，为黄色固体：

¹H-NMR(CDCl₃)：8.93(d，J＝2.7Hz，1H)；8.36(d，J＝2.7Hz，1H)；7.42(AA′BB′系统的AA′，2H)；7.19(AA′BB′系统的BB′，2H)；5.85(bs，2H)；2.39(s，3H)。

在室温下搅拌的同时向叔丁醇钾(0.41g，3.7mmol)在无水DMF(5ml)中的混悬液中滴加5-硝基-3-(苯基乙炔基)吡啶-2-胺(0.70g，2.8mmol)在DMF(25ml)中的溶液。1.5天后，加入碘乙烷(0.38ml，4.7mmol)，将整个体系再搅拌1.5天。然后向该反应体系中加入H₂O(50ml)和EtOAc(100ml)。将该混合物倾入分液漏斗，分离有机层，用EtOAc(50ml)充分萃取水层，用盐水(2x100ml)洗涤合并的有机层。通过减压蒸发除去有机溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化残余物(Et₂O/正己烷，Et₂O10％→20％)，得到1-乙基-2-(4-甲基苯基)-5-硝基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶：

¹H-NMR(CDCl₃)：9.21(d，J＝2.7Hz，1H)；8.71(d，J＝2.7Hz，1H)；7.40(AA′BB′系统的AA′，2H)；7.32(AA′BB′系统的BB′，2H)；6.60(s，1H)；4.41(q，J＝7.2Hz，2H)；2.45(s，3H)；1.31(t，J＝7.2Hz，3H)

将1-乙基-2-(4-甲基苯基)-5-硝基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.36g，1.3mmol)在EtOAc/EtOH(无水)＝4∶7混合物(110ml)中的溶液在10％Pd(C)(110mg)的存在下在H₂气气氛中氢化2h。在真空中通过C盐过滤残余物以除去催化剂，蒸发溶剂，得到粗的1-乙基-2-(4-甲基苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-胺，将其不经任何进一步纯化使用：

¹H-NMR(CDCl₃)：7.91(d，J＝3.0Hz，1H)；7.39(AA′BB′系统的AA′，2H)；7.32-7.18(m，3H)；6.25(s，1H)；4.30(q，J＝7.5Hz，2H)；3.32(bs，2H)；2.41(s，3H)；1.27(t，J＝7.5Hz，3H)。

b)1-异丙基-2-(4-甲基苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-胺

使用上述实施例1a)的方法，除了用异丙基溴替代碘乙烷以外。

1-异丙基-2-(4-甲基苯基)-5-硝基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶：

¹H-NMR(CDCl₃)：9.18(d，J＝2.4Hz，1H)；8.67(d，J＝2.4Hz，1H)；7.34(AA′BB′系统，4H)；6.52(s，1H)；4.70(ept.，J＝6.9Hz，1H)；2.45(s，3H)；1.70(d，J＝6.9Hz，6H)

1-异丙基-2-(4-甲基苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-胺：

¹H-NMR(CDCl₃)：7.85(d，J＝1.4Hz，1H)；7.27(AA′BB′系统的AA′，2H)；7.16-7.05(m，3H)；6.11(s，1H)；4.56(ept.，J＝7.0Hz，1H)；3.85(bs，2H)；2.33(s，3H)，1.59(d，J＝7.0Hz，6H)。

c)1-(2-甲氧基乙基)-2-(4-甲基苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-胺

使用上述实施例1a)的方法，除了用2-甲氧基乙基溴替代碘乙烷以外。

1-(2-甲氧基乙基)-2-(4-甲基苯基)-5-硝基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶：

¹H-NMR(CDCl₃)：9.21(d，J＝2.4Hz，1H)；8.71(d，J＝2.4Hz，1H)；7.49(AA′BB′系统的AA′，2H)；7.32(AA′BB′系统的BB′，2H)；6.62(s，1H)；4.54(t，J＝5.6Hz，2H)；3.70(t，J＝5.6Hz，2H)；3.19(s，3H)；2.45(s，3H)。

1-(2-甲氧基乙基)-2-(4-甲基苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-胺：

¹H-NMR(CDCl₃)：7.89(d，J-2.7Hz，1H)；7.46(AA′BB′系统的AA′，2H)；7.25(AA′BB′系统的BB′，2H)；7.19(d，J＝2.4Hz，1H)；6.27(s，1H)；4.42(t，J＝6.0Hz，2H)；3.68(t，J＝6.0Hz，2H)；3.40(bs，1H)；3.17(s，3H)；2.40(s，3H)。

d)1-乙基-2-(4-氟苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-胺

使用上述实施例1a)的方法，除了用1-乙炔基-4-氟苯替代4-乙炔基甲苯以外。

3-[(4-氟苯基)乙炔基]-5-硝基吡啶-2-胺：

¹H-NMR(CDCl₃/CD₃OD)：8.78(d，J＝2.3Hz，1H)；8.24(d，J＝2.3Hz，1H)；7.43(m，2H)；6.97(m，2H)，2.05(s，3H)。

1-乙基-2-(4-氟苯基)-5-硝基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

¹H-NMR(CDCl₃)：9.30(d，J＝2.5Hz，1H)；8.80(d，J＝2.5Hz，1H)；7.60(m，2H)；7.30(m，2H)；6.70(s，1H)；4.48(q，J＝7.6Hz，2H)；1.39(t，J＝7.6Hz 3H)

1-乙基-2-(4-氟苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-胺

¹H-NMR(CDCl₃)：7.90(d，J＝2.4Hz，1H)；7.42(m，2H)；7.25-7.05(m，3H)，6.21(s，1H)；4.24(q，J＝7.2Hz，2H)；3.50(bs，2H)；1.22(t，J＝7.2Hz，3H)

e)2-(4-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-胺

使用上述实施例1a)的方法，除了用1-乙炔基-4-氟苯和2-甲氧基乙基溴分别替代4-乙炔基甲苯和碘乙烷以外。

2-(4-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)-5-硝基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶：

¹H-NMR(CDCl₃)：9.23(d，J＝2.6Hz，1H)；8.74(d，J＝2.6Hz，1H)；7.90-7.20(2m，5H)；6.64(s，1H)；4.51(t，J＝5.6Hz，2H)；3.75(t，J＝5.6Hz，2H)；3.20(s，3H)；

2-(4-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-胺：

¹H-NMR(CDCl₃)：8.00(d，J＝2.2Hz，1H)；7.63(m，2H)；7.40-7.10(m，3H)，6.34(s，1H)；4.47(t，J＝5.8Hz，2H)；3.80(t，J＝5.8Hz，4H)；3.25(s，3H)。

f)4-(5-氨基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丁酸乙酯

向2-苯基-5-硝基吲哚(如J.Org.Chem.(1966)，31(1)，65-9中所述制备)(1.5g；6.3mmol)在CH₃CN(50ml)中的溶液中加入K₂CO₃(1.7g；12.6mmol)。然后向由此得到的该混合物中滴加4-溴丁酸乙酯(3.3g；16mmol)，在搅拌下将得到的混合物加热至120℃18小时。冷却后，将该混合物倾入水(500ml)，过滤粗产物，真空干燥，得到4-(5-硝基--2--苯基-1H-吲哚-1-基)丁酸乙酯，将其不经任何进一步纯化用于下一步反应。

¹H-NMR(DMSO-d₆)1.08(t，J＝7.16Hz，3H)；1.80(quin，J＝7.23Hz，2H)；2.15(t，J＝7.00Hz，2H)；3.91(q，J＝7.02Hz，2H)；4.34(t，J＝7.31Hz，2H)；6.84(s，1H)；7.47-7.62(m，5H)；7.80(d，J＝9.06Hz，1H)；8.08(dd，J＝9.21，2.19Hz，1H)；8.59(d，J＝2.34Hz，1H)。

向10％Pd/C(67mg，0.06mmol)在95％乙醇(50ml)中的混悬液中加入4-(5-硝基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丁酸乙酯(2.2g；6mmol)在95乙醇(100ml)中的溶液(0.1g；0.1mmol)，将该混合物在Parr氢化瓶(H₂，30psi)中进行氢化4小时。

在真空中通过C盐过滤残余物以除去催化剂，蒸发溶剂，得到粗的4-(5-氨基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丁酸乙酯，将其不经任何进一步纯化使用。

¹H NMR(DMSO-d₆)1.09(t，J＝7.16Hz，3H)；1.78(quin，J＝7.16Hz，2H)；2.09(t，J＝7.16Hz，2H)；3.92(q，J＝7.21Hz，2H)；4.20(t，J＝7.31Hz，2H)；6.44(s，1H)；6.87(dd，J＝8.62，2.19Hz，1H)；7.14(d，J＝2.05Hz，1H)；7.35-7.59(m，6H)；8.08(br.s.，2H)。

g)3-(5-氨基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丙酸乙酯

使用上述实施例1f)中所述的方法，除用3-溴丙酸乙酯替代4-溴丁酸乙酯以外。

3-(5-硝基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丙酸乙酯

¹H NMR(DMSO-d₆)1.02(t，J＝7.02Hz，3H)；2.61(t，J＝7.31Hz，2H)；3.88(q，J＝7.02Hz，2H)；4.57(t，J＝7.16Hz，2H)；6.83(s，1H)；7.46-7.65(m，5H)；7.80(d，J＝9.06Hz，1H)；8.08(dd，J＝9.06，2.34Hz，1H)；8.57(d，J＝2.34Hz，1H)。

3-(5-氨基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丙酸乙酯

¹H NMR(DMSO-d₆)1.05(t，J＝7.16Hz，3H)；2.54(br.s.，J＝7.50，7.50Hz，2H)；3.90(q，J＝7.02Hz，2H)；4.36(t，J＝7.31Hz，2H)；4.55(br.s.，2H)；6.24(s，1H)；6.57(dd，J＝8.62，2.19Hz，1H)；6.70(d，J＝2.05Hz，1H)；7.21(d，J＝8.77Hz，1H)；7.34-7.55(m，5H)。

h)(5-氨基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)乙酸乙酯

使用上述实施例1f)中所述的方法，除用2-溴乙酸乙酯替代4-溴丁酸乙酯以外。

(5-硝基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)乙酸乙酯：

¹H NMR(DMSO-d₆)1.11(t，J＝7.02Hz，3H)；4.09(q，J＝7.02Hz，2H)；5.15(s，2H)；6.90(d，J＝0.58Hz，1H)；7.46-7.60(m，5H)；7.73(d，J＝9.35Hz，1H)；8.08(dd，J＝9.06，2.34Hz，1H)；8.60(d，J＝2.34Hz，1H)。

(5-氨基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)乙酸乙酯：

1H NMR(CDCl₃)1.23(t，J＝7.16Hz，3H)；2.97(br.s.，2H)；4.20(q，J＝7.02Hz，2H)；4.74(s，2H)；6.45(s，1H)；6.79(dd，J＝8.77，2.05Hz，1H)；7.06(s，1H)；7.08(d，J＝5.85Hz，1H)；7.34-7.52(m，5H)。

i)1-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-苯基-1H-吲哚-5-胺

使用上述实施例1f)中所述的方法，除用2-氯-N，N-二甲基乙胺盐酸盐替代4-溴丁酸乙酯以外。

N，N-二甲基-2-(5-硝基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)乙胺：

¹H NMR(DMSO-d₆)1.98(s，6H)；2.41(t，J＝6.87Hz，2H)；4.36(t，J＝6.87Hz，2H)；6.81(s，1H)；7.45-7.65(m，5H)；7.77(d，J＝9.06Hz，1H)；8.07(dd，J＝9.06，2.34Hz，1H)；8.56(d，J＝2.34Hz，1H)。

1-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-苯基-1H-吲哚-5-胺：

¹H NMR(DMSO-d₆)2.00(s，6H)；2.38(t，J＝7.31Hz，2H)；4.13(t，J＝7.31Hz，2H)；4.52(br.s.，2H)；6.23(s，1H)；6.57(dd，J＝8.62，2.19Hz，1H)；6.69(d，J＝1.75Hz，1H)；7.19(d，J＝8.48Hz，1H)；7.35-7.58(m，5H)。

1)1-(2-甲氧基乙基)-2-苯基-1H-吲哚-5-胺

使用上述实施例1f)中所述的方法，除用1-溴-2-甲氧基乙烷替代4-溴丁酸乙酯以外。

1-(2-甲氧基乙基)-5-硝基-2-苯基-1H-吲哚

¹H NMR(DMSO-d₆)3.04(s，3H)；3.53(t，J＝5.41Hz，2H)；4.44(t，J＝5.41Hz，2H)；6.83(s，1H)；7.46-7.66(m，5H)；7.79(d，J＝9.06Hz，1H)；8.06(dd，J＝9.06，2.34Hz，1H)；8.57(d，J＝2.34Hz，1H)。

1-(2-甲氧基乙基)-2-苯基-1H-吲哚-5-胺

1)4-(5-氨基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丁-2-酮

使用上述实施例1f)中所述的方法，除用4-氯丁-2-酮替代4-溴丁酸乙酯以外。

4-(5-硝基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丁-2-酮

¹H NMR(DMSO-d₆)2.00(s，3H)；2.85(t，J＝7.50Hz，2H)；4.45(t，J＝7.50Hz，2H)；6.83(d，J＝0.58Hz，1H)；7.47-7.62(m，5H)；7.79(d，J＝9.35Hz，1H)；8.07(dd，J＝9.06，2.34Hz，1H)；8.58(d，J＝2.34Hz，1H)。

4-(5-氨基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丁-2-酮

¹H NMR(DMSO-d₆)1.98(s，3H)；2.77(t，J＝7.68Hz，2H)；4.25(t，J＝7.68Hz，2H)；4.52(br.s.，2H)；6.24(s，1H)；6.57(dd，J＝8.64，2.06Hz，1H)；6.69(d，J＝1.92Hz，1H)；7.20(d，J＝8.51Hz，1H)；7.32-7.63(m，5H)。

m)2-(4-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吲哚-5-胺

向5-硝基吲哚(3.5g；21.6mmol)在DMF(100ml)中的溶液中加入Cs₂CO₃(13.9g；42.6mmo)。在室温将由此得到的混合物搅拌1小时，然后滴加1-溴-2-甲氧基乙烷(5.9g；42.6mmol)。在搅拌下将得到的混合物加热至120℃4小时。冷却后，将该混合物倾入水(500ml)，过滤粗产物，真空干燥，得到1-(2-甲氧基乙基)-5-硝基-1H-吲哚，将其不经任何进一步纯化用于下一步反应。

¹H NMR(DMSO-d₆)3.21(s，3H)；3.68(t，J＝5.26Hz，2H)；4.43(t，J＝5.26Hz，2H)；6.75(dd，J＝3.22，0.58Hz，1H)；7.62(d，J＝3.22Hz，1H)；7.70(d，J＝9.35Hz，1H)；8.02(dd，J＝9.06，2.34Hz，1H)；8.56(d，J＝2.34Hz，1H)。

向在140℃、在惰性气体气氛中的在真空下干燥过夜的包含乙酸铯(7.3g；38mmol)在N，N-二甲基乙酰胺(DMA，10ml)中的混悬液中加入乙酸钯(0.22g；0.98mmol)、三苯膦(1g；3.8mmol)、1-(2-甲氧基乙基)-5-硝基-1H-吲哚(4.2g；19.1mmol)和1-碘-4-氟苯(4.7g；21mmol)。

将该反应混合物在搅拌下、在140℃、在惰性气体气氛中保持18小时。然后将该混合物冷却至室温，加入二氯甲烷(100ml)，在真空中通过C盐过滤由此得到的混合物。

将有机溶液转入分液漏斗，用H₂O(2×100ml)洗涤，用Na₂SO₄干燥。

通过减压蒸发除去有机溶剂，通过硅胶快速色谱法纯化残余物(正己烷/EtOAc，正己烷100→60％)，得到2-(4-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)-5-硝基-1H-吲哚(0.9g)，将其不经任何进一步纯化使用。

¹H NMR(DMSO-d₆)3.05(s，3H)；3.53(t，J＝5.33Hz，2H)；4.41(t，J＝5.41Hz，2H)；6.83(s，1H)；7.32-7.44(m，2H)；7.62-7.73(m，2H)；7.79(d，J＝9.21Hz，1H)；8.06(dd，J＝9.06，2.34Hz，1H)；8.57(d，J＝2.34Hz，1H)。

向在无水乙醇(100ml)中包含2-(4-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)-5-硝基-1H-吲哚(0.9g；2.9mmol)的混悬液中加入二水合氯化亚锡(3.3g；14.6mmol)。将该反应混合物在搅拌下、在75℃保持48小时。然后将该混合物冷却至室温，减压部分蒸发溶剂，倾入水(100ml)和冰。加入NaHCO₃(饱和溶液)至pH8，将该混合物保持在搅拌下20分钟。将该溶液转入分液漏斗，用乙酸乙酯(2×50ml)萃取。合并有机相，用H₂O(2×100ml)洗涤得到的有机相，用Na₂SO₄干燥。

通过减压蒸发除去有机溶剂，通过硅胶快速色谱法纯化残余物(正己烷/EtOAc，正己烷100→60％)，得到2-(4-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吲哚-5-胺(0.7g)，将其不经任何进一步纯化使用。

¹H NMR(DMSO-d₆)3.07(s，3H)；3.51(t，J＝5.70Hz，2H)；4.18(t，J＝5.85Hz，2H)；4.53(br.s.，2H)；6.22(s，1H)；6.56(dd，J＝8.62，2.19Hz，1H)；6.69(d，J＝1.46Hz，1H)；7.22(d，J＝8.77Hz，1H)；7.30(t，J＝8.92Hz，2H)；7.59(dd，J＝9.06，5.55Hz，2H)。

n)3-(5-氨基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丙基乙酸酯

向在THF(20ml)中包含3-(5-硝基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丙酸乙酯(如实施例1g中所述制备)(2.1g；6.2mmol)的溶液中加入硼氢化钠(0.98g，24.8mmol)和无水EtOH(25ml)；将该反应混合物在搅拌下、在室温下保持18小时。然后加入水(5ml)和HCl 2N至pH 6。将该溶液转入分液漏斗，用乙酸乙酯(2×50ml)萃取。合并有机相，用Na₂SO₄干燥。通过减压蒸发除去溶剂，通过硅胶快速色谱法纯化残余物(正己烷/EtOAc，正己烷100→70％)，得到3-(5-硝基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丙-1-醇(1.5g)，将其不经任何进一步纯化使用。

¹H NMR(CDCl₃)1.81-1.93(m，J＝6.58，6.58，6.43，6.14Hz，2H)；3.36(t，J＝5.70Hz，2H)；3.50(br.s.，1H)；4.38(t，J＝7.02Hz，2H)；6.69(s，1H)；7.28-7.61(m，6H)；8.06(dd，J＝9.06，2.34Hz，1H)；8.55(d，J＝2.05Hz，1H)。

向在CH₂Cl₂(20ml)中包含3-(5-硝基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丙-1-醇(2.2g；7.4mmol)和三乙胺(1.24ml；8.9mmol)的溶液中滴加乙酰氯(0.6ml；8.9mmol)；该反应混合物在搅拌下、在室温下保持2小时。然后加入水(20ml)和NaHCO₃(饱和溶液)至pH7。将该双相溶液转入分液漏斗，用CH₂Cl₂(2×50ml)萃取。合并有机相，用盐水(2×100ml)洗涤，用Na₂SO₄干燥。通过减压蒸发除去溶剂，得到3-(5-硝基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丙基乙酸酯(1.5g)，将其不经任何进一步纯化使用。

¹H NMR(DMSO-d₆)1.79(s，3H)；1.86(qd，J＝6.63，6.43Hz，2H)；3.75(t，J＝5.99Hz，2H)；4.41(t，J＝7.16Hz，2H)；6.85(s，1H)；7.47-7.64(m，5H)；7.79(d，J＝9.06Hz，1H)；8.08(dd，J＝9.06，2.34Hz，1H)；8.59(d，J＝2.05Hz，1H)。

向10％Pd/C(87mg，0.08mmol)在95°乙醇(100ml)中的混悬液中加入3-(5-硝基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丙基乙酸酯(2.76g；8mmol)在95°乙醇(200ml)中的溶液，在Parr氢化瓶(H₂，30psi)中将该混合物进行氢化4小时。

在真空中通过C盐过滤残余物以除去催化剂，蒸发溶剂，得到粗的3-(5-氨基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丙基乙酸酯，将其不经任何进一步纯化使用。

o)2-(5-氨基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)乙基乙酸酯

使用上述实施例1n)中的方法，除用(5-硝基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)乙酸乙酯(如实施例1h中所述制备)替代3-(5-硝基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)丙酸乙酯以外。

2-(5-硝基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)乙醇

¹H NMR(DMSO-d₆)3.63(t，J＝5.85Hz，2H)；4.32(t，J＝5.85Hz，2H)；6.46(br.s.，1H)；6.83(s，1H)；7.43-7.71(m，5H)；7.77(d，J＝9.06Hz，1H)；8.06(dd，J＝9.06，2.34Hz，1H)；8.57(d，J＝2.34Hz，1H)。

2-(5-硝基-2-苯基-1H-吲哚-1-基)乙酸乙酯

¹H NMR(DMSO-d₆)1.70(s，3H)；4.16(t，J＝5.26Hz，2H)；4.57(t，J＝5.26Hz，2H)；6.83(s，1H)；7.35-7.70(m，5H)；7.81(d，J＝9.35Hz，1H)；8.09(dd，J＝9.35，2.34Hz，1H)；8.58(d，J＝2.34Hz，1H)。

p)2-环己基-1-乙基-1H-吲哚-5-胺

向在CH₂Cl₂(250ml)中包含2-碘-4-硝基苯胺(25g；95mmol)和三乙胺(43ml；312mmol)的溶液中滴加甲磺酰氯(36g；312mmol)。将该反应混合物在搅拌下、在室温下保持18小时，然后加入NH₄Cl(饱和溶液)(250ml)。将该双相溶液转入分液漏斗，分离有机相，用Na₂SO₄干燥，通过减压蒸发除去溶剂。将残余物混悬于EtOH(200ml)中，在搅拌下加热至黄色固体沉淀为止。过滤粗产物，用EtOH(750ml)洗涤，真空干燥，得到N-(2-碘-4-硝基苯基)-N-(甲基磺酰基)甲磺酰胺(32g)，将其不经任何进一步纯化用于下一步反应。

¹H NMR(DMSO-d₆)3.68(s，6H)；7.93(d，J＝8.77Hz，1H)；8.29(dd，J＝8.48，2.34Hz，1H)；8.73(d，J＝2.63Hz，1H)。

向在EtOH(230ml)包含N-(2-碘-4-硝基苯基)-N-(甲基磺酰基)甲磺酰胺(31g；75mmol)的混合物中加入水(115ml)和LiOH(9g；375mmol)。将该反应混合物回流2小时，然后冷却至室温，减压蒸发溶剂。加入NH₄Cl(饱和溶液，250ml)，将该混合物搅拌至黄色固体沉淀为止。过滤粗产物，真空干燥，得到N-(2-碘-4-硝基苯基)甲磺酰胺(24g)，将其不经任何进一步纯化用于下一步反应。

¹H NMR(DMSO-d₆)3.01(s，3H)；7.41(d，J＝9.06Hz，1H)；8.10(dd，J＝9.21，2.78Hz，1H)；8.53(d，J＝2.92Hz，1H)；9.55(br.s.，0H)。

向在DMF(60ml)中包含N-(2-碘-4-硝基苯基)甲磺酰胺(13.5g；39.5mmol)、三乙胺(17.9ml；129mmol)、乙炔基环己烷(8.55g；79mmol)的混合物中加入CuI(1.5g；7.9mmol)和二氯双(三苯膦)钯(Ⅱ)[Cl₂(PPh₃)₂Pd](2.77g；3.95mmol)。将该反应混合物在搅拌下、在70℃保持18小时。冷却至室温后，加入EtOAc(100ml)，过滤出无机沉淀，将该溶液转入分液漏斗，用NaHCO₃(饱和溶液，3x200ml)和水(2x150ml)洗涤。用Na₂SO₄干燥有机相，通过减压蒸发除去溶剂。使得到的粗产物结晶(异丙基醚)，得到2-环己基-1-(甲基磺酰基)-5-硝基-1H-吲哚(11.7g)

¹H NMR(DMSO-d₆)1.14-1.53(m，5H)；1.62-1.93(m，3H)；2.02-2.20(m，2H)；3.08-3.27(m，1H)；3.46(s，3H)；6.87(s，1H)；8.09(d，J＝9.10Hz，1H)；8.17(dd，J＝9.10，2.05Hz，1H)；8.52(d，J＝2.05Hz，1H)。

向在THF(50ml)中包含2-环己基-1-(甲基磺酰基)-5-硝基-1H-吲哚(5.8g；18mmol)的溶液中滴加氟化四丁铵(1M的THF溶液；18ml；18mmol)。将该反应混合物回流18小时，然后冷却至室温。加入水(50ml)和EtOAc(50ml)，将该双相溶液转入分液漏斗，分离有机层，用Na₂SO₄干燥，通过减压蒸发除去溶剂。通过硅胶快速色谱法纯化残余物(正己烷/EtOAc，正己烷100→80％)，得到2-环己基-5-硝基-1H-吲哚(3.2g)，将其不经任何进一步纯化使用。

¹H NMR(DMSO-d₆)1.12-1.58(m，5H)；1.64-1.87(m，3H)；1.95-2.12(m，2H)；2.67-2.85(m，1H)；6.41(d，J＝1.98Hz，1H)；7.43(d，J＝8.92Hz，1H)；7.92(dd，J＝8.92，2.31Hz，1H)；8.43(d，J＝2.31Hz，1H)；11.66(br.s.，1H)。

向2-环己基-5-硝基-1H-吲哚(5g；20.5mmol)在DMF(100ml)中的溶液中加入氢化钠(50％混悬液)(1g，20.5mmol)；将该混合物保持在搅拌下30分钟，然后滴加在DMF(10ml)中的碘乙烷(2.5ml；30.8mmol)，将得到的混合物在搅拌下、在室温下保持18小时。将该反应混合物倾入NaHCO₃(饱和溶液，100ml)，搅拌30分钟。真空过滤固体，得到2-环己基-1-乙基-5-硝基-1H-吲哚(4.8g)，将其不经任何进一步纯化使用。

¹H NMR(DMSO-d₆)1.16-1.56(m，5H)；1.29(t，J＝7.09Hz，3H)；1.67-1.89(m，3H)；1.90-2.05(m，2H)；2.69-2.86(m，1H)；4.28(q，J＝7.16Hz，2H)；6.52(s，1H)；7.62(d，J＝9.06Hz，1H)；7.96(dd，J＝9.06，2.34Hz，1H)；8.45(d，J＝2.34Hz，1H)。

向10％Pd/C(380mg，0.36mmol)在95°乙醇(50ml)中的混悬液中加入2-环己基-1-乙基-5-硝基-1H-吲哚(4.8g；18mmol)在95°乙醇(100ml)中的溶液，将该混合物在Parr氢化瓶(H₂，30psi)中进行氢化4小时。在真空中通过C盐过滤残余物以除去催化剂，蒸发溶剂，得到粗的2-环己基-1-乙基-1H-吲哚-5-胺(4g)，将其不经任何进一步纯化使用。

单一同位素质量＝242.18；GC/MS(M)⁺m/z＝242。

q)2-苯乙基-1-乙基-1H-吲哚-5-胺

在搅拌下向2-碘-4-硝基苯胺(1.02g，3.86mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入三乙胺(1.77ml，12.7mmol)。向该混合物中极缓慢地并且在冰浴中滴加甲磺酰氯(0.98ml，12.7mmol)在二氯甲烷(2ml)中的溶液。将由此得到的混合物在搅拌下、在室温保持过夜。第二天用NH₄Cl饱和水溶液中和该反应混合物。分离有机相，蒸发溶剂后，用乙醇洗涤残余物，过滤，得到N-(2-碘-4-硝基苯基)-N-(甲基磺酰基)-甲磺酰胺，为黄色固体。

N-(2-碘-4-硝基苯基)-N-(甲基磺酰基)甲磺酰胺：

¹H-NMR(DMSO-d₆)：8.73(d，J＝2.6Hz，1H)；8.29(dd，J＝8.8，2.6Hz，1H)；7.93(d，J＝8.8Hz，1H)；3.68(s，6H)。

将在乙醇/水2/1混合物(18ml)中的LiOH(0.21mg，8.9mmol)加入到N-(2-碘-4-硝基苯基)-N-(甲基磺酰基)甲磺酰胺的溶液(0.75g，1.78mmol)中。将钙反应混合物回流2小时。在室温冷却后，用H₂O、NH₄Cl和HCl 2N中和该反应混合物，然后除去乙醇，用乙酸乙酯(3x20ml)萃取水相。通过减压蒸发除去有机溶剂，得到N-(2-碘-4-硝基苯基)甲磺酰胺，不经进一步纯化。

N-(2-碘-4-硝基苯基)甲磺酰胺：

¹H-NMR(DMSO-d₆)：9.53(br.s.，1H)；8.59(d，J＝2.2Hz，1H)；8.19(dd，J＝8.8，2.7，1H)；7.55(d，J＝8.8，1H)；3.14(s，3H)。

在氮气气氛中将在烘箱内预先维持至少48小时的CuI(0.06g，0.34mmol)、双(三苯膦)钯二氯化物(0.2g，0.17mmol)、三乙胺(1.1ml，7.82mmol)和4-苯基-1-丁炔(0.44g，3.4mmol)加入到N-(2-碘-4-硝基苯基)甲磺酰胺(0.6g，1.7mmol)在无水DMF(20ml)中的溶液中。将该反应混合物保持在搅拌下过夜。第二天早晨，冷却后，将该反应混合物倾入H₂O和冰(200ml)，在搅拌下保持几小时，过滤后，回收棕色固体，从乙酸乙酯/己烷1∶1中重结晶、然后从iPrOH/EtOH9∶1中重结晶。过滤残余物，得到1-(甲基磺酰基)-5-硝基-2-(2-苯乙基)-1H-吲哚。

1-(甲基磺酰基)-5-硝基-2-(2-苯乙基)-1H-吲哚：

¹H-NMR(DMSO-d₆)：8.53(d，J＝2.0Hz，1H)；8.18(dd，J＝8.4，2.5，1H)；8.10(d，1H)；7.29(m，5H)；6.91(s，1H)；3.52(s，3H)；3.29(m，2H)；3.05(m，2H)。

将氟化四丁基铵(TBAF，0.37ml，1.29mmol)加入到1-(甲基磺酰基)-5-硝基-2-(2-苯乙基)-1H-吲哚(0.25g，0.95mmol)在THF(5m1)中的溶液中。将该反应混合物在搅拌下回流过夜。第二天早晨，冷却后，将该反应混合物倾入H₂O，保持在搅拌下过夜。过滤后，用硅胶快速色谱法纯化固体(正己烷/EtOAc，正己烷90→80％)，得到2-苯乙基-5-硝基-1H-吲哚。

2-苯乙基-5-硝基-1H-吲哚：

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ11.76(br.s.，1H)，8.42(d，J＝2.31Hz，1H)，7.93(dd，J＝2.31，8.92Hz，1H)，7.45(d，J＝8.92Hz，1H)，7.11-7.34(m，5H)，6.45(s，1H)，2.97-3.15(m，4H)

将60％的NaH分散液(0.5g，2.02mmol)加入到2-苯乙基-5-硝基-1H-吲哚(0.16g，0.6mmol)在DMF(30ml)中的溶液中。将该反应混合物保持在搅拌下30分钟。然后加入碘乙烷(0.15ml，1.9mmol)，将该混合物保持在搅拌下、在室温下过夜。第二天早晨，将该混合物倾入H₂O，保持在搅拌下过夜，得到沉淀，过滤，得到2-苯乙基-1-乙基-5-硝基-1H-吲哚。

2-苯乙基-1-乙基-5-硝基-1H-吲哚：

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.46(d，J＝2.05Hz，1H)，7.97(dd，J＝2.34，9.06Hz，1H)，7.62(d，J＝9.06Hz，1H)，7.13-7.40(m，5H)，6.58(s，1H)，4.26(q，J＝7.31Hz，2H)，2.99-3.18(m，4H)，1.25(t，J＝7.20Hz，3H)。

将SnCl₂(1，2g，6，3mmol)加入到2-苯乙基-1-乙基-5-硝基-1H-吲哚(0.17g，0.57mmol)在THF(50ml)中的溶液中。将该混合物保持在搅拌下、在70℃下过夜。冷却后，将该混合物倾入H₂O，用NaHCO₃中和，用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。减压蒸发溶剂后，用色谱柱纯化固体，使用CHCl₃作为洗脱液，得到2-苯乙基-1-乙基-1H-吲哚-5-胺。

2-苯乙基-1-乙基-1H-吲哚-5-胺：

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ7.25-7.37(m，4H)，7.15-7.25(m，1H)，7.11(d，J＝8.48Hz，1H)，6.72(d，J＝2.05Hz，1H)，6.53(dd，J＝2.19，8.62Hz，1H)，6.02(s，1H)，5.46(br.s.，2H)，4.05(q，J＝7.11Hz，2H)，2.81-3.15(m，4H)，1.18(t，J＝7.16Hz，3H)

r)2-苄基-1-乙基-1H-吲哚-5-胺

使用与对中间体化合物q)所述类似的方法、通过用3-苯基-1-丙炔(0.16g，1.4mmol)替代4-苯基-1-丁炔制备中间体化合物r)。

2-苄基-1-(甲磺酰基)-5-硝基-1H-吲哚：

¹H-NMR(DMSO-d₆)：8.54(d，J＝2，3Hz，1H)；8.17(m，1H)；8.08(m，1H)；7.35(m，5H)；6.53(s，1H)；4.37(s，2H)；3.37(s，3H)。

2-苄基-5-硝基-1H-吲哚：

¹H-NMR(DMSO-d₆)：11.74(b s，1H)；8.44(d，J＝2.3Hz，2H)；7.92(dd，J＝8.9，2.3Hz，1H)；7.44(d，J＝8.9，1H)；7.32(m，4H)；7.24(m，1H)；6.44(s，1H)；4.12(s，2H)。

2-苄基-1-乙基-5-硝基-1H-吲哚：

¹H-NMR(DMSO-d₆)：8.48(d，J＝2.3Hz，1H)；7.98(dd，J＝9.1，2.3Hz，1H)；7.60(d，J＝9.1Hz，1H)；7.30(m，5H)；6.43(s，1H)；4.22(m，4H)；1.09(t，J＝7.2Hz，3H)。

2-苄基-1-乙基-1H-吲哚-5-胺：

¹H-NMR(DMSO-d₆)：7.22(m，5H)；7.04(d，J＝8.5Hz，1H)；6.84(d，J＝2.3Hz，1H)；6.59(dd，J＝8.5，2.3Hz，1H)；6.05(s，1H)；4.05(s，2H)；3.94(q，J＝7.2Hz，2H)；3.22(b s，2H)；1.10(t，J＝7.2Hz，3H)。

s)5-氨基-1-(3-三异丙基硅烷氧基丙基)-1H-吲哚-2-甲酸苯基酰胺

将N₂H₄*H₂O(25ml)滴加到1-氟-4-硝基苯的溶液中。将该混合物保持在搅拌下、首先在室温下3小时，然后在回流状态中1小时。冷却后，过滤得到的沉淀，用H₂O洗涤，得到4-硝基苯基肼，将其不经任何进一步纯化用于下一步反应。

4-硝基苯基肼：M/z(APCI⁺)154(MH⁺)

将4-硝基苯基肼(15g，23mmol)和2-氧代-丙酸乙酯(12g，100mmol)的水(150ml)混悬液在室温下保持搅拌6小时。过滤得到的沉淀，洗涤，得到2-[(4-硝基苯基)-亚肼基]-丙酸乙酯。

¹H-NMR(DMSO-d₆)：10.45(s，1H)；8.21-8.15(m，2H)；7.42-7.36(m，2H)；4.28-4.15(m，2H)；2.15(s，3H)；1.36-1.22(m，3H)。

将多磷酸(PPA，50g)加入到2-[(4-硝基苯基)-亚肼基]-丙酸乙酯(6g，23mmol)在甲苯(70ml)中的溶液中。将该混合物回流3小时，然后在0-10℃冷却，加入NH₄Cl至pH8-9。用乙酸乙酯(EtOAc)萃取该混合物，然后通过减压蒸发除去溶剂。通过硅胶快速色谱法纯化残余物(正己烷/EtOAc，80/20)，用CH₂Cl₂结晶，得到5-硝基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯。

5-硝基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯：

¹H-NMR(DMSO-d₆)：12.55(s，1H)；8.73(s，1H)；8.14(d，1H)；7.62(d，1H)；7.45(s，1H)；4.45-4.32(m，2H)；1.43-1.30(m，3H)。

将无水K₂CO₃(2.36g，17.1mmol)、18-冠-6(1.14g，4.28mmol)和3-三异丙基硅烷氧基丙基溴(3.78g，12.82mmol)加入到5-硝基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯(2g，8.85mmol)在无水乙腈(50ml)中的溶液中。将该混合物在80℃加热4小时。减压蒸发溶剂后，加入水，用二氯甲烷萃取得到的混合物。减压蒸发溶剂后，通过硅胶快速色谱法纯化固体(正己烷/EtOAc，50/10)，得到5-硝基-1-(三异丙基硅烷氧基丙基)-1H-吲哚-2-甲酸乙酯：M/z(APCI⁺)449(MH⁺)

将5-硝基-1-(三异丙基硅烷氧基丙基)-1H-吲哚-2-甲酸乙酯(2.76g，6.2mmol)溶于KOH的5％EtOH/H₂O 1/1溶液(80ml)，在室温保持搅拌16小时。然后蒸发乙醇，将1N HCl加入到该溶液中至pH5。然后用EtOAc萃取该溶液。减压蒸发溶剂后，用正己烷/二氯甲烷10/1洗涤固体，过滤，得到5-硝基-1-(三异丙基硅烷氧基丙基)-1H-吲哚-2-甲酸。

5-硝基-1-(三异丙基硅烷氧基丙基)-1H-吲哚-2-甲酸：

M/z(APCI⁺)421(MH⁺)

将5-硝基-1-(三异丙基硅烷氧基丙基)-1H-吲哚-2-甲酸(0.448g，1.065mmol)、O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸盐(TBTU)(0.478g，1.49mmol)和三乙胺(0.22ml，1.59mmol)在无水丙烯腈(14ml)中的混合物保持在室温下搅拌30分钟。将苯胺(0.109g，1.175mmol)加入到该混合物中。将该混合物保持在50℃-55℃约3小时，然后用H₂O稀释，用乙酸乙酯(EtOAc)萃取。减压蒸发溶剂后，通过硅胶快速色谱法纯化得到的固体(正己烷/EtOAc，50/10)，得到5-硝基-1-(三异丙基硅烷氧基丙基)-1H-吲哚-2-甲酸苯基酰胺：

M/z(APCI⁺)496(MH⁺)

将催化量的10％Pd/C加入到5-硝基-1-(三异丙基硅烷氧基丙基)-1H-吲哚-2-甲酸苯基酰胺(0.323g，0.65mmol)在MeOH(100ml)中的溶液中，将该混合物在29psi氢化12小时。通过Celite^TM过滤该溶液，减压蒸发滤液，得到固体，不经任何进一步纯化使用。

5-氨基-1-(三异丙基硅烷氧基丙基)-1H-吲哚-2-甲酸苯基酰胺：M/z(APCI⁺)466(MH⁺)。

实施例2

本发明化合物的制备

a)制备方法第一种变化形式的实例：

向5-氨基(氮杂)吲哚(Ⅲ)(2mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入三乙胺(2.2mmol)，然后滴加溶于二氯甲烷(10ml)的酰氯(Ⅱ)(2.2mmol)。一旦添加完成，则将该混合物在室温下保持搅拌20小时。然后加入水(50ml)，分离出有机相，用Na₂SO₄干燥。减压蒸发该溶液。纯化得到的粗产物，得到式(Ⅰ)的化合物，其中X、Y、Z、G1、G2、G3、R1、W和R2具有上述给出的含义。

b)制备方法第二种变化形式的实例：

向5-氨基(氮杂)吲哚(Ⅲ)(0.9mmol)的混悬液中加入在二氯甲烷(3ml)中的Amberlyst A21树脂(0.9g)和在二氯甲烷(3ml)中的酰氯(Ⅱ)(0.28mmol)。将该化合物保持在搅拌下20小时。然后通过过滤除去Amberlyst A21树脂，用二氯甲烷(5ml)洗涤。合并有机相，用二甲基甲酰胺(1ml)稀释，与Amberlyst 15树脂(0.9g)一起搅拌5小时。重复该处理两次。通过过滤除去Amberlyst 15树脂，在离心机中蒸发溶液，得到式(Ⅰ)的化合物，其中X、Y、Z、G1、G2、G3、R1、W和R2具有上述给出的含义。

c)制备方法第三种变化形式的实例：

在惰性气体气氛中，将苯甲酸(Ⅱ)(0.67mmol)和5-氨基(氮杂)吲哚(Ⅲ)(0.45mmol)溶于二氯甲烷(8ml)和二甲基甲酰胺(0.8ml)。在室温保持该化合物搅拌10分钟后，加入PS-碳二亚胺树脂(0.73g)。

在将该反应混合物保持搅拌20小时后，通过过滤除去树脂，用二氯甲烷(2×5ml)洗涤。离心蒸发溶液，得到式(Ⅰ)的化合物，其中X、Y、Z、G1、G2、G3、R1、W和R2具有上述给出的含义。

d)制备方法第四种变化形式的实例：

向在0℃搅拌下的苯甲酸(Ⅱ)(10mmol)在二甲基甲酰胺(40ml)中的溶液中加入1-羟基苯并三唑(HOBt)(10mmol)和二环己基碳二亚胺(DCC)(10mmol)。将该化合物保持在0℃下、在搅拌下30分钟，加入溶于二甲基甲酰胺(20ml)的5-氨基(氮杂)吲哚(Ⅲ)(9mmol)。

将该化合物保持在0℃下、在搅拌下再经过30分钟，然后在室温下18小时。过滤该混合物，加入2N盐酸至pH2，过滤出由此形成的沉淀，纯化，得到式(Ⅰ)的化合物，其中X、Y、Z、G1、G2、G3、R1、W和R2具有上述给出的含义。

e)制备方法第五种变化形式的实例：

在惰性气体气氛中向在140℃真空干燥过夜的乙酸铯(6.02mmol)在N，N-二甲基乙酰胺(DMA)(3ml)中的混悬液中加入乙酸钯(0.017mmol)、三苯膦(0.067mmol)、5-氨基(氮杂)吲哚(Ⅳ)^I(3.35mmol)和酰基碘(Ⅴ)(3.68mmol)。

将该反应混合物保持在140℃、在惰性气体气氛中搅拌18小时。将该反应混合物冷却至室温，加入二氯甲烷(50ml)，通过C盐真空过滤得到的混合物。将过滤的有机溶液转入分液漏斗。用H₂O(2×50ml)洗涤有机相，用Na₂SO₄干燥，减压蒸发。

纯化残余物，得到式(Ⅰ)的化合物，其中X、Y、Z、G1、G2、G3、R1、W和R2具有上述给出的含义。

f)使用PL-FMP树脂的固相制备的实例：

下列通过使用制备树脂的固相制备的实例以具体涉及的本发明化合物给出，其中上述举出的G1、G2、G3基团是CH，R1是SO2R^I，X、Y、Z、W、R2和R^I具有上述给出的含义。另外，下列实例包括步骤1和2以制备本发明方法的起始化合物B1，因为中间体A1首先在原位制备，无需从制备树脂中分离。

步骤(1)：将在1％AcOH的DMF溶液(300ml)中的15g PL-FMP树脂(0.9mmol/g)在室温搅拌2h。然后加入N-(4-氨基-2-碘苯基)烷基磺酰胺(54mmol)和11.5g三乙酰氧基硼氢化钠(54mmol)。PL-FMP树脂(Polymer Laboratories，UK制备)是基于醛的适合于通过还原氨基化结合胺类的树脂。将该混合物在室温搅拌24h，然后过滤树脂，用DMF(3x150ml)、DMF/MeOH 1/1体积比(3x150ml)、MeOH(3x150ml)、CH₂Cl₂/MeOH 1/1体积比(3x100ml)和CH₂Cl₂(3x100ml)洗涤。在室温真空干燥树脂，得到18.3g树脂(A1)，将其不经任何进一步纯化使用。

步骤(2)：将1.172g树脂(A1)(0.8mmol，理论值)加入到DMF(10ml)、B2炔(5mmol)、CuI(32mg，0.17mmol)、58mg二氯双(三苯膦)钯(Ⅱ)[Cl₂(PPh₃)₂Pd](0.8mmol)和2ml三乙胺(22mmol)的混合物中。将该混合物在70℃加热，搅拌48h。

通过冷却至室温使反应停止。过滤树脂，用DMF(3x10ml)、DMF/H₂O95/5体积比(3x10ml)、DMF/H₂O 90/10体积比(3x10ml)、DMF/H₂O 80/20体积比(3x10ml)、DMF/H₂O 50/50体积比(3x10ml)、DMF(3x10ml)、DMF/MeOH 50/50体积比(3x10ml)、MeOH(3x10ml)、MeOH/CH₂Cl₂ 50/50体积比(3x10ml)和CH₂Cl₂(3x10ml)洗涤。将到目前为止得到的树脂B1不经任何进一步纯化使用。

步骤(3)：将1.38ml N，N-二异丙基乙胺(DIEA，8.0mmol)和酰氯(6.5mmol)(C2)加入到树脂(B1)在CH₂Cl₂(10ml)中的混悬液中。将该混合物在室温搅拌18h，然后过滤树脂，用CH₂Cl₂(3x10ml)、CH₂Cl₂/DMF 1/1体积比(3x10ml)、DMF(3x10ml)、DMF/H₂O 9/1体积比(3x10ml)、DMF(3x10ml)、DMF/MeOH 1/1体积比(3x10ml)、MeOH(3x10ml)、CH₂Cl₂/MeOH 1/1体积比(3x10ml)、CH₂Cl₂(3x10ml)洗涤。将到目前为止得到的树脂(C1)不经任何进一步纯化使用。

步骤(4)：将树脂(C1)加入到三乙基硅烷(0.15ml)在TFA/DCM 1/1体积比(15ml)中的溶液中，在室温搅拌15分钟。过滤树脂，用三乙基硅烷(0.15ml)在TFA/DCM 1/1体积比(5ml)中的溶液洗涤。真空蒸发该溶液，得到粗产物，用制备型HPLC纯化，得到化合物(Ⅰ)，其中X、Y、Z、W、R2和R^I具有上述给出的含义。

g)2-3位上的双键还原的实例：

将5-氨基(氮杂)吲哚衍生物(1mmol)溶于EtOH(3ml)和浓HCl(1.5ml)的溶液。然后加入锡(5mmol)，将该混合物回流6小时。过滤该混合物，将该溶液倾入20％KOH溶液(5ml)，用Et₂O(3X10ml)萃取。用C盐过滤有机相，用Na₂SO₄干燥。减压蒸发该溶液。纯化得到的粗产物，得到式(Ⅰ′)的化合物，其中X、Y、Z、G1、G2、G3、R1、W和R2具有上述给出的含义。

h)来自相应酯的酸的制备实例：

将(氮杂)吲哚酯衍生物(0.32mmol)溶于THF/EtOH 1/1体积比的溶液(3ml)，然后加入NaOH 1N溶液(1.2ml)，将该混合物在室温搅拌3h。

真空除去有机溶剂，加入1N HCl溶液至酸沉淀。过滤产物，用水洗涤，真空干燥，得到式(Ⅰ)的化合物，其中X、Y、Z、G1、G2、G3、n、W和R2具有上述给出的含义。

i)制备方法的第二种变化形式的实例：

在惰性气体气氛中，将苯甲酸(Ⅱ)(0.74mmol)、TBTU(0.86mmol)和三乙胺(0.98mmol)溶于无水乙腈(3ml)。将该混合物保持在室温搅拌30分钟后，加入化合物(Ⅴ)(0.61mmol)在无水乙腈(3ml)中的溶液。将该混合物保持在室温下搅拌3小时，然后用H2O稀释，用乙酸乙酯(EtOAc)萃取。减压蒸发溶剂后，将得到的固体(0.16mmol)溶于MeOH(15ml)。向该溶液中加入HCl 2N(2.5ml)，将该混合物保持在室温3小时。然后减压蒸发溶剂，将残余物溶于DCM，用NaHCO₃饱和溶液洗涤。蒸发有机溶剂后，纯化残余物，得到化合物(Ⅰ)，其中Y、Z、G1、G2和G3具有上述所示的含义，W是酰胺键，R2是苯基。

由此制备下表1中所示的本发明化合物。在表1中，使用具有如下含义的下列缩写：

纯化A＝结晶

纯化B＝硅胶快速色谱法

纯化C＝制备型HPLC(X Bridge prep.C18；5μm，30x150mm)

EtOAc＝乙酸乙酯

Hex＝己烷

MeOH＝甲醇

EtOH＝乙醇

CH₃CN＝乙腈

H₂O＝水

HCOOH＝甲酸

iPrOH＝异丙醇

Pr₂O＝丙醚

实施例3

体外生物活性

所用的试验能够评价测试化合物对PGE₂产生的抑制能力和相对于PGF_2α产生的选择性。使用人肺腺癌细胞系A549，它对用促炎细胞因子例如IL-1_β刺激特别敏感，并且对该刺激产生响应，特别在两种类前列腺素PGE₂和PGF_2α的产生中具有活性(Thoren S.JakobssonP-J，2000)。

在37℃与5％浓度CO₂下、在孵育箱中在富含5％胎牛血清和L-谷氨酰胺(最终4mM)的适宜培养基(DMEM-Dulbecco改进的Eagles培养基)中用IL-1_β(10ng/ml)刺激细胞，同时用测试化合物将细胞处理22h。

在孵育结束时，使用EIA试剂盒(Cayman Chemicals生产和销售，Ann Arbor，MI，USA)测定产生和释放入上清液的PGE₂和PGF_2α量。

所用的对比化合物是10nM浓度的吲哚美辛(Sigma-Aldrich)，它是抑制等同量度PGE₂和PGF_2α的非类固醇抗炎药。

表示为在10μM浓度下PGE₂和PGF_2α产生抑制百分比的结果如表2所示，其中“ia”(无活性)表示低于20％的抑制活性。

表2

为了示例目的，表3校对了本发明大量化合物的pIC₅₀值，其中pIC₅₀表示IC₅₀的负对数，由此表示与刺激、但未用相同化合物处理的细胞相比化合物抑制PGE₂或PGF_2α产生达50％的化合物浓度。

在表3中，“nd”意指未测定

表3

实施例4

体内生物活性

在醋酸诱导的小鼠拉伸模型中评价测试化合物(Stock J.L.等人，J Clin Inv 2001，107：325-331)。该试验能够评价本发明化合物在炎性痛模型中的镇痛活性。

体重25-30g的雌性CD-1小鼠用于本试验。用混悬于甲基纤维素(MTC)的测试化合物(0.1-10mg/kg)经腹膜内处理动物。用单独的媒介物(MTC)通过相同途径处理对照组动物。

处理后30分钟，动物接受腹膜内注射醋酸(0.7v/v的生理盐水溶液，16μl/g体重)，以诱导炎性痛和检查测试化合物对感受伤害响应的效果。

给予醋酸并且持续20分钟后即刻测定拉伸次数，它表示用于评价感受伤害响应的参数。

如表4报道的，在给予醋酸后20分钟，与用单独的MTC处理的动物相比，本发明的化合物以剂量依赖性方式诱导拉伸减少。

表4

实施例5

PGES同种型之间的选择性

所用试验能够评价本发明化合物抑制人淋巴瘤细胞系U-937中PGE₂产生的能力，所述人淋巴瘤细胞系U-937优选表达酶同种型(cPGES)，它负责在基础条件下、在没有促炎刺激物的存在下产生PGE₂。这种酶形式不同于促炎刺激后主要在A549细胞中表达的酶形式(mPGES-1)。

在这种细胞模型中不存在对PGE₂的抑制活性确保了化合物与负责在有促炎刺激物的存在下产生PGE₂的酶形式相比的选择性。

表示为PGE₂产生抑制百分比的结果如表5所示，其中“ia”(无活性)表示低于20％的抑制活性。所用参比化合物是10nM浓度的吲哚美辛。

发现本发明的化合物并非显著抑制PGE₂产生，这主要归因于cPGES的作用。

表5