利用具有反式剪接功能的蛋白质内含子制备重组多肽

摘要

具有反式剪切活性的蛋白质内含子的N-端剪接结构域和C-端剪接结构域之间能够特异性结合。本发明用蛋白质内含子的一个剪接结构域(N-或C-端剪接结构域)作为载体蛋白与目标多肽融合表达；将另一个剪接结构域(C-或N-端剪接结构域)与支持介质交联，制备亲和柱，用来吸附并纯化上述含有目标多肽的融合蛋白。通过增加亲和层析柱洗涤液中的盐浓度，去除融合蛋白样品中的杂质；通过改变层析柱的pH、温度、或者加入含巯基基团的化学试剂，诱导蛋白质内含子的反式剪切，使目标多肽从融合蛋白中释放出来，并同时获得纯化。