二乙撑三胺五乙酸或乙二胺四乙酸或胺三乙酸修饰卟啉及制备方法及用途

摘要

本发明公开了二乙撑三胺五乙酸或乙二胺四乙酸或胺三乙酸修饰卟啉及制备方法及用途，修饰的卟啉具有下述结构：本发明的二乙撑三胺五乙酸或乙二胺四乙酸或胺三乙酸修饰卟啉(Ⅰ)水溶性好，生物相容性好，该体系具有较高的单线态氧发生行为和较强的光吸收能力，在光动力治疗药物等领域有显著的效果，基于细胞和小鼠试验均证实了这一点。

说明书

技术领域

本发明涉及一种卟啉，具体地涉及一种二乙撑三胺五乙酸或乙二胺四乙酸或胺三乙酸修饰卟啉及制备方法及用途。

背景技术

光动力治疗(PDT)是基于光、光敏剂以及氧气构成的新型治疗方法。相对于传统的化疗放疗以及外科手术而言，PDT具有手术创伤小、具有方位选择性、治疗疾病的适应症广等特点。光动力治疗的核心是光敏剂。光敏剂的性能优劣直接决定了其疗效和用途。目前光敏剂的发展大致包括卟啉类、酞菁类以及其它小分子光敏剂，然而在临床上得到许可应用的还是以卟啉类化合物为主，包括photofrin，卟啉单甲醚、Foscasn等化合物。每种光敏药物均有其响应的适应症，这是由于响应光敏药物的自身特性与相应疾病的特征匹配情况，这包括药物的生理代谢、细胞定位、光吸收波长和产生单线态的能力。目前尚没有一种光敏药物具有普遍的适应性。因而开发新型、高效的光敏药物具有世界普遍性。

卟啉类化合物是一个具有大的芳香结构的体系，其水中溶解性能很差，传统的改善水溶性的方法包括通过在卟啉周边引入磺酸基，糖基以及PEG片段来实现。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供具有良好的生物相容性和水溶性的二乙撑三胺五乙酸或乙二胺四乙酸或胺三乙酸修饰卟啉。

本发明的第二个目的是提供一种二乙撑三胺五乙酸或乙二胺四乙酸或胺三乙酸修饰卟啉制备方法。

本发明的第三个目的是提供二乙撑三胺五乙酸或乙二胺四乙酸或胺三乙酸修饰卟啉二的用途。

本发明的技术方案概述如下：

二乙撑三胺五乙酸或乙二胺四乙酸或胺三乙酸修饰卟啉，具有下述结构：

其中M为H、Fe、Mn、Cu、Zn、Co、Pt或Mg；

R1＝-X-Y；

R2＝-X-Y、-X-H、-H、-OCH₃、-CH₃或-COOH；

R3＝-X-Y、-X-H、-H、-OCH₃、-CH₃或-COOH；

R4＝-X-Y、-X-H、-H、-OCH₃、-CH₃或-COOH；

n＝2、3、4、5或6；

二乙撑三胺五乙酸或乙二胺四乙酸或胺三乙酸修饰卟啉的制备方法，包括如下步骤：按比例，将0.2-0.5g的卟啉(Ⅱa、Ⅱb或Ⅱc)，0.50-3.0g的二乙撑三胺五乙酸酐或乙二胺四乙酸酐或胺三乙酸酐，0.2.0-2.0mL的三乙胺溶于10-30ml的二甲基亚砜或N、N-二甲基甲酰胺或吡啶中，在4，4-二甲氨基吡啶催化下，室温搅拌反应12-36h，加入10-40ml水，静置，析出沉淀，分离得到沉淀物，用乙醚、乙醇或乙酸乙酯洗涤沉淀或依次用二氯甲烷、乙醇洗涤沉泻，重结晶或凝胶柱层析，得到一种二乙撑三胺五乙酸或乙二胺四乙酸或胺三乙酸修饰卟啉(Ⅰa、Ⅰb或Ⅰc)的纯品；所述卟啉(Ⅱa、Ⅱb或Ⅱc)的结构式为：

其中M为H、Fe、Mn、Cu、Zn、Co、Pt或Mg；

R1＝-X-H；

R2＝-X-H、-H、-OCH₃、-CH₃或-COOH；

R3＝-X-H、-H、-OCH₃、-CH₃或-COOH；

R4＝-X-H、-H、-OCH₃、-CH₃或-COOH；

n＝2、3、4、5或6。

二乙撑三胺五乙酸或乙二胺四乙酸或胺三乙酸修饰卟啉(Ⅰa、Ⅰb或Ⅰc)在制备光动力治疗药物的应用。

本发明的二乙撑三胺五乙酸或乙二胺四乙酸或胺三乙酸修饰卟啉(Ⅰ)水溶性好，生物相容性好，该体系具有较高的单线态氧发生行为和较强的光吸收能力，在光动力治疗药物等领域有显著的效果，基于细胞和小鼠试验均证实了这一点。本发明的制备方法简洁易行。

附图说明

图1为本发明二乙撑三胺五乙酸修饰卟啉的紫外图谱；

图2为本发明二乙撑三胺五乙酸修饰卟啉的质谱图；

图3为细胞存活率与本发明化合物药物浓度关系图；

图4为本发明化合物的急性毒性评价(给药后小鼠体重随时间的变化)；

图5为本发明化合物抗肿瘤效果评价。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。下述实施例用于说明本发明，但并不限制本发明，本发明还可以将下述实施例的中所用原料的取量按比例扩大或缩小。

实施例1

二乙撑三胺五乙酸修饰卟啉化合物的制备：

将0.2g 5，10，15，20-四-[对-氨基苯基]卟啉，1.4g二乙撑三胺五乙酸双环酐，1.0ml的三乙胺溶于15ml的二甲基亚砜中，在3mg 4，4-二甲氨基吡啶催化下，室温搅拌12h，反应完毕后，加入30mL水，静置，析出产品，抽滤，得到粗品；用二氯甲烷洗涤3次、乙醇洗涤3次，干燥，重结晶，得到二乙撑三胺五乙酸修饰的卟啉化合物纯品，见下式。

产物二乙撑三胺五乙酸修饰的卟啉的紫外图谱见图1，质谱图见图2，水溶性见图3

其中M为H

R1＝R2＝R3＝R4＝-X-Y、其中

实施例2

将0.2g 5，10，15，20-四-[对-氨基苯基]二氢卟酚，1.4g乙二胺四乙酸酐，1.0ml的三乙胺溶于15ml的二甲基亚砜中，在2mg4，4-二甲氨基吡啶催化下，室温搅拌12h，反应完毕后，加入30mL水，静置，析出产品，抽滤，得到粗品；用二氯甲烷洗涤3次、乙醇洗涤3次，干燥，重结晶，得到乙二胺四乙酸修饰的卟啉化合物，见下式。

其中M为H

R1＝R2＝R3＝R4＝-X-Y

实施例3

将0.2g 5，10，15，20-四-[对-氨基苯基]四氢卟酚，1.4g胺三乙酸酐，1.0ml的三乙胺溶于15ml的二甲基亚砜中，在5mg 4，4-二甲氨基吡啶催化下，室温搅拌12h，反应完毕后，加入30mL水，静置，析出产品。抽滤，得到粗品，用二氯甲烷洗涤3次、乙醇洗涤3次，干燥，重结晶，得到胺三乙酸修饰的卟啉化合物，见下式。

其中M为H

R1＝R2＝R3＝R4＝-X-Y、

实施例4

将0.5g的卟啉(Ⅱa)，3.0g的二乙撑三胺五乙酸酐，2.0mL的三乙胺溶于30ml二甲基亚砜中，在4mg 4，4-二甲氨基吡啶催化下，室温搅拌12h，加入10ml水，静置，析出沉淀，分离得到沉淀物，用乙醚洗涤3次，干燥，重结晶，得到一种二乙撑三胺五乙酸修饰的卟啉化合物纯品。

卟啉(Ⅱa)结构式，其中M为H；R1＝R2＝R3＝R4＝-X-H；其中：

实施例5

将0.3g的卟啉(Ⅱa)，2.0g的二乙撑三胺五乙酸酐，1.0mL的三乙胺溶于20ml N、N-二甲基甲酰胺中，在5mg4，4-二甲氨基吡啶催化下，室温搅拌24h，加入40ml水，静置，析出沉淀，分离得到沉淀物，用6ml乙酸乙酯洗涤3次，干燥，凝胶柱层析，得到一种二乙撑三胺五乙酸修饰的卟啉化合物纯品。

卟啉(Ⅱa)结构式，其中M为H；R1＝-X-H；其中：R2＝R3＝R4＝-H

实施例6

将0.4g的卟啉(Ⅱa)，2.5g的二乙撑三胺五乙酸酐，1.5mL的三乙胺溶于25ml吡啶，在3mg 4，4-二甲氨基吡啶催化下，室温搅拌36h，加入25ml水，静置，析出沉淀，分离得到沉淀物，用5ml乙醇洗涤3次，干燥，重结晶，得到一种二乙撑三胺五乙酸修饰的卟啉化合物纯品。卟啉(Ⅱa)结构式，其中M Fe；R1＝-X-H；其中：n＝2；R2＝R3＝R4＝-OCH₃

实施例7

将0.2g的卟啉(Ⅱa)，0.50g的乙二胺四乙酸酐，0.2.0mL的三乙胺溶于10ml二甲基亚砜中，在3mg 4，4-二甲氨基吡啶催化下，室温搅拌30h，加入10ml水，静置，析出沉淀，分离得到沉淀物，用5ml二氯甲烷洗涤3次，5ml乙醇洗涤3次，干燥，重结晶，得到一种乙二胺四乙酸修饰的卟啉化合物纯品。

卟啉(Ⅱa)结构式，其中M为Mg；R1＝-X-H；其中：n＝6；R2＝R3＝R4＝-CH₃

实施例8

将0.2g的卟啉(Ⅱa)，0.50g的乙二胺四乙酸酐，0.2.0mL的三乙胺溶于10ml N、N-二甲基甲酰胺中，在3mg4，4-二甲氨基吡啶催化下，室温搅拌28h，加入10ml水，静置，析出沉淀，分离得到沉淀物，用5ml二氯甲烷洗涤3次，5ml乙醇洗涤3次，干燥，凝胶柱层析，得到一种乙二胺四乙酸修饰的卟啉化合物纯品。

卟啉(Ⅱa)结构式，其中M为Mn；R1＝-X-H；其中：n＝4；R2＝R3＝R4＝-COOH。

实施例9

将0.3g的卟啉(Ⅱa)，1.0g的乙二胺四乙酸酐，1.0mL的三乙胺溶于12ml吡啶中，在3mg 4，4-二甲氨基吡啶催化下，室温搅拌16h，加入30ml水，静置，析出沉淀，分离得到沉淀物，用5ml二氯甲烷洗涤3次，5ml乙醇洗涤3次，干燥，凝胶柱层析，得到一种乙二胺四乙酸修饰的卟啉化合物纯品。

卟啉(Ⅱa)结构式，其中M为Cu；n＝2。

实施例10

将0.2g的卟啉(Ⅱa)，0.50g的胺三乙酸酐，0.5mL的三乙胺溶于10ml二甲基亚砜中，在3mg 4，4-二甲氨基吡啶催化下，室温搅拌18h，加入15ml水，静置，析出沉淀，分离得到沉淀物，用5ml二氯甲烷洗涤3次，5ml乙醇洗涤3次，干燥，重结晶，得到一种胺三乙酸修饰的卟啉化合物纯品。

卟啉(Ⅱa)结构式，其中M为Co；R1＝-X-H；其中：

n＝5；R2＝R3＝R4＝-OCH₃

实施例11

将0.4g的卟啉(Ⅱa)，0.25.0g的胺三乙酸酐，2.0mL的三乙胺溶于20ml N、N-二甲基甲酰胺中，在3mg 4，4-二甲氨基吡啶催化下，室温搅拌30h，加入35ml水，静置，析出沉淀，分离得到沉淀物，用5ml二氯甲烷洗涤3次，5ml乙醇洗涤3次，干燥，重结晶，得到一种胺三乙酸修饰的卟啉化合物纯品。

卟啉(Ⅱa)结构式，其中M为Zn：R1＝-X-H；其中：n＝6；R2＝R3＝R4＝-H

实施例12

将0.5g的卟啉(Ⅱa)，3.0g的胺三乙酸酐，1.0mL的三乙胺溶于30ml吡啶中，在3mg4，4-二甲氨基吡啶催化下，室温搅拌36h，加入40ml水，静置，析出沉淀，分离得到沉淀物，用5ml二氯甲烷洗涤3次，5ml乙醇洗涤3次，干燥，凝胶柱层析，得到一种胺三乙酸修饰的卟啉化合物纯品。

卟啉(Ⅱa)结构式，其中M为Zn；R1＝-X-H；其中：n＝6；R2＝R3＝R4＝-H

实施例4-11的卟啉环中苯基上的取代基为对位，也可以选用取代基在邻位或间位的为原料制备修饰的卟啉化合物。

实施例13

步骤同实施例4，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-X-H；R3＝-X-H；R4＝-X-H；n＝2。

实施例14

步骤同实施例4，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-X-H；R3＝-X-H；R4＝-X-H；n＝6。

实施例15

步骤同实施例4，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-X-H；R3＝-X-H；R4＝-X-H；n＝3。

实施例13-15的卟啉环中苯基上的取代基为对位，也可以选用取代基在邻位或间位的为原料制备修饰的卟啉化合物。

实施例16

步骤同实施例5，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-H；R3＝-H；R4＝-H；n＝2。

实施例17

步骤同实施例5，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-H；R3＝-H；R4＝-H；n＝2。

实施例18

步骤同实施例5，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-H；R3＝-H；R4＝-H；n＝6。

实施例16-18的卟啉环中苯基上的取代基为对位，也可以选用取代基在邻位或间位的为原料制备修饰的卟啉化合物。

实施例19

步骤同实施例6，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-OCH₃；R3＝-OCH₃；R4＝-OCH₃；n＝2。

实施例20

步骤同实施例6，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-OCH₃；R3＝-OCH₃；R4＝-OCH₃；n＝4。

实施例21

步骤同实施例6，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-OCH₃；R3＝-OCH₃；R4＝-OCH₃；n＝6。

实施例19-21的卟啉环中苯基上的取代基为对位，也可以选用取代基在邻位或间位的为原料制备修饰的卟啉化合物。

实施例22

步骤同实施例7，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-CH₃；R3＝-CH₃；R4＝-CH₃；n＝2。

实施例23

步骤同实施例7，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-CH₃；R3＝-CH₃；R4＝-CH₃；n＝4。

实施例24

步骤同实施例7，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-CH₃；R3＝-CH₃；R4＝-CH₃；n＝6。

实施例22-24的卟啉环中苯基上的取代基为对位，也可以选用取代基在邻位或间位的为原料制备修饰的卟啉化合物。

实施例25

步骤同实施例8，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-COOH；R3＝-COOH；R4＝-COOH；n＝2。

实施例26

步骤同实施例8，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-COOH；R3＝-COOH；R4＝-COOH；n＝4。

实施例27

步骤同实施例8，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：R1＝-X-H；R2＝-COOH；R3＝-COOH；R4＝-COOH；n＝6。

实施例25-27的卟啉环中苯基上的取代基为对位，也可以选用取代基在邻位或间位的为原料制备修饰的卟啉化合物。

实施例28

步骤同实施例9，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-COOH；R3＝-COOH；R4＝-COOH；n＝2。

实施例29

步骤同实施例9，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-COOH；R3＝-COOH；R4＝-COOH；n＝4。

实施例30

步骤同实施例9，原料卟啉选用结构式(Ⅱa)其中：

R1＝-X-H；R2＝-COOH；R3＝-COOH；R4＝-COOH；n＝6。

实施例28-30的卟啉环中苯基上的取代基为对位，也可以选用取代基在邻位或间位的为原料制备修饰的卟啉化合物。

实施例31-实施例57，用原料卟啉(Ⅱb)替代原料卟啉(Ⅱa)，反应条件和其它原料依次与实施例4-30相同。

实施例58-实施例84，用原料卟啉(ⅡC)替代原原料卟啉(Ⅱa)，反应条件或其它原料依次与实施例4-30相同。

实施例85

二乙撑三胺五乙酸修饰卟啉化合物的制备：

将0.2g 5，10，15-三[对-氨基苯基]-20-苯基卟啉，1.4g二乙撑三胺五乙酸双环酐，1.0ml的三乙胺溶于15ml的二甲基亚砜中，在3mg 4，4-二甲氨基吡啶催化下，室温搅拌12h，反应完毕后，加入30mL水，静置，析出产品，抽滤，得到粗品；用二氯甲烷洗涤3次、乙醇洗涤3次，干燥，重结晶，得到二乙撑三胺五乙酸修饰的卟啉化合物纯品，见下式。

其中M为H

R1＝R2＝R3＝-X-Y，R4＝H，其中

实施例86

将0.2g 5，10-二[对-氨基苯基]-15，20-二苯基卟啉，1.4g二乙撑三胺五乙酸双环酐，1.0ml的三乙胺溶于15ml的二甲基亚砜中，在3mg 4，4-二甲氨基吡啶催化下，室温搅拌12h，反应完毕后，加入30mL水，静置，析出产品，抽滤，得到粗品；用二氯甲烷洗涤3次、乙醇洗涤3次，干燥，重结晶，得到二乙撑三胺五乙酸修饰的卟啉化合物纯品，见下式。

其中M为H

R3＝R4＝-X-Y，R3＝R4＝H，其中

实施例87

将0.2g 5-[对-氨基苯基]-10，15，20-三苯基卟啉，1.4g二乙撑三胺五乙酸双环酐，1.0ml的三乙胺溶于15ml的二甲基亚砜中，在3mg 4，4-二甲氨基吡啶催化下，室温搅拌12h，反应完毕后，加入30mL水，静置，析出产品，抽滤，得到粗品；用二氯甲烷洗涤3次、乙醇洗涤3次，干燥，重结晶，得到二乙撑三胺五乙酸修饰的卟啉化合物纯品，见下式。

其中M为H

R1＝-X-Y，R2＝R3＝R4＝H，其中

实施例88光动力治疗药物(实施例1)细胞评价

1.肿瘤细胞铺板：将处于生长对数期的癌细胞用胰蛋白酶消化后，接种在96孔板中，铺板密度为1×10⁴/孔个细胞。本实验共设12，5，6.25，3.125，1.5625，0.78μmol/L五个药物浓度组，一个阴性对照组和一个空白对照组(只在实验最后一步加180μL DMSO)，每组设4个副孔。铺板后将96孔板放入CO₂培养箱内孵育过夜，待细胞贴壁。

2.给药：细胞贴壁后，倾去培养液，每孔依次加入依比列配好的药物溶液200μL，浓度依次为12，5，6.25，3.125，1.5625，0.78μmol/L(阴性对照组以培养液代替药物溶液)。将96孔板放入37℃ CO₂培养箱中孵箱中孵育24小时。(注意此整个过程要避光)。

3.照光行光动力学治疗：650nm激光激发波长，8J/cm²，照光20min。

4.加MTT显色：照光结束后，培养箱中继续孵育3小时，然后每孔加入5mg/mL的MTT20μL，培养箱中孵育1h。(注意此整个过程要避光)。

5.吸光度值检测：倾去孔内液体，每孔中加入180μL DMSO，立即将96孔板放入酶标仪内，震荡5分钟。490nm波长处检测各实验孔的OD值。计算细胞存活率(％)＝[(处理组OD值-空白对照组OD值)/(阴性对照组OD值-空白对照组OD值)]×100％。

光动力药物剂量与细胞毒性的关联(激光能量密度为8J/cm²，光照时间为20分钟，光照波长为650nm。细胞存活率通过MTT法分析，试验用细胞为DMTM肝癌细胞。)

结果表明，随着药物浓度增大，细胞的药物毒性增强。

见图3和表1。

(图3中，化合物1为实施例1制备，化合物2为实施例85制备，化合物3为实施例86制备，化合物4为实施例87制备。

单位是(μmol/L)(S表示Survival存活率，右下脚数字为相应浓度)

表1

  Compound  1(实施例1制 备的修饰卟啉)  2(实施例85制 备的修饰卟啉)  3(实施例86制 备的修饰卟啉)  4(实施例87制 备的修饰卟啉)  S_0.78  99.98％  98.3224％  92.9389％  93.8838％  S_1.56  97.36％  89.9877％  96.822％  95.4945％  S_3.12  75.7196％  68.3456％  71.2608％  74.4839％  Sl_6.25  26.9625％  28.4531％  36.352％  32.985％  S_12.5  19.9712％  25.4808％  35.124％  28.106％

实验证明，本发明各实施例制备的本发明的化合物随着浓度增大，细胞的药物毒性都有不同程度的增强。

实施例89化合物的急性毒性评价

对实施例1制备的样品进行了初步的安全评价，选取体重为20～22g昆明小鼠80只，雌雄各半，随机分为2组，空白组与实验组，每组40只。禁食12小时后，对实验组进行尾静脉注射浓度为1mM/L样品，每只小鼠注射剂量为200μl/20g。观察并记录2周内小鼠的生理指标变化情况，结果如表2，结果表明，血常规检查中，在红细胞、白细胞、血小板等指标进行方差分析结果中，实验组与空白组相比，除了红细胞平均体积(MCV)在第1天、第7天与空白组相比有一定的降低外，其他指标均未见明显的异常。在观察15天内的实验组与空白组中的小鼠体重变化中发现，两组体重变化无明显差异。见图4(浓度为1mmol/L的实施例1制备的样品与空白组尾静脉给药后，15天内的体重变化情况)

表2浓度为1mmol/L的样品(实施例1)尾静脉给药后，15天内的血常规变化

(其中，括号内为空白组数据，P≤0.05)

实验证明，本发明各实施例制备的化合物与空白组相比，两组体重变化无明显差异。

实施例90

二乙撑三胺五乙酸修饰卟啉的光动力治疗用途

试验方法：

1.建立小鼠肝癌H-22模型的建立：①小鼠腿毛：先剪去小鼠背部靠近尾部的较长的毛，然后利用8％的硫化钠褪去约2×2cm大小的皮肤，备用；②24h后，取一只肝癌H-22腹水生长良好的小鼠，取出腹水2-3ml，按1∶3的比例进行稀释，细胞浓度大约10⁷/ml，常规皮肤消毒后，用一毫升注射器每只小鼠背后腿毛区皮下接种0.2ml的瘤液。

2、给药：接种肿瘤5-7天后(小鼠背部瘤的大小约为0.5cm×0.5cm)，开始给药(实施例1，实施例85，实施例86，实施例87制备)给药浓度为20mg/kgw(0.2ml)，瘤内、局部给药(在肿瘤的局部皮下和肿瘤内给药)。给药后小鼠避光饲养。

3、照光：给药后12h和24h后，用波长为649nm的激光，光密度为0.194w/cm²。照光时间660s，半径0.75cm，照光能量72J/cm²。4、21天后处死，称瘤重，计算抑瘤率。(对照组瘤重-PDT组瘤重)/对照组瘤重*100％。结果显示，1a(实施例1制备的修饰卟啉)联合PDT治疗后荷肝癌H-22昆明小鼠有明显的抑制作用，治疗后大部分肿瘤不再增殖，有的小鼠肿瘤几乎消失，联合PDT治疗21天后荷肝癌H-22昆明小鼠的影响，具体结果见图5和表3。

表3：1(实施例1制备)、2(实施例85制备)、3(实施例86制备)4、(实施例87制备)的本发明修饰卟啉联合PDT治疗21天后对荷肝癌H-22昆明小鼠的抑制率

  组别  抑制率  对照  1-PDT(10mg/kg)  48.56％

  组别  抑制率  1-PDT(20mg/kg)  69.12％  1-PDT(40mg/kg)  73.35％  2-PDT(10mg/kg)  45.56％  2-PDT(20mg/kg)  51.02％  2-PDT(40mg/kg)  62.35％  3-PDT(10mg/kg)  38.56％  3-PDT(20mg/kg)  42.32％  3-PDT(40mg/kg)  58.62％  4-PDT(10mg/kg)  40.06％  4-PDT(20mg/kg)  48.62％  4-PDT(40mg/kg)  6.62％

实验证明本发明各个实施例制备的修饰卟啉均具有光动力抑制肿瘤的作用。

实施例91

水溶性测定：

实施例1 制备的修饰卟啉    水溶解性：(6.31g/L)

实施例85制备的修饰卟啉    水溶解性：(1.78g/L)

实施例86制备的修饰卟啉    水溶解性：(1.450.76g/L)

实施例87制备的修饰卟啉    水溶解性：(0.9647g/L)

实验证明本发明各个实施例制备的修饰卟啉均水溶性与对应的原料相比都有不同程度的增加。