用于变应性眼病或变应性鼻病的包含三环性三唑并苯并氮杂衍生物的预防剂或治疗剂

摘要

本发明提供了用于预防或治疗变应性眼病或变应性鼻病的药物组合物，所述药物组合物包含7，8－二甲氧基－4(5H)，10－二氧代－1H－1，2，3－三唑并[4，5－c][1]苯并氮杂、2－(1－异丙氧基羰基氧基－2－甲基丙基)－7，8－二甲氧基－4(5H)，10－二氧代－2H－1，2，3－三唑并[4，5－c][1]苯并氮杂或其可药用盐。本发明的药物组合物具有少的副作用，在显示对常规点眼药治疗抗性的晚期相中产生强的预防效果和治疗效果，并且可以合适地用于局部施用。

说明书

相关申请的交叉参考

本申请基于在先日本专利申请号055706/2006(申请日：2006年3月2日)和055711/2006(申请日：2006年3月2日)并要求它们的优先权的权益，其中所述专利的完整内容在本文中通过参考而并入。

发明背景

发明领域

本发明提供了用于变应性眼病或变应性鼻病的预防剂或治疗剂，其包含三环性三唑并苯并氮杂(triazolobenzazepine)衍生物。更具体地，本发明提供了用于预防或治疗变应性眼病或变应性鼻病的药物组合物，其包含7，8-二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-1H-1，2，3-三唑并[4，5-c][1]苯并氮杂、其前体药物或其可药用盐。

背景技术

变应性眼病是涉及眼及其周围组织的由于多种刺激所诱导的变态反应如免疫反应的症状。其具体的例子包括季节变应性结膜炎、慢性变应性结膜炎、春季结膜炎、特应性角结膜炎和巨乳头性结膜炎。在它们当中，变应性结膜炎的病理学状态主要是基于I型变态反应的结膜/角膜炎性疾病。I型变态反应是包含早期相(速发型反应)和晚期相(迟发型反应)的二相反应。

早期相在暴露于抗原15至30分钟后出现并且在此后1至2小时内消失。晚期相在早期相消失后6至12小时出现并且持续24至48小时(见Hansen I.等：变应性鼻炎早期相和晚期相中的炎症介质，Curr.Opin.Allergy Clin.Immunol.4；159-163，2004)。在早期相中，症状如瘙痒、流泪、充血、结膜和眼睑水肿因化学递质如从肥大细胞中释放的组胺的作用而出现。另一方面，晚期相是由炎症细胞如T细胞和嗜酸性粒细胞的侵入、由它们产生的细胞因子/趋化因子、从嗜酸性粒细胞释放的毒性蛋白所诱导的持续性炎症反应。认为晚期相参与病理学状态的严重性增加及拖延(见Azuma Kozue，Ohno Shigeaki：变应性结膜疾病概览，“NEW MOOK眼科变应性眼病6”，Ohno Shigeaki等编著，KANEHARA & Co.，LTD.，1-5，2003)。

对于早期相，组胺释放抑制剂色甘酸盐(cromoglycate)、和抗组胺药是有效的(见King H.C.等编著的“Allergy in ENT Practice The basicguide 2^nd(耳鼻喉科实践中的变态反应，基本指南，第二版”中King H.C.：变应性鼻炎的药物疗法，Thieme Medical Publisher，Inc.178-204，2005)。另一方面，晚期相例如由细胞因子/趋化因子和毒性蛋白以及组胺而诱导(见Kramer M.F.等：晚期相变应性反应中的鼻IL-16和MIP-1a.Allergyand Asthma Proc.22；127-132，2001；Economides A和Kaliner M.A.：第5章变应性鼻炎，在Kaliner M.A编著的“Current Review of Rhinitis(鼻炎最新综述)”中，Current Medicine，Inc.35-51，2002)。它们在晚期相的炎症中发挥重要作用。在这种联系下，存在即便左卡巴斯汀(levocabastine)(其是最有效的抗组胺药)也不能抑制晚期相的报道(见A.B.Kay Blackwell Science，Inc.编著的“Allergy and Allergic Diseases(变态反应和变应性疾病)”中，Hingorani M.和Lightman S.：眼变态反应，1645-1670，1997)。

类固醇具有有效的细胞因子/趋化因子产生抑制性活性并且针对晚期相具有极有效的作用(见Ciprandi G.B等：地夫可特(Deflazacort)针对由变应原特异性结膜激发试验所诱导的晚期相但不针对早期相反应有保护作用.Allergy 48；421-430，1993)。然而，类固醇具有副作用风险，如引起眼压增加和青光眼发作。因此，推荐短期使用类固醇。此外，也应当由眼科专业医生定期对副作用实施检查(见Takamura Etsuko：变应性结膜炎中眼部瘙痒的病因及治疗，Allergology 19；444-449，2005；Barney N.P.和Graziano F.M.：眼的变应性和免疫学疾病，在Adkinson N.F.等编著的Middleton′s Allergy principles & practice第6版，Mosby，Inc.1599-1617，2003)。因此，对变应性眼病中类固醇的使用存在诸多限制，并且因此使用类固醇是麻烦的。

因而，仍需要开发用于治疗和预防变应性眼病的医药品，所述医药品在晚期相中也有效并且没有副作用。

变应性鼻病是涉及鼻及其周围组织的基于由多种刺激所诱导的变态反应如免疫反应的症状。其具体例子包括季节变应性鼻炎、全年变应性鼻炎和变应性鼻窦炎(allergic sinusitis)。变应性鼻炎的临床疾病也基于I型变态反应。

在I型变态反应的早期相中，例如喷嚏、瘙痒、鼻流汁和鼻粘膜水肿因化学介质如从肥大细胞中释放的组胺而出现。如同眼病的情况，组胺释放抑制剂色甘酸盐、和抗组胺药在早期相中也是有效的。然而在晚期相中，除组胺以外，还有由浸润的炎症细胞如T细胞和嗜酸性粒所产生的细胞细胞因子/趋化因子和毒性蛋白也诱导上述症状。因此，据报道不能仅通过阻断组胺的作用而获得任何满意的效应(见Bensch G.W.等：评估鼻抗原攻击后鼻分泌物中的细胞因子：缺乏抗组胺药的影响.Ann.Allergy Asthmaimmunol.88；457-462，2002)。认为晚期相参与病理学状态严重性增加和拖延，并且实际上，抗组胺药的内服药物广泛用作鼻炎的基本处方药物。然而，据报道额外施用抗组胺药的滴鼻剂至鼻炎患者未改善这种作用(见Bereger W.E.等：氮卓斯汀(azelastine)鼻喷雾剂在对氯雷他定(loratadine)没有令人满意应答的患者中的效力，Ann.Allergy Asthma Immunol.91；205-211，2003；LaForce C.F.等：氮卓斯汀鼻喷雾剂在用非索非那定(fexofenadine)治疗后仍然有症候的季节变应性鼻炎患者中的效力，Ann.Allergy Asthma Immunol.93；154-159，2004)。这支持如此事实，即晚期相中因侵入的炎症细胞所诱导的症状不能毫不困难地由抗组胺药抑制。

类固醇具有有效的细胞因子/趋化因子产生抑制性活性并针对变应性鼻炎变态反应中的晚期相具有极有效的作用(见Drain K.L.和Li J.T.C.：第17章皮质类固醇及其在鼻炎中的用途，在“Current Review ofRhinitis(鼻炎最新综述)”中，Kaliner M.A.编著，Current Medicine，Inc.163-173，2002)。就鼻炎中的临床作用而言，已经证实类固醇胜过抗组胺药(见Adrinson Jr.N.F.等编著的“Middleton′s Allergy Principles&Practice第6版”中Schleimer R.P.等：糖皮质激素，Mosby，Inc.870-913，2003)。然而类固醇有时候在鼻内诱导局部副作用如鼻出血、局部刺激和干燥(见上文所述的Drain K.L.和Li J.T.C.：第17章皮质类固醇及其在鼻炎中的用途，在Kaliner M.A.编著的“Current Review of Rhinitis(鼻炎最新综述)”中，Current Medicine，Inc.163-173，2002)。在患有变应性疾病合并其它变应性疾病如哮喘及特应性湿疹并且已经使用类固醇的患者中，在一些情况下，添加鼻用类固醇有时候造成对类固醇的过度暴露并且增加全身性副作用的风险(下丘脑-垂体-肾上腺系统抑制和抑制青春期中的早期生长)。出于这些原因，对变应性鼻病中类固醇的使用存在诸多限制。

因此，本领域仍需要开发用于治疗和预防变应性鼻病的医药品，所述医药品在晚期相中也有效并且引起副作用的可能性更小。

7，8-二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-1H-1，2，3-三唑并[4，5-c][1]苯并氮杂(本文此后称作“化合物A”)是具有下列结构的化合物并且已知具有抗过敏活性(见WO 95/18130(日本专利号3290664和美国专利号5686442)。

(化合物A)

然而，该文献(上文所述的WO 95/18130)涉及用于预防变应性疾病的经口剂(片剂和胶囊剂)中的有效成分。实际上，药理学试验例仅显示在通过经口施用含有化合物A的三环性苯并氮杂衍生物而抑制变态反应方面的预防作用。具体而言，该文献公开了通过在变态反应发作前经口施用三环性苯并氮杂衍生物而抑制足部皮肤中变态反应的预防作用。该文献描述了发作抑制效果(抑制率)是约50％。

如上所述，抑制组胺释放的色甘酸盐是在变态反应早期相中有效的。然而，应当注意以下事实。在暴露于抗原之前施用时，色甘酸盐是有效的，然而另一方面，在变态反应诱导后，该作用消失。因此，认为色甘酸盐具有这样的特性，即作用发生慢并且该作用是温和的。另一方面，在临床上，由于治疗是在有症候的状态下开始的，因而不能仅由预防作用而毫不困难地期望满意的临床效果。因此在变态反应发作之后施用药剂时显现治疗效果是十分重要的。

2-(1-异丙氧基羰基氧基-2-甲基丙基)-7，8-二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-2H-1，2，3-三唑并[4，5-c][1]苯并氮杂(本文此后常称作“化合物B”)是化合物A的前体药物并具有以下结构。已知化合物B在穿过消化道粘膜后在体内转化成化合物A并且显现抗过敏作用作为其药物效力。已经证实与化合物A相比，化合物B在经口施用后可以提高吸收达7倍(见WO99/16770(日本专利号3188482和美国专利号6372735)。

(化合物B)

然而该文献(上文所述的WO 99/16770)也涉及用于预防变应性疾病的经口剂中的有效成分，并且仅公开了经口剂如片剂和细粒剂作为制剂例子。另外，该文献中公开的药理学试验实施例也涉及经口剂。

通常，即便活性成分例如在消化道中经粘膜吸收至活体内并表现优异的作用时，实际上不能说可以在肠胃外施用中维持可与经口施用时可比较的优异作用。例如，当肠胃外制剂局部施用至变应性疾病的靶器官中的粘膜时，由于目的活性成分直接作用于患病部分，因此，应当充分考虑剂量和剂型。此外，由直接作用所致副作用的可能性也不可忽视。通常，应当与经口施用的研究结果不同地另外单独地进行研究。

发明概述

本发明人现已对预防和治疗变应性眼病或变应性鼻病中有效并且不显现明显副作用的医药品进行了研究。作为结果，已经发现晚期相可以通过局部施用化合物A至眼或鼻而在变态反应发作之前基本上完全受到抑制(即用于预防目的)。还已经发现晚期相可以通过局部施用化合物A至眼或鼻而在变应性炎症进展期间有效地受到抑制(即用于治疗目的)。此外，已经发现在体内转化成化合物A的化合物B具有与化合物A相同的作用并且因此是可用的。本发明以这些研究结果为基础。

因此，本发明的目的是提供在预防和治疗变应性眼病或变应性鼻病中有效并且与此同时显现很少副作用及适于局部施用的医药品。

根据本发明，提供了用于预防或治疗变应性眼病或变应性鼻病的药物组合物，其包含7，8-二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-1H-1，2，3-三唑并[4，5-c][1]苯并氮杂(化合物A)、其前体药物或其可药用盐。

本发明还提供了用于预防或治疗变应性眼病或变应性鼻病的药物组合物，其包含：

2-(1-异丙氧基羰基氧基-2-甲基丙基)-7，8-二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-2H-1，2，3-三唑并[4，5-c][1]苯并氮杂(化合物B)或其可药用盐。化合物B是化合物A的前体药物。

在本发明的优选实施方案中，预防性或治疗性药物组合物作为点眼剂(ocular instillation)施用。在本发明的另一个优选实施方案中，预防性或治疗性药物组合物作为滴鼻剂(nasal drops)施用。

在本发明更优选的实施方案中，预防性或治疗性药物组合物还包含可药用载体。

根据本发明，还提供了用于预防或治疗变应性眼病或变应性鼻病的方法，其包括施用预防有效量或治疗有效量的7，8-二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-1H-1，2，3-三唑并[4，5-c][1]苯并氮杂其前体药物或其可药用盐至哺乳动物。

在本发明的另一个实施方案中，提供了用于预防或治疗变应性眼病或变应性鼻病的方法，其包括施用预防有效量或治疗有效量的2-(1-异丙氧基羰基氧基-2-甲基丙基)-7，8-二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-2H-1，2，3-三唑并[4，5-c][1]苯并氮杂或其可药用盐至哺乳动物。

本发明，还提供了7，8-二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-1H-1，2，3-三唑并[4，5-c][1]苯并氮杂其前体药物或其可药用盐的用途，用于制备预防或治疗变应性眼病或变应性鼻病的药剂。

根据本发明的另一个方面，提供了2-(1-异丙氧基羰基氧基-2-甲基丙基)-7，8-二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-2H-1，2，3-三唑并[4，5-c][1]苯并氮杂或其可药用盐的用途，用于制备预防或治疗变应性眼病或变应性鼻病的药剂。

此外，本发明可以视作：(1)用于变应性眼病或变应性鼻病的预防剂或治疗剂，其包含7，8-二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-1H-1，2，3-三唑并[4，5-c][1]苯并氮杂或其可药用盐；(2)用于变应性眼病或变应性鼻病的预防剂或治疗剂，其包含2-(1-异丙氧基羰基氧基-2-甲基丙基)-7，8-二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-2H-1，2，3-三唑并[4，5-c][1]苯并氮杂或其可药用盐；(3)根据以上项(1)或(2)的用于变应性眼病的预防剂或治疗剂，其作为点眼剂施用；(4)根据以上项(1)或(2)的用于变应性鼻病的预防剂或治疗剂，其作为滴鼻剂施用。

用于预防或治疗变应性眼病或变应性鼻病的本发明药物组合物具有很少副作用，并且在对现有的滴眼剂或滴鼻剂的疗法显示抗性的所述晚期相中具备有效预防作用和治疗作用。

发明详述

化合物

化合物A(7，8-二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-1H-1，2，3-三唑并[4，5-c][1]苯并氮杂)作为本发明中的活性成分是常规化合物并且可以通过上文所述WO 95/18130中对该化合物产生方法的描述和对实施例43的所述方法而产生。

本发明中的活性成分可以是化合物A的前体药物、或者是化合物A、化合物A的前体药物的可药用盐。化合物A的前体药物是这样的类型，其中该化合物A中的1，2，3-三唑基已经受到修饰，并且可以根据上文所述WO99/16770而产生。

本发明中优选的前体药物是化合物B(2-(1-异丙氧基羰基氧基-2-甲基丙基)-7，8-二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-2H-1，2，3-三唑并[4，5-c][1]苯并氮杂)并且可以通过上文所述的WO99/16770中对实施例20的描述而产生。

在本发明中，化合物A或化合物B作为活性成分可以转化成能够用作活性成分的其可药用盐。化合物A或化合物B的可药用盐包括可医用的非毒性盐。合适的非毒性盐包括碱金属盐或碱土金属盐，如钠、钾或钙盐；氢卤酸盐，如氢氟酸盐、氢氯酸盐、氢溴酸盐或氢碘酸盐；无机酸盐，如硝酸盐、高氯酸盐、硫酸盐或磷酸盐；低级烷基磺酸盐，如甲磺酸盐、三氟甲磺酸盐或乙磺酸盐(“低级烷基”优选地是C1-3烷基)；芳基磺酸盐，如苯磺酸盐或对甲苯磺酸盐；有机酸盐，如延胡索酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、草酸盐或马来酸盐；和氨基酸盐，如谷氨酸盐或精氨酸盐。

药物组合物

如工作实施例中所示，局部施用(点眼施用)作为本发明中活性成分的化合物A至实验动物确实显示针对变应性眼病、尤其变应性结膜炎的预防作用和治疗作用。这种作用显著优于现有药物并且还可以抑制晚期相变态反应(试验实施例1和2)。此外，当化合物A和化合物B作为点眼剂施用时，化合物A和化合物B的浓度可以在比经口施用时的更高浓度上以更长的时间局部维持(试验实施例3)。局部施用(点鼻施用)化合物A至实验动物确实显示对变应性鼻病、尤其变应性鼻炎的预防作用和治疗作用。这种作用显著优于现有药物(试验实施例4-1，4-2和5)。当化合物A和化合物B作为滴鼻剂施用和经口施用时，点鼻施用可以在较低的剂量上实现较高的抑制性作用(尤其试验实施例4-2和4-3)。

WO 99/16770显示了化合物B是化合物A的前体药物。

另外，从安全性角度看，与经口施用相比，在局部施用(点眼/点鼻施用)中，对全部身体的暴露量低并且在低得多的剂量上显现有效作用，表明全身性副作用可能显著地降低。此外，局部刺激试验的结果显示了化合物A和化合物B的安全性。具体而言，研究了对人眼中角膜的上皮细胞的毒性。作为结果，对于24小时细胞存活率而言，在浓度范围100nM-0.3mM中没有观察到任何毒性。这种浓度是将化合物A显示充分效果的0.1％液体剂点眼时的眼组织最大浓度1.29μg/g(4.7μM)的60倍以上。即便当实施使用兔子的重度眼刺激试验时，在所述试验中点眼每日6次，间隔30分钟实施，持续2日，结果如下：对于3％化合物A和1％化合物B，观察到结膜仅轻微变红，并且对于0.5％化合物A，根本观察不到刺激作用，表明这些化合物是高度安全的药物。

因此，本发明中的活性成分显现对变应性眼病或变应性鼻病的优异预防作用或治疗作用，优选地当局部应用时。如上所述，根据本发明，提供了用于预防或治疗变应性眼病或变应性鼻病的药物组合物，所述药物组合物包含化合物A、其前体药物或其可药用盐、或化合物B或其可药用盐。

变应性眼病包括例如季节变应性结膜炎、慢性变应性结膜炎、春季结膜炎、特应性角结膜炎和巨乳头性结膜炎。

变应性鼻病包括例如季节变应性鼻炎、慢性变应性鼻炎、变应性鼻窦炎和花粉症。

用于预防或治疗变应性眼病的本发明药物组合物可以是任何药物组合物，只要它可以局部施用例如至眼部粘膜。本发明的这种药物组合物优选地作为点眼剂施用。局部施用、尤其点眼可以有利地高度抑制结膜(其是变应性眼病中的靶器官)内的炎症反应。因此，本发明的药物组合物优选地以点眼剂形式使用。

用于预防或治疗变应性眼病的药物组合物作为点眼剂施用时，该药物组合物可以根据常规方法通过将该药物组合物与本身已知的可药用载体、赋形剂和稀释剂混合而配制成滴眼剂。

在本发明中，可药用载体、赋形剂和稀释剂有时候统称为可药用载体。

用于预防或治疗变应性眼病的本发明组合物作为滴眼剂使用时，这种药物组合物可以以作为滴眼剂常用的任何形式提供。例如，滴眼剂可以以水性滴眼剂如水性滴眼液体剂、水性悬浮滴眼液体剂、粘性滴眼液体剂和可溶化滴眼液体剂；以及非水性滴眼剂如非水性滴眼液体剂和非水性悬浮液体剂形式提供。在本发明中，更优选水性滴眼液体剂。

用于预防或治疗变应性眼病的药物组合物例如配制成水性滴眼液体剂时，可以在水性滴眼液体剂中恰当地掺入多种常用于水性滴眼液体剂中的添加剂。添加剂包括缓冲剂、张度调节剂、防腐剂、保存剂、增溶剂(稳定剂)、pH调节剂、增稠剂和螯合剂。

用于预防或治疗变应性鼻病的本发明药物组合物可以是任何药物组合物，只要它可以局部施用例如至鼻粘膜。本发明的药物组合物优选地作为滴鼻剂施用。局部施用、尤其点鼻施用可以有利地高度抑制鼻粘膜(其是变应性鼻病中的靶器官)内的炎症反应。因此，本发明的这种药物组合物优选地滴鼻剂形式使用。

用于预防或治疗变应性鼻病的药物组合物作为滴鼻剂施用时，该药物组合物可以根据常规方法通过将该药物组合物与本身已知的可药用载体、赋形剂和稀释剂混合而配制成滴鼻剂。

用于预防或治疗变应性鼻病的本发明组合物作为滴鼻剂使用时，这种药物组合物可以以作为滴鼻剂常用的任何形式提供。例如，滴鼻剂可以以水性滴鼻剂如水性滴鼻液体剂、水性悬浮滴鼻液体剂、非水性滴鼻液体剂、非水性悬浮滴鼻液体剂或凝胶滴鼻液体剂形式提供。

用于预防或治疗变应性鼻病的药物组合物例如配制成滴鼻剂时，可以在滴鼻剂中恰当地并入多种常用于滴鼻剂中的添加剂。添加剂包括缓冲剂、张度调节剂、防腐剂、增溶剂(稳定剂)、pH调节剂、增稠剂和螯合剂。

可用于本发明中的缓冲剂包括例如硼酸盐缓冲剂、磷酸盐缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂、酒石酸盐缓冲剂和乙酸盐缓冲剂。

张度调节剂包括例如盐如氯化钠、糖类如山梨醇、甘露醇和葡萄糖、多元醇如丙三醇、聚乙二醇和丙二醇。

防腐剂包括例如苯扎氯铵、苄索氯铵和对羟基苯甲酸酯如对羟基苯甲酸甲酯及对羟基苯甲酸乙酯。

保存剂包括对羟基苯甲酸酯和苯扎氯铵。

pH调节剂包括例如氢氧化钠、氢氧化铵、氢氯酸、乙酸和磷酸。

增稠剂包括例如甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮和聚丙烯酸及其盐。

它们可以以两种或多种组合使用。

用于预防或治疗变应性眼病的药物组合物作为眼用软膏剂使用时，纯化羊毛脂、凡士林、Plastibase、和液体石蜡可以适当地用作眼用软膏剂的基质。

用于预防或治疗变应性眼病或变应性鼻病的药物组合物中，本发明的活性成分可以合适地与其他眼科学化学剂如马来酸氯苯那敏、盐酸萘甲唑啉、薁磺酸钠、氯化溶菌酶、甘草次酸(glycyrrhetinic acid)，或与用于治疗鼻病的化学剂组合而使用，只要可以达到预期的目标。

本发明药物组合物的剂量可以根据该药物组合物中所含活性成分的量适当地变化。对于预防或治疗作为靶疾病的变应性眼病或变应性鼻病，将预防有效量或治疗有效量的活性成分施用至患者。

表述“预防有效量或治疗有效量”意指可以在患有目的变应性眼病或变应性鼻病的患者中实现预防作用或治疗作用的量。通常，有效量可以在考虑了具体情况如年龄、体重、性别、疾病类型和患者症状的严重性后适当地确定。

在本发明中，当使用化合物A时，所用化合物A的量可以是任意量，只要预期的作用可以实现，并且可以根据例如症状和年龄而变化。化合物A的量优选地是0.001至3重量％，更优选地0.01-1重量％。对于眼科施用(点眼施用)，化合物A可以例如通过每日两次至四次，每次一滴至数滴眼而施用。当严重性水平较高时，化合物A可以例如作为点眼剂每日数次施用。点眼剂量一般是约30μl。对于点鼻施用，化合物A可以通过滴鼻或通过从填充有化合物A的喷雾瓶中喷雾以每日1至4次每次剂量10-200μL施用。

在本发明中，当使用化合物B时，所用化合物B的量可以是任意量，只要预期的作用可以实现，并且可以根据例如症状和年龄而变化，化合物B的量优选地是0.001至3重量％，更优选地0.01-1重量％。对于点眼施用，化合物B可以例如通过每日两次至四次，每次一滴至数滴眼而施用。当严重性水平较高时，化合物B可以例如作为点眼剂每日数次施用。点眼剂量一般是约30μl。对于点鼻施用，化合物B可以通过滴鼻或通过从填充有化合物B的喷雾瓶中喷雾以每日1至4次每次剂量10-200μL施用。

用于预防或治疗变应性眼病或变应性鼻病的药物组合物可以处于作为滴眼剂或滴鼻剂而常用的pH范围内，并且优选地是4.0-8.0。

实施例

本发明进一步以不意图作为限制本发明的以下实施例说明。

试验实施例1：对变应性结膜炎的预防作用

试验实施例1-1：化合物A对变应性结膜炎的预防作用

准备了雄性SD大鼠。百日咳博德特氏菌(Bordetella pertussis)(4×10¹⁰个)和1mg二硝基苯基化卵清蛋白(下文中有时缩写成“DNP-OA”)皮下施用至大鼠的足垫。在施用8至10日之后，施用3％DNP-OA溶液至大鼠右眼以诱导变态反应。在一些实验中，为证实染料泄露部位和水肿部位，注射染料，并且在解剖学上证实染料泄露部位与水肿部位是一致的。在诱导变态反应6小时后静脉内施用伊文思蓝(一种染料)(25mg/kg)。

在诱导变态反应9小时后，收获大鼠眼球。此外，从眼球中取出晶状体、眼房水、和玻璃体内容物，并且测定组织的重量。另外，测定所收获的眼组织中的染料泄露量。为测定染料，将眼组织浸入0.15mL的1N KOH并且在37℃裂解2或3日。将0.6N磷酸/丙酮混合液(0.9mL)添加至裂解的组织，并且将混合物于1750g离心15分钟。用Multiskan JX(由Labsystem Ltd.制造)测定上清液中伊文思蓝的吸光度(630nm)。以染料的量作为染料泄露量。

将化合物A溶解于0.15M碳酸氢钠，并且将溶液调节至pH7.2。对于对照组，施用调节至pH7.2的0.15M碳酸氢钠。对于阴性对照组(非敏化组)，施用3％DNP-OA溶液至非敏化大鼠的右眼，并且溶剂以与在对照组中的相同方式使用。

药物或溶剂在诱导变态反应前15分钟施用至右眼(5μL/眼)。化合物A以浓度0.01％、0.1％、和1％施用以研究剂量反应。

结果如表1中显示。

在该表中，抑制率由以下等式计算：

抑制(％)＝100×{(BA)-(CA)}÷(BA)

其中A代表阴性对照组(非敏化组)；B代表对照组；并且C代表药物施用组。

表1：化合物A对变应性结膜炎的预防作用(对剂量反应的研究)

^＊＊；与对照组相比较，p<0.01(Dunnett多重比较检验)

(非敏化组的组织重量：76.4±2.5mg，对照组的组织重量：114.2±4.7mg，n＝8)

(非敏化组的染料泄露量：2.96±0.17mg，对照组的染料泄露量：6.91±0.47mg，n＝8)

如结果中所示，证实染料泄露量与组织重量基本相关，可以用肉眼观察到染料泄露部位与水肿集中在结膜上。在解剖学上，染料的泄露集中在结膜中，并且基于此事实，确定变态反应主要在结膜内受到诱导。已经诱导变态反应的眼组织的重量因主要在结膜内发展的水肿而增加。因此在以下试验中，使用眼组织重量的增加作为晚期相的指标检验药物的作用。

试验实施例1-2：比较化合物A与现有药物间对变应性结膜炎的预防作用

实施了在化合物A与现有药物之间对变应性结膜炎预防作用的比较试验。使用以下用于变应性结膜炎的现有药物(市售滴眼剂)进行比较。

1)肥大细胞稳定剂(组胺释放抑制剂)：色甘酸盐(色甘酸钠，由Astellas Pharma Inc.制造)

2)抗组胺药：酮替芬(延胡索酸酮替芬，由Novartis制造)和左卡巴斯汀(盐酸左卡巴斯汀，由Santen Pharmaceutical Co.，Ltd.制造)

3)类固醇：倍他米松(Betamethazone)(倍他米松磷酸钠，由Shionogi&Co.，Ltd.制造)和氟米龙(氟米龙，由Santen Pharmaceutical Co.，Ltd.制造)

化合物A与现有药物以表2中所示浓度施用并且对变应性结膜炎的预防作用以与试验实施例1-1中相同的方式加以证实。

结果如表2中显示。

表2：化合物A与现有药物之间对变应性结膜炎预防作用的比较

^＊，^＊＊：与对照组相比较，p<0.05，0.01(Dunnett多重比较检验)

如结果中所示，用于变应性结膜炎的现有药物(可商业获得的滴眼剂)除类固醇之外，均不抑制晚期相变态反应。

试验实施例2：化合物A对变应性结膜炎的治疗作用(对剂量反应的研究)

在临床实践中大多数情况下，药物通常在症状发作后施用。因此，对化合物A针对变应性结膜炎的治疗作用实施了试验。

可从试验实施例1-2的结果中见到，用于变应性结膜炎的现有滴眼剂除类固醇之外均不抑制晚期相变态反应。因此对于治疗作用(症状发作后施用药物的作用)，仅为比较而评价已经在试验实施例1-2中表现预防作用的倍他米松的结果。

化合物A、倍他米松、对照组和阴性对照组以与试验实施例1-1中相同的浓度施用，并且倍他米松的浓度在表3中显示。

该试验与试验实施例1-1中相同的方式实施，除了在诱导变态反应三小时后，分别将化合物A、倍他米松、对照组和阴性对照组以试验溶液剂量5μL/眼施用至右眼外。

结果如表3中显示。

表3：化合物A对变应性结膜炎的治疗作用

 

药物组织重量的增加化合物A  0.01％70.3％^＊＊化合物A  0.1％99.9％^＊＊化合物A  1％103.7％^＊＊倍他米松 0.1％74.8％^＊＊

^＊＊：与对照组相比较p<0.01(Dunnett多重比较检验)

如表3中所示，化合物A和倍他米松对变应性结膜炎具备强效治疗作用。

试验实施例3：眼组织中所施用化合物A和B的浓度变化

试验实施例3-1：眼组织中经眼所施用的化合物A和化合物B的浓度变化

提供了化合物A在调节至pH7.4的等张硼酸盐缓冲液中的试验溶液(0.1％或1％)和化合物B在等张硼酸盐缓冲液中的试验溶液(0.1％)，并且将每种试验溶液50μL作为点眼剂施用至雄性兔。

眼组织中化合物A在点眼后的浓度测定如下：首先，从试验动物中取出组织或血液并冷藏保存。添加纯水(0.1mL)至适量的冷藏保存组织等，随后匀浆。此后，对其添加0.5mL1％磷酸、0.05mL内标溶液(WO95/18130中所述的特定内标物质(10.1μg/mL))、0.05mL乙腈和0.05mL纯水。添加提取溶剂(25％氯仿/二乙醚)(8mL)并将混合物振摇和离心。此后，7mL有机层在减压下挥发至干燥，并将残余物溶解于0.3mL流动相以形成分析物。使用通过将0.55g四氧溴化铵(tetraoxyl ammoniumbromide)混合并溶解于450mL乙腈、450mL10mM磷酸盐缓冲液和100mL甲醇中而制备的液体作为流动相。化合物A的浓度通过注射0.025mL该分析物至高效液相色谱仪(HPLC)(测定条件：荧光激发：270nm，发射：466nm)而测定。

仅测定眼组织中化合物A的浓度，因为化合物B是化合物A的前体药物。

结果如表中显示4。

表4：眼组织中化合物A的浓度变化

在该表中，数字是平均值±标准误。

试验实施例3-2：经口施用的化合物B在血液中和眼组织中的浓度变化

化合物B悬浮在1％羟甲基纤维素中以调节化合物的浓度至0.2mg/mL。将这种试验溶液以剂量5mL/kg(剂量：1mg/kg(200μg/大鼠)经口施用至雄性大鼠。测定了经口施用后血液中和眼组织中化合物A的浓度曲线。

结果如表5中显示。

表5：在经口施用化合物B之后血液中和眼组织中化合物A的浓度变化

在该表中，数字是平均值。N.D.：未检测。

可从表4和5中结果见到，与经口施用化合物B的情形相比较，经眼施用化合物A和化合物B能以高得多的浓度维持眼组织中化合物A的浓度持续长得多的时间段(8小时或更长)。

制剂实施例：用于变应性眼病的预防剂或治疗剂

以下将描述用于产生作为变应性眼病预防剂或治疗剂的医药品的一般方法和本发明医药品的制备实施例。

化合物A或化合物B和张度调节剂添加至无菌纯化水中。根据需要，在溶剂中添加并溶解例如防腐剂、缓冲剂、稳定剂和增稠剂。下文显示具体的制剂实施例。

制备实施例1：用于局部眼科施用的溶液剂制剂

表6：

制备实施例2：用于局部眼科施用的悬浮液制剂

表7：

试验实施例4：对变应性鼻炎的预防作用

试验实施例4-1：化合物A对变应性鼻炎的预防作用(对剂量反应的研究)

准备了Sprague Dawley大鼠(n＝6)。百日咳博德特氏菌(Bordetellapertussis)(4×10¹⁰个)和1mg二硝基苯基化卵清蛋白(下文中有时缩写成“DNP-OA”)皮下施用至大鼠的足垫。在施用9日之后，施用15μL的13.3％DNP-OA溶液至双鼻腔以诱导变态反应。在距离抗原施用6小时后，静脉内施用伊文思蓝(一种染料)(50mg/kg)。

在诱导变态反应9小时后，收获大鼠的鼻中隔粘膜并测定该组织的重量。鼻中隔粘膜用1N KOH裂解，并将染料的泄露量测定作为变应性鼻炎晚期相中血管通透性的指标。

将化合物A溶解在生理盐水中。对于不进行任何药物处理的对照组，使用化合物A的溶剂中所用的生理盐水。以未诱导过敏的阴性对照组作为生理盐水组。在这种情况下，施用生理盐水而不是抗原。在紧接着诱导变态反应之前，将化合物A和对照组(生理盐水)(各5μL)作为滴鼻剂施用双鼻腔。化合物A以浓度0.01％、0.1％和1％施用以研究剂量反应。

结果如表8中显示。

在该表中，抑制率由以下等式计算。

抑制(％)＝100x{(B-A)-(C-A)}÷(B-A)

其中A代表阴性对照组(非敏化组)；B代表对照组；并且C代表药物施用组。

表8：化合物A对变应性鼻炎的预防作用

^＊＊：与对照组相比较，p<0.01(Dunnett多重比较检验)

药物在紧接着施用抗原(变态反应开始)之前施用。

结果显示当化合物A作为滴鼻剂预防性地施用时，化合物A以剂量依赖性方式有效对抗变应性鼻炎。

试验实施例4-2：比较化合物A与现有药物之间对变应性鼻炎的预防作用。

进行了化合物A与现有药物之间对变应性鼻炎的预防作用的比较。使用以下用于变应性鼻炎的现有药物(商业可获得的滴鼻剂)进行比较。

1)肥大细胞稳定剂(组胺释放抑制剂)：色甘酸盐(色甘酸钠，由Astellas Pharma Inc.制造)和氨来呫诺(Amlexanox)(由Takeda ChemicalIndustries，Ltd.制造)

2)抗组胺药：酮替芬(延胡索酸酮替芬，由Novartis制造)和左卡巴斯汀(盐酸左卡巴斯汀，由NIPPON SHINYAKU CO.，LTD.制造)

3)类固醇：氟替卡松丙酸酯(氟替卡松丙酸酯，由Glaxo K.K.制造)。

化合物A与现有药物以表9中所示浓度在紧接着施用抗原(变态反应开始)之前施用，并且对变应性结膜炎的预防作用以与试验实施例4-1中相同的方式加以证实。

结果如表9中显示。

表9：比较化合物A与现有药物之间对变应性鼻炎的预防作用

^＊＊；与对照组相比较，p<0.01(Dunnett多重比较检验)

可从该结果中见到，化合物A、氨来呫诺和酮替芬具备对变应性鼻炎的预防作用。

试验实施例4-3：化合物B抗变应性鼻炎的预防作用，其中化合物B经口施用

除了将化合物B悬浮在羟丙基甲基纤维素中并且该悬浮液经口施用之外，其余以与试验实施例4-1中的相同方式进行对变应性鼻炎的预防作用的确认。药物在施用抗原(变态反应开始)之前15分钟施用。

结果如10表中所示。

表10：

^＊＊；与对照组相比较p<0.01(Dunnett多重比较检验)

从表9和10中可见，当假定化合物B在体内转化为化合物A时，可以说点鼻施用在较低剂量上表现较高的抑制率。因此，可以预期当化合物A配制成滴鼻剂时，可以在不小于0.1％的浓度上提供更可靠的药物效力，并且另外，总暴露量的减少可以降低全身性副作用。

试验实施例5：化合物A对变应性鼻炎的治疗作用

在临床实践中，重要的是能够在呈现症状的状态下也有效果。因此，对化合物A抗变应性鼻炎的治疗作用实施了试验。为了比较，还评估了在试验实施例3-2中起到有效预防作用的氨来呫诺和酮替芬。

变态反应以与试验实施例4-1中相同的方式诱导，并且测定了变应性鼻炎晚期相中的血管通透性。然而，在这种情况下，为了评估治疗作用，化合物A、氨来呫诺和酮替芬在诱导变态反应1小时后施用。由于鼻汁漏出，因此使剂量加倍(10μL)从而使得药物在鼻腔中的分散不受抑制，并且药物的浓度用生理盐水调节至预防作用实验中的一半浓度，以便使得每个体的施用剂量相同。

结果如11表中显示。

表11：化合物A对变应性鼻炎的治疗作用

与对照组相比较，p<0.01(Dunnett多重比较检验)

药物在施用抗原1小时之后施用。

从结果中看出，施用作为滴鼻剂的化合物A表现出对变应性鼻炎的治疗作用。

制剂实施例：用于变应性鼻病的预防剂或治疗剂

以下描述用于产生变应性鼻病的预防剂或治疗剂的一般方法和本发明用于变应性鼻病的预防剂或治疗剂的制备实施例。

化合物A或化合物B和张度调节剂添加至无菌纯化水中。根据需要，在溶剂中添加并溶解例如防腐剂、缓冲剂、稳定剂和增稠剂。下文显示具体的制剂实施例。

制备实施例3：用于鼻病的局部用溶液制剂

表12：

制备实施例4：用于鼻病的局部用悬浮液制剂

表13：