疏水蛋白－多肽和具有活性剂和效果剂的来自疏水蛋白－多肽的缀合物的应用及其制备及其在化妆品工业中的应用

摘要

本发明涉及用于处理含角蛋白的材料、粘膜和牙齿的化妆品组合物，所述组合物包含至少一种疏水蛋白多肽序列(i)Xn－C1－X1－50－C2－X0－5－C3－Xp－C4－X1－100－C5－X1－50－C6－X0－5－C7－X1－50－C8－Xm(I)。

说明书

现有技术

疏水蛋白是具有大约100个氨基酸的小蛋白质，其具有丝状真菌的特 性且没有在其它生物中发现。最近，已经在天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolor)中发现疏水蛋白样蛋白质，其称作“chaplins”并同样具有高 的表面活性性质。在水/空气界面的chaplins能够组装形成淀粉样纤丝 (Classen et al.2003Genes Dev 1714-1726；Elliot et al.2003，Genes Dev.17， 1727-1740)。

疏水蛋白以水不溶性形式分布在各种真菌结构(如气生菌丝、孢子和 子实体)的表面。疏水蛋白的基因由子囊菌(ascomycetes)、半知菌 (deuteromycetes)和担子菌(basidiomycetes)分离。某些真菌包含不止 一种疏水蛋白基因，如普通裂褶菌(Schizophyllum commune)、灰盖鬼 伞(Coprinus cinereus)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)。多种疏水蛋 白当然涉及真菌发育的不同阶段。此处疏水蛋白大概具有多种作用(van Wetter等人，2000，Mol.Microbiol.，36，201-210；Kershaw等人，1998， Fungal Genet.Biol，1998，23，18-33)。

已经描述的疏水蛋白的生物学功能不仅是降低水的表面张力以形成气 生菌丝，而且降低孢子的疏水性等人，1999，Curr.Biol.，19， 1985-88；Bell等人，1992，Genes Dev.，6，2382-2394)。此外，疏水蛋白用于 在苔藓子实体中内衬气体通道并作为真菌病原体对植物表面的识别体系中 的组分(Lugones等人，1999，Mycol.Res.，103，635-640；Hamer&Talbot 1998，Curr.Opinion Microbiol.，第1卷，693-697)。

互补实验已经表明疏水蛋白能够在一定程度上在一类中功能性替代自 己。

目前已知的疏水蛋白仅能使用常规蛋白质化学纯化和分离方法以中等 的产率和纯度制备。使用基因工程技术提供较大量的疏水蛋白的尝试至今 还没有成功。

US 20030217419A1描述了普通裂褶菌疏水蛋白SC3在化妆品制剂中 的应用。

目的

本发明的目的是提供对角蛋白或含角蛋白的物质如皮肤、指甲或毛发 和/或粘膜和/或牙齿具有高亲合性的新的多肽。所述多肽对于尤其是毛发、 指甲和皮肤或者粘膜或牙齿的含角蛋白结构的化妆品和药用处理是合适 的，并适于作为多种活性物质和效应物质的锚(anchor)。

本发明的另一个目的是提供具有对角蛋白或含角蛋白物质如皮肤或毛 发具有高亲合性的结合肽的新的结合角蛋白的效应分子，和一些的效应分 子结合的结合角蛋白的效应分子。该类结合角蛋白的效应分子允许效应分 子在角蛋白(所称作的“寻靶))上具有高的局部浓度，或对角蛋白具有 长的作用时间。

发明描述

本发明提供用于处理含角蛋白材料、粘膜和牙齿的化妆品组合物，其 在化妆品相容的介质中包含至少一种结构通式(I)的疏水蛋白多肽序列(i)。 结构式(I)：

X_n-C¹-X_1-50-C²-X_0-5-C³-X_p-C⁴-X_1-100-C⁵-X_1-50-C⁶-X_0-5-C⁷-X_1-50-C⁸-X_m

(I)

其中X可以为20种天然氨基酸(Phe、Leu、Ser、Tyr、Cys、Trp、 Pro、His、Gln、Arg、Ile、Met、Thr、Asn、Lys、Val、Ala、Asp、Glu、 Gly)中的任意一种，且X旁的下标是氨基酸的数目，其中下标n和m为 0～500，优选15～300的数字，p为1～250，优选1～100，C为半胱氨酸、丙 氨酸、丝氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸或苏氨酸，其中至少四个称作C的基团 是半胱氨酸，条件是至少一个简写为X_n或X_m或X_p的肽序列是自然不与 疏水蛋白连接的至少20个氨基酸长度的肽序列，

所述多肽在涂布玻璃表面之后，产生接触角的至少20°改变。

命名为C¹～C⁸的氨基酸优选半胱氨酸；然而它们也可以被类似空间排 列的其它氨基酸代替，优选被丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸或甘氨 酸代替。然而，C¹～C⁸位置中至少4个、优选至少5个、特别优选至少6 个和尤其至少7个应由半胱氨酸组成。半胱氨酸可在根据本发明的蛋白质 中以还原形式存在，或者彼此形成二硫桥存在。特别优选的是C-C桥的分 子内形式，尤其是具有至少一个、优选2个、特别优选3个、非常特别优 选4个分子内二硫桥的那些。在上述半胱氨酸被类似空间排列的氨基酸的 代替中，所述的C位置有利地可在彼此形成分子内二硫桥的对中交换。

如果半胱氨酸、丝氨酸、丙氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸或苏氨酸也用于 X指代的位置，则通式中单个的C位置编号可因此改变。

特别有利的多肽(i)是通式(II)的那些

X_n-C¹-X_3-25-C²-X_0-2-C³-X_5-50-C⁴-X_2-35-C⁵-X_2-15-C⁶-X_0-2-C⁷-X_3-35-C⁸-X_m

(II)

其中X为20种天然氨基酸(Phe、Leu、Ser、Tyr、Cys、Trp、Pro、 His、Gln、Arg、Ile、Met、Thr、Asn、Lys、Val、Ala、Asp、Glu、Gly) 中的任意一种，且X旁的下标是氨基酸的数目，其中下标n和m为2～300， C为半胱氨酸、丙氨酸、丝氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸或苏氨酸，其中至少 四个称作C的基团是半胱氨酸，条件是至少一个简写为X_n或X_m的肽序列 是天然不与疏水蛋白连接的至少35个氨基酸长度的多肽序列，

所述多肽在涂布玻璃表面之后，产生至少20°接触角的变化。

非常特别有利的是通式(III)的那些多肽(i)

X_n-C¹-X_5-9-C²-C³-X_11-39-C⁴-X_2-23-C⁵-X_5-9-C⁶-C⁷-X_6-18-C⁸-X_m    (III)

其中X为20种天然氨基酸(Phe、Leu、Ser、Tyr、Cys、Trp、Pro、 His、Gln、Arg、Ile、Met、Thr、Asn、Lys、Val、Ala、Asp、Glu、Gly) 中的任意一种，且X旁的下标是氨基酸的数目，其中下标n和m为0～200， C为半胱氨酸、丙氨酸、丝氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸或苏氨酸，其中至少 六个称作C的基团是半胱氨酸，条件是至少一个简写为X_n或X_m的肽序列 是至少40个氨基酸长度的肽序列，其天然不与疏水蛋白连接，

所述多肽在涂布玻璃表面之后，引起接触角的至少20°的改变。

所述本发明的优选实施方案是具有结构通式(I)、(II)或(III)的多肽， 其中该结构式包括至少一种I类疏水蛋白，优选至少一种疏水蛋白dewA、 rodA、hypA、hypB、sc3、basf1、basf2或其部分或衍生物。具体的疏水 蛋白在下列序列方案中进行结构表征。也可以将相同或不同结构的多个疏 水蛋白，优选2或3个，一起连接或者连接到天然不与疏水蛋白结合的相 应的合适的多肽序列上。

本发明特别优选的实施方案是具有描述在SEQ ID NO：20，22，24的多 肽序列的新的蛋白质和编码这些多肽的核酸序列，尤其是根据SEQ ID NO： 19，21，23的序列。作为所有氨基酸的至少一个、至多10个，优选5个， 特别优选5％的交换，插入或缺失的结果，由描述在SEQ ID NO.22，22或 24的多肽序列开始产生且仍然具有起始蛋白质至少50％的生物学性质的 蛋白质也是特别优选的实施方案。蛋白质生物学性质此处理解为如实施例 10所述的接触角的变化。

根据本发明的蛋白质在至少一个缩写为X_n或X_m或X_p的位置携带天 然不与疏水蛋白连接的至少20个，优选至少35个，特别优选至少50个， 尤其至少100个氨基酸的多肽序列(下文也称作融合配偶体)。该表达意指 根据本发明的蛋白质由疏水蛋白部分和天然不以此形式一起产生的融合配 偶体部分。

融合配偶体部分可选自多种蛋白质。也可以将多个融合配偶体连接到 疏水蛋白部分，例如连接到疏水蛋白部分的氨基末端(X_n)和羧基末端 (X_m)。然而，也可以例如将两个融合配偶体连接到根据本发明蛋白质的一 个位置(X_n或X_m)。

特别优选的融合配偶体是导致根据本发明的蛋白质能够涂布玻璃表 面，且用蛋白质处理的玻璃表面耐清洁剂处理的那些多肽序列，如实验部 分(实施例10)详细描述(如1％SDS/80℃/10分钟)。

特别合适的融合配偶体是在微生物中(尤其在大肠杆菌(E.coli)或 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中)自然产生的多肽。所述融合配偶体 的实例是序列yaad(SEQ ID NO：15和16)、yaae(SEQ ID NO：17和18)以 及硫氧环蛋白。仅包括部分、优选10～90％、特别优选25～75％的所述序列 的这些特定序列的片段或衍生物也是高度适合的。此处优选在C末端上的 缺失；例如仅由前75个N-末端氨基酸组成的yaad片段，或者与指定的 序列相比，单个的氨基酸或核苷酸已经产生改变。例如在序列yaad和yaae 的C-末端可附着额外的氨基酸，尤其是两个额外的氨基酸，优选氨基酸 Arg、Ser。而且，额外的氨基酸与天然产生的序列，例如在SEQ ID NO：17 和18中的氨基酸No.2(Gly)相比，可优选被插入到序列yaae中。

其它优选的融合配偶体是结合角蛋白的结构域，例如在人的 desmoplacin中出现的那些或者可通过常规基因工程方法如氨基酸去取代、 插入或缺失衍生的那些。对角蛋白的结合可容易地使用描述在实验部分的 实验进行检查。

此外，在两个融合配偶体的连接位点，也可插入额外的氨基酸，其由 于在核酸水平新产生或失活的限制性内切核酸酶的识别位点产生。

根据本发明的蛋白质还可以在它们的多肽序列上进行修饰，例如通过 糖基化、乙酰化或通过化学交联，例如与戊二醛交联。

如果表面涂布有蛋白质的话，根据本发明蛋白质的一个性质是表面性 能的变化。该表面性能的变化可通过在用根据本发明的蛋白质涂布表面之 前和之后测量水滴的接触角并计算这两次测量的差异而通过实验测定。

用于测量接触角的精确的实验条件在实施例10的实验部分给出。在 这些条件下，根据本发明的蛋白质具有增加至少20度、优选25度、特别 优选30度接触角的性质。

在目前已知的疏水蛋白的疏水蛋白部分，保留极性和非极性氨基酸的 位置，其根据特征性疏水性图是显而易见的。生物物理性质和疏水性差异 的导致将目前已知的疏水蛋白的分类分成两类，I类和II类(Wessels等人， 1994，Ann.Rev.Phytopathol.，32，413-437)。

I类疏水蛋白的组装膜很大程度上是不溶性的(甚至在升高的温度下 1％SDS中)且仅可使用浓三氟乙酸(TFA)或甲酸进行再次解离。与此相 比，组装形式的II类疏水蛋白是较不稳定的。它们可仅使用60％的乙醇 或1％SDS(在室温)进行再次溶解。对溶剂和清洁剂的高稳定性是疏水蛋 白的一种特定性能，且区分使用根据本发明的多肽的涂层与在表面上多种 蛋白质形成的“非特异”蛋白质涂层。

氨基酸序列的比较表明在II类疏水蛋白的情形下半胱氨酸C³和C⁴的 区域长度明显短于I类疏水蛋白情形。

II类疏水蛋白比I类具有更多带电氨基酸。

本发明还提供含疏水蛋白的效应分子，其组成为

(i)至少一种疏水蛋白，

(ii)一种天然不与疏水蛋白(i)连接的效应分子。

疏水蛋白(i)可由所有的已知疏水蛋白多肽代表。特别合适的疏水蛋白 (i)是上述结构通式(I)、(II)或(III)的多肽(i)。

优选疏水蛋白多肽序列(i)包含根据SEQ ID NO：1-24的氨基酸序列。

根据本发明同样包括特别公开的疏水蛋白多肽序列(i)的“功能等同物” 及其在根据本发明方法中的应用。

为了本发明的目的，特别公开的多肽(i)的“功能等同物”或类似物是 与其不同但是额外具有希望的生物学活性如角蛋白结合的多肽。因而，例 如“功能等同物”应理解为疏水蛋白多肽序列，其根据描述在实施例12/13 的一种结合测试显示出SEQ ID NO：1-24的疏水蛋白在实施例12/13的结 合测试显示的结合的至少10％、优选至少50％、特别优选75％、非常特 别优选90％的结合。

合适的氨基酸替代的实例在下表中给出：

最初残基            替代实例

Ala                 Ser

Arg    Lys

Asn    Gln；His

Asp    Glu

Cys    Ser

Gln    Asn

Glu    Asp

Gly    Pro

His    Asn；Gln

Ile    Leu；Val

Leu    Ile；Val

Lys    Arg；Gln；Glu

Met    Leu；Ile

Phe    Met；Leu；Tyr

Ser    Thr

Thr    Ser

Trp    Tyr

Tyr    Trp；Phe

Val    Ile；Leu

根据本发明，“功能等同物”应理解为尤其还指突变蛋白，其在上述 氨基酸序列的至少一个序列位置具有不同于特别提及的氨基酸，但仍然具 有一种上述生物学活性。因而“功能等同物”包含通过一个或多个氨基酸 添加、替代、缺失和/或倒位可获得的突变蛋白，只要它们产生具有本发明 性质谱的突变蛋白，可以在任一序列位置发生所述修饰。

“功能等同物”在上述意义上也是指所述多肽的“前体”和所述多肽 的“功能衍生物”和“盐”。

“前体”此处是多肽的天然或合成前体，其具有或不具有希望的生物 学活性。

术语“盐”应理解为根据本发明的蛋白质羧基盐及氨基的酸加成盐。羧 基盐可以本身已知的方式制备且包含无机盐例如钠、钙、铵、铁和锌盐， 和与有机碱例如胺，如三乙醇胺、精氨酸、赖氨酸、哌啶等形成的盐。本 发明同样提供酸加成盐例如与无机酸(如盐酸或硫酸)形成的盐以及与有 机酸(如乙酸或草酸)形成的盐。

根据本发明多肽的“功能衍生物”可同样借助于已知技术在功能性氨 基酸侧基或它们的N-或C-末端制备。此类衍生物包含例如，羧酸基团的 脂族酯；可与氨或伯胺或仲胺反应获得的羧酸基团的酰胺；通过与酰基反 应制备的游离氨基的N-酰基衍生物；或通过与酰基反应制备的游离羟基的 O-酰基衍生物。

当然“功能衍生物”也包含可从其它生物获得的多肽和天然存在的变 体。可例如通过序列比较区建立同源序列区并基于本发明的特定要求确定 等同酶。

“功能衍生物”同样包含片段，优选例如具有目的生物学功能的根据本 发明多肽的单个结构域或序列基序。

“功能衍生物”也是融合蛋白，其包含一个上述疏水蛋白多肽序列或 其衍生的功能等同物和至少一个其它的异源序列，该异源序列功能上与所 述多肽序列不同并且为N-或C-末端连接(即融合蛋白部分无明显的相互功 能损害)。所述异源序列的非限制性实例例如是信号肽或酶。

根据本发明还包括的“功能衍生物”是特别公开的蛋白质的同源物。通 过Pearson和Lipman，Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)85(8)，1988，2444-2448 的算法计算，这些同源物与特别公开的氨基酸序列之一具有至少50％、优 选至少75％、尤其至少85％、例如90％、95％或99％的同源性。根据本 发明同源多肽的同源性百分数尤其是指基于本文特别描述的氨基酸序列之 一的总长度的氨基酸残基的同一性百分数。

在可能的蛋白质糖基化情形下，根据本发明的“功能衍生物”包含去糖 基化或糖基化形式的上述类型蛋白质及可通过改变糖基化模式获得的修饰 形式。

根据本发明多肽(i)的同源物可通过诱变，如通过蛋白质点突变或截短 产生。

根据本发明多肽的同源物可通过筛选突变体组合文库例如截短突变体 鉴定。例如在核酸水平通过组合诱变，例如通过合成寡核苷酸的混合物的 酶促连接，可产生蛋白质变体文库。有多种方法可用于从简并寡核苷酸序 列制备潜在的同源物文库。简并基因序列的化学合成可在自动DNA合成 仪中进行，且该合成基因然后可连接到合适的表达载体中。简并组的基因 的使用可以在一个混合物中提供编码希望的潜在蛋白质序列组的所有的序 列。用于合成简并寡核苷酸的方法是本领域技术人员已知的(如Narang， S.A.(1983)Tetrahedron 39：3；Itakura等人(1984)Annu.Rev.Biochem. 53：323；Itakura等人，(1984)Science 198：1056；Ike等人(1983)Nucleic Acids Res.11：477)。

几种技术是现有技术中已知的用于筛选在已经通过点突变或截短制 备的组合文库中的基因产物，并用于筛选具有所选性质的基因产物的 cDNA文库。这些技术可适于快速筛选基因文库，所述文库已经根据本发 明同源物的组合诱变产生。筛选大的基因文库(其进行高通量分析)最常 使用的技术包括在可复制的表达载体中克隆基因文库，用所得的载体文库 转化合适的细胞并在一定条件下表达组合基因，所述条件下目的活性的检 测方便编码基因的载体的分离，已经检测了所述基因的产物。循环总体诱 变(REM)是一种在文库中增加功能突变体频率的技术，可与筛选测试组合 用于鉴定同源物(Arkin和Yourvan(1992)PNAS 89：7811-7815；Delgrave 等人(1993)Proetin Engineering 6(3)：327-331)。

本发明特别有利的实施方案是含疏水蛋白的效应分子，其中该疏水蛋 白由多肽序列(i)代表，其包含至少一个下述疏水蛋白多肽序列，

a)结构通式(I)的多肽序列，

b)与(a)相比在至多60％、优选至多75％、特别优选至多90％的氨基 酸位置经修饰的多肽序列，

条件是疏水蛋白多肽序列(b)的角蛋白结合值是疏水蛋白多肽序列(a) 已经在根据实施例12和13中测试的值的至少10％。

修饰氨基酸此处是指氨基酸替代、插入和缺失或这三种可能的任一组 合。

优选使用对希望的生物具有高的特定亲合性的疏水蛋白多肽序列(i)。 对于在皮肤用化妆品中的使用，优选使用对人皮肤角蛋白具有特别高亲合 性的疏水蛋白多肽序列(i)。对于在毛发化妆品上的使用，优选对人毛发角 蛋白具有特别高亲合性的那些疏水蛋白多肽序列。

对于在宠物部分中的使用，因此优选对相应的角蛋白(例如狗角蛋白 或猫角蛋白)具有特别高亲合性的那些疏水蛋白多肽序列(i)。

然而根据本发明也可以在效应分子中使用一种以上的疏水蛋白多肽序 列(i)。例如为了实现更高的结合，相同疏水蛋白多肽序列(i)的多个拷贝也 可以顺序连接。

根据本发明具有结合角蛋白性质的疏水蛋白在人化妆品，尤其是皮肤 护理和毛发护理，和动物护理具有广泛的使用领域。

根据本发明的疏水蛋白多肽(i)优选用于毛发和皮肤用化妆品。它们允 许皮肤护理或皮肤保护效应物质的高浓度和长的作用时间。

效应分子(ii)

在下文中效应分子(ii)应理解为具有一定的可预见效果的分子。这些 可以是蛋白样分子，如酶，或非蛋白原分子，如染料、防晒剂、维生素和 脂肪酸或含有金属离子的化合物。

在蛋白样效应分子中，优选酶和抗体。

在酶中，下述优选作为效应分子(ii)：氧化酶、过氧化物酶、蛋白酶、 酪氨酸酶、金属结合酶、乳过氧化物酶、溶菌酶、淀粉葡糖苷酶 (amyloglycosidase)、葡萄糖氧化酶、过氧化物歧化酶、光裂合酶、过氧 化氢酶。

高度合适的蛋白样效应分子(ii)还可以是植物和动物源的蛋白质水解 产物，例如海洋来源的蛋白质水解产物或丝水解产物。

在非蛋白样效应分子(ii)中，优选染料，例如半永久性的染料或氧化染 料。在反应性染料的情形下，一种组分优选作为效应分子(ii)连接到结合角 蛋白的疏水蛋白多肽序列(i)，然后在作用位点与第二种染料组分氧化偶联， 即与毛发结合之后。

合适的染料是用于根据本发明分子的所有的常用毛发染料。合适的染 料是本领域技术人员由化妆品手册中已知的，例如Schrader，Grundlagen und Rezepturen der Kosmetika[化妆品原理和配方]，Hüthig Verlag， Heidelberg，1989，ISBN 3-7785-1491-1。

其它合适的效应分子(ii)是类胡萝卜素。根据本发明，类胡萝卜素应 理解为单独或作为混合物的下述化合物：β-胡萝卜素、番茄红素、叶黄素、 虾青素、玉米黄质、隐黄质、柠檬黄质(citranaxanthin)、斑蝥黄、胭脂 树橙、β-脱辅基-4-胡萝卜醛、β-脱辅基-8-胡萝卜醛、β-脱辅基-8-胡萝卜素 酸酯(carotenic esters)。优选使用的类胡萝卜素是β-胡萝卜素、番茄红 素、叶黄素、虾青素、隐黄质、柠檬黄质和斑蝥黄.

出于本发明的目的，类视黄醇是指维生素A醇(维生素A)和它的衍生 物，如维生素A醛(视黄醛)、维生素A酸(视黄酸)和维生素A酯(如乙酸 视黄酯、丙酸视黄酯和棕榈酸视黄酯)。术语视黄酸此处包含全反式视黄酸 和13-顺式视黄酸。术语维生素A和视黄醛优选包含全反式化合物。优选 的用于根据本发明悬浮液的类视黄醇是全反式视黄醇，下文也称作维生素 A。

其它优选效应分子(ii)是维生素，尤其是维生素A及其酯。

A、C、E和F族维生素、前维生素和维生素前体，尤其是3，4-二脱氢 维生素A、β-胡萝卜素(维生素A的前维生素)、抗坏血酸(维生素C)和抗坏 血酸的棕榈酯、葡糖苷或磷酸酯，生育酚，尤其是α-生育酚和它的酯，如 乙酸酯、烟酸酯、磷酸酯和琥珀酸酯；还有维生素F(其是指必需脂肪酸， 尤其是亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸)；维生素A和它的衍生物和前维生 素有利地显示出特定的皮肤光滑效果。

维生素B族的维生素、前维生素或维生素前体或其衍生物，优选根 据本发明使用的2-呋喃酮衍生物和其它的一起包括：

维生素B₁，俗名硫胺素，化学名氯化3-[(4’-氨基-2’-甲基-5’-嘧啶基)甲 基]-5-(2-羟基乙基)-4-甲基噻唑鎓。

维生素B₂，俗名核黄素，化学名7，8-二甲基-10-(1-D-核糖醇基)-苯并 [g]蝶啶-2，4(3H，10H)-二酮。核黄素以游离形式如在乳清中出现，其它的 核黄素衍生物可从细菌和酵母中分离出。根据本发明同样合适的核黄素的 立体异构体之一是来苏黄素，其可以从鱼粉或肝脏中分离出并带有D-阿拉 伯糖醇基(arabityl)而不是D-核糖醇基(ribityl)。

维生素B₃。该名称下所列的经常是化合物烟酸和烟酰胺。根据本发明 优选烟酰胺。

维生素B₅(泛酸和泛醇)。优选使用泛醇。根据本发明可使用的泛醇衍 生物尤其是泛醇酯和醚，以及阳离子衍生化的泛醇。在本发明其它优选实 施方案中，除了泛酸或泛醇以外，也可使用2-呋喃酮的衍生物。特别优选 的衍生物也是商业上可得的的物质，俗名为泛内酯(Merck)的二氢-3-羟基 -4，4-二甲基-2(3H)-呋喃酮、4-羟基甲基-γ-丁内酯(Merck)、3，3-二甲基-2-羟 基-γ-丁内酯(Aldrich)和2，5-二氢-5-甲氧基-2-呋喃酮(Merck)，其中都明显 包括所有的立体异构体。

这些化合物有利地使得本发明的结合角蛋白效应分子具有湿润和镇静 皮肤的性质。

维生B₆，不应理解为均一物质，而是已知俗名吡哆醇、吡哆胺和吡哆 醛的5-羟基甲基-2-甲基吡啶-3-醇的衍生物。

维生素B₇(生物素)，也称作维生素H或″皮肤维生素″。生物素是 (3aS，4S，6aR)-2-氧代六氢噻吩并[3，4-d]咪唑-4-戊酸。

根据本发明，非常特别优选泛醇、泛内酯、烟酰胺和生物素。

根据本发明，合适的衍生物(盐、酯、糖、核苷酸、核苷、肽和脂类) 可作为该组中亲脂性的、油溶性的抗氧化剂，优选生育酚和及其衍生物， 五倍子酯、类黄酮和类胡萝卜素、和丁基羟基甲苯/苯甲醚。作为水溶性的 抗氧化剂，优选氨基酸，如酪氨酸和半胱氨酸及其衍生物，和鞣酸，尤其 是植物来源的那些。

三萜，尤其是三萜酸，如熊果酸、迷迭香酸(rosemarinic acid)、白 桦脂酸、乳香酸和泻根酸。

其它优选效应分子(ii)是UV防晒滤光剂。这些应理解为能够吸收紫外 线并以长波辐射如热的形式发出被吸收的能量的有机物质。该有机物质可 为油溶性的或水溶性的。

可使用的油溶性的UV-B滤光剂的实例是下述物质：

3-苄叉樟脑及其衍生物，如3-(4-甲基苄叉)樟脑；

4-胺基苯甲酸衍生物，优选4-(二甲基氨基)苯甲酸2-乙基己酯、4-(二甲 基氨基)苯甲酸2-辛酯和4-(二甲基胺基)苯甲酸戊酯；

肉桂酸酯，优选4-甲氧基肉桂酸2-乙基己酯、4-甲氧基肉桂酸丙酯、 4-甲氧基肉桂酸异戊酯、4-甲氧基肉桂酸异戊酯、2-氰基-3-苯基肉桂酸2- 乙基己酯(氰双苯丙烯酸辛酯)；

水杨酸酯，优选水杨酸2-乙基己酯、水杨酸4-异丙基苄基酯、水杨酸 高薄荷酯；

二苯甲酮衍生物，优选2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮、2-羟基-4-甲氧基-4′- 甲基二苯甲酮、2，2′-二羟基-4-甲氧基二苯甲酮；

亚苄基丙二酸酯，优选4-甲氧基亚苄基丙二酸二-2-乙基己酯；

三嗪衍生物，例如2，4，6-三苯胺基(对-羰-2′-乙基-1′-己氧基)-1，3，5-三嗪 (辛基三嗪酮)和二辛基丁酰胺三嗪酮(HEB)：

丙烷-1，3-二酮，例如1-(4-叔丁基苯基)-3-(4′-甲氧基苯基)丙烷-1，3-二 酮。

合适的水溶性物质是：

2-苯基苯并咪唑-5-磺酸和其碱金属盐、碱土金属盐、铵盐、烷基铵盐、 烷醇铵盐和葡糖铵盐(glucammonium)；

二苯甲酮的磺酸衍生物，优选2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮-5-磺酸及其 盐；

3-苄叉樟脑的磺酸衍生物，例如4-(2-氧代-3-亚冰片基甲基)苯磺酸和 2-甲基-5-(2-氧代-3-亚冰片基)磺酸及其盐。

特别优选使用肉桂酸酯，优选4-甲氧基肉桂酸2-乙基己酯，4-甲氧基肉 桂酸异戊酯，2-氰基-3-苯基肉桂酸2-乙基己酯(氰双苯丙烯酸辛酯)。

而且，优选使用二苯甲酮衍生物，尤其是2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮、 2-羟基-4-甲氧基-4′-甲基二苯甲酮、2，2′-二羟基-4-甲氧基二苯甲酮，和使用 丙烷-1，3-二酮，例如1-(4-叔丁基苯基)-3-(4′-甲氧基苯基)丙烷-1，3-二酮。

合适的典型UV-A滤光剂是：

苯甲酰基甲烷衍生物，例如1-(4′-叔丁基苯基)-3-(4′-甲氧基苯基)丙烷 -1，3-二酮、4-叔丁基-4′-甲氧基二苯甲酰基甲烷或1-苯基-3-(4′-异丙基苯基) 丙烷-1，3-二酮；

二苯甲酮的氨基羟基-取代的衍生物，例如，正-己基苯甲酸N，N-二乙基 氨基羟基苯甲酰酯。

UV-A和UV-B滤光剂当然也可用于混合物中。

然而，可使用的其它防晒滤光剂是其它不溶性的色素，如细分散的金 属氧化物和盐例如二氧化钛、氧化铁、氧化铝、氧化铈、氧化锆、硅酸盐 (滑石)、硫酸钡和硬脂酸锌。颗粒应当具有小于100nm、优选5～50nm、 尤其是15～30nm的平均直径。

除了上述两组主要防晒物质外，还可以使用抗氧化型的次要防晒剂， 其中断当UV线透过皮肤时引发的光化学反应链。典型实例是超氧化物歧 化酶、过氧化氢酶、生育酚(维生素E)和抗坏血酸(维生素C)。

其它组是对被UV光损害的皮肤具有消炎效果的抗刺激剂。这类物质 例如是红没药醇、叶绿醇和phytantriol。

效应分子(ii)与结合角蛋白的疏水蛋白-疏水蛋白多肽序列(i)的连接

将效应分子(ii)结合到对角蛋白具有结合亲合性的疏水蛋白多肽序列(i) 上。(i)和(ii)之间的结合或者是共价或者是基于离子或者是范德华作用结合 (图3)。

优选共价连接。这可例如经由疏水蛋白多肽序列(i)的侧链，尤其是经 由氨基官能或羧酸酯官能或硫羟官能进行。优选经由一个或多个赖氨酸残 基的氨基官能连接、半胱氨酸残基的一个或多个硫羟基连接或经由疏水蛋 白多肽(i)的N-末端或C-末端官能连接。该效应分子(ii)与疏水蛋白多肽序 列(i)的连接可以是直接的，即作为已经存在于(i)和(ii)的两种化学官能共价 连接，例如将(i)的氨基官能连接到(ii)的羧酸酯官能以得到酰胺。然而该连 接也可经由所称作的接头(即至少双功能分子，其一种功能是与(i)成键， 另一种功能是连接到(ii))进行。

如果效应分子(ii)同样由多肽序列组成，那么(i)和(ii)的连接可通过所 称作的融合蛋白(即由两个部分序列(i)和(ii)组成的共同多肽序列)进行。

在(i)和(ii)之间也可以插入所称作的间隔区元件，例如具有蛋白酶、脂 肪酶、酯酶、磷酸酶、水解酶潜在的切割位点的多肽序列，或者允许容易 纯化融合蛋白的多肽序列，例如所称作的His标签，即低聚组氨酸残基。

非蛋白样效应分子与疏水蛋白多肽序列(i)的连接优选通过疏水蛋白多 肽(i)的可官能化基团(侧基)进行，所述基团与效应分子的化学官能共价键 合。

此处优选经由疏水蛋白多肽(i)的氨基、硫羟基或羟基官能的键合连接， 例如如果合适的话在活化后，所述基团可与效应分子(ii)的羧基官能键合形 成相应的酰胺、硫酯或酯。

疏水蛋白多肽序列(i)与效应分子(ii)的另一优选的连接是使用裁剪的 接头。所述接头具有两个或多个所称作的锚定基团，可用其连接疏水蛋白 多肽序列(i)和一种或多种效应分子(ii)。例如，(i)的锚定基团可以是硫羟 官能，通过该硫羟官能团接头可与多肽(i)的半胱氨酸残基形成二硫键。(ii) 的锚定基团可以例如是羧基官能团，通过该官能团接头可与效应分子(ii)的 羟基官能形成酯键。

裁剪接头的使用允许对希望的效应分子的连接进行准确的调整。而且 因此也可以确定的方式连接两个或多个效应分子与疏水蛋白多肽序列(i)。

所用的接头受到待偶联的官能度的控制。合适的接头例如是与多肽(i) 通过巯基-反应性基团，如马来酰亚胺、吡啶基连硫醚、α-卤代乙酰基、乙 烯基砜偶联的分子和与效应分子(ii)通过下述偶联的分子

-巯基-反应性基团，如马来酰亚胺、吡啶基连硫醚、α-卤代乙酰基、乙 烯基砜)，胺反应性基团(如琥珀酰亚胺酯、碳二亚胺、羟基甲基膦、 亚氨酯、PFP酯等)

-糖类和氧化糖类-反应性基团(如肼类等)

-羧基-反应性基团(如碳二亚胺等)

-羟基-反应性基团(如异氰酸酯等)

-胸腺嘧啶-反应性基团(如补骨脂素等)

-无选择性基团(如芳基叠氮化物等)

-光活性基团(如全氟苯基叠氮化物等)

-金属络合基团(如EDTA、六聚his、铁蛋白)

-抗体和抗体片段(如单链抗体、抗体的F(ab)片段、催化抗体)。

备选地，在活性物质/效应物质和角蛋白结合结构域之间的直接偶联可 例如通过碳二亚胺、戊二醛或本领域技术人员已知的其它交联剂进行。

接头可以是稳定的、热裂解的、光裂解的或酶促切割的(特别是通过 脂肪酶、酯酶、蛋白酶、磷酸酶、水解酶等)。相应的化学结构是本领域技 术人员已知的并在分子部分(i)和(ii)之间整合。

根据本发明可与分子使用的酶促切割的接头实例例如在WO 98/01406 中具体说明，因此其全文引入本文作为参考。

根据本发明结合角蛋白的疏水蛋白效应分子在人化妆品(尤其是皮肤 护理和毛发护理)，动物护理中具有广泛的应用领域。

优选地，根据本发明结合角蛋白的疏水蛋白效应分子用于皮肤化妆品、 指甲化妆品和毛发化妆品中。它们允许在皮肤护理、指甲护理或毛发护理 或皮肤保护、指甲保护和毛发保护的效应物质中具有高浓度和长的作用时 间。

用于制备毛发化妆品或皮肤化妆品制剂的合适的辅剂和添加剂是本领 域技术人员已知的并可在化妆品手册中找到，例如Schrader，Grundlagen und Rezepturen der Kosmetika[化妆品原理和配方]，Hüthig Verlag， Heidelberg，1989，ISBN 3-7785-1491-1。

根据本发明的化妆品组合物可以是皮肤化妆品、毛发化妆品、皮肤病 组合物、卫生组合物或药物组合物。

根据本发明的组合物优选以凝胶剂、泡沫剂、喷雾剂、软膏剂、霜剂、 乳剂、混悬剂、洗剂、奶剂或糊剂的形式。如果希望的话，也可使用脂质 体或微球。

根据本发明的化妆品或药物活性组合物可额外地包含化妆品和/或皮 肤病用活性物质和辅剂。

优选，根据本发明的化妆品组合物包含至少一种如上所述的疏水蛋白 多肽序列(i)，和至少一种不同于所述多肽序列(i)的组分，其选自化妆品 活性物质、乳化剂、表面活性剂、防腐剂、芳香油、增稠剂、毛发聚合物、 毛发和皮肤调节剂、接枝聚合物、水溶性的或可分散的含聚硅氧烷聚合物、 光防护剂、漂白剂、胶凝剂、护理剂、着色剂、染发剂、晒黑剂、染料、 色素、增稠剂、湿润剂、再加脂剂(refatting agents)、胶原、蛋白质水 解产物、脂类、抗氧化剂、消泡剂、抗静电剂、润肤剂和软化剂。

在该类制剂中的常用增稠剂是交联的聚丙烯酸及其衍生物，多糖及其 衍生物，如黄原胶、琼脂、藻酸盐或纤基乙酸钠，纤维素衍生物，如羧甲 基纤维素或羟基羧甲基纤维素，脂肪醇、甘油一酯和脂肪酸，聚乙烯醇和 聚乙烯吡咯烷酮。优选使用非离子增稠剂。

合适的化妆品和/或皮肤病用活性物质例如是，着色活性物质、皮肤和 毛发着色剂、染发剂、晒黑剂、漂白剂、角蛋白硬化物质、抗微生物活性 物质、滤光活性物质、驱虫活性物质、具有充血作用的物质、具有角质溶 解和角质促成作用的物质、去头屑活性物质、消炎剂、具有角质化作用的 物质、抗氧化活性物质或作为自由基清除剂的活性物质、皮肤润湿物质、 加脂活性物质、具有抗红斑或抗变应活性的物质及其混合物。

人工晒黑皮肤和适于无需用UV射线天然或人工辐照而晒黑皮肤的 活性物质例如是二羟基丙酮、阿脲和胡桃壳提取物。合适的硬化角蛋白的 物质通常是也用于止汗的活性物质，例如硫酸铝钾、水合氯化铝、乳酸铝 等。

抗微生物活性物质用于破坏微生物或抑制它们的生长，并因此用作防 腐剂和减少体臭的形成或减弱体臭强度的除臭物质。这些包括例如本领域 技术人员已知的常用防腐剂，例如对羟基苯甲酸酯、咪唑啉基脲、甲醛、 山梨酸、苯甲酸、水杨酸等。该类除臭物质例如是蓖麻醇酸锌、三氯生、 十一碳烯酸烷基醇酰胺、柠檬酸三乙酯、氯己定等。

合适的滤光活性物质是在UV-B和/或UV-A区吸收UV射线的物质。 合适的紫外线滤光剂例如是2，4，6-三芳基-1，3，5-三嗪，其中所述芳基在每种 情形下可携带至少一个优选选自羟基、烷氧基(尤其为甲氧基)、烷氧基 羰基(尤其为甲氧基羰基和乙氧基羰基)及其混合基团的取代基。合适 的还有对氨基苯甲酸酯、肉桂酸酯、二苯甲酮类、樟脑衍生物，以及可防 止UV射线的色素，如二氧化钛、滑石和氧化锌。

合适的驱虫活性物质是能够驱赶特定的动物或者使动物(尤其是昆 虫)远离人类的化合物。这些化合物例如包括2-乙基-1，3-己二醇、N，N-二 乙基-间甲苯酰胺等。促进皮肤中血液循环的具有充血活性的合适物质例如 是精油，如矮松提取物、熏衣草提取物、迷迭香提取物、杜松子提取物、 烤栗提取物、桦树叶提取物、干草种子(hayflower)提取物、乙酸乙酯、 樟脑、薄荷醇、薄荷油、迷迭香提取物、桉油等。合适的角质溶解和角质 促成物质例如是水杨酸、巯基乙酸钙、巯基乙酸及其盐、硫等。合适的去 头屑活性物质例如是硫、硫化聚乙二醇脱水山梨糖醇单油酸酯、硫化蓖麻 醇聚乙氧基化物、吡硫锌、巯氧吡啶铝等。抵抗皮肤刺激的合适消炎剂例 如是尿囊素、红没药醇、α-红没药醇、甘菊提取物、泛醇等。

作为化妆品和/或药用活性物质(且如果合适的话作为辅剂)，根据本发 明化妆品组合物可包含至少一种化妆品或药学可接受的聚合物，其不同于 根据本发明使用的聚合电解质络合物的聚合物。这些非常通常地包括阳离 子、两性和中性聚合物。

合适的聚合物例如是具有INCI名Polyquaternium的阳离子聚合物， 如乙烯基吡咯烷酮/N-乙烯基咪唑鎓盐共聚物(Luviquat FC，Luviquat HM， Luviquat MS，Luviquat&commat，Care)、用硫酸二乙酯季铵化的N-乙烯 基吡咯烷酮/甲基丙烯酸二甲基氨基乙基酯共聚物(Luviquat PQ 11)、N- 乙烯基己内酰胺/N-乙烯基吡咯烷酮/N-乙烯基咪唑鎓盐共聚物(Luviquat E Hold)、阳离子纤维素衍生物(polyquaternium-4和-10)、丙烯酰胺共聚物 (polyquaternium-7)和壳聚糖。

合适的阳离子(季铵化)聚合物还有Merquat(基于二甲基二烯丙基氯化 铵的聚合物)、Gafquat(通过聚乙烯吡咯烷酮与季铵化合物反应制备的季铵 聚合物)、聚合物JR(具有阳离子基团的羟基乙基纤维素)和植物基阳离子聚 合物，如瓜耳胶聚合物，如Rhodia的Jaguar级。

其它合适的聚合物还有中性聚合物，如聚乙烯吡咯烷酮、N-乙烯基 吡咯烷酮和乙酸乙烯酯和/或丙酸乙烯酯的共聚物、聚硅氧烷、聚乙烯基己 内酰胺和与N-乙烯基吡咯烷酮的其它的共聚物、聚乙烯亚胺及其盐、聚乙 烯基胺及其盐、纤维素衍生物、聚天冬氨酸盐和衍生物。这些包括例如 Luviflex 0 Swing(部分皂化的聚乙酸乙烯酯和聚乙二醇的共聚物，BASF)。

合适的聚合物还是非离子的、水溶性的或水可分散性的聚合物或低聚 物，如聚乙烯基己内酰胺，如Luviskol 0 Plus(BASF)，或聚乙烯吡咯烷酮 和其共聚物，尤其是乙烯基酯，如乙酸乙烯酯、如Luviskol 0 VA 37 (BASF)、聚酰胺，如描述在例如DE-A-43 33 238中的基于衣康酸和脂肪族 二胺。

合适的聚合物还是两性的或两性离子的聚合物，如可获得名为 Amphomer(National Starch)的辛基丙烯酰胺/甲基丙烯酸甲酯/甲基丙烯 酸叔丁基氨基乙酯/甲基丙烯酸羟基丙基酯的共聚物，和公开在例如德国专 利申请DE39 29 973、DE 21 50 557、DE28 17 369和DE 3708 451中的两 性离子聚合物。丙烯酰氨基丙基三甲基氯化铵/丙烯酸或甲基丙烯酸共聚物 及其碱金属盐和铵盐是优选的两性离子聚合物。其他合适的两性离子聚合 物是商业上可得的名为Amersette(AMERCHOL)的甲基丙烯酰基乙基甜 菜碱/甲基丙烯酸酯共聚物，和甲基丙烯酸羟乙酯、甲基丙烯酸甲酯、N，N- 二甲基氨基乙基甲基丙烯酸酯和丙烯酸的共聚物(Jordapon(D))。

合适的聚合物还是非离子的、含硅氧烷的、水溶性的或水可分散的聚 合物，如聚醚硅氧烷，如Tegopren 0(Goldschmidt)或Besi&commat (Wacker)。

根据本发明药物组合物的配方基优选包含药学可接受的辅剂。药学可 接受的辅剂是用于药学领域、食品技术和相关领域中已知的那些，尤其是 在相关的药典中列出的那些(如DAB Ph.Eur.BP NF)和其性质不排除生 理学应用的其他辅剂。

合适的辅剂可以是：润滑剂、润湿剂、乳化剂和悬浮剂、防腐剂、抗 氧化剂、抗刺激剂、螯合剂、乳液稳定剂、成膜剂、胶凝剂、气味掩盖剂、 树脂、水状胶体、溶剂、溶解促进剂、中和剂、渗透促进剂、色素、季铵 化合物、再加脂剂和富脂剂、软膏、霜剂或油基物质、聚硅氧烷衍生物、 稳定剂、消毒剂、推进剂、干燥剂、遮光剂、增稠剂、蜡、软化剂、白油。 该方法的制剂是基于例如在Fiedler，H.P.Lexikon der Hilfsstoffe für Pharmazie，Kosmetik und angrenzende Gebiete[药品、化妆品和相关领域 的助剂词典]，第四版，Aulendorf：ECV-Editio-Kantor-Verlag，1996中所 述的专门知识。

为了制备根据本发明的皮肤病用组合物，活性物质可用合适的辅剂(赋 形剂)混合或稀释。赋形剂可以是用作活性物质的媒介、载体或介质的固 体、半固体或液体物质。如果希望的话，可以本领域技术人员已知的方式 添加额外的辅剂。此外，聚合物和分散剂是合适的药用辅剂，优选作为固 体药剂的涂层或粘合剂。它们也可用于霜剂并作为片剂涂层和片剂粘合 剂。

根据优选实施方案，根据本发明的组合物是皮肤清洁组合物。

优选的皮肤清洁组合物是液体至凝胶样粘度的肥皂，如透明皂、高级 香皂、去臭皂、润肤皂、婴儿皂、皮肤保护用皂、磨砂皂和合成洗涤剂、 皂膏、软皂和膏状洗涤剂、液体洗涤剂、洗浴和沐浴用制剂，如清洗液、 淋浴沐浴凝胶、泡沫浴剂、浴油、和摩擦制剂、剃须泡沫剂、洗剂和霜 剂。

根据另一个优选实施方案，根据本发明的组合物是用于护理和保护皮 肤、指甲护理组合物的化妆品组合物或装饰化妆品的制剂。

合适的皮肤用化妆品组合物例如是面部滋补霜、面膜、去臭和其它化 妆品洗剂。用于装饰化妆品的组合物包括例如遮瑕棒、舞台用彩妆品、眉 毛油和眼影、唇膏、眼影笔、眼线膏、彩妆品、粉剂和眉笔。

而且，疏水蛋白多肽序列(i)可用于清洁毛孔的鼻贴、抗粉刺组合物、 驱虫、剃须组合物、去除毛发组合物、私密护理组合物、足部护理组合 物和身体护理。

根据本发明的皮肤护理组合物尤其是W/O或O/W皮肤霜剂、日霜和 晚霜、眼霜、面霜、抗皱霜、保湿霜剂、增白霜剂、维生素霜剂、皮肤洗 剂、护理洗剂和保湿洗剂。

基于上述的聚合电解质络合物的皮肤化妆品和皮肤病用组合物显示 有利的效果。该聚合物可与其他物质一起有助于润湿和调理皮肤并改善皮 肤的感觉。该聚合物在制剂中还可作为增稠剂。通过添加根据本发明的聚 合物，在一些制剂中可实现皮肤相容性的很大改善。

皮肤用化妆品和皮肤病用组合物包含优选至少一种疏水蛋白多肽序 列(i)，其量基于组合物的总重量为0.000001～10％重量，优选0.0001～1％重 量。

基于疏水蛋白多肽序列(i)的特别的防晒组合物与常用辅剂如聚乙烯吡 咯烷酮相比，具有增加UV-吸收成分停留时间的性质。

取决于使用领域，根据本发明的组合物可以适合皮肤护理的形式使 用，例如霜剂、泡沫剂、凝胶剂、棒剂、摩丝、乳液、喷雾剂(泵送喷雾剂 或含推进剂的喷雾剂)或洗剂。

除了疏水蛋白多肽序列(i)和合适的载体外，皮肤用化妆品制剂还可包 含其它的活性物质和如上所述的皮肤用化妆品的常用辅剂。这些优选包 括乳化剂、防腐剂、芳香油，化妆品活性物质如phytantriol、维生素A、 E和C、视黄醇、红没药醇、泛醇、防晒剂、漂白剂、着色剂、染发剂、 晒黑剂、胶原、蛋白质水解产物、稳定剂、pH调节剂、染料、盐、增稠 剂、胶凝剂、稠度调节剂、聚硅氧烷、润湿剂、再加脂剂和其它的常用添 加剂。

皮肤用化妆品和皮肤病用组合物的优选的油和脂肪组分是上述的矿 物质和合成油例如石蜡、硅油和具有大于8个碳原子的脂肪烃，动物和植 物油，例如向日葵油、椰子油、鳄梨油、橄榄油、羊毛脂或蜡、脂肪酸、 脂肪酸酯，例如C6-C30-脂肪酸的甘油三酯、石蜡酯，例如希蒙得木油、 脂肪醇、凡士林、氢化羊毛脂和乙酰化羊毛脂，及其混合物。

如果必须建立特定的性质，根据本发明的疏水蛋白多肽序列(i)还可与 常规的聚合物混合。

为了建立某些性质，例如改善活性物质和辅剂(如色素)的触觉、扩 散行为、耐水性和/或结合性，该皮肤用化妆品和皮肤病用制剂可额外地还 包含基于聚硅氧烷化合物的调节物质。

合适的聚硅氧烷化合物例如是聚烷基聚硅氧烷、聚芳基聚硅氧烷、聚 芳基烷基聚硅氧烷、聚醚聚硅氧烷或聚硅氧烷树脂。

化妆品或皮肤病用制剂通过本领域技术人员已知的常用方法制备。

优选地，化妆品和皮肤病用组合物呈乳剂形式，尤其是油包水(W/O) 或水包油(O/W)乳剂形式。

然而也可以选择其它类型的制剂，例如氢化分散剂、凝胶剂、油、油 凝胶、多重乳液，例如呈W/O/W或O/W/O乳剂、无水软膏剂或软膏基等 形式。

乳剂通过已知的方法制备。除了至少一种疏水蛋白多肽序列(i)以外， 该乳剂通常包含常用组分，如脂肪醇、脂肪酸酯，尤其是脂肪酸甘油三酯、 脂肪酸、羊毛脂和其衍生物，天然或合成油或蜡和存在于水中的乳化剂。 乳剂特定类型添加剂的选择和合适的乳剂的制备描述在例如Schrader， Grundlagen und Rezepturen der Kosmetika[化妆品原理和制剂]，Hüthig Buch Verlag，Heidelberg，第2版，1989年，第3部分，其全文引入本文作 为参考。

如用于皮肤霜剂等的合适的乳剂通常包含在油中或脂肪相中通过合适 的乳化剂体系乳化的水相。为了提供水相，可使用聚合电解质络合物。

可在乳液脂肪相中存在的优选的脂肪组分是：烃油、如石蜡油、 purcellin油、全氢化角鲨烯和微晶蜡在这些油中的溶液；动物或植物油， 如甜扁桃仁油、鳄梨油、calophylum油、羊毛脂和其衍生物、蓖麻油、芝 麻油、橄榄油、希蒙得木油、烛果油、胸棘鲷(hoplostethus)油、在大气 压下蒸馏起点大约为250℃和蒸馏终点为410℃的矿物油(例如凡士林 油)，饱和或不饱和脂肪酯酸，如肉豆蔻酸烷基酯，如肉豆蔻酸异丙酯、 丁酯或鲸蜡基酯、硬脂酸十六烷基酯、棕榈酸乙基或异丙基酯、辛酸或癸 酸甘油三酯和蓖麻油酸鲸蜡酯。

脂肪相还可包含溶于其它油中的硅油，如聚二甲基硅氧烷、甲基苯基 聚硅氧烷和聚硅氧烷乙二醇共聚物，脂肪酸和脂肪醇。

除了疏水蛋白多肽序列(i)以外，也可以使用蜡，例如巴西棕榈蜡、小 烛树蜡、蜂蜡、微晶蜡、地蜡和Ca、Mg及Al的油酸盐、肉豆蔻酸盐、 亚油酸盐和硬脂酸盐。

此外，根据本发明的乳剂可呈O/W乳剂形式。通常以增稠形式存在的 乳剂通常包含油相、在水相中稳定油相的乳化剂和水相。合适的乳化剂优 选是O/W乳化剂，如聚甘油酯、山梨糖酯或部分酯化的甘油酯。

根据其它优选实施方案，根据本发明的组合物是淋浴凝胶、洗发制剂 或沐浴制剂。

该类制剂包含至少一种疏水蛋白多肽序列(i)和作为基础表面活性剂的 常用阴离子表面活性剂和作为助表面活性剂的两性和/或非离子表面活性 剂。其它合适的活性物质和/或辅剂通常选自脂质、香料、染料、有机酸、 防腐剂和抗氧化剂、和增稠剂/胶凝剂、皮肤调节剂和润湿剂。

这些制剂基于制剂的总重量优选包含2～50％重量、优选5～40％重量、 特别优选8～30％重量的表面活性剂。

在洗涤、淋浴和沐浴制剂中，可以使用常用于身体清洁组合物的所有 的阴离子、中性、两性或阳离子表面活性剂。

合适的阴离子表面活性剂例如是烷基硫酸盐、烷基醚基硫酸盐、烷基 磺酸盐、烷基芳基磺酸盐、烷基琥珀酸盐、烷基磺基琥珀酸盐、N-alkoyl肌 氨酸盐、酰基牛磺酸盐、酰基异硫代硫酸盐(isothionates)、烷基磷酸盐、 烷基醚磷酸盐、烷基醚羧酸盐、α-烯烃磺酸盐，尤其是碱金属盐和碱土金 属盐(如钠盐、钾盐、镁盐、钙盐、铵盐和三乙醇胺盐)。在分子中可具 有1～10个环氧乙烷或环氧丙烷单元、优选1～3个环氧乙烷单元的烷基醚硫 酸盐、烷基醚磷酸酯和烷基醚羧酸盐。这些包括例如月桂基硫酸钠、月桂 基硫酸铵、月桂基醚硫酸钠、月桂基醚硫酸铵、月桂基肌氨酸钠、油酰基 琥珀酸钠、月桂基磺基琥珀酸铵、十二烷基苯磺酸钠、十二烷基苯磺酸三 乙醇胺。

合适的两性表面活性剂例如是烷基甜菜碱、烷基酰氨基丙基甜菜碱、 烷基磺基甜菜碱、烷基甘氨酸盐、烷基羧基甘氨酸盐、烷基二乙酸盐或二 丙酸盐、烷基双二乙酸酯盐或双二丙酸盐。

例如可使用椰油基二甲基磺基丙基甜菜碱、月桂基甜菜碱、椰油酰胺 基丙基甜菜碱或椰油基双丙酸钠。

合适的非离子表面活性剂例如是在烷基链中具有6～20个碳原子的脂 族醇或烷基酚的反应产物，所述烷基链可以是线性或分枝的，具有环氧乙 烷和/或环氧丙烷。烯化氧的量大约为6～60摩尔/摩尔醇。此外，烷基胺氧 化物、单或二烷基链烷醇酰胺、聚乙二醇脂肪酸酯、乙氧基化脂肪酸酰胺、 烷基多葡糖苷或山梨糖醚酯是合适的。

而且，洗涤、淋浴和沐浴制剂可包含常用阳离子表面活性剂，例如季 铵盐化合物(例如十六烷基三甲基氯化铵)。

此外，淋浴凝胶剂/洗发制剂可包含增稠剂，例如氯化钠、PEG-55、 油酸丙二醇酯、PEG-120甲基葡萄糖二油酸酯及其它，和防腐剂，其它活 性物质和辅剂和水。

根据其它优选实施方案，根据本发明的组合物是毛发处理组合物。

根据本发明的毛发处理组合物优选包含至少一种疏水蛋白多肽序列 (i)，其量基于组合物的总重量为大约0.000001～10％重量、优选0.00001～1％ 重量。

优选地，根据本发明的毛发处理组合物呈定型泡沫、毛发摩丝、毛发 凝胶、洗发剂、毛发喷雾剂、毛发泡沫剂、ends fluid、永久卷发中和剂、 毛发着色剂和漂白剂或热油处理的形式。取决于应用领域，该毛发化妆品 制剂可用作(气雾剂)喷雾剂、(气雾剂)泡沫剂、凝胶剂、凝胶喷雾剂、霜剂、 洗剂或蜡。此处毛发喷雾剂包含气雾剂喷雾剂和不含推进剂气体的泵送喷 雾剂。毛发泡沫剂包含气雾剂泡沫剂和不含推进剂气体的泵送泡沫剂。毛 发喷雾剂和毛发泡沫剂优选主要或排他地包含水溶性的或水可分散的组 分。如果用于根据本发明的毛发喷雾剂和毛发泡沫剂的化合物是水可分散 的，则它们可以以水性微分散液形式应用，颗粒直径通常为1～350nm、 优选1～250nm。此处这些制剂的固体含量通常为大约0.5～20％重量。这些 微分散液通常不需要乳化剂或表面活性剂用于它们的稳定。

在优选实施方案中，根据本发明的毛发化妆品制剂包含a) 0.000001～10％重量的至少一种疏水蛋白多肽序列(i)，b)20～99.95％重量的 水和/或醇，c)0～50％重量的至少一种推进剂气体，d)0～5％重量的至少一 种乳化剂，e)0～3％重量的至少一种增稠剂和至多25％重量的其它组分。

醇应理解为所有常用于化妆品的醇，如乙醇、异丙醇、正丙醇。

其它组分应理解为化妆品中常用添加剂，例如推进剂、消泡剂、表面 活性化合物(即表面活性剂)、乳化剂、成泡沫剂和增溶剂。所用的表面 活性化合物可以是阴离子的、阳离子的、两性或中性的。其它常用组分也 可以例如是防腐剂、芳香油、遮光剂、活性物质、UV滤光剂、护理物质 (如泛醇、胶原、维生素、蛋白质水解产物、α和β羟基羧酸、稳定剂、 pH调节剂、染料、粘度调节剂、胶凝剂、盐、润湿剂、再加脂剂、螯合剂 和其它常用添加剂。

如果需要建立非常特定的性质，这些还可以包括可与根据本发明的疏 水蛋白多肽序列(i)组合使用的化妆品中已知的所有式样和调节聚合物。

合适的常用毛发化妆品聚合物例如是上述阳离子、阴离子、中性、非 离子和两性聚合物，其引入本文作为参考。

为了建立某些性质，制剂可额外地还包含基于聚硅氧烷化合物的调节 物质。合适的聚硅氧烷化合物例如是聚烷基聚硅氧烷、聚芳基聚硅氧烷、 聚芳基烷基聚硅氧烷、聚醚聚硅氧烷、有机硅树脂或聚二甲基硅氧烷共聚 醇(CTFA)和氨基官能聚硅氧烷化合物，如氨基封端的聚二甲基硅氧烷 (CTFA)。

根据本发明的聚合物在发型制剂，尤其是毛发喷雾剂(气雾剂喷雾剂和 不含推进剂气体的泵送喷雾剂)和毛发泡沫剂(气雾剂泡沫剂和不含推进 剂气体的泵送泡沫剂)中特别适于作为定型剂。

在优选实施方案中，喷雾剂制剂包含a)0.000001～10％重量的至少一 种疏水蛋白多肽序列(i)，b)90～99.9％重量的水和/或醇，c)0～70％重量的 至少一种推进剂，d)0～20％重量的其它组分。

推进剂是常用于毛发喷雾剂或气雾剂泡沫剂的推进剂。优选丙烷/丁 烷、戊烷、二甲醚、1，1-二氟乙烷(HFC-152a)、二氧化碳、氮气或压缩气 体的混合物。

根据本发明优选的气雾剂毛发泡沫剂的制剂包含a)0.000001～10％重 量的至少一种疏水蛋白多肽序列(i)，b)90～99.9％重量的水和/或醇，c) 5～20％重量的推进剂，d)0.1～5％重量的乳化剂，e)0～10％重量的其它组分。

可使用的乳化剂是所有常用于毛发泡沫剂的乳化剂。合适的乳化剂可 以是非离子的、阳离子的或阴离子的或两性的。

非离子乳化剂的实例(INCI命名法)是月桂基乙二醇醚，如月桂基聚氧 乙烯(4)醚；十六烷基聚氧乙烯醚(ceteths)，如十六烷基乙二醇醚、聚 乙二醇鲸蜡基醚；十六/十八醇聚氧乙烯醚(ceteareth)，如十六/十八醇聚 氧乙烯(25)醚、聚乙二醇脂肪酸甘油酯、羟基化卵磷脂、脂肪酸乳酰基 酯、烷基多葡糖苷。

阳离子乳化剂实例是鲸蜡基二甲基-2-羟基乙基磷酸二氢铵、鲸蜡基三 甲基氯化铵、鲸蜡基三甲基溴化铵、椰油基三甲基甲基硫酸铵、 quaternium-1～x(INCI)。

阴离子乳化剂可例如选自烷基硫酸盐、烷基醚硫酸盐、烷基磺酸盐、 烷基芳基磺酸盐、烷基琥珀酸盐、烷基磺基琥珀酸盐、N-alkoyl肌氨酸盐、 酰基牛磺酸盐、酰基异硫代硫酸(isothionates)盐、烷基磷酸盐、烷基醚磷 酸盐、烷基醚羧酸盐、α-烯烃磺酸盐，尤其是碱金属盐和碱土金属盐(如 钠盐、钾盐、镁盐、钙盐、铵盐和三乙醇胺盐)。烷基醚硫酸盐、烷基醚 磷酸盐和烷基醚羧酸盐可在分子中有1～10个环氧乙烷或环氧丙烷单元、优 选1～3个环氧乙烷单元。

根据本发明适于定型凝胶剂的制剂可例如具有下述组成：a) 0.000001～10％重量的至少一种疏水蛋白多肽序列(i)，b)80～99.85％重量的 水和/或醇，c)0～3％重量、优选0.05～2％重量的胶凝剂，d)0～20％重量的 其它组分。

通常，根据本发明使用的疏水蛋白多肽序列(i)已经具有″自增稠″效 果，是指在许多情形下，当制备凝胶时可免除胶凝剂的使用。然而为了建 立凝胶的特定的流变学或其它应用性质，胶凝剂的使用可以是有利的。可 使用的胶凝剂是化妆品中常用的所有的胶凝剂。这些包括轻微交联的聚丙 烯酸，例如卡波姆(INCI)，纤维素衍生物(如羟基丙基纤维素、羟基乙基 纤维素、阳离子改性纤维素)，多糖(如黄原胶、辛酸/癸酸甘油三酯、丙 烯酸钠共聚物、polyquaternium-32(和)Paraffinum Liquidum(INCI)、丙 烯酸钠共聚物(和)Paraffinum Liquidum(和)PPG-1十三烷基聚氧乙烯 (6)醚、丙烯酰氨基丙基三甲基氯化铵/丙烯酰胺共聚物、硬脂基聚氧乙 烯(10)醚烯丙基醚、丙烯酸酯共聚物、polyquaternium-37(和)Paraffinum Liquidum(和)PPG-1十三烷基聚氧乙烯(6)醚、polyquaternium 37(和)二 癸酸.二辛酸丙二醇酯(和)PPG-1十三烷基聚氧乙烯(6)醚、 polyquaternium-7、polyquaternium-44。

根据本发明的疏水蛋白多肽序列(i)可在化妆品制剂中用作调节剂。

包含根据本发明的疏水蛋白多肽序列(i)的制剂可优选在洗发精制剂中 用作定型剂和/或调节剂。优选洗发制剂包含a)0.000001～10％重量的至少 一种疏水蛋白多肽序列(i)，b)25～94.95％重量的水，c)5～50％重量的表面 活性剂，d)0～5％重量的其它调节剂，e)0～10％重量的其它化妆品组分。

在洗发制剂中，可以使用常用于洗发剂的所有的阴离子、中性、两性 或阳离子表面活性剂。

合适的阴离子表面活性剂例如是烷基硫酸盐、烷基醚基硫酸盐、烷基 磺酸盐、烷基芳基磺酸盐、烷基琥珀酸盐、烷基磺基琥珀酸盐、N-alkoyl肌 氨酸盐、酰基牛磺酸盐、酰基异硫代硫酸盐(isothionates)、烷基磷酸盐、 烷基醚磷酸盐、烷基醚羧酸盐、α-烯烃磺酸盐，尤其是碱金属盐和碱土金 属盐(如钠盐、钾盐、镁盐、钙盐、铵盐和三乙醇胺盐)。在分子中可具 有1～10个环氧乙烷或环氧丙烷单元、优选1～3个环氧乙烷单元的烷基醚硫 酸盐、烷基醚磷酸酯和烷基醚羧酸盐。

合适的包括例如月桂基硫酸钠、月桂基硫酸铵、月桂基醚硫酸钠、月 桂基醚硫酸铵、月桂基肌氨酸钠、油酰基琥珀酸钠、月桂基磺基琥珀酸铵、 十二烷基苯磺酸钠、十二烷基苯磺酸三乙醇胺。

合适的两性表面活性剂例如是烷基甜菜碱、烷基酰氨基丙基甜菜碱、 烷基磺基甜菜碱、烷基甘氨酸盐、烷基羧基甘氨酸盐、烷基二乙酸盐或二 丙酸盐、烷基双二乙酸酯盐或双二丙酸盐。

例如可使用椰油基二甲基磺基丙基甜菜碱、月桂基甜菜碱、椰油酰胺 基丙基甜菜碱或椰油基双丙酸钠。

合适的非离子表面活性剂例如是在烷基链中具有6～20个碳原子的脂 族醇或烷基酚的反应产物，所述烷基链可以是线性或分枝的，具有环氧乙 烷和/或环氧丙烷。烯化氧的量大约为6～60摩尔/摩尔醇。此外，烷基胺氧 化物、单或二烷基链烷醇酰胺、聚乙二醇脂肪酸酯、烷基多葡糖苷或山梨 糖醚酯是合适的。

而且，洗发制剂可包含常用阳离子表面活性剂，例如季铵化合物，例 如鲸蜡基三甲基氯化铵。

在洗发制剂中，常用调节剂可与疏水蛋白多肽序列(i)组合使用以获得 一定的效果。

这些包括例如具有INCI名Polyquaternium的上述阳离子聚合物，尤 其是乙烯基吡咯烷酮/N-乙烯基咪唑鎓盐的共聚物(Luviquat FC， Luviquat&commat，HM，Luviquat MS，Luviquat Care)、用硫酸二乙酯季 铵化的N-乙烯基吡咯烷酮/甲基丙烯酸二甲基氨基乙基酯的共聚物 (Luviquat PQ 11)、N-乙烯基己内酰胺/N-乙烯基吡咯烷酮/N-乙烯基咪唑鎓 盐的共聚物(Luviquat D Hold)、阳离子纤维素衍生物(Polyquaternium-4 和-10)、丙烯酰胺共聚物(Polyquaternium-7)。此外，可使用蛋白质水解 产物以及基于聚硅氧烷化合物的调节物质，例如聚烷基硅氧烷、聚芳基硅 氧烷、聚芳基烷基硅氧烷、聚醚硅氧烷或有机硅树脂。其它合适的聚硅氧 烷化合物是聚聚二甲基硅氧烷共聚醇(CTFA)和氨基功能聚硅氧烷化合物 如聚二甲基硅氧烷共聚醇(CTFA)和氨基官能聚硅氧烷化合物，如氨基封端 的聚二甲基硅氧烷(CTFA)。此外，可使用阳离子瓜耳胶衍生物，如瓜耳胶 羟基丙基三甲基氯化铵(INCI)。

根据其它实施方案，该毛发化妆品或皮肤用化妆品制剂用于护理或保 护皮肤或毛发，并呈乳剂、分散剂、混悬剂、含水表面活性剂制剂、奶剂、 洗剂、霜剂、香膏、软膏、凝胶剂、粒剂、粉剂、棒制剂，如唇膏，泡沫 剂、气雾剂或喷雾剂形式。该类制剂非常适于局部制剂。合适的乳剂是水 包油乳剂和油包水乳剂或微乳剂。

通常，毛发化妆品或皮肤用化妆品制剂用于施用到皮肤(局部)或毛发。 此处的局部制剂应当理解为是指适于将活性物质以细密分布、优选以可被 皮肤吸收的形式应用到皮肤上的那些制剂。为此目的合适的例如是水溶液 和水-醇溶液、喷雾剂、泡沫剂、泡沫气雾剂、软膏、含水凝胶、O/W或 W/O型乳剂，微乳剂或化妆棒制剂。

根据本发明的化妆品组合物的优选实施方案，该组合物包含载体。优 选载体是水、气体、水基液体、油、凝胶剂、乳剂或微乳剂、分散体或其 混合物。特定的载体对皮肤显示良好的相容性。对局部制剂特别有利的是 含水凝胶剂、乳剂或微乳剂。

可使用的乳化剂是非离子的表面活性剂、两性离子表面活性剂、两性 表面活性剂或阴离子乳化剂。该乳化剂可以基于根据本发明的组合物以 0.1～10％重量，优选1～5％重量存在于该组合物中。

作为非离子表面活性剂，可以使用例如来自下面组的至少一组的表面 活性剂：

2～30mol的环氧乙烷和/或0～5mol的环氧丙烷与具有8～22个碳原子 的线性脂肪醇、具有12～22碳原子的脂肪酸以及在烷基中具有8～15个碳 原子的烷基酚的加成产物；

1～30mol的环氧乙烷与甘油的加成产物的C_12/18-脂肪酸单和二酯；

具有6～22个碳原子的饱和及不饱和脂肪酸的甘油单和二酯和脱水山 梨醇单和二酯和其环氧乙烷加成产物；

在烷基中具有8～22个碳原子的烷基单糖苷和寡糖苷及其乙氧基化类 似物；

15～60mol的环氧乙烷与蓖麻油和/或氢化蓖麻油的加成产物；

多元醇和尤其是聚甘油酯，例如聚甘油聚蓖麻醇酸酯、聚甘油聚-12- 羟基硬脂酸酯或聚甘油二聚亚油酸酯。两种或多种这类物质的化合物的混 合物同样是适合的；

2～15mol的环氧乙烷与蓖麻油和/或氢化蓖麻油的加成产物；

基于线性、支化、不饱和或饱和C_6/22-脂肪酸、蓖麻油酸和12-羟基硬 脂酸与甘油、聚甘油、季戊四醇、二季戊四醇、糖醇(如山梨糖醇)、烷基 葡糖苷(如甲基葡糖苷、丁基葡糖苷、月桂基葡糖苷)和聚葡糖苷(如纤维素) 的部分酯；

单、二和三烷基磷酸酯，单、二和/或三-PEG烷基磷酸酯及其盐；

羊毛蜡醇；

聚硅氧烷、聚烷基、聚醚共聚物和相应的衍生物；

如DE-C 1165574中的季戊四醇、脂肪酸、柠檬酸与脂肪醇的混合酯 和/或具有6～22个碳原子的脂肪酸、甲基葡萄糖与多元醇(优选甘油或聚 甘油)和聚(亚烷基)二醇和甜菜碱的混合酯。

此外，可使用的乳化剂是两性离子表面活性剂。两性离子表面活性剂 是用于描述在分子中携带至少一个季铵基团和至少一个羧酸盐基团或一个 磺酸盐基团的那些表面-活性化合物的术语。特别合适的两性离子表面活性 剂是所称作的甜菜碱，如N-烷基-N，N-二甲基甘氨酸铵，例如椰油基烷基 二甲基甘氨酸铵，N-酰基氨基丙基-N，N-二甲基甘氨酸铵，例如椰油基酰 基氨基丙基二甲基甘氨酸铵和在每种情形下在烷基或酰基具有8～18个碳 原子的2-烷基-3-羧基甲基-3-羟基乙基咪唑啉，以及椰油基酰基氨基乙基羟 基乙基羧基甲基甘氨酸盐。特别优选的是已知CTFA名为椰油酰胺基丙基 甜菜碱的脂肪酸酰胺衍生物。

同样合适的乳化剂是两性表面活性剂。两性表面活性剂应理解为在分 子中除了C_8，18-烷基或酰基外，包含至少一个游离氨基和至少一个-COOH 或-SO₃H基且能够形成内盐的那些表面-活性化合物。合适的两性表面活性 剂的实例是在每种情形下在烷基中具有大约8～18个碳原子的N-烷基甘氨 酸、N-烷基丙酸、N-烷基氨基丁酸、N-烷基亚氨基二丙酸、N-羟基乙基-N- 烷基酰氨基丙基甘氨酸、N-烷基牛磺酸、N-烷基肌氨酸、2-烷基氨基丙酸 和烷基氨基乙酸。

特别优选的两性表面活性剂是N-椰油基-烷基氨基丙酸盐、椰油基酰 基氨基乙基氨基丙酸盐和C_12/18-酰基肌氨酸。除了两性乳化剂外，季化乳 化剂也是合适的，特别优选酯季型的那些，优选甲基-季铵化二脂肪酸三乙 醇胺酯盐。而且，可使用的阴离子乳化剂是烷基醚硫酸盐、单甘油酯硫酸 盐、脂肪酸硫酸盐、磺基琥珀酸盐和/或醚羧酸。

合适的油体是基于具有6～18个，优选8～10个碳原子的脂肪醇的 Guerbet醇，线性C₆-C₂₂-脂肪酸与线性C₆-C₂₂-脂肪醇的酯，支化C₆-C₁₃- 羧酸与线性C₆-C₂₂-脂肪醇的酯，线性C₆-C₂₂-脂肪酸与支化醇(尤其是2- 乙基己醇)的酯，线性和/或支化脂肪酸与多元醇(例如丙二醇，二聚二醇 (dimerdiol)或三聚三醇(trimertriol))和/或Guerbet醇的酯，基于C₆-C₁₀- 脂肪酸的甘油三酯，基于C₆-C₁₈-脂肪酸的液体甘油单/二-、三酯混合物， C₆-C₂₂-脂肪醇和/或Guerbet醇与芳香羧酸(尤其是苯甲酸)的酯，C₂-C₁₂- 二羧酸与具有1～22个碳原子的线性或支化醇或具有2～10个碳原子和2～6 个羟基的多元醇的酯，植物油，支化伯醇，取代的环己烷，线性C₆-C₂₂- 脂肪醇碳酸酯，Guerbet碳酸酯，苯甲酸与线性和/或支化的C₆-C₂₂-醇的酯 (如TN)，二烷基醚，环氧化脂肪酸酯与多元醇的开环产物，硅 油和/或脂族或环烷烃。其它可使用的油体还有聚硅氧烷化合物，例如聚二 甲基硅氧烷、甲基苯基聚硅氧烷、环状聚硅氧烷和在室温以液体或树脂形 式存在的氨基-、脂肪酸、醇、聚醚-、环氧-、氟-、烷基-和/或苷改性的聚 硅氧烷化合物。油体在根据本发明的组合物中的存在量基于组合物为 1～90％重量，优选5～80％重量，尤其是10～50％重量。

通过将相应的化合物偶联到疏水蛋白多肽(i)上，可以明显延长在皮肤 上的活性时间。偶联如上所述进行，制剂及应用通过本领域技术人员已知 的方法进行。尤其对于去臭剂，合适的效应分子(ii)是：芳香油、环糊精、 离子交换剂、蓖麻醇酸锌、抗微生物/抑菌化合物(如DCMX，Irgasan DP 300， TCC)。

合适的止汗剂是：鞣酸和锌/铝盐。

使用根据本发明物质的其它领域是对于皮肤和粘膜的特定疾病的治疗 或预防应用。在口腔中、咽腔和鼻腔中尤其有利于经由疏水蛋白多肽序列 (i)结合用于治疗/预防的活性物质增加的和更长效的程度。为此使用的领域 尤其是：

-病毒病(如疱疹、柯萨奇病毒、水痘带状疱疹、巨细胞病毒等)

-细菌病(如TB、梅毒等)

-真菌病(如假丝酵母(Candida)、隐球酵母(Cryptococcus)、组织 胞浆菌病、曲霉(Aspergillus)、毛霉菌病(Mucormycosis)等)

-肿瘤疾病(如黑素瘤、腺瘤等)

-自身免疫性疾病(如寻常性天疱疮、大疱性类天疱疮、全身性红斑狼疮 等)

-晒斑

-寄生虫攻击(如壁虱、螨、跳蚤等)

-昆虫接触(如吸血昆虫，如按蚊等)

适于治疗或预防的物质(如类皮质激素、免疫抑制化合物、抗生素、抗 真菌剂、抗病毒化合物、驱虫剂等)可经由上述的接头(取决于待偶联的官 能度优化的接头)与结合角蛋白的多肽(i)偶联。

实验部分

实施例1

克隆yaad-His₆/yaaE-His₆的准备

用寡核苷酸Hal570和Hal571(Hal572/Hal573)进行聚合酶链式反应。使 用的模板DNA是枯草芽孢杆菌的基因组DNA。所得的PCR片段包含枯 草芽孢杆菌yaaD/yaaE基因的编码序列，在每端分别具有NcoI和BgIII 限制性切割位点。纯化PCR片段并用限制性内切核酸酶NcoI和BglII切 割。该DNA片段用作插入片段并克隆到来自Qiagen的载体pQE60中， 其已经事先用限制性内切核酸酶NcoI和BgIII线性化。所形成的载体 pQE60YAAD#2/pQE60YaaE#5可以用于表达由YAAD::HIS₆或

YAAE::HIS₆组成的蛋白质。

Hal570：gcgcgcccatggctcaaacaggtactga

Hal571：gcagatctccagccgcgttcttgcatac

Hal572：ggccatgggattaacaataggtgtactagg

Hal573：gcagatcttacaagtgccttttgcttatattcc

实施例2

克隆yaad疏水蛋白DewA-His₆

用寡核苷酸KaM 416和KaM 417进行聚合酶链式反应。使用的模板 DNA是构巢曲霉的基因组DNA。所得的PCR片段包含疏水蛋白基因dewA 的编码序列和N-末端因子Xa蛋白酶切割位点。纯化PCR片段并用限制性 内切核酸酶BamHI切割。该DNA片段用作插入片段并克隆到事先用限制 性内切核酸酶BgIII线性化的载体pQE60YAAD#2中。

所形成的载体#508可以用于表达由YAAD::Xa::dewA::HIS₆组成的融 合蛋白。

KaM416：

GCAGCCCATCAGGGATCCCTCAGCCTTGGTACCAGCGC

KaM417：

CCCGTAGCTAGTGGATCCATTGAAGGCCGCATGAAGTTCTCCGT

CTCCGC

实施例3

克隆yaad疏水蛋白RodA-His₆

类似地使用寡核苷酸KaM 434和KaM 435将质粒#513克隆到质粒#518 中。

KaM434：

GCTAAGCGGATCCATTGAAGGCCGCATGAAGTTCTCCATTGCTG

C

KaM435：CCAATGGGGATCCGAGGATGGAGCCAAGGG

实施例4

克隆yaad疏水蛋白BASF1-His₆

类似地使用寡核苷酸KaM 417和KaM 418将质粒#507克隆到质粒#508 中。

使用的模板DNA是合成的DNA序列(疏水蛋白BASF1)(见附件)。

KaM417：CCCGTAGCTAGTGGATCCATTGAAGGCCGCATGAAG TTCTCCGTCTCCGC

KaM418：

CTGCCATTCAGGGGATCCCATATGGAGGAGGGAGACAG

实施例5

克隆yaad疏水蛋白BASF2-His₆

类似地使用寡核苷酸KaM 417和KaM 418将质粒#506克隆到质粒#508 中。

使用的模板DNA是合成的DNA序列(疏水蛋白BASF2)(见附件)。

KaM417：CCCGTAGCTAGTGGATCCATTGAAGGCCGCATGAAG TTCTCCGTCTCCGC

KaM418：

CTGCCATTCAGGGGATCCCATATGGAGGAGGGAGACAG

实施例6

克隆yaad疏水蛋白SC3-His₆

类似地使用寡核苷酸KaM 464和KaM 465将质粒#526克隆到质粒#508 中。

使用的模板DNA是来自Schyzophyllum commune的cDNA(见附件)。

KaM464：CGTTAAGGATCCGAGGATGTTGATGGGGGTGC

KaM465：GCTAACAGATCTATGTTCGCCCGTCTCCCCGTCGT

实施例7

重组大肠杆菌菌株yaad疏水蛋白DewA-His₆的发酵

在15ml Greiner管中的3ml LB液体培养基中接种表达yaad疏水蛋白 DewA-His₆的大肠杆菌菌株。在摇床上37℃下以200rpm(转/分钟)培养8 小时。在每种情况下，两个1升的带挡板的锥形瓶和250ml LB培养基(+ 100μg/ml氨苄青霉素)在每种情况下接种1ml初步培养物并在摇床上以 180rpm在37℃下培养9小时。

在20升发酵罐中用0.5升初步培养物(OD_600nm 1∶10，对H₂O测量)接种 13.5升LB培养基(+100μg/ml氨苄青霉素)。在～3.5的OD_600nm下，加入 140ml 100mM IPTG。3小时后，冷却发酵罐到10℃并离心除去发酵液。 细胞沉淀用于进一步纯化。

实施例8

纯化重组的疏水蛋白融合蛋白(纯化具有C-末端His6标记的疏水蛋白 融合蛋白)

将100g细胞沉淀(100-500mg疏水蛋白)用pH7.5的50mM磷酸钠缓 冲液补充到总体积200ml，并重悬浮。将悬浮液用Ultraturrax型T25(Janke 和Kunkel；IKA-Labortechnik)处理10分钟并随后在室温下用500单位 Benzonase(Merck，Darmstadt；订单号1.01697.0001)温育1小时以降解核 酸。细胞破碎前，用玻璃柱体(P1)实现过滤。对于细胞破碎和断裂剩余的 基因组DNA，在1500巴下进行两次匀浆器循环(Microfluidizer M-110EH； Microfluidics Corp.)。离心匀浆物(Sorvall RC-5B，GSA-转子，250ml离心 杯，60分钟，4℃，12000rpm，23000g)，将上清液置于冰上并将沉淀物重悬 浮在100ml磷酸钠缓冲液，pH7.5中。

重复离心和重悬浮3次，在第三次重复时磷酸钠缓冲液包含1％SDS。 重悬浮后，搅拌混合物1小时并进行最后的离心(Sorvall RC-5B，GSA-转子， 250ml离心杯，60分钟，4℃，12000rpm，23000g)。

根据SDS-PAGE分析，最后离心后，在上清液中存在疏水蛋白(图1)。 实验表明疏水蛋白可能以内含体的形式存在于对应的大肠杆菌细胞中。向 用50mM Tris-Cl pH8.0缓冲液平衡的50ml镍-琼脂糖HP(Sepharose High Performance)17-5268-02柱(Amersham)应用50ml包含疏水蛋白的上 清液。用50mM Tris-Cl pH8.0缓冲液洗涤柱子并随后用包含200mM咪 唑的50mM Tris-Cl pH8.0缓冲液洗脱疏水蛋白。为了除去咪唑，对50 mM Tris-Cl pH8.0缓冲液透析溶液。

图1显示了本发明疏水蛋白的纯化：

泳道1：应用于镍-琼脂糖柱的混合物(1∶10稀释)

泳道2：穿过液＝洗涤步骤洗脱液

泳道3-5：洗脱级分的OD280峰

图1的本发明疏水蛋白具有约53kD的分子量。一些较小的带代表疏水 蛋白的降解产物。

实施例9

具有疏水蛋白的表面的涂布/评价

评价疏水蛋白和疏水蛋白融合蛋白的涂布性质优选在用作亲水或疏 水表面模型的玻璃或特氟隆上进行。

涂布的标准实验

玻璃：

-疏水蛋白的浓度：1～100μg/mL

-在pH 4的50mM乙酸钠+0.1％吐温20中温育载玻片过夜(温度： 80℃)

-涂布后，用去矿质水洗涤

-然后温育10分钟/80℃/1％SDS

-用去矿质水洗涤

特氟隆：

-浓度：1～100μg/mL

-在10mM tris pH 8中温育特氟隆板过夜(温度：80℃)

-涂布后，去矿质水洗涤

-温育10分钟/80℃/0.1％吐温20

-用去矿质水洗涤

-然后温育10分钟/80℃/1％SDS

-用去矿质水洗涤

样品在空气中干燥并测定一滴5μL的水的接触角(单位：度)。获得例 如下述值：

具有如实施例8的yaad-DewA融合蛋白的混合物(对照组：没有蛋白 质；yaad-dewA-his₆：100μg/mL的纯化融合配偶体)：

实施例10

具有疏水蛋白的表面的涂布/评价

玻璃(窗玻璃，Süddeutsche Glas，Mannheim)：

-疏水蛋白的浓度：100μg/mL

-在pH 4的50mM乙酸钠+0.1％吐温20中温育玻璃板过夜(温度 80℃)

-涂布后，蒸馏水洗涤

-然后温育10分钟/80℃/在蒸馏水中的1％SDS

-蒸馏水洗涤

样品在空气中干燥并测定一滴5μL的水接触角(单位：度)。

接触角测量使用Dataphysics接触角系统OCA 15+，软件SCA 20.2.0. (2002年11月)测定。该测量根据制造商的说明进行。

未处理的玻璃给出30±5°的接触角；用如实施例8的功能疏水蛋白 (yaad-dewA-his₆)涂布玻璃给出75±5°的接触角。

实施例11

对皮肤1的结合(定性)

为了测试疏水蛋白是否与皮肤结合，开发了目视定性测试。

所用溶液：

封闭溶液：在TBS中稀释的DIG Wash+Bufferset 1585762 Boehringer MA (10×溶液)

TBS：20mM Tris；150mM NaCl pH 7.5

TTBS：TBS+0.05％吐温20

第一步是从皮肤将外部角蛋白层转移到稳定的载体上。为此，牢固地 应用透明胶带脱去人皮肤上的毛并再次除去。该测试可直接在透明胶带上 进行，或者粘合角蛋白层可通过再次粘附转移到载玻片上。如下进行结合 说明：

-用多种试剂进行温育，转移到Falcon容器中

-如果合适的话，加入乙醇脱脂，除去乙醇并干燥载玻片

-在室温用封闭缓冲液温育1h

-用TTBS洗涤2×5分钟

-用TBS洗涤1×5分钟

-在室温在TBS/0.05％吐温20中温育待测试的疏水蛋白(偶联到标 记-如His₆、HA等上)或对照蛋白质2-4h

-除去上清液

-用TBS洗涤3x

-在室温与用TBS+0.01％封闭缓冲液稀释1∶2000的单克隆抗-聚- 组氨酸抗体温育1h

-用TTBS洗涤2×5分钟

-用TBS洗涤1×5分钟

-在室温与在TBS+0.01％封闭缓冲液中稀释1∶5000的抗小鼠IgG 碱性磷酸酶缀合物温育1h，

-用TTBS洗涤2×5分钟

-用TBS洗涤1×5分钟

-加入磷酸酶底物(NBT-BCIP；Boehringer MA 1片/40mL的水 2.5min；用水停止)

-用肉眼或使用显微镜光学检测有色沉淀。蓝色沉淀表明疏水蛋白已 经结合到皮肤上。

实施例12

对皮肤2的结合(定量)

开发了定量测试，其允许比较疏水蛋白与非特异性蛋白质的毛发/皮肤 结合强度(图2)。

将5mm的软木塞钻孔器用于从解冻的不带有毛发(人或猪)的皮肤 干片上钻出一片(或者在表面测试情形下将一部分皮肤插入到Falcon盖子 中)。然后将皮肤样品转化成2-3mm的厚度以除去任何存在的组织。然后 将皮肤样品转移到Eppendorf容器中(蛋白质低结合)以进行结合阐明(也 参见图2)：

-用PBS/0.05％吐温20洗涤2x

-加入1mL PBS中的1％BSA并在室温温育1h，温和旋转运动(900 rpm)。

-除去上清液

-在PBS+0.05％吐温20中加入100μg的疏水蛋白；在室温温育2h， 并温和旋转运动(900rpm)。

-除去上清液

-用PBS/0.05％吐温20洗涤3x

-用具有过氧化物酶缀合物的1mL的单克隆小鼠抗标记(His6或HA 或特异KBD)抗体(在PBS/0.05％吐温20中1∶2000)[单克隆抗聚 组氨酸过氧化物酶缀合物，在小鼠中制备，冻干成粉末，Sigma]在 室温温育2-4h，温和旋转运动(900rpm)

-用PBS/0.05％吐温20洗涤3x

-加入过氧化物酶底物(1mL/Eppendorf容器；组成参见下文)

-允许反应进行至出现蓝色(大约1∶30分钟)。

-用100μl的2M H₂SO₄中止反应。

-在405nm测量吸光度

过氧化物酶底物(临用前制备)：

0.1mL的TMB溶液(DMSO中42mM TMB)

+10mL底物缓冲液(0.1M乙酸钠，pH 4.9)

+14.7μl H₂O₂3％浓度

实施例13

对毛发的结合(定量)

为了能够也说明与其它蛋白质相比疏水蛋白对毛发的结合强度，开发 了定量测定法(图2)。在该测试中，首先将毛发与疏水蛋白温育并洗去过量 的疏水蛋白。然后经由疏水蛋白His标记偶联抗体-过氧化物酶缀合物。再 次洗去未结合的抗体-过氧化物酶缀合物。结合的抗体-过氧化物酶缀合物 [单克隆抗聚-组氨酸过氧化物酶缀合物，在小鼠中产生，冻干成粉末，Sigma] 可将无色的底物(TMB)转变成有色的产物，其在405nm光度测量。吸收强 度表明已结合的疏水蛋白或者对照蛋白质的量。选择的对照蛋白例如是枯 草芽孢杆菌的YaaD，其同样具有该测试所必须的用于检测的His标记。 代替His标记，也可以使用缀合过氧化物酶的其它特异抗体。

将5mg的毛发(人类)切成5mm长度的部分并转移到Eppendorf容器 中(蛋白质低结合)以进行结合阐明：

-加入1mL的乙醇用于脱脂

-离心，除去乙醇并用H₂O洗涤毛发

-加入1mL的PBS中的1％BSA并在室温温育1h，温和旋转运动。

-离心，除去上清液

-加入1mL的PBS/0.05％吐温20中的待测试的疏水蛋白(在标记如 His₆、HA等上偶联)或对照蛋白质；在4℃温育16h(或者在室 温温育至少2h)，温和旋转运动。

-离心，除去上清液

-用PBS/0.05％吐温20洗涤3x

-用具有过氧化物酶缀合物的1mL的单克隆小鼠抗标记(His6或HA) 抗体(在PBS/0.05％吐温20中1∶2000)[单克隆抗聚组氨酸过氧化 物酶缀合物，在小鼠中产生，冻干成粉末，Sigma]在室温温育2-4h， 温和旋转运动

-用PBS/0.05％吐温20洗涤3x

-加入过氧化物酶底物(1mL/Eppendorf容器)

-允许反应进行至出现蓝色(大约2分钟)。

-用100μl的2M H₂SO₄中止反应。

-在405nm测量吸光度

过氧化物酶底物(临用前制备)：

0.1mL的TMB溶液(DMSO中42mM TMB )

+10mL底物缓冲液(0.1M乙酸钠，pH 4.9)

+14.7μl H₂O₂3％强度

BSA＝牛血清白蛋白

PBS＝磷酸缓冲盐溶液

吐温20＝失水山梨醇聚氧乙烯醚单月桂酸酯酸酯，n大约20 TMB＝3，5，3′，5′-四甲基联苯胺

通过例如疏水蛋白进行的对毛发的结合测试表明疏水蛋白对毛发的较 好的结合，相比比较蛋白YaaD明显的结合明显较差：

  1   缓冲液   A_405nm＝0.05   2   比较蛋白yaad   A_405nm＝0.12   3   疏水蛋白   A_405nm＝1.43

表1.：对毛发的定量疏水蛋白活性测试：1)缓冲液；2)比较蛋白yaad；3)疏 水蛋白。该表显示在405nm的测量吸收值。

类似于实施例11(对皮肤的结合)，对粘膜的结合也可通过使用透明胶 带除去粘膜样品测量(例如人口腔粘膜)，其也可根据结合效果进行研究。

对牙齿的结合可通过直接将待研究的多肽序列与牙齿表面(例如牛牙 齿)温育进行测定并根据实施例11进行测量。

实施例14

用“Alexa”染料衍生疏水蛋白和对毛发结合的

将活性物质或效应物质与蛋白质(一般原理图3)偶联的一种方式是经 由半胱氨酸的SH基。在偶联到染料Alexa Fluor 532之前，切割疏水蛋白 的二硫桥：

Alexa Fluor 532

1mg疏水蛋白

0.5mL缓冲液(75mM Tris pH 8.0

           2.5mM EDTA

           1mM DTT)

在37℃温育30分钟

根据制造商的说明进行染料的偶联(Alexa 532蛋白质标记试剂盒； Molecular Probes；MP-A-10236)

如下进行用Alexa-偶联的疏水蛋白涂布人毛发：

-在室温在缓冲液TBS中用50μg/mL的Alexa疏水蛋白或对照蛋

白质yaad或未偶联的Alexa 532与10mg的人毛发温育24小时

-用TBS/0.05％吐温20洗涤2x

-用TBS洗涤1x

-用TBS/1％SDS洗涤1x

-用荧光显微镜检测(图4)

实施例15

疏水蛋白在日常护理乳剂中的应用-O/W型

WS 1％：

  ％     成分(INCI)

A 1.7    十六烷基聚氧乙烯(6)醚，十八烷醇

  0.7    十六烷基聚氧乙烯(25)醚

  2.0    二乙基氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯

  2.0    PEG-14聚二甲基硅氧烷

  3.6    十六/十八醇

  6.0    甲氧基肉桂酸乙基己酯

  2.0    己二酸二丁酯

B 5.0    甘油

  0.2    EDTA二钠

  1.0    泛醇

  适量   防腐剂

  67.8   去矿质水

C 4.0    辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸钠共聚物

D 0.2    抗坏血酸磷酸钠

  1.0    生育酚乙酸酯

0.2    红没药醇

1.0    辛酸/癸酸甘油三酯，抗坏血酸钠，生育酚，维生素A

1.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

E适量  氢氧化钠

WS 5％：

  ％     成分(INCI)

A 1.7    十六烷基聚氧乙烯(6)醚，十八烷醇

  0.7    十六烷基聚氧乙烯(25)醚

  2.0    二乙基氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯

  2.0    PEG-14聚二甲基硅氧烷

  3.6    十六/十八醇

  6.0    甲氧基肉桂酸乙基己酯

  2.0    己二酸二丁酯

B 5.0    甘油

  0.2    EDTA二钠

  1.0    泛醇

  适量   防腐剂

  63.8   去矿质水

C 4.0    辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸钠共聚物

D 0.2    抗坏血酸磷酸钠

  1.0    生育酚乙酸酯

  0.2    红没药醇

  1.0    辛酸/癸酸甘油三酯，抗坏血酸钠，生育酚，维生素A

  5.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

E 适量   氢氧化钠

制备：分别加热相A和B至大约80℃。搅拌相B进相A并均化。搅 拌相C进组合的相A和B并再次均化。搅拌冷却至大约40℃，加入相D， 用相E调节pH至大约6.5，均化并搅拌冷却至室温。

注：不用保护性气体制备配方。装瓶必须在氧气不透过性的包装，如 铝管中进行。

实施例16

疏水蛋白在保护性日霜中的应用-O/W型

WS1％：

  ％     成分(INCI)

A 1.7    十六烷基聚氧乙烯(6)醚，十八烷醇

  0.7    十六烷基聚氧乙烯(25)醚

  2.0    二乙基氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯

  2.0    PEG-14聚二甲基硅氧烷

  3.6    十六/十八醇

  6.0    甲氧基肉桂酸乙基己酯

  2.0    己二酸二丁酯

B 5.0    甘油

  0.2    EDTA二钠

  1.0    泛醇

  适量   防腐剂

  68.6   去矿质水

C 4.0    辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸钠共聚物

D 1.0    抗坏血酸磷酸钠

  1.0    生育酚乙酸酯

  0.2    红没药醇

  1.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

E  适量  氢氧化钠

WS 5％：

  ％     成分(INCI)

A 1.7    十六烷基聚氧乙烯(6)醚，十八烷醇

  0.7    十六烷基聚氧乙烯(25)醚

  2.0    二乙基氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯

  2.0    PEG-14聚二甲基硅氧烷

  3.6    十六/十八醇

  6.0    甲氧基肉桂酸乙基己酯

  2.0    己二酸二丁酯

B 5.0    甘油

  0.2    EDTA二钠

  1.0    泛醇

  适量   防腐剂

  64.6   去矿质水

C 4.0    辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸钠共聚物

D 1.0    抗坏血酸磷酸钠

  1.0    生育酚乙酸酯

  0.2    红没药醇

  5.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

E 适量   氢氧化钠

制备：分别加热相A和B至大约80℃。搅拌相B进相A并均化。掺 入相C进组合的相A和B并均化。搅拌冷却至大约40℃，加入相D，用 相E调节pH至大约6.5并均化，搅拌冷却至室温。

实施例17

在疏水蛋白面部清洁洗剂中的应用-O/W型

WS1％：

   ％     成分(INCI)

A  10.0   乙基己酸十六/十八烷酯

  10.0    辛酸/癸酸甘油三酯

  1.5     环戊聚硅氧烷，环己聚硅氧烷

  2.0     PEG-40氢化蓖麻油

B 3.5     辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸钠共聚物

C 1.0     生育酚乙酸酯

  0.2     红没药醇

  适量    防腐剂

  适量    芳香油

D 3.0     Polyquaternium-44

  0.5     椰油基三甲基甲硫酸铵

  0.5     十六烷基聚氧乙烯(25)醚

  2.0     泛醇，丙二醇

  4.0     丙二醇

  0.1     EDTA二钠

  1.0     具有大约5％疏水蛋白的水溶液

  60.7    去矿质水

WS 5％：

  ％     成分(INCI)

A 10.0   乙基己酸十六/十八烷酯

  10.0   辛酸/癸酸甘油三酯

  1.5    环戊聚硅氧烷，环己聚硅氧烷

  2.0    PEG-40氢化蓖麻油

B 3.5    辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸钠共聚物

C 1.0    生育酚乙酸酯

  0.2    红没药醇

  适量   防腐剂

  适量   芳香油

D 3.0    Polyquaternium-44

  0.5    椰油基三甲基甲硫酸铵

  0.5    十六烷基聚氧乙烯(25)醚

  2.0    泛醇，丙二醇

  4.0    丙二醇

  0.1    EDTA二钠

  5.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  56.7   去矿质水

制备：溶解相A，搅拌相B进相A。掺入相C进组合的相A和B。溶解相 D，搅拌进组合的相A、B和C并均化。之后搅拌15分钟。

实施例18

疏水蛋白在日常护理身体喷雾剂中的应用

WS 1％：

  ％     成分(INCI)

A 3.0    甲氧基肉桂酸乙基己酯

  2.0    二乙基氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯

  1.0    Polyquaternium-44

  3.0    丙二醇

  2.0    泛醇，丙二醇

  1.0    环戊聚硅氧烷，环己聚硅氧烷

  10.0   辛基十二烷醇

  0.5    PVP

  10.0   辛酸/癸酸甘油三酯

  3.0    C12-15烷基苯甲酸酯

  3.0    甘油

  1.0    生育酚乙酸酯

  0.3    红没药醇

  1.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  59.2   醇

WS 5％：

  ％     成分(INCI)

A 3.0    甲氧基肉桂酸乙基己酯

  2.0    二乙基氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯

  1.0    Polyquaternium-44

  3.0    丙二醇

  2.0    泛醇，丙二醇

  1.0    环戊聚硅氧烷，环己聚硅氧烷

  10.0   辛基十二烷醇

  0.5    PVP

  10.0   辛酸/癸酸甘油三酯

  3.0    C12-15烷基苯甲酸酯

  3.0    甘油

  1.0    生育酚乙酸酯

  0.3    红没药醇

  5.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  55.2   乙醇

制备：称量相A中的组分并溶解得到透明溶液。

实施例19

疏水蛋白在皮肤护理凝胶剂中的应用

WS 1％：

  ％     成分(INCI)

A 3.6    PEG-40氢化蓖麻油

  15.0   醇

  0.1    红没药醇

  0.5    生育酚乙酸酯

  适量   芳香油

B 3.0    泛醇

  0.6    卡波姆(carbomer)

  1.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  75.4   去矿质水

C 0.8    三乙醇胺

WS 5％：

  ％     成分(INCI)

A 3.6    PEG-40氢化蓖麻油

  15.0   乙醇

  0.1    红没药醇

  0.5    生育酚乙酸酯

  适量   芳香油

B 3.0    泛醇

  0.6    卡波姆

  5.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  71.4   去矿质水

C 0.8    三乙醇胺

制备：溶解相A得到透明溶液。允许相B膨胀并用相C中和。搅拌 相A进均化的相B中并均化。

实施例20

疏水蛋白在剃须后洗剂中的应用

WS 1％：

  ％     成分(INCI)

A 10.0   乙基己酸十六/十八烷酯

  5.0    生育酚乙酸酯

  1.0    红没药醇

  0.1    芳香油

  0.3    丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物

B 15.0   乙醇

  1.0    泛醇

  3.0    甘油

  1.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  0.1    三乙醇胺

  63.5   去矿质水

WS 5％：

  ％     成分(INCI)

A 10.0   基己酸十六/十八烷酯

  5.0    生育酚乙酸酯

  1.0    红没药醇

  0.1    芳香油

  0.3    丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物

B 15.0   乙醇

  1.0    泛醇

  3.0    甘油

  5.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  0.1    三乙醇胺

  59.5   去矿质水

制备：混合相A中的组分。溶解相B，掺入相A并均化。

实施例21

疏水蛋白在晒后洗剂中的应用

WS 1％：

  ％     成分(INCI)

A 0.4    丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物

  15.0   乙基己酸十六/十八烷酯

  0.2    红没药醇

  1.0    生育酚乙酸酯

  适量   芳香油

B 1.0    泛醇

  15.0   乙醇

  3.0    甘油

  1.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  63.2   去矿质水

C 0.2    三乙醇胺

WS 5％：

  ％     成分(INCI)

A 0.4    丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物

  15.0   基己酸十六/十八烷酯

  0.2    红没药醇

  1.0    生育酚乙酸酯

  适量   芳香油

B 1.0    泛醇

  15.0   乙醇

  3.0    甘油

  5.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  59.2   去矿质水

C 0.2    三乙醇胺

制备：混合相A中的组分。均化下搅拌相B进相A。用相C中和并再 次均化。

实施例22

疏水蛋白在防晒液中的应用

WS 1％：

  ％     成分(INCI)

A 4.5    甲氧基肉桂酸乙基己酯

  2.0    二乙基氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯

  3.0    2-氰基-3，3-二苯基丙烯酸-2-乙基己酯

  2.5    二-C12-13烷基苹果酸酯

  0.5    生育酚乙酸酯

  4.0    聚甘油基-3甲基葡萄糖二硬脂酸酯

B 3.5    异壬酸十六/十八烷酯

  1.0    VP/二十碳烯共聚物

  5.0    异十六烷

  2.5    二-C12-13烷基苹果酸酯

  3.0    二氧化钛，三甲氧基辛酰基硅烷

C 5.0    甘油

  1.0    十六/十八烷基硫酸钠

  0.5    黄原胶

  59.7   去矿质水

D 1.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  1.0    苯氧基乙醇，对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸乙酯，对羟基 苯甲酸丁酯，对羟基苯甲酸丙酯，对羟基苯甲酸异丁酯

  0.3    红没药醇

WS 5％：

  ％     成分(INCI)

A 4.5    甲氧基肉桂酸乙基己酯

  2.0    二乙基氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯

  3.0    2-氰基-3，3-二苯基丙烯酸-2-乙基己酯

  2.5    二-C12-13烷基苹果酸酯

  0.5    生育酚乙酸酯

  4.0    聚甘油基-3甲基葡萄糖二硬脂酸酯

B 3.5    异壬酸十六/十八烷酯

  1.0    VP/二十碳烯共聚物

  5.0    异十六烷

  2.5    二-C12-13烷基苹果酸酯

  3.0    二氧化钛，三甲氧基癸酰基硅烷

C 5.0    甘油

  1.0    十六/十八烷基硫酸钠

  0.5    黄原胶

  55.7   去矿质水

D 5.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  1.0    苯氧基乙醇，对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸乙酯，对羟基 苯甲酸丁酯，对羟基苯甲酸丙酯，对羟基苯甲酸异丁酯

  0.3    红没药醇

制备：分别加热相A和B的组分至大约80℃。搅拌相B进相A并均 化。加热相C至大约80℃并均化下搅拌进组合的相A和B。搅拌冷却至 大约40℃，加入相D并再次均化。

实施例23

疏水蛋白在防晒液中的应用-O/W型

WS 1％：

  ％     成分(INCI)

A 2.0    十六烷基聚氧乙烯(6)醚，十八烷醇

  2.0    十六烷基聚氧乙烯(25)醚

  3.0    Tribehenin

  2.0    十六/十八醇

  2.0    乙基己酸十六/十八烷酯

  5.0    甲氧基肉桂酸乙基己酯

  1.0    基己基三嗪酮

  1.0    VP/二十碳烯共聚物

  7.0    肉豆蔻酸异丙酯

B 5.0    氧化锌，三乙氧基辛酰基硅烷

C 0.2    黄原胶

  0.5    丙烯酸羟基乙酯/丙烯酰基二甲基牛磺酸钠共聚物， 角鲨烷，失水山梨醇聚氧乙烯(20)醚硬脂酸酯

  0.2    EDTA二钠

  5.0    丙二醇

  0.5    泛醇

  60.9   去矿质水

D 1.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  0.5    苯氧基乙醇，对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸丁酯，对羟基 苯甲酸乙酯，对羟基苯甲酸丙酯，对羟基苯甲酸异丙酯

  1.0    生育酚乙酸酯

  0.2    红没药醇

WS 5％：

  ％     成分(INCI)

A 2.0    十六烷基聚氧乙烯(6)醚，十八烷醇

  2.0    十六烷基聚氧乙烯(25)醚

  3.0    Tribehenin

  2.0    十六/十八醇

  2.0    基己酸十六/十八烷酯

  5.0    甲氧基肉桂酸乙基己酯

  1.0    基己基三嗪酮

  1.0    VP/二十碳烯共聚物

  7.0    肉豆蔻酸异丙酯

B 5.0    氧化锌，三乙氧基辛酰基硅烷

C 0.2    黄原胶

  0.5    丙烯酸羟基乙酯/丙烯酰基二甲基牛磺酸钠共聚物，角鲨烷，失 水山梨醇聚氧乙烯(20)醚硬脂酸酯

  0.2    EDTA二钠

  5.0    丙二醇

  0.5    泛醇

  56.9   去矿质水

D 5.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  0.5    苯氧基乙醇，对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸丁酯，对羟基 苯甲酸乙酯，对羟基苯甲酸丙酯，对羟基苯甲酸异丙酯

  1.0    生育酚乙酸酯

  0.2    红没药醇

制备：加热相A至大约80℃。在相B中搅拌并均化3分钟。同样加 热相C至大约80℃并均化下搅拌进组合的相A和B。冷却至大约40℃， 在相D中搅拌并再次均化。

实施例24

疏水蛋白在防晒液中的应用-O/W型

WS 1％：

％成分(INCI)

A 3.5    十六烷基聚氧乙烯(6)醚，十八烷醇

  1.5    十六烷基聚氧乙烯(25)醚

  7.5    甲氧基肉桂酸乙基己酯

  2.0    乙基氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯

  2.0    环戊聚硅氧烷，环己聚硅氧烷

  0.5    蜂蜡

  3.0    十六/十八醇

  10.0   辛酸/癸酸甘油三酯

B 5.0    二氧化钛，硅石，Methicone，氧化铝

C 3.0    甘油

  0.2    EDTA二钠

  0.3    黄原胶

  1.0    癸基葡糖苷

  2.0    泛醇，丙二醇

  56.3   去矿质水

D 1.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  1.0    生育酚乙酸酯

  0.2    红没药醇

  适量   芳香油

  适量   防腐剂

WS 5％：

  ％成分(INCI)

A 3.5    十六烷基聚氧乙烯(6)醚，十八烷醇

  1.5    十六烷基聚氧乙烯(25)醚

  7.5    甲氧基肉桂酸乙基己酯

  2.0    二乙基氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯

  2.0    环戊聚硅氧烷，环己聚硅氧烷

  0.5    蜂蜡

  3.0    十六/十八醇

  10.0   辛酸/癸酸甘油三酯

B 5.0    二氧化钛，硅石，Methicone，氧化铝

C 3.0    甘油

  0.2    EDTA二钠

  0.3    黄原胶

  1.0    癸基葡糖苷

  2.0    泛醇，丙二醇

  52.3   去矿质水

D 5.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  1.0    生育酚乙酸酯

  0.2    红没药醇

  适量   芳香油

  适量   防腐剂

制备：加热相A至大约80℃，在相B中搅拌并均化3分钟。同样加 热相C至80℃并均化下搅拌进组合的相A和B。冷却至大约40℃，在 相D中搅拌并再次均化。

实施例25

疏水蛋白在足香膏液中的应用

WS 1％：

  ％     成分(INCI)

A 2.0    十六烷基聚氧乙烯(6)醚，十八烷醇

  2.0    十六烷基聚氧乙烯(25)醚

  5.0    乙基己酸十六/十八烷酯

  4.0    十六醇

  4.0    硬脂酸甘油酯

  5.0    矿物油

  0.2    薄荷醇

  0.5    樟脑

B 69.3   去矿质水

  适量   防腐剂

C 1.0    红没药醇

  1.0    生育酚乙酸酯

D 1.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  5.0    金缕梅提取物

WS 5％：

  ％     成分(INCI)

A 2.0    十六烷基聚氧乙烯(6)醚，十八烷醇

  2.0    十六烷基聚氧乙烯(25)醚

  5.0    乙基己酸十六/十八烷酯

  4.0    十六醇

  4.0    硬脂酸甘油酯

  5.0    矿物油

  0.2    薄荷醇

  0.5    樟脑

B 65.3   去矿质水

  适量   防腐剂

C 1.0    红没药醇

  1.0    生育酚乙酸酯

D 5.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  5.0    金缕梅提取物

制备：分别加热相A和B至大约80℃。均化下搅拌相B进相A。搅 拌冷却至大约40℃，均化后快速加入相C和D。搅拌冷却至室温。

实施例26

疏水蛋白在红没药醇的W/O乳剂中的应用

WS 1％：

  ％     成分(INCI)

A 6.0    PEG-7氢化蓖麻油

  8.0    乙基己酸十六/十八烷酯

  5.0    肉豆蔻酸异丙酯

  15.0   矿物油

  0.3    硬脂酸镁

  0.3    硬脂酸铝

  2.0    PEG-45/十二烷基甘油共聚物

B 5.0    甘油

  0.7    硫酸镁

  55.6   去矿质水

C 1.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  0.5    生育酚乙酸酯

  0.6    红没药醇

WS 5％：

  ％     成分(INCI)

A 6.0    PEG-7氢化蓖麻油

  8.0    乙基己酸十六/十八烷酯

  5.0    肉豆蔻酸异丙酯

  15.0   矿物油

  0.3    硬脂酸镁

  0.3    硬脂酸铝

  2.0    PEG-45/十二烷基甘油共聚物

B 5.0    甘油

  0.7    硫酸镁

  51.6   去矿质水

C 5.0    大约5％疏水蛋白的水溶液

  0.5    生育酚乙酸酯

制备：分别加热相A和B至大约85℃。搅拌相B进相A并均化。搅 拌冷却至大约40℃，加入相C并再次快速均化。搅拌冷却至室温。 序列表中DNA序列名和多肽序列

 dewA DNA和多肽序列   SEQ ID NO：1  dewA多肽序列   SEQ ID NO：2  rodA DNA和多肽序列   SEQ ID NO：3  rodA多肽序列   SEQ ID NO：4  hypA DNA和多肽序列   SEQ ID NO：5  hypA多肽序列   SEQ ID NO：6  hypB DNA和多肽序列   SEQ ID NO：7  hypB多肽序列   SEQ ID NO：8  sc3DNA和多肽序列   SEQ ID NO：9  sc3多肽序列   SEQ ID NO：10  basf1 DNA和多肽序列   SEQ ID NO：11  basf1多肽序列   SEQ ID NO：12  basf2 DNA和多肽序列   SEQ ID NO：13  basf2多肽序列   SEQ ID NO：14  yaad DNA和多肽序列   SEQ ID NO：15  yaad多肽序列   SEQ ID NO：16  yaae DNA和多肽序列   SEQ ID NO：17  yaae多肽序列   SEQ ID NO：18

  yaad-Xa-dewA-his DNA和多肽   序列   SEQ ID NO：19   yaad-Xa-dewA-his多肽序列   SEQ ID NO：20   yaad-Xa-rodA-his DNA和多肽   序列   SEQ ID NO：21   yaad-Xa-rodA-his多肽序列   SEQ ID NO：22   yaad-Xa-basf1-his DNA和多肽   序列   SEQ ID NO：23   yaad-Xa-basf1-his多肽序列   SEQ ID NO：24

序列表

<110>巴斯福股份公司

<120>疏水蛋白的重组制剂

<130>AE 20050355

<160>24

<170>PatentIn版本3.1

<210>1

<211>405

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(405)

<223>basf-dewA

<400>1

atg cgc ttc atc gtc tct ctc ctc gcc ttc act gcc gcg gcc acc gcg    48

Met Arg Phe Ile Val Ser Leu Leu Ala Phe Thr Ala Ala Ala Thr Ala

1               5                   10                  15

acc gcc ctc ccg gcc tct gcc gca aag aac gcg aag ctg gcc acc tcg    96

Thr Ala Leu Pro Ala Ser Ala Ala Lys Asn Ala Lys Leu Ala Thr Ser

            20                  25                  30

gcg gcc ttc gcc aag cag gct gaa ggc acc acc tgc aat gtc ggc tcg    144

Ala Ala Phe Ala Lys Gln Ala Glu Gly Thr Thr Cys Asn Val Gly Ser

        35                  40                  45

atc gct tgc tgc aac tcc ccc gct gag acc aac aac gac agt ctg ttg    192

Ile Ala Cys Cys Asn Ser Pro Ala Glu Thr Asn Asn Asp Ser Leu Leu

    50                  55                  60

agc ggt ctg ctc ggt gct ggc ctt ctc aac ggg ctc tcg ggc aac act    240

Ser Gly Leu Leu Gly Ala Gly Leu Leu Asn Gly Leu Ser Gly Asn Thr

65                  70                  75                  80

ggc agc gcc tgc gcc aag gcg agc ttg att gac cag ctg ggt ctg ctc    288

Gly Ser Ala Cys Ala Lys Ala Ser Leu Ile Asp Gln Leu Gly Leu Leu

                85                  90                  95

gct ctc gtc gac cac act gag gaa ggc ccc gtc tgc aag aac atc gtc    336

Ala Leu Val Asp His Thr Glu Glu Gly Pro Val Cys Lys Asn Ile Val

            100                 105                 110

gct tgc tgc cct gag gga acc acc aac tgt gtt gcc gtc gac aac gct    384

Ala Cys Cys Pro Glu Gly Thr Thr Asn Cys Val Ala Val Asp Asn Ala

        115                 120                 125

ggc gct ggt acc aag gct gag                                        405

Gly Ala Gly Thr Lys Ala Glu

    130                 135

<210>2

<211>135

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>basf-dewA

<400>2

Met Arg Phe Ile Val Ser Leu Leu Ala Phe Thr Ala Ala Ala Thr Ala

1               5                   10                  15

Thr Ala Leu Pro Ala Ser Ala Ala Lys Asn Ala Lys Leu Ala Thr Ser

            20                  25                  30

Ala Ala Phe Ala Lys Gln Ala Glu Gly Thr Thr Cys Asn Val Gly Ser

        35                  40                  45

Ile Ala Cys Cys Asn Ser Pro Ala Glu Thr Asn Asn Asp Ser Leu Leu

    50                  55                  60

Ser Gly Leu Leu Gly Ala Gly Leu Leu Asn Gly Leu Ser Gly Asn Thr

65                  70                  75                  80

Gly Ser Ala Cys Ala Lys Ala Ser Leu Ile Asp Gln Leu Gly Leu Leu

                85                  90                  95

Ala Leu Val Asp His Thr Glu Glu Gly Pro Val Cys Lys Asn Ile Val

            100                 105                 110

Ala Cys Cys Pro Glu Gly Thr Thr Asn Cys Val Ala Val Asp Asn Ala

        115                 120                 125

Gly Ala Gly Thr Lys Ala Glu

    130                 135

<210>3

<211>471

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(471)

<223>basf-rodA

<400>3

atg aag ttc tcc att gct gcc gct gtc gtt gct ttc gcc gcc tcc gtc    48

Met Lys Phe Ser Ile Ala Ala Ala Val Val Ala Phe Ala Ala Ser Val

1               5                   10                  15

gcg gcc ctc cct cct gcc cat gat tcc cag ttc gct ggc aat ggt gtt    96

Ala Ala Leu Pro Pro Ala His Asp Ser Gln Phe Ala Gly Asn Gly Val

            20                  25                  30

ggc aac aag ggc aac agc aac gtc aag ttc cct gtc ccc gaa aac gtg    144

Gly Asn Lys Gly Asn Ser Asn Val Lys Phe Pro Val Pro Glu Asn Val

        35                  40                  45

acc gtc aag cag gcc tcc gac aag tgc ggt gac cag gcc cag ctc tct    192

Thr Val Lys Gln Ala Ser Asp Lys Cys Gly Asp Gln Ala Gln Leu Ser

    50                  55                  60

tgc tgc aac aag gcc acg tac gcc ggt gac acc aca acc gtt gat gag    240

Cys Cys Asn Lys Ala Thr Tyr Ala Gly Asp Thr Thr Thr Val Asp Glu

65                  70                  75                  80

ggt ctt ctg tct ggt gcc ctc agc ggc ctc atc ggc gcc ggg tct ggt    288

Gly Leu Leu Ser Gly Ala Leu Ser Gly Leu Ile Gly Ala Gly Ser Gly

                85                  90                  95

gcc gaa ggt ctt ggt ctc ttc gat cag tgc tcc aag ctt gat gtt gct    336

Ala Glu Gly Leu Gly Leu Phe Asp Gln Cys Ser Lys Leu Asp Val Ala

            100                 105                 110

gtc ctc att ggc atc caa gat ctt gtc aac cag aag tgc aag caa aac    384

Val Leu Ile Gly Ile Gln Asp Leu Val Asn Gln Lys Cys Lys Gln Asn

        115                 120                 125

att gcc tgc tgc cag aac tcc ccc tcc agc gcg gat ggc aac ctt att    432

Ile Ala Cys Cys Gln Asn Ser Pro Ser Ser Ala Asp Gly Asn Leu Ile

    130                 135                 140

ggt gtc ggt ctc cct tgc gtt gcc ctt ggc tcc atc ctc                471

Gly Val Gly Leu Pro Cys Val Ala Leu Gly Ser Ile Leu

145                 150                 155

<210>4

<211>157

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>basf-rodA

<400>4

Met Lys Phe Ser Ile Ala Ala Ala Val Val Ala Phe Ala Ala Ser Val

1               5                   10                  15

Ala Ala Leu Pro Pro Ala His Asp Ser Gln Phe Ala Gly Asn Gly Val

            20                  25                  30

Gly Asn Lys Gly Asn Ser Asn Val Lys Phe Pro Val Pro Glu Asn Val

        35                  40                  45

Thr Val Lys Gln Ala Ser Asp Lys Cys Gly Asp Gln Ala Gln Leu Ser

    50                  55                  60

Cys Cys Asn Lys Ala Thr Tyr Ala Gly Asp Thr Thr Thr Val Asp Glu

65                  70                  75                  80

Gly Leu Leu Ser Gly Ala Leu Ser Gly Leu Ile Gly Ala Gly Ser Gly

                85                  90                  95

Ala Glu Gly Leu Gly Leu Phe Asp Gln Cys Ser Lys Leu Asp Val Ala

            100                 105                 110

Val Leu Ile Gly Ile Gln Asp Leu Val Asn Gln Lys Cys Lys Gln Asn

        115                 120                 125

Ile Ala Cys Cys Gln Asn Ser Pro Ser Ser Ala Asp Gly Asn Leu Ile

    130                 135                 140

Gly Val Gly Leu Pro Cys Val Ala Leu Gly Ser Ile Leu

145                 150                 155

<210>5

<211>336

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(336)

<223>basf-HypA

<400>5

atg atc tct cgc gtc ctt gtc gct gct ctc gtc gct ctc ccc gct ctt    48

Met Ile Ser Arg Val Leu Val Ala Ala Leu Val Ala Leu Pro Ala Leu

1               5                   10                  15

gtt act gca act cct gct ccc gga aag cct aaa gcc agc agt cag tgc    96

Val Thr Ala Thr Pro Ala Pro Gly Lys Pro Lys Ala Ser Ser Gln Cys

            20                  25                  30

gac gtc ggt gaa atc cat tgc tgt gac act cag cag act ccc gac cac    144

Asp Val Gly Glu Ile His Cys Cys Asp Thr Gln Gln Thr Pro Asp His

        35                  40                  45

acc agc gcc gcc gcg tct ggt ttg ctt ggt gtt ccc atc aac ctt ggt    192

Thr Ser Ala Ala Ala Ser Gly Leu Leu Gly Val Pro Ile Asn Leu Gly

    50                  55                  60

gct ttc ctc ggt ttc gac tgt acc ccc att tcc gtc ctt ggc gtc ggt    240

Ala Phe Leu Gly Phe Asp Cys Thr Pro Ile Ser Val Leu Gly Val Gly

65                  70                  75                  80

ggc aac aac tgt gct gct cag cct gtc tgc tgc aca gga aat caa ttc    288

Gly Asn Asn Cys Ala Ala Gln Pro Val Cys Cys Thr Gly Asn Gln Phe

                85                  90                  95

acc gca ttg att aac gct ctt gac tgc tct cct gtc aat gtc aac ctc    336

Thr Ala Leu Ile Asn Ala Leu Asp Cys Ser Pro Val Asn Val Asn Leu

            100                 105                 110

<210>6

<211>112

<212>PRT

<213>人工序列

>220>

<223>basf-HypA

<400>6

Met Ile Ser Arg Val Leu Val Ala Ala Leu Val Ala Leu Pro Ala Leu

1               5                   10                  15

Val Thr Ala Thr Pro Ala Pro Gly Lys Pro Lys Ala Ser Ser Gln Cys

            20                  25                  30

Asp Val Gly Glu Ile His Cys Cys Asp Thr Gln Gln Thr Pro Asp His

        35                  40                  45

Thr Ser Ala Ala Ala Ser Gly Leu Leu Gly Val Pro Ile Asn Leu Gly

    50                  55                  60

Ala Phe Leu Gly Phe Asp Cys Thr Pro Ile Ser Val Leu Gly Val Gly

65                  70                  75                  80

Gly Asn Asn Cys Ala Ala Gln Pro Val Cys Cys Thr Gly Asn Gln Phe

                85                  90                  95

Thr Ala Leu Ile Asn Ala Leu Asp Cys Ser Pro Val Asn Val Asn Leu

            100                 105                 110

<210>7

<211>357

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(357)

<223>basf-HypB

<400>7

atg gtc agc acg ttc atc act gtc gca aag acc ctt ctc gtc gcg ctc    48

Met Val Ser Thr Phe Ile Thr Val Ala Lys Thr Leu Leu Val Ala Leu

1               5                   10                  15

ctc ttc gtc aat atc aat atc gtc gtt ggt act gca act acc ggc aag    96

Leu Phe Val Asn Ile Asn Ile Val Val Gly Thr Ala Thr Thr Gly Lys

            20                  25                  30

cat tgt agc acc ggt cct atc gag tgc tgc aag cag gtc atg gat tct    144

His Cys Ser Thr Gly Pro Ile Glu Cys Cys Lys Gln Val Met Asp Ser

        35                  40                  45

aag agc cct cag gct acg gag ctt ctt acg aag aat ggc ctt ggc ctg    192

Lys Ser Pro Gln Ala Thr Glu Leu Leu Thr Lys Asn Gly Leu Gly Leu

    50                  55                  60

ggt gtc ctt gct ggc gtg aag ggt ctt gtt ggc gcg aat tgc agc cct    240

Gly Val Leu Ala Gly Val Lys Gly Leu Val Gly Ala Asn Cys Ser Pro

65                  70                  75                  80

atc acg gca att ggt att ggc tcc ggc agc caa tgc tct ggc cag acc    288

Ile Thr Ala Ile Gly Ile Gly Ser Gly Ser Gln Cys Ser Gly Gln Thr

                85                  90                  95

gtt tgc tgc cag aat aat aat ttc aac ggt gtt gtc gct att ggt tgc    336

Val Cys Cys Gln Asn Asn Asn Phe Asn Gly Val Val Ala Ile Gly Cys

            100                 105                 110

act ccc att aat gcc aat gtg                                        357

Thr Pro Ile Asn Ala Asn Val

        115

<210>8

<211>119

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>basf-HypB

<400>8

Met Val Ser Thr Phe Ile Thr Val Ala Lys Thr Leu Leu Val Ala Leu

1               5                   10                  15

Leu Phe Val Asn Ile Asn Ile Val Val Gly Thr Ala Thr Thr Gly Lys

            20                  25                  30

His Cys Ser Thr Gly Pro Ile Glu Cys Cys Lys Gln Val Met Asp Ser

        35                  40                  45

Lys Ser Pro Gln Ala Thr Glu Leu Leu Thr Lys Asn Gly Leu Gly Leu

    50                  55                  60

Gly Val Leu Ala Gly Val Lys Gly Leu Val Gly Ala Asn Cys Ser Pro

65                  70                  75                  80

Ile Thr Ala Ile Gly Ile Gly Ser Gly Ser Gln Cys Ser Gly Gln Thr

                85                  90                  95

Val Cys Cys Gln Asn Asn Asn Phe Asn Gly Val Val Ala Ile Gly Cys

            100                 105                 110

Thr Pro Ile Asn Ala Asn Val

        115

<210>9

<211>408

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(408)

<223>basf-sc3

<400>9

atg ttc gcc cgt ctc ccc gtc gtg ttc ctc tac gcc ttc gtc gcg ttc    48

Met Phe Ala Arg Leu Pro Val Val Phe Leu Tyr Ala Phe Val Ala Phe

1               5                   10                  15

ggc gcc ctc gtc gct gcc ctc cca ggt ggc cac ccg ggc acg acc acg    96

Gly Ala Leu Val Ala Ala Leu Pro Gly Gly His Pro Gly Thr Thr Thr

            20                  25                  30

ccg ccg gtt acg acg acg gtg acg gtg acc acg ccg ccc tcg acg acg    144

Pro Pro Val Thr Thr Thr Val Thr Val Thr Thr Pro Pro Ser Thr Thr

        35                  40                  45

acc atc gcc gcc ggt ggc acg tgt act acg ggg tcg ctc tct tgc tgc    192

Thr Ile Ala Ala Gly Gly Thr Cys Thr Thr Gly Ser Leu Ser Cys Cys

    50                  55                  60

aac cag gtt caa tcg gcg agc agc agc cct gtt acc gcc ctc ctc ggc    240

Asn Gln Val Gln Ser Ala Ser Ser Ser Pro Val Thr Ala Leu Leu Gly

65                  70                  75                  80

ctg ctc ggc att gtc ctc agc gac ctc aac gtt ctc gtt ggc atc agc    288

Leu Leu Gly Ile Val Leu Ser Asp Leu Asn Val Leu Val Gly Ile Ser

                85                  90                  95

tgc tct ccc ctc act gtc atc ggt gtc gga ggc agc ggc tgt tcg gcg    336

Cys Ser Pro Leu Thr Val Ile Gly Val Gly Gly Ser Gly Cys Ser Ala

            100                 105                 110

cag acc gtc tgc tgc gaa aac acc caa ttc aac ggg ctg atc aac atc    384

Gln Thr Val Cys Cys Glu Asn Thr Gln Phe Asn Gly Leu Ile Asn Ile

        115                 120                 125

ggt tgc acc ccc atc aac atc ctc                                    408

Gly Cys Thr Pro Ile Asn Ile Leu

    130                 135

<210>10

<211>136

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>basf-sc3

<400>10

Met Phe Ala Arg Leu Pro Val Val Phe Leu Tyr Ala Phe Val Ala Phe

1               5                   10                  15

Gly Ala Leu Val Ala Ala Leu Pro Gly Gly His Pro Gly Thr Thr Thr

            20                  25                  30

Pro Pro Val Thr Thr Thr Val Thr Val Thr Thr Pro Pro Ser Thr Thr

        35                  40                  45

Thr Ile Ala Ala Gly Gly Thr Cys Thr Thr Gly Ser Leu Ser Cys Cys

    50                  55                  60

Asn Gln Val Gln Ser Ala Ser Ser Ser Pro Val Thr Ala Leu Leu Gly

65                  70                  75                  80

Leu Leu Gly Ile Val Leu Ser Asp Leu Asn Val Leu Val Gly Ile Ser

                85                  90                  95

Cys Ser Pro Leu Thr Val Ile Gly Val Gly Gly Ser Gly Cys Ser Ala

            100                 105                 110

Gln Thr Val Cys Cys Glu Asn Thr Gln Phe Asn Gly Leu Ile Asn Ile

        115                 120                 125

Gly Cys Thr Pro Ile Asn Ile Leu

    130                 135

<210>11

<211>483

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(483)

<223>basf-BASF1

<400>11

atg aag ttc tcc gtc tcc gcc gcc gtc ctc gcc ttc gcc gcc tcc gtc    48

Met Lys Phe Ser Val Ser Ala Ala Val Leu Ala Phe Ala Ala Ser Val

1               5                   10                  15

gcc gcc ctc cct cag cac gac tcc gcc gcc ggc aac ggc aac ggc gtc    96

Ala Ala Leu Pro Gln His Asp Ser Ala Ala Gly Asn Gly Asn Gly Val

            20                  25                  30

ggc aac aag ttc cct gtc cct gac gac gtc acc gtc aag cag gcc acc    144

Gly Asn Lys Phe Pro Val Pro Asp Asp Val Thr Val Lys Gln Ala Thr

        35                  40                  45

gac aag tgc ggc gac cag gcc cag ctc tcc tgc tgc aac aag gcc acc    192

Asp Lys Cys Gly Asp Gln Ala Gln Leu Ser Cys Cys Asn Lys Ala Thr

    50                  55                  60

tac gcc ggc gac gtc ctc acc gac atc gac gag ggc atc ctc gcc ggc    240

Tyr Ala Gly Asp Val Leu Thr Asp Ile Asp Glu Gly Ile Leu Ala Gly

65                  70                  75                  80

ctc ctc aag aac ctc atc ggc ggc ggc tcc ggc tcc gag ggc ctc ggc    288

Leu Leu Lys Asn Leu Ile Gly Gly Gly Ser Gly Ser Glu Gly Leu Gly

                85                  90                  95

ctc ttc gac cag tgc gtc aag ctc gac ctc cag atc tcc gtc atc ggc    336

Leu Phe Asp Gln Cys Val Lys Leu Asp Leu Gln Ile Ser Val Ile Gly

            100                 105                 110

atc cct atc cag gac ctc ctc aac cag gtc aac aag cag tgc aag cag    384

Ile Pro Ile Gln Asp Leu LeH Asn Gln Val Asn Lys Gln Cys Lys Gln

        115                 120                 125

aac atc gcc tgc tgc cag aac tcc cct tcc gac gcc acc ggc tcc ctc    432

Asn Ile Ala Cys Cys Gln Asn Ser Pro Ser Asp Ala Thr Gly Ser Leu

    130                 135                 140

gtc aac ctc ggc ctc ggc aac cct tgc atc cct gtc tcc ctc ctc cat    480

Val Asn Leu Gly Leu Gly Asn Pro Cys Ile Pro Val Ser Leu Leu His

145                 150                 155                 160

atg                                                                483

Met

<210>12

<211>161

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>basf-BASF1

<400>12

Met Lys Phe Ser Val Ser Ala Ala Val Leu Ala Phe Ala Ala Ser Val

1               5                   10                  15

Ala Ala Leu Pro Gln His Asp Ser Ala Ala Gly Asn Gly Asn Gly Val

            20                  25                  30

Gly Asn Lys Phe Pro Val Pro Asp Asp Val Thr Val Lys Gln Ala Thr

        35                  40                  45

Asp Lys Cys Gly Asp Gln Ala Gln Leu Ser Cys Cys Asn Lys Ala Thr

    50                  55                  60

Tyr Ala Gly Asp Val Leu Thr Asp Ile Asp Glu Gly Ile Leu Ala Gly

65                  70                  75                  80

Leu Leu Lys Asn Leu Ile Gly Gly Gly Ser Gly Ser Glu Gly Leu Gly

                85                  90                  95

Leu Phe Asp Gln Cys Val Lys Leu Asp Leu Gln Ile Ser Val Ile Gly

            100                 105                 110

Ile Pro Ile Gln Asp Leu Leu Asn Gln Val Asn Lys Gln Cys Lys Gln

        115                 120                 125

Asn Ile Ala Cys Cys Gln Asn Ser Pro Ser Asp Ala Thr Gly Ser Leu

    130                 135                 140

Val Asn Leu Gly Leu Gly Asn Pro Cys Ile Pro Val Ser Leu Leu His

145                 150                 155                 160

Met

<210>13

<211>465

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(465)

<223>basf-BASF2

<400>13

atg aag ttc tcc gtc tcc gcc gcc gtc ctc gcc ttc gcc gcc tcc gtc    48

Met Lys Phe Ser Val Ser Ala Ala Val Leu Ala Phe Ala Ala Ser Val

1               5                   10                  15

gcc gcc ctc cct cag cac gac tcc gcc gcc ggc aac ggc aac ggc gtc    96

Ala Ala Leu Pro Gln His Asp Ser Ala Ala Gly Asn Gly Asn Gly Val

            20                  25                  30

ggc aac aag ttc cct gtc cct gac gac gtc acc gtc aag cag gcc acc    144

Gly Asn Lys Phe Pro Val Pro Asp Asp Val Thr Val Lys Gln Ala Thr

        35                  40                  45

gac aag tgc ggc gac cag gcc cag ctc tcc tgc tgc aac aag gcc acc    192

Asp Lys Cys Gly Asp Gln Ala Gln Leu Ser Cys Cys Asn Lys Ala Thr

    50                  55                  60

tac gcc ggc gac gtc acc gac atc gac gag ggc atc ctc gcc ggc ctc    240

Tyr Ala Gly Asp Val Thr Asp Ile Asp Glu Gly Ile Leu Ala Gly Leu

65                  70                  75                  80

ctc aag aac ctc atc ggc ggc ggc tcc ggc tcc gag ggc ctc ggc ctc    288

Leu Lys Asn Leu Ile Gly Gly Gly Ser Gly Ser Glu Gly Leu Gly Leu

                85                  90                  95

ttc gac cag tgc gtc aag ctc gac ctc cag atc tcc gtc atc ggc atc    336

Phe Asp Gln Cys Val Lys Leu Asp Leu Gln Ile Ser Val Ile Gly Ile

            100                 105                 110

cct atc cag gac ctc ctc aac cag cag tgc aag cag aac atc gcc tgc    384

Pro Ile Gln Asp Leu Leu Asn Gln Gln Cys Lys Gln Asn Ile Ala Cys

        115                 120                 125

tgc cag aac tcc cct tcc gac gcc acc ggc tcc ctc gtc aac ctc ggc    432

Cys Gln Asn Ser Pro Ser Asp Ala Thr Gly Ser Leu Val Asn Leu Gly

    130                 135                 140

aac cct tgc atc cct gtc tcc ctc ctc cat atg                        465

Asn Pro Cys Ile Pro Val Ser Leu Leu His Met

145                 150                 155

<210>14

<211>155

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>basf-BASF2

<400>14

Met Lys Phe Ser Val Ser Ala Ala Val Leu Ala Phe Ala Ala Ser Val

1               5                   10                  15

Ala Ala Leu Pro Gln His Asp Ser Ala Ala Gly Asn Gly Asn Gly Val

            20                  25                  30

Gly Asn Lys Phe Pro Val Pro Asp Asp Val Thr Val Lys Gln Ala Thr

        35                  40                  45

Asp Lys Cys Gly Asp Gln Ala Gln Leu Ser Cys Cys Asn Lys Ala Thr

    50                  55                  60

Tyr Ala Gly Asp Val Thr Asp Ile Asp Glu Gly Ile Leu Ala Gly Leu

65                  70                  75                  80

Leu Lys Asn Leu Ile Gly Gly Gly Ser Gly Ser Glu Gly Leu Gly Leu

                85                  90                  95

Phe Asp Gln Cys Val Lys Leu Asp Leu Gln Ile Ser Val Ile Gly Ile

            100                 105                 110

Pro Ile Gln Asp Leu Leu Asn Gln Gln Cys Lys Gln Asn Ile Ala Cys

        115                 120                 125

Cys Gln Asn Ser Pro Ser Asp Ala Thr Gly Ser Leu Val Asn Leu Gly

    130                 135                 140

Asn Pro Cys Ile Pro Val Ser Leu Leu His Met

145                 150                 155

<210>15

<211>882

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(882)

<223>basf-yaad

<400>15

atg gct caa aca ggt act gaa cgt gta aaa cgc gga atg gca gaa atg    48

Met Ala Gln Thr Gly Thr Glu Arg Val Lys Arg Gly Met Ala Glu Met

1               5                   10                  15

caa aaa ggc ggc gtc atc atg gac gtc atc aat gcg gaa caa gcg aaa    96

Gln Lys Gly Gly Val Ile Met Asp Val Ile Asn Ala Glu Gln Ala Lys

            20                  25                  30

atc gct gaa gaa gct gga gct gtc gct gta atg gcg cta gaa cgt gtg    144

Ile Ala Glu Glu Ala Gly Ala Val Ala Val Met Ala Leu Glu Arg Val

        35                  40                  45

cca gca gat att cgc gcg gct gga gga gtt gcc cgt atg gct gac cct    192

Pro Ala Asp Ile Arg Ala Ala Gly Gly Val Ala Arg Met Ala Asp Pro

    50                  55                  60

aca atc gtg gaa gaa gta atg aat gca gta tct atc ccg gta atg gca    240

Thr Ile Val Glu Glu Val Met Asn Ala Val Ser Ile Pro Val Met Ala

65                  70                  75                  80

aaa gcg cgt atc gga cat att gtt gaa gcg cgt gtg ctt gaa gct atg    288

Lys Ala Arg Ile Gly His Ile Val Glu Ala Arg Val Leu Glu Ala Met

                85                  90                  95

ggt gtt gac tat att gat gaa agt gaa gtt ctg acg ccg gct gac gaa    336

Gly Val Asp Tyr Ile Asp Glu Ser Glu Val Leu Thr Pro Ala Asp Glu

            100                 105                 110

gaa ttt cat tta aat aaa aat gaa tac aca gtt cct ttt gtc tgt ggc    384

Glu Phe His Leu Asn Lys Asn Glu Tyr Thr Val Pro Phe Val Cys Gly

        115                 120                 125

tgc cgt gat ctt ggt gaa gca aca cgc cgt att gcg gaa ggt gct tct    432

Cys Arg Asp Leu Gly Glu Ala Thr Arg Arg Ile Ala Glu Gly Ala Ser

    130                 135                 140

atg ctt cgc aca aaa ggt gag cct gga aca ggt aat att gtt gag gct    480

Met Leu Arg Thr Lys Gly Glu Pro Gly Thr Gly Asn Ile Val Glu Ala

145                 150                 155                 160

gtt cgc cat atg cgt aaa gtt aac gct caa gtg cgc aaa gta gtt gcg    528

Val Arg His Met Arg Lys Val Asn Ala Gln Val Arg Lys Val Val Ala

                165                 170                 175

atg agt gag gat gag cta atg aca gaa gcg aaa aac cta ggt gct cct    576

Met Ser Glu Asp Glu Leu Met Thr Glu Ala Lys Asn Leu Gly Ala Pro

            180                 185                 190

tac gag ctt ctt ctt caa att aaa aaa gac ggc aag ctt cct gtc gtt    624

Tyr Glu Leu Leu Leu Gln Ile Lys Lys Asp Gly Lys Leu Pro Val Val

        195                 200                 205

aac ttt gcc gct ggc ggc gta gca act cca gct gat gct gct ctc atg    672

Asn Phe Ala Ala Gly Gly Val Ala Thr Pro Ala Asp Ala Ala Leu Met

    210                 215                 220

atg cag ctt ggt gct gac gga gta ttt gtt ggt tct ggt att ttt aaa    720

Met Gln Leu Gly Ala Asp Gly Val Phe Val Gly Ser Gly Ile Phe Lys

225                 230                 235                 240

tca gac aac cct gct aaa ttt gcg aaa gca att gtg gaa gca aca act    768

Ser Asp Asn Pro Ala Lys Phe Ala Lys Ala Ile Val Glu Ala Thr Thr

                245                 250                 255

cac ttt act gat tac aaa tta atc gct gag ttg tca aaa gag ctt ggt    816

His Phe Thr Asp Tyr Lys Leu Ile Ala Glu Leu Ser Lys Glu Leu Gly

            260                 265                 270

act gca atg aaa ggg att gaa atc tca aac tta ctt cca gaa cag cgt    864

Thr Ala Met Lys Gly Ile Glu Ile Ser Asn Leu Leu Pro Glu Gln Arg

        275                 280                 285

atg caa gaa cgc ggc tgg                                            882

Met Gln Glu Arg Gly Trp

    290

<210>16

<211>294

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>basf-yaad

<400>16

Met Ala Gln Thr Gly Thr Glu Arg Val Lys Arg Gly Met Ala Glu Met

1               5                   10                  15

Gln Lys Gly Gly Val Ile Met Asp Val Ile Asn Ala Glu Gln Ala Lys

            20                  25                  30

Ile Ala Glu Glu Ala Gly Ala Val Ala Val Met Ala Leu Glu Arg Val

        35                  40                  45

Pro Ala Asp Ile Arg Ala Ala Gly Gly Val Ala Arg Met Ala Asp Pro

    50                  55                  60

Thr Ile Val Glu Glu Val Met Asn Ala Val Ser Ile Pro Val Met Ala

65                  70                  75                  80

Lys Ala Arg Ile Gly His Ile Val Glu Ala Arg Val Leu Glu Ala Met

                85                  90                  95

Gly Val Asp Tyr Ile Asp Glu Ser Glu Val Leu Thr Pro Ala Asp Glu

            100                 105                 110

Glu Phe His Leu Asn Lys Asn Glu Tyr Thr Val Pro Phe Val Cys Gly

        115                 120                 125

Cys Arg Asp Leu Gly Glu Ala Thr Arg Arg Ile Ala Glu Gly Ala Ser

    130                 135                 140

Met Leu Arg Thr Lys Gly Glu Pro Gly Thr Gly Asn Ile Val Glu Ala

145                 150                 155                 160

Val Arg His Met Arg Lys Val Asn Ala Gln Val Arg Lys Val Val Ala

                165                 170                 175

Met Ser Glu Asp Glu Leu Met Thr Glu Ala Lys Asn Leu Gly Ala Pro

            180                 185                 190

Tyr Glu Leu Leu Leu Gln Ile Lys Lys Asp Gly Lys Leu Pro Val Val

        195                 200                 205

Asn Phe Ala Ala Gly Gly Val Ala Thr Pro Ala Asp Ala Ala Leu Met

    210                 215                 220

Met Gln Leu Gly Ala Asp Gly Val Phe Val Gly Ser Gly Ile Phe Lys

225                 230                 235                 240

Ser Asp Asn Pro Ala Lys Phe Ala Lys Ala Ile Val Glu Ala Thr Thr

                245                 250                 255

His Phe Thr Asp Tyr Lys Leu Ile Ala Glu Leu Ser Lys Glu Leu Gly

            260                 265                 270

Thr Ala Met Lys Gly Ile Glu Ile Ser Asn Leu Leu Pro Glu Gln Arg

        275                 280                 285

Met Gln Glu Arg Gly Trp

    290

<210>17

<211>591

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(591)

<223>basf-yaae

<400>17

atg gga tta aca ata ggt gta cta gga ctt caa gga gca gtt aga gag    48

Met Gly Leu Thr Ile Gly Val Leu Gly Leu Gln Gly Ala Val Arg Glu

1               5                   10                  15

cac atc cat gcg att gaa gca tgc ggc gcg gct ggt ctt gtc gta aaa    96

His Ile His Ala Ile Glu Ala Cys Gly Ala Ala Gly Leu Val Val Lys

            20                  25                  30

cgt ccg gag cag ctg aac gaa gtt gac ggg ttg att ttg ccg ggc ggt    144

Arg Pro Glu Gln Leu Asn Glu Val Asp Gly Leu Ile Leu Pro Gly Gly

        35                  40                  45

gag agc acg acg atg cgc cgt ttg atc gat acg tat caa ttc atg gag    192

Glu Ser Thr Thr Met Arg Arg Leu Ile Asp Thr Tyr Gln Phe Met Glu

    50                  55                  60

ccg ctt cgt gaa ttc gct gct cag ggc aaa ccg atg ttt gga aca tgt    240

Pro Leu Arg Glu Phe Ala Ala Gln Gly Lys Pro Met Phe Gly Thr Cys

65                  70                  75                  80

gcc gga tta att ata tta gca aaa gaa att gcc ggt tca gat aat cct    288

Ala Gly Leu Ile Ile Leu Ala Lys Glu Ile Ala Gly Ser Asp Asn Pro

                85                  90                  95

cat tta ggt ctt ctg aat gtg gtt gta gaa cgt aat tca ttt ggc cgg    336

His Leu Gly Leu Leu Asn Val Val Val Glu Arg Asn Ser Phe Gly Arg

            100                 105                 110

cag gtt gac agc ttt gaa gct gat tta aca att aaa ggc ttg gac gag    384

Gln Val Asp Ser Phe Glu Ala Asp Leu Thr Ile Lys Gly Leu Asp Glu

        115                 120                 125

cct ttt act ggg gta ttc atc cgt gct ccg cat att tta gaa gct ggt    432

Pro Phe Thr Gly Val Phe Ile Arg Ala Pro His Ile Leu Glu Ala Gly

    130                 135                 140

gaa aat gtt gaa gtt cta tcg gag cat aat ggt cgt att gta gcc gcg    480

Glu Asn Val Glu Val Leu Ser Glu His Asn Gly Arg Ile Val Ala Ala

145                 150                 155                 160

aaa cag ggg caa ttc ctt ggc tgc tca ttc cat ccg gag ctg aca gaa    528

Lys Gln Gly Gln Phe Leu Gly Cys Ser Phe His Pro Glu Leu Thr Glu

                165                 170                 175

gat cac cga gtg acg cag ctg ttt gtt gaa atg gtt gag gaa tat aag    576

Asp His Arg Val Thr Gln Leu Phe Val Glu Met Val Glu Glu Tyr Lys

            180                 185                 190

caa aag gca ctt gta                                                591

Gln Lys Ala Leu Val

        195

<210>18

<211>197

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>basf-yaae

<400>18

Met Gly Leu Thr Ile Gly Val Leu Gly Leu Gln Gly Ala Val Arg Glu

1               5                   10                  15

His Ile His Ala Ile Glu Ala Cys Gly Ala Ala Gly Leu Val Val Lys

            20                  25                  30

Arg Pro Glu Gln Leu Asn Glu Val Asp Gly Leu Ile Leu Pro Gly Gly

        35                  40                  45

Glu Ser Thr Thr Met Arg Arg Leu Ile Asp Thr Tyr Gln Phe Met Glu

    50                  55                  60

Pro Leu Arg Glu Phe Ala Ala Gln Gly Lys Pro Met Phe Gly Thr Cys

65                  70                  75                  80

Ala Gly Leu Ile Ile Leu Ala Lys Glu Ile Ala Gly Ser Asp Asn Pro

                85                  90                  95

His Leu Gly Leu Leu Asn Val Val Val Glu Arg Asn Ser Phe Gly Arg

            100                 105                 110

Gln Val Asp Ser Phe Glu Ala Asp Leu Thr Ile Lys Gly Leu Asp Glu

        115                 120                 125

Pro Phe Thr Gly Val Phe Ile Arg Ala Pro His Ile Leu Glu Ala Gly

    130                 135                 140

Glu Asn Val Glu Val Leu Ser Glu His Asn Gly Arg Ile Val Ala Ala

145                 150                 155                 160

Lys Gln Gly Gln Phe Leu Gly Cys Ser Phe His Pro Glu Leu Thr Glu

                165                 170                 175

Asp His Arg Val Thr Gln Leu Phe Val Glu Met Val Glu Glu Tyr Lys

            180                 185                 190

Gln Lys Ala Leu Val

        195

<210>19

<211>1329

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(1329)

<223>basf-yaad-Xa-dewA-his

<400>19

atg gct caa aca ggt act gaa cgt gta aaa cgc gga atg gca gaa atg    48

Met Ala Gln Thr Gly Thr Glu Arg Val Lys Arg Gly Met Ala Glu Met

1               5                   10                  15

caa aaa ggc ggc gtc atc atg gac gtc atc aat gcg gaa caa gcg aaa    96

Gln Lys Gly Gly Val Ile Met Asp Val Ile Asn Ala Glu Gln Ala Lys

            20                  25                  30

atc gct gaa gaa gct gga gct gtc gct gta atg gcg cta gaa cgt gtg    144

Ile Ala Glu Glu Ala Gly Ala Val Ala Val Met Ala Leu Glu Arg Val

        35                  40                  45

cca gca gat att cgc gcg gct gga gga gtt gcc cgt atg gct gac cct    192

Pro Ala Asp Ile Arg Ala Ala Gly Gly Val Ala Arg Met Ala Asp Pro

    50                  55                  60

aca atc gtg gaa gaa gta atg aat gca gta tct atc ccg gta atg gca    240

Thr Ile Val Glu Glu Val Met Asn Ala Val Ser Ile Pro Val Met Ala

65                  70                  75                  80

aaa gcg cgt atc gga cat att gtt gaa gcg cgt gtg ctt gaa gct atg    288

Lys Ala Arg Ile Gly His Ile Val Glu Ala Arg Val Leu Glu Ala Met

                85                  90                  95

ggt gtt gac tat att gat gaa agt gaa gtt ctg acg ccg gct gac gaa    336

Gly Val Asp Tyr Ile Asp Glu Ser Glu Val Leu Thr Pro Ala Asp Glu

            100                 105                 110

gaa ttt cat tta aat aaa aat gaa tac aca gtt cct ttt gtc tgt ggc    384

Glu Phe His Leu Asn Lys Asn Glu Tyr Thr Val Pro Phe Val Cys Gly

        115                 120                 125

tgc cgt gat ctt ggt gaa gca aca cgc cgt att gcg gaa ggt gct tct    432

Cys Arg Asp Leu Gly Glu Ala Thr Arg Arg Ile Ala Glu Gly Ala Ser

    130                 135                 140

atg ctt cgc aca aaa ggt gag cct gga aca ggt aat att gtt gag gct    480

Met Leu Arg Thr Lys Gly Glu Pro Gly Thr Gly Asn Ile Val Glu Ala

145                 150                 155                 160

gtt cgc cat atg cgt aaa gtt aac gct caa gtg cgc aaa gta gtt gcg    528

Val Arg His Met Arg Lys Val Asn Ala Gln Val Arg Lys Val Val Ala

                165                 170                 175

atg agt gag gat gag cta atg aca gaa gcg aaa aac cta ggt gct cct    576

Met Ser Glu Asp Glu Leu Met Thr Glu Ala Lys Asn Leu Gly Ala Pro

            180                 185                 190

tac gag ctt ctt ctt caa att aaa aaa gac ggc aag ctt cct gtc gtt    624

Tyr Glu Leu Leu Leu Gln Ile Lys Lys Asp Gly Lys Leu Pro Val Val

        195                 200                 205

aac ttt gcc gct ggc ggc gta gca act cca gct gat gct gct ctc atg    672

Asn Phe Ala Ala Gly Gly Val Ala Thr Pro Ala Asp Ala Ala Leu Met

    210                 215                 220

atg cag ctt ggt gct gac gga gta ttt gtt ggt tct ggt att ttt aaa    720

Met Gln Leu Gly Ala Asp Gly Val Phe Val Gly Ser Gly Ile Phe Lys

225                 230                 235                 240

tca gac aac cct gct aaa ttt gcg aaa gca att gtg gaa gca aca act    768

Ser Asp Asn Pro Ala Lys Phe Ala Lys Ala Ile Val Glu Ala Thr Thr

                245                 250                 255

cac ttt act gat tac aaa tta atc gct gag ttg tca aaa gag ctt ggt    816

His Phe Thr Asp Tyr Lys Leu Ile Ala Glu Leu Ser Lys Glu Leu Gly

            260                 265                 270

act gca atg aaa ggg att gaa atc tca aac tta ctt cca gaa cag cgt    864

Thr Ala Met Lys Gly Ile Glu Ile Ser Asn Leu Leu Pro Glu Gln Arg

        275                 280                 285

atg caa gaa cgc ggc tgg aga tcc att gaa ggc cgc atg cgc ttc atc    912

Met Gln Glu Arg Gly Trp Arg Ser Ile Glu Gly Arg Met Arg Phe Ile

    290                 295                 300

gtc tct ctc ctc gcc ttc act gcc gcg gcc acc gcg acc gcc ctc ccg    960

Val Ser Leu Leu Ala Phe Thr Ala Ala Ala Thr Ala Thr Ala Leu Pro

305                 310                 315                 320

gcc tct gcc gca aag aac gcg aag ctg gcc acc tcg gcg gcc ttc gcc    1008

Ala Ser Ala Ala Lys Asn Ala Lys Leu Ala Thr Ser Ala Ala Phe Ala

                325                 330                 335

aag cag gct gaa ggc acc acc tgc aat gtc ggc tcg atc gct tgc tgc    1056

Lys Gln Ala Glu Gly Thr Thr Cys Asn Val Gly Ser Ile Ala Cys Cys

            340                 345                 350

aac tcc ccc gct gag acc aac aac gac agt ctg ttg agc ggt ctg ctc    1104

Asn Ser Pro Ala Glu Thr Asn Asn Asp Ser Leu Leu Ser Gly Leu Leu

        355                 360                 365

ggt gct ggc ctt ctc aac ggg ctc tcg ggc aac act ggc agc gcc tgc    1152

Gly Ala Gly Leu Leu Asn Gly Leu Ser Gly Asn Thr Gly Ser Ala Cys

    370                 375                 380

gcc aag gcg agc ttg att gac cag ctg ggt ctg ctc gct ctc gtc gac    1200

Ala Lys Ala Ser Leu Ile Asp Gln Leu Gly Leu Leu Ala Leu Val Asp

385                 390                 395                 400

cac act gag gaa ggc ccc gtc tgc aag aac atc gtc gct tgc tgc cct    1248

His Thr Glu Glu Gly Pro Val Cys Lys Asn Ile Val Ala Cys Cys Pro

                405                 410                 415

gag gga acc acc aac tgt gtt gcc gtc gac aac gct ggc gct ggt acc    1296

Glu Gly Thr Thr Asn Cys Val Ala Val Asp Asn Ala Gly Ala Gly Thr

            420                 425                 430

aag gct gag gga tct cat cac cat cac cat cac                        1329

Lys Ala Glu Gly Ser His His His His His His

        435                 440

<210>20

<211>443

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>basf-yaad-Xa-dewA-his

<400>20

Met Ala Gln Thr Gly Thr Glu Arg Val Lys Arg Gly Met Ala Glu Met

1               5                   10                  15

Gln Lys Gly Gly Val Ile Met Asp Val Ile Asn Ala Glu Gln Ala Lys

            20                  25                  30

Ile Ala Glu Glu Ala Gly Ala Val Ala Val Met Ala Leu Glu Arg Val

        35                  40                  45

Pro Ala Asp Ile Arg Ala Ala Gly Gly Val Ala Arg Met Ala Asp Pro

    50                  55                  60

Thr Ile Val Glu Glu Val Met Asn Ala Val Ser Ile Pro Val Met Ala

65                  70                  75                  80

Lys Ala Arg Ile Gly His Ile Val Glu Ala Arg Val Leu Glu Ala Met

                85                  90                  95

Gly Val Asp Tyr Ile Asp Glu Ser Glu Val Leu Thr Pro Ala Asp Glu

            100                 105                 110

Glu Phe His Leu Asn Lys Asn Glu Tyr Thr Val Pro Phe Val Cys Gly

        115                 120                 125

Cys Arg Asp Leu Gly Glu Ala Thr Arg Arg Ile Ala Glu Gly Ala Ser

    130                 135                 140

Met Leu Arg Thr Lys Gly Glu Pro Gly Thr Gly Asn Ile Val Glu Ala

145                 150                 155                 160

Val Arg His Met Arg Lys Val Asn Ala Gln Val Arg Lys Val Val Ala

                165                 170                 175

Met Ser Glu Asp Glu Leu Met Thr Glu Ala Lys Asn Leu Gly Ala Pro

            180                 185                 190

Tyr Glu Leu Leu Leu Gln Ile Lys Lys Asp Gly Lys Leu Pro Val Val

        195                 200                 205

Asn Phe Ala Ala Gly Gly Val Ala Thr Pro Ala Asp Ala Ala Leu Met

    210                 215                 220

Met Gln Leu Gly Ala Asp Gly Val Phe Val Gly Ser Gly Ile Phe Lys

225                 230                 235                 240

Ser Asp Asn Pro Ala Lys Phe Ala Lys Ala Ile Val Glu Ala Thr Thr

                245                 250                 255

His Phe Thr Asp Tyr Lys Leu Ile Ala Glu Leu Ser Lys Glu Leu Gly

            260                 265                 270

Thr Ala Met Lys Gly Ile Glu Ile Ser Asn Leu Leu Pro Glu Gln Arg

        275                 280                 285

Met Gln Glu Arg Gly Trp Arg Ser Ile Glu Gly Arg Met Arg Phe Ile

    290                 295                 300

Val Ser Leu Leu Ala Phe Thr Ala Ala Ala Thr Ala Thr Ala Leu Pro

305                 310                 315                 320

Ala Ser Ala Ala Lys Asn Ala Lys Leu Ala Thr Ser Ala Ala Phe Ala

                325                 330                 335

Lys Gln Ala Glu Gly Thr Thr Cys Asn Val Gly Ser Ile Ala Cys Cys

            340                 345                 350

Asn Ser Pro Ala Glu Thr Asn Asn Asp Ser Leu Leu Ser Gly Leu Leu

        355                 360                 365

Gly Ala Gly Leu Leu Asn Gly Leu Ser Gly Asn Thr Gly Ser Ala Cys

    370                 375                 380

Ala Lys Ala Ser Leu Ile Asp Gln Leu Gly Leu Leu Ala Leu Val Asp

385                 390                 395                 400

His Thr Glu Glu Gly Pro Val Cys Lys Asn Ile Val Ala Cys Cys Pro

                405                 410                 415

Glu Gly Thr Thr Asn Cys Val Ala Val Asp Asn Ala Gly Ala Gly Thr

            420                 425                 430

Lys Ala Glu Gly Ser His His His His His His

        435                 440

<210>21

<211>1395

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(1395)

<223>basf-yaad-Xa-rodA-his

<400>21

atg gct caa aca ggt act gaa cgt gta aaa cgc gga atg gca gaa atg    48

Met Ala Gln Thr Gly Thr Glu Arg Val Lys Arg Gly Met Ala Glu Met

1               5                   10                  15

caa aaa ggc ggc gtc atc atg gac gtc atc aat gcg gaa caa gcg aaa    96

Gln Lys Gly Gly Val Ile Met Asp Val Ile Asn Ala Glu Gln Ala Lys

            20                  25                  30

atc gct gaa gaa gct gga gct gtc gct gta atg gcg cta gaa cgt gtg    144

Ile Ala Glu Glu Ala Gly Ala Val Ala Val Met Ala Leu Glu Arg Val

        35                  40                  45

cca gca gat att cgc gcg gct gga gga gtt gcc cgt atg gct gac cct    192

Pro Ala Asp Ile Arg Ala Ala Gly Gly Val Ala Arg Met Ala Asp Pro

    50                  55                  60

aca atc gtg gaa gaa gta atg aat gca gta tct atc ccg gta atg gca    240

Thr Ile Val Glu Glu Val Met Asn Ala Val Ser Ile Pro Val Met Ala

65                  70                  75                  80

aaa gcg cgt atc gga cat att gtt gaa gcg cgt gtg ctt gaa gct atg    288

Lys Ala Arg Ile Gly His Ile Val Glu Ala Arg Val Leu Glu Ala Met

                85                  90                  95

ggt gtt gac tat att gat gaa agt gaa gtt ctg acg ccg gct gac gaa    336

Gly Val Asp Tyr Ile Asp Glu Ser Glu Val Leu Thr Pro Ala Asp Glu

            100                 105                 110

gaa ttt cat tta aat aaa aat gaa tac aca gtt cct ttt gtc tgt ggc    384

Glu Phe His Leu Asn Lys Asn Glu Tyr Thr Val Pro Phe Val Cys Gly

        115                 120                 125

tgc cgt gat ctt ggt gaa gca aca cgc cgt att gcg gaa ggt gct tct    432

Cys Arg Asp Leu Gly Glu Ala Thr Arg Arg Ile Ala Glu Gly Ala Ser

    130                 135                 140

atg ctt cgc aca aaa ggt gag cct gga aca ggt aat att gtt gag gct    480

Met Leu Arg Thr Lys Gly Glu Pro Gly Thr Gly Asn Ile Val Glu Ala

145                 150                 155                 160

gtt cgc cat atg cgt aaa gtt aac gct caa gtg cgc aaa gta gtt gcg    528

Val Arg His Met Arg Lys Val Asn Ala Gln Val Arg Lys Val Val Ala

                165                 170                 175

atg agt gag gat gag cta atg aca gaa gcg aaa aac cta ggt gct cct    576

Met Ser Glu Asp Glu Leu Met Thr Glu Ala Lys Asn Leu Gly Ala Pro

            180                 185                 190

tac gag ctt ctt ctt caa att aaa aaa gac ggc aag ctt cct gtc gtt    624

Tyr Glu Leu Leu Leu Gln Ile Lys Lys Asp Gly Lys Leu Pro Val Val

        195                 200                 205

aac ttt gcc gct ggc ggc gta gca act cca gct gat gct gct ctc atg    672

Asn Phe Ala Ala Gly Gly Val Ala Thr Pro Ala Asp Ala Ala Leu Met

    210                 215                 220

atg cag ctt ggt gct gac gga gta ttt gtt ggt tct ggt att ttt aaa    720

Met Gln Leu Gly Ala Asp Gly Val Phe Val Gly Ser Gly Ile Phe Lys

225                 230                 235                 240

tca gac aac cct gct aaa ttt gcg aaa gca att gtg gaa gca aca act    768

Ser Asp Asn Pro Ala Lys Phe Ala Lys Ala Ile Val Glu Ala Thr Thr

                245                 250                 255

cac ttt act gat tac aaa tta atc gct gag ttg tca aaa gag ctt ggt    816

His Phe Thr Asp Tyr Lys Leu Ile Ala Glu Leu Ser Lys Glu Leu Gly

            260                 265                 270

act gca atg aaa ggg att gaa atc tca aac tta ctt cca gaa cag cgt    864

Thr Ala Met Lys Gly Ile Glu Ile Ser Asn Leu Leu Pro Glu Gln Arg

        275                 280                 285

atg caa gaa cgc ggc tgg aga tct att gaa ggc cgc atg aag ttc tcc    912

Met Gln Glu Arg Gly Trp Arg Ser Ile Glu Gly Arg Met Lys Phe Ser

    290                 295                 300

att gct gcc gct gtc gtt gct ttc gcc gcc tcc gtc gcg gcc ctc cct    960

Ile Ala Ala Ala Val Val Ala Phe Ala Ala Ser Val Ala Ala Leu Pro

305                 310                 315                 320

cct gcc cat gat tcc cag ttc gct ggc aat ggt gtt ggc aac aag ggc    1008

Pro Ala His Asp Ser Gln Phe Ala Gly Asn Gly Val Gly Asn Lys Gly

                325                 330                 335

aac agc aac gtc aag ttc cct gtc ccc gaa aac gtg acc gtc aag cag    1056

Asn Ser Asn Val Lys Phe Pro Val Pro Glu Asn Val Thr Val Lys Gln

            340                 345                 350

gcc tcc gac aag tgc ggt gac cag gcc cag ctc tct tgc tgc aac aag    1104

Ala Ser Asp Lys Cys Gly Asp Gln Ala Gln Leu Ser Cys Cys Asn Lys

        355                 360                 365

gcc acg tac gcc ggt gac acc aca acc gtt gat gag ggt ctt ctg tct    1152

Ala Thr Tyr Ala Gly Asp Thr Thr Thr Val Asp Glu Gly Leu Leu Ser

    370                 375                 380

ggt gcc ctc agc ggc ctc atc ggc gcc ggg tct ggt gcc gaa ggt ctt    1200

Gly Ala Leu Ser Gly Leu Ile Gly Ala Gly Ser Gly Ala Glu Gly Leu

385                 390                 395                 400

ggt ctc ttc gat cag tgc tcc aag ctt gat gtt gct gtc ctc att ggc    1248

Gly Leu Phe Asp Gln Cys Ser Lys Leu Asp Val Ala Val Leu Ile Gly

                405                 410                 415

atc caa gat ctt gtc aac cag aag tgc aag caa aac att gcc tgc tgc    1296

Ile Gln Asp Leu Val Asn Gln Lys Cys Lys Gln Asn Ile Ala Cys Cys

            420                 425                 430

cag aac tcc ccc tcc agc gcg gat ggc aac ctt att ggt gtc ggt ctc    1344

Gln Asn Ser Pro Ser Ser Ala Asp Gly Asn Leu Ile Gly Val Gly Leu

        435                 440                 445

cct tgc gtt gcc ctt ggc tcc atc ctc gga tct cat cac cat cac cat    1392

Pro Cys Val Ala Leu Gly Ser Ile Leu Gly Ser His His His His His

    450                 455                 460

cac                                                                1395

His

465

<210>22

<211>465

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>basf-yaad-Xa-rodA-his

<400>22

Met Ala Gln Thr Gly Thr Glu Arg Val Lys Arg Gly Met Ala Glu Met

1               5                   10                  15

Gln Lys Gly Gly Val Ile Met Asp Val Ile Asn Ala Glu Gln Ala Lys

            20                  25                  30

Ile Ala Glu Glu Ala Gly Ala Val Ala Val Met Ala Leu Glu Arg Val

        35                  40                  45

Pro Ala Asp Ile Arg Ala Ala Gly Gly Val Ala Arg Met Ala Asp Pro

    50                  55                  60

Thr Ile Val Glu Glu Val Met Asn Ala Val Ser Ile Pro Val Met Ala

65                  70                  75                  80

Lys Ala Arg Ile Gly His Ile Val Glu Ala Arg Val Leu Glu Ala Met

                85                  90                  95

Gly Val Asp Tyr Ile Asp Glu Ser Glu Val Leu Thr Pro Ala Asp Glu

            100                 105                 110

Glu Phe His Leu Asn Lys Asn Glu Tyr Thr Val Pro Phe Val Cys Gly

        115                 120                 125

Cys Arg Asp Leu Gly Glu Ala Thr Arg Arg Ile Ala Glu Gly Ala Ser

    130                 135                 140

Met Leu Arg Thr Lys Gly Glu Pro Gly Thr Gly Asn Ile Val Glu Ala

145                 150                 155                 160

Val Arg His Met Arg Lys Val Asn Ala Gln Val Arg Lys Val Val Ala

                165                 170                 175

Met Ser Glu Asp Glu Leu Met Thr Glu Ala Lys Asn Leu Gly Ala Pro

            180                 185                 190

Tyr Glu Leu Leu Leu Gln Ile Lys Lys Asp Gly Lys Leu Pro Val Val

        195                 200                 205

Asn Phe Ala Ala Gly Gly Val Ala Thr Pro Ala Asp Ala Ala Leu Met

    210                 215                 220

Met Gln Leu Gly Ala Asp Gly Val Phe Val Gly Ser Gly Ile Phe Lys

225                 230                 235                 240

Ser Asp Asn Pro Ala Lys Phe Ala Lys Ala Ile Val Glu Ala Thr Thr

                245                 250                 255

His Phe Thr Asp Tyr Lys Leu Ile Ala Glu Leu Ser Lys Glu Leu Gly

            260                 265                 270

Thr Ala Met Lys Gly Ile Glu Ile Ser Asn Leu Leu Pro Glu Gln Arg

        275                 280                 285

Met Gln Glu Arg Gly Trp Arg Ser Ile Glu Gly Arg Met Lys Phe Ser

    290                 295                 300

Ile Ala Ala Ala Val Val Ala Phe Ala Ala Ser Val Ala Ala Leu Pro

305                 310                 315                 320

Pro Ala His Asp Ser Gln Phe Ala Gly Asn Gly Val Gly Asn Lys Gly

                325                 330                 335

Asn Ser Asn Val Lys Phe Pro Val Pro Glu Asn Val Thr Val Lys Gln

            340                 345                 350

Ala Ser Asp Lys Cys Gly Asp Gln Ala Gln Leu Ser Cys Cys Asn Lys

        355                 360                 365

Ala Thr Tyr Ala Gly Asp Thr Thr Thr Val Asp Glu Gly Leu Leu Ser

    370                 375                 380

Gly Ala Leu Ser Gly Leu Ile Gly Ala Gly Ser Gly Ala Glu Gly Leu

385                 390                 395                 400

Gly Leu Phe Asp Gln Cys Ser Lys Leu Asp Val Ala Val Leu Ile Gly

                405                 410                 415

Ile Gln Asp Leu Val Asn Gln Lys Cys Lys Gln Asn Ile Ala Cys Cys

            420                 425                 430

Gln Asn Ser Pro Ser Ser Ala Asp Gly Asn Leu Ile Gly Val Gly Leu

        435                 440                 445

Pro Cys Val Ala Leu Gly Ser Ile Leu Gly Ser His His His His His

    450                 455                 460

His

465

<210>23

<211>1407

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<221>CDS

<222>(1)..(1407)

<223>basf-yaad-Xa-BASF1-his

<400>23

atg gct caa aca ggt act gaa cgt gta aaa cgc gga atg gca gaa atg    48

Met Ala Gln Thr Gly Thr Glu Arg Val Lys Arg Gly Met Ala Glu Met

1               5                   10                  15

caa aaa ggc ggc gtc atc atg gac gtc atc aat gcg gaa caa gcg aaa    96

Gln Lys Gly Gly Val Ile Met Asp Val Ile Asn Ala Glu Gln Ala Lys

            20                  25                  30

atc gct gaa gaa gct gga gct gtc gct gta atg gcg cta gaa cgt gtg    144

Ile Ala Glu Glu Ala Gly Ala Val Ala Val Met Ala Leu Glu Arg Val

        35                  40                  45

cca gca gat att cgc gcg gct gga gga gtt gcc cgt atg gct gac cct    192

Pro Ala Asp Ile Arg Ala Ala Gly Gly Val Ala Arg Met Ala Asp Pro

    50                  55                  60

aca atc gtg gaa gaa gta atg aat gca gta tct atc ccg gta atg gca    240

Thr Ile Val Glu Glu Val Met Asn Ala Val Ser Ile Pro Val Met Ala

65                  70                  75                  80

aaa gcg cgt atc gga cat att gtt gaa gcg cgt gtg ctt gaa gct atg    288

Lys Ala Arg Ile Gly His Ile Val Glu Ala Arg Val Leu Glu Ala Met

                85                  90                  95

ggt gtt gac tat att gat gaa agt gaa gtt ctg acg ccg gct gac gaa    336

Gly Val Asp Tyr Ile Asp Glu Ser Glu Val Leu Thr Pro Ala Asp Glu

            100                 105                 110

gaa ttt cat tta aat aaa aat gaa tac aca gtt cct ttt gtc tgt ggc    384

Glu Phe His Leu Asn Lys Asn Glu Tyr Thr Val Pro Phe Val Cys Gly

        115                 120                 125

tgc cgt gat ctt ggt gaa gca aca cgc cgt att gcg gaa ggt gct tct    432

Cys Arg Asp Leu Gly Glu Ala Thr Arg Arg Ile Ala Glu Gly Ala Ser

    130                 135                 140

atg ctt cgc aca aaa ggt gag cct gga aca ggt aat att gtt gag gct    480

Met Leu Arg Thr Lys Gly Glu Pro Gly Thr Gly Asn Ile Val Glu Ala

145                 150                 155                 160

gtt cgc cat atg cgt aaa gtt aac gct caa gtg cgc aaa gta gtt gcg    528

Val Arg His Met Arg Lys Val Asn Ala Gln Val Arg Lys Val Val Ala

                165                 170                 175

atg agt gag gat gag cta atg aca gaa gcg aaa aac cta ggt gct cct    576

Met Ser Glu Asp Glu Leu Met Thr Glu Ala Lys Asn Leu Gly Ala Pro

            180                 185                 190

tac gag ctt ctt ctt caa att aaa aaa gac ggc aag ctt cct gtc gtt    624

Tyr Glu Leu Leu Leu Gln Ile Lys Lys Asp Gly Lys Leu Pro Val Val

        195                 200                 205

aac ttt gcc gct ggc ggc gta gca act cca gct gat gct gct ctc atg    672

Asn Phe Ala Ala Gly Gly Val Ala Thr Pro Ala Asp Ala Ala Leu Met

    210                 215                 220

atg cag ctt ggt gct gac gga gta ttt gtt ggt tct ggt att ttt aaa    720

Met Gln Leu Gly Ala Asp Gly Val Phe Val Gly Ser Gly Ile Phe Lys

225                 230                 235                 240

tca gac aac cct gct aaa ttt gcg aaa gca att gtg gaa gca aca act    768

Ser Asp Asn Pro Ala Lys Phe Ala Lys Ala Ile Val Glu Ala Thr Thr

                245                 250                 255

cac ttt act gat tac aaa tta atc gct gag ttg tca aaa gag ctt ggt    816

His Phe Thr Asp Tyr Lys Leu Ile Ala Glu Leu Ser Lys Glu Leu Gly

            260                 265                 270

act gca atg aaa ggg att gaa atc tca aac tta ctt cca gaa cag cgt    864

Thr Ala Met Lys Gly Ile Glu Ile Ser Asn Leu Leu Pro Glu Gln Arg

        275                 280                 285

atg caa gaa cgc ggc tgg aga tct att gaa ggc cgc atg aag ttc tcc    912

Met Gln Glu Arg Gly Trp Arg Ser Ile Glu Gly Arg Met Lys Phe Ser

    290                 295                 300

gtc tcc gcc gcc gtc ctc gcc ttc gcc gcc tcc gtc gcc gcc ctc cct    960

Val Ser Ala Ala Val Leu Ala Phe Ala Ala Ser Val Ala Ala Leu Pro

305                 310                 315                 320

cag cac gac tcc gcc gcc ggc aac ggc aac ggc gtc ggc aac aag ttc    1008

Gln His Asp Ser Ala Ala Gly Asn Gly Asn Gly Val Gly Asn Lys Phe

                325                 330                 335

cct gtc cct gac gac gtc acc gtc aag cag gcc acc gac aag tgc ggc    1056

Pro Val Pro Asp Asp Val Thr Val Lys Gln Ala Thr Asp Lys Cys Gly

            340                 345                 350

gac cag gcc cag ctc tcc tgc tgc aac aag gcc acc tac gcc ggc gac    1104

Asp Gln Ala Gln Leu Ser Cys Cys Asn Lys Ala Thr Tyr Ala Gly Asp

        355                 360                 365

gtc ctc acc gac atc gac gag ggc atc ctc gcc ggc ctc ctc aag aac    1152

Val Leu Thr Asp Ile Asp Glu Gly Ile Leu Ala Gly Leu Leu Lys Asn

    370                 375                 380

ctc atc ggc ggc ggc tcc ggc tcc gag ggc ctc ggc ctc ttc gac cag    1200

Leu Ile Gly Gly Gly Ser Gly Ser Glu Gly Leu Gly Leu Phe Asp Gln

385                 390                 395                 400

tgc gtc aag ctc gac ctc cag atc tcc gtc atc ggc atc cct atc cag    1248

Cys Val Lys Leu Asp Leu Gln Ile Ser Val Ile Gly Ile Pro Ile Gln

                405                 410                 415

gac ctc ctc aac cag gtc aac aag cag tgc aag cag aac atc gcc tgc    1296

Asp Leu Leu Asn Gln Val Asn Lys Gln Cys Lys Gln Asn Ile Ala Cys

            420                 425                 430

tgc cag aac tcc cct tcc gac gcc acc ggc tcc ctc gtc aac ctc ggc    1344

Cys Gln Asn Ser Pro Ser Asp Ala Thr Gly Ser Leu Val Asn Leu Gly

        435                 440                 445

ctc ggc aac cct tgc atc cct gtc tcc ctc ctc cat atg gga tct cat    1392

Leu Gly Asn Pro Cys Ile Pro Val Ser Leu Leu His Met Gly Ser His

    450                 455                 460

cac cat cac cat cac                                                1407

His His His His His

465

<210>24

<211>469

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>basf-yaad-Xa-BASF1-his

<400>24

Met Ala Gln Thr Gly Thr Glu Arg Val Lys Arg Gly Met Ala Glu Met

1               5                   10                  15

Gln Lys Gly Gly Val Ile Met Asp Val Ile Asn Ala Glu Gln Ala Lys

            20                  25                  30

Ile Ala Glu Glu Ala Gly Ala Val Ala Val Met Ala Leu Glu Arg Val

        35                  40                  45

Pro Ala Asp Ile Arg Ala Ala Gly Gly Val Ala Arg Met Ala Asp Pro

    50                  55                  60

Thr Ile Val Glu Glu Val Met Asn Ala Val Ser Ile Pro Val Met Ala

65                  70                  75                  80

Lys Ala Arg Ile Gly His Ile Val Glu Ala Arg Val Leu Glu Ala Met

                85                  90                  95

Gly Val Asp Tyr Ile Asp Glu Ser Glu Val Leu Thr Pro Ala Asp Glu

            100                 105                 110

Glu Phe His Leu Asn Lys Asn Glu Tyr Thr Val Pro Phe Val Cys Gly

        115                 120                 125

Cys Arg Asp Leu Gly Glu Ala Thr Arg Arg Ile Ala Glu Gly Ala Ser

    130                 135                 140

Met Leu Arg Thr Lys Gly Glu Pro Gly Thr Gly Asn Ile Val Glu Ala

145                 150                 155                 160

Val Arg His Met Arg Lys Val Asn Ala Gln Val Arg Lys Val Val Ala

                165                 170                 175

Met Ser Glu Asp Glu Leu Met Thr Glu Ala Lys Asn Leu Gly Ala Pro

            180                 185                 190

Tyr Glu Leu Leu Leu Gln Ile Lys Lys Asp Gly Lys Leu Pro Val Val

        195                 200                 205

Asn Phe Ala Ala Gly Gly Val Ala Thr Pro Ala Asp Ala Ala Leu Met

    210                 215                 220

Met Gln Leu Gly Ala Asp Gly Val Phe Val Gly Ser Gly Ile Phe Lys

225                 230                 235                 240

Ser Asp Asn Pro Ala Lys Phe Ala Lys Ala Ile Val Glu Ala Thr Thr

                245                 250                 255

His Phe Thr Asp Tyr Lys Leu Ile Ala Glu Leu Ser Lys Glu Leu Gly

            260                 265                 270

Thr Ala Met Lys Gly Ile Glu Ile Ser Asn Leu Leu Pro Glu Gln Arg

        275                 280                 285

Met Gln Glu Arg Gly Trp Arg Ser Ile Glu Gly Arg Met Lys Phe Ser

    290                 295                 300

Val Ser Ala Ala Val Leu Ala Phe Ala Ala Ser Val Ala Ala Leu Pro

305                 310                 315                 320

Gln His Asp Ser Ala Ala Gly Asn Gly Asn Gly Val Gly Asn Lys Phe

                325                 330                 335

Pro Val Pro Asp Asp Val Thr Val Lys Gln Ala Thr Asp Lys Cys Gly

            340                 345                 350

Asp Gln Ala Gln Leu Ser Cys Cys Asn Lys Ala Thr Tyr Ala Gly Asp

        355                 360                 365

Val Leu Thr Asp Ile Asp Glu Gly Ile Leu Ala Gly Leu Leu Lys Asn

    370                 375                 380

Leu Ile Gly Gly Gly Ser Gly Ser Glu Gly Leu Gly Leu Phe Asp Gln

385                 390                 395                 400

Cys Val Lys Leu Asp Leu Gln Ile Ser Val Ile Gly Ile Pro Ile Gln

                405                 410                 415

Asp Leu Leu Asn Gln Val Asn Lys Gln Cys Lys Gln Asn Ile Ala Cys

            420                 425                 430

Cys Gln Asn Ser Pro Ser Asp Ala Thr Gly Ser Leu Val Asn Leu Gly

        435                 440                 445

Leu Gly Asn Pro Cys Ile Pro Val Ser Leu Leu His Met Gly Ser His

    450                 455                 460

His His His His His

465