法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2014-06-04
未缴年费专利权终止 IPC(主分类):C07D295/18 授权公告日:20110727 终止日期:20130413 申请日:20060413
专利权的终止
2011-07-27
授权
授权
2008-06-11
实质审查的生效
实质审查的生效
2008-04-09
公开
公开
本发明涉及调节细胞增殖的新化合物和涉及增殖性疾病的预防和/或 治疗。优选的化合物可以发挥调节“细胞凋亡蛋白抑制剂”(IAP)活性的作 用。最优选的化合物是IAP的抑制剂。
细胞程序性死亡(细胞凋亡)是多细胞生物体发育和维持的关键机理。 生物体仅在细胞的新形成和消亡之间存在平衡时才保持健康。这种平衡失 控会表现出病理学结果如癌症、肝炎、帕金森氏病、中风、心肌梗塞等。
肿瘤细胞与其它细胞的区别可能特别是在于其复制是未受抑制的。其 设计了各种防止细胞凋亡发生的策略。一种最近才描述的分子机理涉及通 过与胱天蛋白酶直接相互作用和使之无效来阻止细胞凋亡的IAP族成员的 过表达。
因此，在癌症的控制中，十分感兴趣的是细胞凋亡蛋白(IAP)抑制剂的 抑制物质。IAP包括包括XIAP和CIAP。
本发明的目的是制备一类阻断(抑制)IAP的新化合物。或者，本发明 的化合物可以被称为细胞凋亡蛋白抑制剂的抑制剂(IAPI)。
本发明涉及式(I)化合物或其药理学上可接受的盐、溶剂化物、水合物 或药理学上可接受的制剂，
其中
R1是氢原子，或者烷基、杂烷基、链烯基、杂链烯基、炔基、杂炔基、 芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、烷基环烷基、杂烷基环烷基、芳烷基 或杂芳烷基，这些基团中的任意基团可以进一步被至少一个卤素取代；
R2是烷基、杂烷基、链烯基、杂链烯基、炔基、杂炔基、芳基、杂芳 基、环烷基、杂环烷基、烷基环烷基、杂烷基环烷基、芳烷基或杂芳烷基， 这些基团中的任意基团可以进一步被至少一个卤素取代；
R3选自下述结构之一：
和
m是整数1、2或3；
n是整数1、2、3、4、5或6；
A-B一起是-CHR4-CH-、-CR5＝C-或-CO-CH-；
X各自彼此独立地是价键、氧原子、硫原子、式CR6R7、CO、NR8的基团、任选被取代的亚环烷基、任选被取代的亚杂环烷基、任选被取代 的亚芳基，或者任选被取代的亚杂芳基；
Y各自彼此独立地是价键、氧原子、硫原子、式CR6R7、CO、NR8的基团、任选被取代的亚环烷基、任选被取代的亚杂环烷基、任选被取代 的亚芳基，或者任选被取代的亚杂芳基；
R4是氢原子、卤素原子，或者烷基、链烯基、炔基、杂烷基、芳基、 杂芳基、环烷基、烷基环烷基、杂烷基环烷基、杂环烷基、芳烷基或杂芳 烷基；
R5是氢原子，或者烷基、链烯基、炔基、杂烷基、芳基、杂芳基、环 烷基、烷基环烷基、杂烷基环烷基、杂环烷基、芳烷基或杂芳烷基；
基团R6彼此独立地是氢原子，或者烷基、链烯基、炔基、杂烷基、芳 基、杂芳基、环烷基、烷基环烷基、杂烷基环烷基、杂环烷基、芳烷基或 杂芳烷基；
基团R7彼此独立地是氢原子，或者烷基、链烯基、炔基、杂烷基、芳 基、杂芳基、环烷基、烷基环烷基、杂烷基环烷基、杂环烷基、芳烷基或 杂芳烷基；
基团R8彼此独立地是氢原子，或者烷基、链烯基、炔基、杂烷基、芳 基、杂芳基、环烷基、烷基环烷基、杂烷基环烷基、杂环烷基、芳烷基或 杂芳烷基；
R9是氢，或者是烷基、杂烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、 烷基环烷基、杂烷基-环烷基、芳烷基或杂-芳烷基，或者R2和R9与氮原 子可以形成杂芳基或杂芳烷基；且
R10是氢，或者是烷基或杂烷基。
R1优选是例如SO(0-2)R4；COR4；COOR4，或者是CONR4R5。
正如对本领域技术人员而言显而易见的那样，本发明的许多化合物包 含不对称碳原子。因此，应当清楚的是，认为在本发明的范围内包括所提 供结构式的所有单一立体异构体。除非特别说明，否则在提及所提供的任 意结构式中的任意R基团时都不意味着表示其手性或立体专一性。
烷基的表述指饱和的直链或支链烃基，其特别是具有1至20个碳原子， 优选具有1至12个碳原子，最优选具有1至6个碳原子，例如甲基、乙基、 丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正己基、2，2-二甲基丁基或正辛 基。
链烯基和炔基的表述指至少部分不饱和的直链或支链烃基，其特别是 具有2至20个碳原子，优选具有2至12个碳原子，最优选具有2至6个 碳原子，例如乙烯基、烯丙基、乙炔基、炔丙基、异戊二烯基(isoprenyl) 或己-2-烯基。链烯基优选具有一条或两条(最优选一条)双键，炔基具有一 条或两条(最优选一条)三键。
此外，烷基、链烯基和炔基的表述还指其中例如一个或多个氢原子被 卤素原子(优选F或Cl)、-COOH、-OH、-SH、-SO(0-2)R4、-NH2、-NO2、 ＝O、＝S、＝NH代替的基团，如2，2，2-三氯乙基或三氟甲基。
杂烷基的表述指其中一个或多个(优选1、2或3个)碳原子被氧、氮、 磷、硼、硒、硅或硫原子(优选氧、硫或氮)代替的烷基、链烯基或炔基。 杂烷基的表述还指羧基(例如-C(O)-)或羧酸或得自羧酸的基团，如 -C(O)-O-C(CH3)3、酰基、酰基烷基、烷氧基羰基、酰氧基、酰氧基烷基、 羧基烷基酰胺或烷氧基羰氧基。杂烷基还指链内或链侧的硫(sulfoxy)基团， 包括尤其是-SO(0-2)R4。
杂烷基的实例有式Ra-O-Ya-、Ra-S-Ya-、Ra-N(Rb)-Ya-、Ra-CO-Ya-、 Ra-O-CO-Ya-、Ra-CO-O-Ya-、Ra-CO-N(Rb)-Ya-、Ra-N(Rb)-CO-Ya-、 Ra-O-CO-N(Rb)-Ya-、Ra-N(Rb)-CO-O-Ya-、Ra-N(Rb)-CO-N(Rc)-Ya-、 Ra-O-CO-O-Ya-、Ra-N(Rb)-C(＝NRd)-N(Rc)-Ya-、Ra-CS-Ya-、 Ra-O-CS-Ya-、Ra-CS-O-Ya-、Ra-CS-N(Rb)-Ya-、Ra-N(Rb)-CS-Ya-、 Ra-O-CS-N(Rb)-Ya-、Ra-N(Rb)-CS-O-Ya-、Ra-N(Rb)-CS-N(Rc)-Ya-、 Ra-O-CS-O-Ya-、Ra-S-CO-Ya-、Ra-CO-S-Ya-、Ra-S-CO-N(Rb)-Ya-、 Ra-N(Rb)-CO-S-Ya-、Ra-S-CO-O-Ya-、Ra-O-CO-S-Ya-、Ra-S-CO-S-Ya-、 Ra-S-CS-Ya-、Ra-CS-S-Ya-、Ra-S-CS-N(Rb)-Ya-、Ra-N(Rb)-CS-S-Ya-、 Ra-S-CS-O-Ya-、Ra-O-CS-S-Ya-的基团，其中Ra是氢原子、C1-C6烷基-、 C2-C6链烯基-或C2-C6炔基；Rb是氢原子、C1-C6烷基-、C2-C6链烯基-或 C2-C6炔基；Rc是氢原子、C1-C6烷基-、C2-C6链烯基-或C2-C6炔基；Rd是氢原子、C1-C6烷基-、C2-C6链烯基-或C2-C6炔基，且Ya是直键、C1-C6亚烷基、C2-C6亚链烯基或C2-C6亚炔基，由此各杂烷基包含至少一个碳原 子并且一个或多个氢原子可以被氟或氯原子代替。杂烷基的具体实例有甲 氧基、三氟甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基、甲氧基甲 基、乙氧基甲基、甲氧基乙基、甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、二乙 基氨基、异丙基乙基氨基、甲基-氨基甲基、乙基氨基甲基、二-异丙基氨 基乙基、烯醇醚、二甲基氨基甲基、二甲基氨基乙基、乙酰基、丙酰基、 丁酰氧基、乙酰氧基、甲氧基羰基、乙氧基-羰基、N-乙基-N-甲基氨基甲 酰基或N-甲基氨基甲酰基。杂烷基的其它实例有腈、异腈、氰酸酯、硫氰 酸酯、异氰酸酯、异硫氰酸酯和烷基腈基团。
环烷基的表述指饱和或部分不饱和的(例如环烯基)环状基团，其具有 一个或多个(优选1或2或3个)环形成框架，包含特别是3至14个碳原子、 优选3至10(尤其是3、4、5、6或7)个碳原子。环烷基的表述还指其中 一个或多个氢原子被氟、氯、溴或碘原子或-COOH、-OH、＝O、-SH、＝S、 -NH2、＝NH、-NO2、烷基或杂烷基代替的基团，即，例如环状酮类如环己 酮、2-环己烯酮或环戊酮。环烷基的其它具体实例有环丙基、环丁基、环 戊基、螺环[4，5]癸烷基、降冰片基(norbornyl)、环己基、环戊烯基、环己 二烯基、十氢萘基、立方烷基、二环[4.3.0]壬基、四氢萘、环戊基环己基、 氟代环己基或环己-2-烯基。
杂环烷基的表述指其中一个或多个(优选1、2或3个)环碳原子被氧、 氮、硅、硒、磷或硫原子(优选氧、硫或氮)代替的上述所定义的环烷基。 杂环烷基优选具有1或2个具有3至10(尤其是3、4、5、6或7)个环原子 的环。杂环烷基的表述还指其中一个或多个氢原子被氟、氯、溴或碘原子 或-COOH、-OH、＝O、-SH、＝S、-NH2、＝NH、-NO2、烷基或杂烷基代 替的基团。其实例有哌啶基、吗啉基、六亚甲基四胺基(urotropinyl)、吡 咯烷基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、氧杂环丙基、氮杂环丙 基或2-吡唑啉基，以及内酰胺、内酯、环状亚胺和环状酸酐。
烷基环烷基的表述指其中根据上述定义包含环烷基以及烷基、链烯基 或炔基的基团，例如烷基环烷基、烷基环烯基、链烯基环烷基和炔基环烷 基。烷基环烷基优选包含具有一个或两个具有3至10(尤其是3、4、5、6 或7)个环碳原子的环的环烷基和一个或两个具有1或2至6个碳原子的烷 基、链烯基或炔基。
杂烷基环烷基的表述指其中一个或多个(优选1、2或3个)环碳原子和 /或碳原子被氧、氮、硅、硒、磷或硫原子(优选氧、硫或氮)代替的上述所 定义的烷基环烷基。杂烷基环烷基优选具有1或2个具有3至10(尤其是3、 4、5、6或7)个环原子的环和一个或两个具有1或2至6个碳原子的烷基、 链烯基、炔基或杂烷基。这类基团的实例有烷基杂环烷基、烷基杂环烯基、 链烯基杂环烷基、炔基杂环烷基、杂烷基环烷基、杂烷基杂环烷基和杂烷 基杂环烯基，环状基团是饱和的，或者是单-、二-或三-元不饱和的。
卤代或卤素的表述优选是氟、氯、溴或碘，最优选是氟、氯或溴。
芳基或Ar的表述指具有一个或多个具有特别是6至14个环碳原子、 优选6至10(尤其是6)个环碳原子的环的芳族基团。芳基(或Ar)的表述还 指其中一个或多个氢原子被氟、氯、溴或碘原子或-COOH、-OH、-SH、 ＝NH、-NO2、烷基或杂烷基代替的基团。其实例有苯基、萘基、联苯基、 苯胺基、2-氟苯基、3-硝基苯基或4-羟基苯基。
杂芳基的表述指包含一个或多个具有特别是3至14个环原子、优选5 至10(尤其是5或6)个环原子和一个或多个(优选1、2、3或4个)氧、氮、 磷或硫环原子(优选O、S或N)的芳族基团。杂芳基的表述还指其中一个或 多个氢原子被氟、氯、溴或碘原子或-COOH、-OH、-SH、＝NH、-NO2、 烷基或杂烷基代替的基团。其实例有4-吡啶基、2-咪唑基、3-苯基吡咯基、 噻唑基-唑基、三唑基、四唑基、异唑基、吲唑基、吲哚基、苯并咪唑 基、哒嗪基、喹啉基、嘌呤基、咔唑基、吖啶基、嘧啶基、2，3’-联呋喃基、 3-吡唑基和异喹啉基。
芳烷基的表述指其中根据上述定义包含芳基以及烷基、链烯基、炔基 和/或环烷基的基团，如芳基烷基、烷基芳基、芳基链烯基、芳基炔基、芳 基环烷基、芳基环烯基、烷基芳基环烷基和烷基芳基环烯基。芳烷基的具 体实例有甲苯、二甲苯、均三甲基苯、苯乙烯、苄基氯、邻-氟代甲苯、1H- 茚、四氢化萘、二氢化萘、茚满酮、苯基环戊基、异丙基苯、环己基苯基、 芴和茚满。芳烷基优选包含一个或两个具有6至10个环碳原子的芳族环和 一或两个具有1或2至6个碳原子的烷基、链烯基和/或炔基和/或具有5 或6个环碳原子的环烷基。
杂芳烷基的表述指其中一个或多个(优选1、2、3或4个)环碳原子和/ 或碳原子被氧、氮、硅、硒、磷、硼或硫原子(优选氧、硫或氮)代替的上 述所定义的芳烷基，即其指气质根据上述定义包含芳基或杂芳基以及烷基、 链烯基、炔基和/或杂烷基和/或环烷基和/或杂环烷基的基团。杂芳烷基优 选包含一个或两个具有5或6至10个环碳原子的芳族环和一或两个具有1 或2至6个碳原子的烷基、链烯基和/或炔基和/或具有5或6个环碳原子 的环烷基，其中这些碳原子中的1、2、3或4个可以被氧、硫或氮原子代 替。
其实例有芳基杂烷基、芳基杂环烷基、芳基杂环烯基、芳基烷基杂环 烷基、芳基链烯基杂环烷基、芳基炔基杂环烷基、芳基烷基杂环烯基、杂 芳基烷基、杂芳基链烯基、杂芳基炔基、杂芳基杂烷基、杂芳基环烷基、 杂芳基环烯基、杂芳基杂环烷基、杂芳基杂环烯基、杂芳基烷基环烷基、 杂芳基烷基杂环烯基、杂芳基杂烷基环烷基、杂芳基杂烷基环烯基和杂芳 基杂烷基杂环烷基，环状基团是饱和的或单-、二-或三-元不饱和的。其具 体实例有四氢异喹啉基、苯甲酰基、2-或3-乙基吲哚基、4-甲基吡啶子基、 2-、3-或4-甲氧基苯基、4-乙氧基苯基、2-、3-或4-羧基苯基烷基。
环烷基、杂环烷基、烷基环烷基、杂烷基环烷基、芳基、杂芳基、芳 烷基和杂芳烷基的表述还指其中一个或多个氢原子被氟、氯、溴或碘原子 或OH、＝O、SH、＝S、NH2、＝NH或NO2基团代替的基团。
表述“任选被取代”指其中一个或多个氢原子被例如氟、氯、溴或碘原 子或-COOH、-OH、＝O、-SH、＝S、-NH2、＝NH、-NO2、烷基或杂烷基 代替的基团。这种表述还指被未取代的C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C1-C6杂烷基、C3-C10环烷基、C2-C9杂环烷基、C6-C10芳基、C1-C9杂芳基、C7-C12芳烷基或C2-C11杂芳烷基取代的基团。
根据其取代情况，式(I)化合物可以包含一个或多个手性中心。因此， 本发明包括所有纯的对映异构体和所有纯的非对映异构体以及它们任意比 例的混合物。此外，本发明还包括通式(I)化合物所有的顺式/反式异构体以 及其混合物。此外，本发明还包括式(I)化合物所有的互变异构形式。
在一个实施方案中，R1是亲脂性(疏水性)基团。在另一个实施方案中， R1优选是疏脂性(亲水性)基团。
在某些实施方案中，R1是C1-10烷基、-(CO)0-1-(CH2)0-6-C3-7-环烷基、 -(CO)0-1-(CH2)0-6-苯基、-(CO)0-1-(CH2)0-6-萘基、-(CO)0-1-(CH2)0-6-杂芳基或 -(CO)0-1-(CH2)0-6-杂环烷基，其中环烷基、苯基、萘基、杂芳基或杂环烷基 可任选被取代。在其它实施方案中，R1是例如SO(0-2)R4；COR4；COOR4， 或者是CONR4R5。
R2优选是C1-10-烷基、-(CH2)0-6-C3-7-环烷基、C1-10-烷基-苯基、C1-10-烷 基-萘基、-(CH2)0-6-C3-7-环烷基-(CH2)0-6-苯基(其中该基团还包括稠合的环 烷基-苯基环系统，例如茚满或四氢萘)、-(CH2)0-4-CH((CH2)0-4-苯基)2、 -(CH2)0-6-杂环烷基或-(CH2)0-6-杂芳基，其中环烷基、苯基、萘基、杂芳基 或杂环烷基可任选被取代。
R2更优选是如WO2004/005248(其全文引入本文作为参考)中所定义 的氨基酸残基。
R2最优选是任选被取代的苄基、苯乙基或四氢萘基。
R3优选是式CH3-NH-CHR6-CO-NH-CHR7-CO-的基团，其中基团R6和R7的定义如上，并且优选彼此独立地是C1-10-烷基-、C3-7-环烷基-或 C1-10-杂烷基；在这种情况中，R6最优选是甲基且R7最优选是式-CH(CH3)2或-C(CH3)3的基团。
m优选是整数1。
A-B更优选一起是式CH2-CH、CH＝C或CO-CH的基团。
在表1-3中提供了本发明的优选化合物的具体实例。
对于本领域技术人员显而易见的是，当本发明的化合物可以以盐形式 存在时，其尤其是以酸加成盐或碱加成盐的形式存在。当化合物可以以盐 形式存在时，这类盐形式包括在本发明的范围内。虽然在化学操作如纯化 操作中可以使用任意盐形式，但是仅可药用的盐才可用于药物产品。
当在同一分子中存在碱性基团和酸性基团时，式(I)化合物也可以形成 内盐。
对于分离或纯化目的而言，也可能使用不可药用的盐，例如苦味酸盐 或高氯酸盐。对于治疗应用而言，仅使用可药用的盐或游离化合物(可以以 药物制剂的形式应用)，因此优选这些形式。
鉴于游离形式的化合物和其盐形式(包括这些可用作中间体的盐，例如 可用于化合物、互变异构体或互变异构混合物以及其盐的纯化或鉴别的这 些盐)之间的密切关系，因此，在上下文中任何地方提及化合物、尤其是式 I化合物时，如果适宜和方便以及没有以其它方式提及的情况下，应当清 楚的是，其也涉及这些化合物、尤其是式I化合物的相应互变异构体，这 些化合物、尤其是式I化合物的互变异构混合物，或者任意这些物质的盐。
在提及“化合物......、其互变异构体，或者其盐”等的情况中，其指“化 合物......、其互变异构体，或者该化合物或互变异构体的盐”。
任何不对称碳原子都可以以(R)-、(S)-或(R，S)-构型存在，优选以(R)- 或(S)-构型存在。如果可能的话，位于环上具有不饱和键的原子上的取代基 可以以顺式-(＝Z-)或反式(＝E-)形式存在。因此，化合物可以以异构体混合 物的形式存在，或者优选以纯异构体的形式存在，优选以对映异构纯的非 对映异构体或纯对映异构体的形式存在。
本发明还涉及在体内转化成式(I)化合物本身的式(I)化合物的前体药 物。因此，如果方便和适宜的话，对式(I)化合物的任何提及应当被理解为 还涉及式(I)化合物相应的前体药物。
式(I)化合物具有有价值的药理学性质，可用于治疗激酶依赖性疾病， 例如可用作治疗增殖性疾病的药物。
当适宜的时候，可药用盐包括可药用的碱加成盐和酸加成盐，例如， 金属盐(如碱金属盐和碱土金属盐)、铵盐、有机胺加成盐和氨基酸加成盐 以及磺酸盐。酸加成盐包括无机酸加成盐如盐酸盐、硫酸盐和磷酸盐，和 有机酸加成盐如烷基磺酸盐、芳基磺酸盐、醋酸盐、马来酸盐、富马酸盐、 酒石酸盐、柠檬酸盐和乳酸盐。金属盐的实例有碱金属盐如锂盐、钠盐和 钾盐，碱土金属盐如镁盐和钙盐、铝盐和锌盐。铵盐的实例有铵盐和四甲 基铵盐。有机胺加成盐的实例有与吗啉和哌啶形成的盐。氨基酸加成盐的 实例有与甘氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸和赖氨酸形成的盐。磺酸盐包括甲磺 酸盐、甲苯磺酸盐和苯磺酸盐。
式(I)化合物药理学上可接受的盐的实例有与下列酸形成的盐：生理学 上可接受的矿物酸，如盐酸、硫酸和磷酸；有机酸如甲磺酸、对甲苯磺酸、 乳酸、甲酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、琥珀酸、富马酸、马来酸和水杨 酸。式(I)化合物可以被溶剂化，特别是可以被水合。水合可以例如在制备 过程中发生或者可以是由最初不含水的式(I)化合物的吸湿性产生的。
本发明的药物组合物包含至少一种式(I)化合物作为活性成分并任选地 包含载体和/或助剂。
同样是本发明目的的前体药物(例如R.B.Silverman，Medizinische Chemie，VCH Weinheim，1995，第8章，第361ff页)由式(I)化合物和至少一 种药理学上可接受的保护基团组成，其在生理学条件下被裂解，例如羟 基、烷氧基、芳烷氧基、酰基或酰氧基，如甲氧基、乙氧基、苄氧基、乙 酰基或乙酰氧基。
这些活性成分在制备药物中的用途也是本发明的目的。一般而言，式 (I)化合物是用已知的可接受的方法来进行给药的，其被单独给药或者与任 意其它治疗剂一起联合给药。例如可以用下述方式之一来完成给药：口服 给药，例如以糖锭剂、包衣片、丸剂、半固体、软或硬胶囊、溶液、乳剂 或混悬剂的形式口服给药；胃肠道外给药，例如以可注射溶液的形式胃肠 道外给药；以栓剂的形式直肠给药；通过吸入进行给药，例如以粉末制剂 或喷雾形式，经皮或鼻内给药。对于片剂、丸剂、半固体、包衣片、糖锭 剂和硬明胶胶囊的制备而言，可以将可治疗应用的产品与药理学上惰性的 无机或有机药用载体例如乳糖、蔗糖、葡萄糖、明胶、麦芽糖、硅胶、淀 粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其盐、干脱脂乳等混合到一起。对于软 胶囊的制备而言，可以使用诸如植物油、石油、动物或合成油、蜡、脂、 多元醇之类的药用载体。对于液体溶液和糖浆的制备而言，可以使用诸如 水、醇类、含水盐溶液、含水右旋糖、多元醇、甘油、植物油、石油、动 物或合成油之类的药用载体。对于栓剂而言，可以使用诸如植物油、石油、 动物或合成油、蜡、脂和多元醇之类的药用载体。对于气雾剂而言，可以 使用适用于这一目的的压缩气体，如氧、氮和二氧化碳。可药用的物质还 可包含防腐和稳定添加剂、乳化剂、甜味剂、芳香剂、用于改变渗透压的 盐、缓冲剂、包衣添加剂和抗氧化剂。
与其它治疗剂的联合可以包含其它活性成分，例如紫杉烷类(taxanes)， 其通常用于预防和/或治疗肿瘤疾病。紫杉烷类包括诸如紫杉醇(paciltaxel) 和多西他赛之类的化合物。紫杉醇以TAXOL的形式进行市售；多西他赛 以TAXOTERE的形式进行市售。其它紫杉烷类包括长春瑞滨和埃坡霉素 (epothilones)如埃坡霉素B和patupilone。
在其它实施方案中，本发明提供了包括任意本发明化合物的药盒。在 相关的实施方案中，该药盒还包括任意这些化合物的可药用载体或赋形剂。 在另一个相关的实施方案中，存在于药盒中的本发明的化合物是单位剂量。 在另一个相关的实施方案中，药盒还包括用于将其施用于个体的说明书。
式(I)化合物可以用K.Rossen，J.Sager，L.M.DiMichele；Tetrahedron Letters，第38卷，第18期，第3183-3186页，1997和A.v.Zychlinski和I. Ugi，HETEROCYCLES，第49卷，第29-32页，1998中的方法、通过使相应 的BOC-保护的二肽与相应的其它起始材料反应来制备。然后，可以在标 准条件下用三氟乙酸除去BOC-保护基团。可以用HPLC进行纯化。如下 提供了示例性的合成方法。
系列A的通用合成
(2S)-2-{[(1R)-1，2，3，4-四氢-1-萘基-氨基]羰基}-1，4-哌嗪二甲酸4-苄基酯1-叔 丁基酯(2)
将(2S)-4-[(苄氧基)羰基]-1-(叔丁氧羰基)-2-哌嗪甲酸(1，17.33g， 47.5mmol)溶于DMF(800mL)中，向其中加入二异丙基乙基胺(DIEA， 41.5mL，0.24mol)。将该混合物在RT下搅拌1.5小时。加入R-(-)-1，2，3，4- 四氢-1-萘基胺(7.00g，47.5mmol)，继续另外搅拌1小时。再加入O-(苯并三 唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU，19.84g，52.3mmol)和1- 羟基苯并三唑水合物(HOBt，7.07g，52.3mmol)并将全部混合物在RT下搅 拌过夜。然后，将反应混合物用EtOAc(1.2L)稀释，依次用1M柠檬酸、 盐水、饱和NaHCO3、盐水、水和盐水(各1L溶液)洗涤。然后，将EtOAc 层用Na2SO4干燥，过滤，并在减压下除去溶剂，得到灰白色固体粗品 (23.34g)。将该物质用硅胶快速色谱法进行纯化(最初用CH2Cl2作为洗脱 剂，然后用5％Et2O/CH2Cl2对所需产物进行洗脱)。分离出所需的偶联产 物6(20.37g，收率为87％)，为白色泡沫：
1H NMRδ(CDCl3)7.27- 7.42(m，5H)，7.06-7.19(m，4H)，6.10(brs，1H)，5.11-5.25(brm，3H)，4.46-4.75(brm，2 H)，3.77-4.02(brm，2H)，3.00-3.31(brm，3H)，2.68-2.84(m，2H)，1.97-2.07(brm，1H)， 1.69-1.84(brm，3H)，1.43(s，9H).LCMS(APCI+)494.8(MH+)，438.5(MH+-tBu)，394.4 (MH+-BOC).
(3S)-3-{[(1R)-1，2，3，4-四氢-1-萘基氨基]羰基}-1-哌嗪甲酸苄酯(3)
将酰胺2(20.35g，41.2mmol)溶于CH2Cl2(600mL)和TFA(153ml， 2.06mol)的混合物中。将烧瓶在N2下密封并将混合物在RT下搅拌过夜。 在减压下除去所有的溶剂，得到油状物，将其溶于CH2Cl2(500mL)中，然 后用饱和NaHCO3(2×500mL)和盐水(500mL)洗涤。将CH2Cl2溶液干燥 (Na2SO4)，过滤，在减压下除去溶剂，得到灰白色泡沫形式的所需产物7 (16.21g，收率为100％)：
1H NMRδ(CDCl3)7.07-7.39(m，10H)，5.10-5.21(m，3H)，4.18-4.26(m，1H)，3.78-3.88 (m，1H)，3.39(dd，J＝9.2，3.6Hz，1H)，2.70-3.19(m，6H)，1.97-2.07(m，1H)，1.73-1.86 (m，3H)；LCMS(APCI+)394.4(MH+，100％).
(3S)-4-{(2S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-3-甲基丁酰基}-3-{[(1R)-1，2，3，4-四氢-1- 萘基氨基]羰基}-1-哌嗪甲酸苄酯(4)
用DIEA(36.0mL，0.21mol)、HBTU(17.19g，45.3mmol)和HOBt (6.12g，45.3mmol)在DMF(700mL)中在与上述步骤1的条件相同的条件下 将去保护的哌嗪3(16.20g，41.2mmol)与BOC-L-缬氨酸(8.95g，41.2mmol)偶 联。用硅胶快速色谱法进行纯化(最初用CH2Cl2作为洗脱剂，然后用10％ Et2O/CH2Cl2对所需产物进行洗脱)。分离出所需的偶联产物4(15.51g，收 率为64％)，为白色泡沫：
1H NMRδ(CDCl3)6.99-7.64(m， 9H)，5.99-6.34(brm，1H)，2.68-5.26(brm，11H)，1.51-2.15(brm，6H)，1.42(s，9H)， 1.15(s，3H)，0.64-1.02(brm，5H)；LCMS(APCI+)594.2(MH+)，537.9(MH+-tBu)，493.7 (MH+-BOC，100％).
(3S)-4-[(2S)-2-氨基-3-甲基丁酰基]-3-{[(1R)-1，2，3，4-四氢-1-萘基氨基]羰 基}-1-哌嗪甲酸苄酯(5)
用TFA(97mL，1.31mol)在CH2Cl2(500mL)中在与步骤2的条件相同 的条件下对化合物4(15.50g，26.2mmol)进行BOC-去保护。在进行后处理 后，得到所需的游离胺5(12.57g，收率为97％)，为灰白色泡沫：
1H NMRδ (CDCl3)7.28-7.42(m，5H)，7.03-7.19(m，4H)，6.07-6.35(brm，1H)，5.09-5.27(brm，3 H)，3.68-4.81(brm，3H)，2.66-3.53(brm，6H)，1.45-2.04(brm，8H)，0.74-1.00(brm，1 H)；LCMS(APCI+)493.7(MH+，100％).
(3S)-4-[(2S)-2-({(2S)-2-[(叔丁氧羰基)(甲基)氨基]丙酰基}氨基)-3-甲基丁酰 基]-3-{[(1R)-1，2，3，4-四氢-1-萘基氨基]羰基}-1-哌嗪甲酸苄酯(6)
然后，用DIEA(22.3mL，0.13mol)、HBTU(10.64g，28.1mmol)和HOBt (3.79g，28.1mmol)在DMF(550mL)中在与上述步骤1的条件下相同的条件 下将胺5(12.57g，25.5mmol)与BOC-N-甲基-L-丙氨酸(5.18g，25.5mmol)进 行偶联。用硅胶快速色谱法进行纯化(最初用CH2Cl2作为洗脱剂，然后用 50％Et2O/CH2Cl2对所需的产物进行洗脱)。分离出所需的偶联产物6(15.30 g，收率为89％)，为白色泡沫：
1H NMRδ(CDCl3)7.28-7.38(brm，5H)， 7.03-7.19(brm，4H)，6.73(brs，1H)，6.02-6.35(brm，1H)，5.05-5.26(brm，4H)，3.84- 4.82(brm，5H)，2.68-3.56(brm，9H)，1.70-2.07(brm，5H)，1.47(s，9H)，0.60-1.33(br m，8H)；LCMS(APCI+)679.0(MH+)，579.0(MH+-BOC，100％)；HPLC(C18柱)99.4％.
甲基[(1S)-1-甲基-2-({(1S)-2-甲基-1-[((2S)-2-{[(1R)-1，2，3，4-四氢-1-萘基氨基] 羰基}哌嗪基)羰基]丙基}氨基)-2-氧代乙基]氨基甲酸叔丁酯(7)
将化合物6(13.02g，19.2mmol)溶于MeOH(600mL)中，向其中加入5％ Pd/C(1.80g)。将该混合物在氢气气氛(40psi)下在压力容器中搅拌2小时。 然后，通过用硅藻土过滤除去催化剂并从所得的滤液中除去溶剂，得到油 状物粗品，将其用硅胶快速色谱法进行纯化(5％MeOH/CH2Cl2)。得到所 需的产物7(9.71g，收率为93％)，为白色泡沫：
1H NMRδ(CDCl3)7.02-7.20(m，4H)，6.71 (brs，1H)，6.37(brd，J＝8.8Hz，1H)，4.16-5.13(brm，4H)，3.10-3.71(brm，3H)，2.64- 2.84(brm，7H)，1.58-2.11(brm，7H)，1.46(s，9H)，1.30(d，J＝7.1Hz，2H)，0.86-1.02 (brm，3H)，0.75(d，J＝6.7Hz，2H)，0.53(brd，J＝6.7Hz，2H)；LCMS(APCI+)544.9 (MH+)，444.6(MH+-BOC)，260.2(MH+-二肽，100％)；HPLC(C8柱)95.2％.
用醛对7进行还原胺化的操作的实例
(1S)-2-({(1S)-1-[((2S)-4-异丁基-2-{[(1R)-1，2，3，4-四氢-1-萘基氨基]羰基}哌 嗪基)羰基]-2-甲基丙基}氨基)-1-甲基-2-氧代乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(8， R＝异丁基)
将中间体7(250mg，0.46mmol)溶于1，2-二氯乙烷(4mL)中，向其中加 入异丁醛(63μL，0.69mmol)和NaBH(OAc)3(146mg，0.69mmol)。将该混合 物在N2下在RT下搅拌过夜。此时LCMS表明有少量未进行反应的起始 材料，因此另外加入一定量的异丁醛(63μL，0.69mmol)和NaBH(OAc)3(146mg，0.69mmol)。在RT下另外搅拌4小时后，将反应混合物用CH2Cl2(50mL)稀释，然后用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤并干燥(Na2SO4)。过滤后， 在减压下除去溶剂，得到油状物，将其用硅胶快速色谱法进行纯化(10-50％ Et2O/CH2Cl2)。分离出标题化合物(255mg，收率为92％)，为白色泡沫：
1H NMRδ(CDCl3)6.72-7.27(m，5H)，4.37-5.24brm，5H)，3.26-3.90(brm，2H)， 2.67-2.96(brm，6H)，1.62-2.19(m，11H)，1.48(s，9H)，1.23-1.34(m，3H)，0.69-0.99(m， 12H)；LCMS(APCI+)601.3(MH+，100％).
7与磺酰氯反应的方法的实例
甲基[(1S)-1-甲基-2-({(1S)-2-甲基-1-[((2S)-4-(苯基磺酰基)-2-{[(1R)-1，2，3，4- 四氢-1-萘基氨基]羰基}哌嗪基)羰基]丙基}氨基)-2-氧代乙基]氨基甲酸叔丁 酯(8，R＝苯磺酰基)
将中间体7(200mg，0.37mmol)溶于无水CH2Cl2(4mL)中并将烧瓶在 N2下密封。加入DIEA(96μL，0.56mmol)，然后加入苯磺酰氯(46μL， 0.36mmol)，然后将混合物在RT下搅拌2小时。随后，将反应物用CH2Cl2(50mL)稀释，用饱和NaHCO3(50mL)、盐水(50mL)洗涤并干燥(Na2SO4)。 在过滤后，在减压下除去溶剂，得到油状物，将其用硅胶快速色谱法进行 纯化(25％Et2O/CH2Cl2)。分离出标题化合物(216mg，收率为86％)，为无 色玻璃状物：
1H NMRδ(CDCl3) 7.51-7.86(m，5H)，7.03-7.25(m，4H)，6.69(v brs，1H)，6.04(brd，J＝8.2Hz，1H)，5.16- 5.25(m，1H)，4.29-4.75(brm，3H)，3.47-4.21(brm，3H)，2.69-2.88(brm，5H)，2.38-2.67 (m，2H)，1.81-2.09(m，5H)，1.55(s，3H)，1.46(s，9H)，1.23-1.31(brm，2H)，0.84-0.92 (brm，3H)，0.76(d，J＝6.7Hz，2H)；LCMS(APCI+)685.6(MH+，100％).
7与异氰酸酯反应的方法的实例
(1S)-2-({(2S)-4-[(苄基氨基)羰基]-2-{[(1R)-1，2，3，4-四氢-1-萘基氨基]羰基}哌 嗪基)羰基]-2-甲基丙基}氨基)-1-甲基-2-氧代乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(8， R＝苄基氨基甲酰基)
将中间体7(133mg，0.245mmol)溶于无水CH2Cl2(5mL)中，向其中加 入异氰酸苄酯(32μL，0.258mmol)。将溶液在室温下搅拌16小时，其后再加 入异氰酸苄酯(10μL，0.08mmol)，将溶液在室温下再搅拌5小时。在减压 下除去溶剂，得到油状物，将其用硅胶快速色谱法进行纯化(95∶5 CH2Cl2/MeOH)。分离出标题化合物(152mg，收率为92％)，为白色泡沫：
1H NMRδ(CDCl3)6.05-7.90(m，11H)，3.82-5.24(m，9H)，2.60-3.20(m，8H)， 1.60-2.12(m，5H)，1.49 and 1.47(s，9H总)，1.24-1.34(m，3H)，1.11(d，1H，J＝7Hz)， 1.02(d，2H，J＝6.7Hz)，0.75(d，2H，J＝6.7Hz)，0.55(brd，2H，J＝6.1Hz)；LCMS (APCI+)678.6(MH+，100％).
11与羧酸反应的方法的实例
(1S)-2-({(1S)-1-[((2S)-4-[4-(乙酰氨基)苯甲酰基]-2-{[(1R)-1，2，3，4-四氢-1-萘 基氨基]羰基}哌嗪基)羰基]-2-甲基丙基}氨基)-1-甲基-2-氧代乙基(甲基)氨 基甲酸叔丁酯[8，R＝4-(乙酰氨基)苯甲酰基]
将中间体7(191mg，0.351mmol)溶于DMF(10mL)中，向其中加入 DIEA(0.305mL，1.75mmol)。将该混合物在室温下搅拌0.5小时。加入4- 乙酰氨基苯甲酸(66mg，0.368mmol)，继续搅拌1小时。然后，加入HOBt (52mg，0.385mmol)和HBTU(146mg，0.385mmol)并将整个混合物在室温下 搅拌2小时。将反应混合物用EtOAc(100mL)稀释并依次用1M柠檬酸、 盐水、饱和NaHCO3、盐水、水和盐水洗涤。然后，将EtOAc层用MgSO4干燥，过滤，然后在室温下在减压下除去溶剂，得到无色的树胶状物质。 将该物质用硅胶快速色谱法进行纯化(EtOAc)，得到白色泡沫形式的标题 化合物(211mg，收率为85％)：
1H NMRδ(CDCl3)6.40-7.62(m，11 H)，4.25-5.30(m，5H)，3.93(“brd”，1H，Jobs＝11.9Hz)，3.47(“brtd”，1H，Jobs＝11.4，3 Hz)，2.65-3.30(brm，7H)，1.70-2.22(brm，8H)，1.48 and 1.46(s，9H总)，1.28-1.34(m， 3H)，0.60-1.12(brm，7H)；LCMS(APCI+)706.7(MH+，100％).
7与氨基甲酰氯反应的方法的实例
甲基[(1S)-1-甲基-2-({(1S)-2-甲基-1-[((2S)-4-[(甲基苯氨基)羰基]-2-{[(1R) -1，2，3，4-四氢-1-萘基氨基]羰基}哌嗪基)羰基]丙基}氨基)-2-氧代乙基]氨基 甲酸叔丁酯(8，R＝N-甲基-N-苯基氨基甲酰基)
将中间体7(175mg，0.322mmol)溶于无水CH2Cl2(15mL)中，向其中加 入DIEA(70μL，0.40mmol)。将溶液冷却至0℃并加入N-甲基-N-苯基氨基 甲酰氯(66mg，0.39mmol)，随后，将溶液加温至室温4小时。加入N-甲基 -N-苯基氨基甲酰氯(66mg，0.39mmol)和DIEA(70μL，0.40mmol)并将溶液 在室温下搅拌15小时。将溶液用CH2Cl2(50mL)稀释并用饱和NaHCO3和盐水洗涤。将溶液干燥(MgSO4)，过滤，在减压下除去溶剂，得到油状 物形式的粗品。将该物质用硅胶快速色谱法进行纯化(0-5％ MeOH/CH2Cl2)。分离出标题化合物(168mg，收率为77％)，为白色泡沫：
1H NMRδ(CDCl3)6.60-7.60 (m，10H)，4.19-5.20(m，5H)，3.62(“brd”，1H，Jobs＝13.2Hz)，3.52(“brd”，1H，Jobs＝13.4 Hz)，2.56-3.28(m，10H)，1.72-2.10(m，5H)，1.47 and 1.45(s，9H总)，1.24-1.32(brm，3 H)，0.88-1.12(m，2H)，1.09(brd，1H，J＝6.7Hz)，0.90(dd，2H，J＝7.0，2.6Hz)，0.78(br d，2H，J＝6.7Hz)，0.66(brd，2H，6.7Hz；LCMS(APCI+)678.6(MH+，100％).
7与硼酸反应的方法的实例
(1S)-2-({(1S)-1-[((2S)-4-(4-氟苯基)-2-{[(1R)-1，2，3，4-四氢-1-萘基氨基]羰基} 哌嗪基)羰基]-2-甲基丙基}氨基)-1-甲基-2-氧代乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯 (8，R＝4-氟苯基)
将中间体7(486mg，0.89mmol)、4-氟苯基硼酸(625mg，4.47mmol)、 Cu(OAc)2(406mg，2.24mmol)和TEA(451mg，4.47mmol)称重并加入烧瓶 中，然后溶于无水CH2Cl2(20mL)中。将该混合物在室温下搅拌24小时， 此时LCMS表明已经形成了一些所需产物。再加入另一份硼酸(625mg， 4.47mmol)并将混合物再搅拌24小时，使所需产物产生主峰，同时具有一 些未反应的起始材料。将该反应混合物减压浓缩，然后直接加样到二氧化 硅塞上，用10％Et2O/CH2Cl2洗脱以对所需产物进行分离。在这些条件下， 未反应的起始材料保留在柱的基线上。分离出标题化合物(188mg，收率为 33％)，为灰白色泡沫：
1H NMR δ(CDCl3)6.92-7.42(m，8H)，6.74(v brs，1H)，6.09(brd，J＝8.4Hz，1H)，3.97-5.27(br m，6H)，3.35-3.56(brm，2H)，2.62-3.16(brm，7H)，1.65-2.14(m，5H)，1.47(s，9H)，1.31 (brd，J＝7.1Hz，2H)，1.14(brd，J＝7.1Hz，1H)，0.98(brt， J＝7.3Hz，2H)，0.79(brd，J ＝6.7Hz，2H)，0.61(brd，J＝6.7Hz，2H)；LCMS(APCI+)639.4(MH+，100％).
11与氯甲酸酯反应的方法的实例
(3S)-4-[(2S)-2-({(2S)-2-[(叔丁氧羰基)(甲基)氨基]-丙酰基}氨基)-3-甲基丁酰 基]-3-{[(1R)-1，2，3，4-四氢-1-萘基-氨基]羰基}-1-哌嗪甲酸4-氟苯基酯(8， R＝4-氟苯氧基羰基)
将中间体7(200mg，0.37mmol)溶于无水CH2Cl2(4mL)中并将烧瓶在 N2下进行密封。加入DIEA(96μL，0.56mmol)，然后加入苯磺酰氯(46μL， 0.36mmol)，然后将混合物在RT下搅拌2小时。随后，将反应物用CH2Cl2(50mL)稀释并用饱和NaHCO3(50mL)、盐水(50mL)洗涤并干燥(Na2SO4)。 在过滤后，在减压下除去溶剂，得到油状物，将其用硅胶快速色谱法进行 纯化(20％Et2O/CH2Cl2)。分离出标题化合物(146mg，收率为58％)，为无 色玻璃状物：
1H NMRδ(CDCl3) 6.97-7.23(m，8H)，6.74(v brs，1H)，6.12-6.29(brm，1H)，5.08-2.25(m，2H)，3.90-4.86 (brm，5H)，2.89-3.77(brm，4H)，2.66-2.83(brm，5H)，1.89-2.10(brm，2H)，1.68-1.88 (brm，3H)，1.47(s，9H)，1.28-1.36(brm，2H)，0.57-1.05(brm，6H)；LCMS(APCI+)683.7 (MH+，100％).
化合物A
(S)-4-异丁基-1-[(S)-3-甲基-2-((S)-2-甲基氨基-丙酰基氨基)-丁酰基]-哌嗪-2- 甲酸[(1R)1，2，3，4-四氢-萘-1-基)]-酰胺(9，R＝异丁基，化合物A)。
将(1S)-2-({(1S)-1-[((2S)-4-异丁基-2-{[(1R)-1，2，3，4-四氢-1-萘基氨基]羰 基}哌嗪基)羰基]-2-甲基丙基}氨基)-1-甲基-2-氧代乙基(甲基)氨基甲酸叔丁 酯(8，R＝异丁基)(250mg，0.42mmol)溶于CH2Cl2(7mL)和TFA(1.55ml)的 混合物中。将该混合物在N2下在RT下搅拌过夜。在减压下除去所有的溶 剂，得到油状物，将其溶于CH2Cl2(50mL)中，然后用饱和NaHCO3(50mL) 和盐水(50mL)洗涤。将CH2Cl2溶液干燥(Na2SO4)，过滤，在减压下除去 溶剂，得到白色泡沫形式的标题化合物(157mg，收率为73％)。将该泡沫 (150mg，0.30mmol)溶于EtOAc(10mL)和MeOH(2mL)的混合物中，然后加 入无水柠檬酸(58mg，0.30mmol)。将混合物在RT下搅拌1小时，然后在减 压下除去溶剂，得到白色固体，将其加入最少量水(约2-3mL)中并过滤。 将该溶液冷冻干燥，得到相应的柠檬酸盐(193mg)，为蓬松的白色固体：
1H NMRδ(d6-DMSO)10.30(brs，4H)，8.39-8.64 (m，1H)，8.09-8.19(m，1H)，7.05-7.30(m，4H)，4.55-5.03(brm，3H)，3.00-4.20(brm，7 H)，2.63-2.82(brm，3H)，2.46(s，3H)，1.78-2.18(m，7H)，1.63-1.76(brm，3H)，1.28-1.32 (brm，3H)，0.79-0.96(brm，12H)；13C NMRδ(d6-DMSO)176.5，171.1，170.7，170.3， 169.0，168.8，168.5，168.0，137.2，137.0；137.0，128.6，128.5，128.4，128.0，126.6，126.5， 125.8，125.6，71.2，65.6，56.3，54.6，53.5，53.4，52.3，46.5，44.0，43.3，31.2，31.2，29.7， 29.3，28.6，24.9，20.5，20.4，20.4，20.3，20.0，19.9，19.3，19.2，17.5，17.4，16.2；LCMS (APCI+)500.9(MH+，100％)；
HPLC(C18柱)98.1％；HRMS计算值：MH+C28H46N5O3 500.3601，
实测值：500.3601。
化合物B
(S)-4-苯磺酰基-1-[(S)-3-甲基-2-((S)-2-甲基氨基-丙酰基氨基)-丁酰基]- 哌嗪-2-甲酸[(1R)-1，2，3，4-四氢-萘-1-基]-酰胺(9，R＝苯磺酰基，化合物B)： 其可以按照合成化合物A的方法来制备。
化合物C
(S)-4-[(S)-3-甲基-2-((S)-2-甲基氨基-丙酰基氨基)-丁酰基]-哌嗪-1，3-二 甲酸1-苄基酰胺3-{[(1R)-1，2，3，4-四氢-萘-1-基]}-酰胺](9，R＝苄基氨基甲 酰基，化合物C)：其可以按照合成化合物A的方法来制备。
化合物D
(S)-4-(4-乙酰氨基-苯甲酰基)-1-[(S)-3-甲基-2-((S)-2-甲基氨基-丙酰基 氨基)-丁酰基]-哌嗪-2-甲酸(1，2，3，4-四氢-萘-1-基)-酰胺(9，R＝4-(乙酰氨基) 苯甲酰基，化合物D)：其可以按照合成化合物A的方法来制备。
化合物E
(S)-4-[(S)-3-甲基-2-((S)-2-甲基氨基-丙酰基氨基)-丁酰基]-哌嗪-1，3-二 甲酸1-(甲基-苯基-酰胺)3-{[(1R)-1，2，3，4-四氢-萘-1-基)-酰胺]}(9，R＝N-甲基 -N-苯基氨基甲酰基，化合物E)：其可以按照合成化合物A的方法来制 备。
化合物F
(S)-4-(4-氟-苯基)-1-[(S)-3-甲基-2-((S)-2-甲基氨基-丙酰基氨基)丁酰 基]-哌嗪-2-甲酸[(1R)-1，2，3，4-四氢-萘-1-基)]-酰胺(9，R＝4-氟苯基，化合物 F)：其可以按照合成化合物A的方法来制备。
化合物G
(S)-4-[(S)-3-甲基-2-((S)-2-甲基氨基-丙酰基氨基)-丁酰 基]-3-[(1R)-1，2，3，4-四氢-萘-1-基氨基甲酰基}-哌嗪-1-甲酸4-氟-苯基酯(9， R＝4-氟苯氧基羰基，化合物G)：其可以按照合成化合物A的方法来制备。
表A中的化合物通常可以由一般可以获得的起始材料按照系列A的操 作来制备。
系列B的合成，例如化合物H
(S)-4-苄基-哌嗪-1，2-二甲酸1-叔丁基酯2-甲基酯(3)：在N2下，向配有 搅拌棒的干燥的100.0ml单颈圆底烧瓶中加入(S)-1-N-Boc-哌嗪-2-甲酸甲 酯(800mg，3.275mmol)。向烧瓶中加入无水乙腈(20ml)，然后加入苄基氯 (0.38ml，3.275mmol)和三乙胺(1.28ml，9.17mmol)。然后，将冷凝器加到烧 瓶上并将反应混合物在71℃下加热20分钟。使反应混合物回复至室温并 减压浓缩。然后，将其用二氯甲烷稀释并用水和盐水洗涤。将有机层用 Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将粗品化合物采用己烷和乙酸乙酯梯度溶 剂系统经过快速柱色谱法纯化，得到570mg(52％)所需产物。
其水浴温度优选不超过20℃，否则会发生差向异构化。
(S)-4-苄基-哌嗪-1，2-二甲酸1-叔丁酯(4)：向包含化合物3(720mg， 2.15mmol)的圆底烧瓶中加入MeOH(20ml)，然后加入1N NaOH(12.9ml， 12.9mmol)，在室温下搅拌过夜，这时LCMS在321(M+H)下表现出产物 峰。将反应混合物减压浓缩以除去甲醇。用乙酸将其pH酸化至大约3。然 后，将混合物用DCM进行萃取并将有机物用水洗涤两次和用盐水洗涤一 次。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到白色固体4(615mg，收 率为89％)。HPLC表明化合物4的纯度高于98％。
(S)-4-苄基-2-[(R)-(1，2，3，4-四氢-萘-1-基)氨基甲酰基]-哌嗪-1-甲酸叔丁 酯(6)：在N2下，将无水DMF(20ml)加入到包含化合物4(325mg， 1.014mmol)的100ml的圆底烧瓶中。10分钟后，向烧瓶中加入二异丙基胺 (0.88ml，5.07mmol)。然后，将其在室温下搅拌1.5小时。然后，向烧瓶中 加入(R)-1，2，3，4-四氢-1-萘基胺(149.3mg，1.014mmol)并将其搅拌1小时。 向反应物中加入HBTU(423.07mg，1.115mmol)，然后加入HOBT(152.1mg， 1.126mmol)。然后，将反应混合物在室温下在N2下搅拌过夜，此时LCMS 表明反应完全。然后，将其用EtOAc稀释，随后用1.0M柠檬酸、盐水、 饱和碳酸氢钠、盐水、水和盐水洗涤。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并 减压浓缩。将粗品化合物采用己烷和乙酸乙酯梯度溶剂系统、通过快速柱 色谱法进行纯化，得到423mg(93％)所需产物6。HPLC表明该化合物的 纯度高于99％。
(S)-4-苄基-哌嗪-2-甲酸[(1R)-1，2，3，4-四氢-萘-1-基]-酰胺(7)在N2下， 将二氯甲烷(15ml)加入到包含化合物6(423mg，0.941mmol)的100ml圆底 烧瓶中。向烧瓶中加入TFA(3.84ml，49.86mmol)并将其搅拌过夜。在 LCMS表明反应完全时将反应混合物减压浓缩。然后，将其用DCM稀释 并用饱和碳酸氢钠溶液将其pH碱化至大约10。将有机层用盐水洗涤并用 Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到白色泡沫状的化合物7(324mg，收率 为99％)。
((S)-1-{(S)-4-苄基-2-[(R)-(1，2，3，4-四氢-萘-1-基)氨基甲酰基]-哌嗪-1-羰 基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸叔丁酯(9)：在N2下，将无水DMF(11ml)加入 到包含化合物7(190mg，0.544mmol)的100ml圆底烧瓶中。10分钟后，向 烧瓶中加入二异丙基胺(0.473ml，2.72mmol)。然后，将其在室温下搅拌1 小时。然后，向烧瓶中加入Boc-L-缬氨酸(118.19mg，0.544mmol)并将其搅 拌1小时。向反应物中加入HBTU(227mg，0.598mmol)，然后加入HOBT (81.6mg，0.604mmol)。然后，将反应混合物在室温下在N2下搅拌过夜，此 时LCMS表明反应完全。然后，将其用EtOAc稀释并随后用1.0M柠檬酸、 盐水、饱和碳酸氢钠、盐水、水和盐水洗涤。将有机层用Na2SO4干燥， 过滤并减压浓缩，得到356mg(＞100％)所需产物9。
(S)-1-((S)-2-氨基-3-甲基-丁酰基)-4-苄基-哌嗪-2-甲酸[(1R)-1，2，3，4-四 氢-萘-1-基]-酰胺(10)：在N2下，将二氯甲烷(10ml)加入到包含化合物9 (300mg，0.547mmol)的100ml圆底烧瓶中。向烧瓶中加入TFA(2.23ml， 28.98mmol)并将其搅拌过夜。在LCMS表明反应完全时将反应混合物减压 浓缩。然后，将其用DCM稀释并用饱和碳酸氢钠溶液将其pH碱化至大 约10。将有机层用盐水洗涤并用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到白 色泡沫状的化合物10(250mg，收率＞100％)。HPLC表明化合物10的纯度 为95％。
[(S)-1-((S)-1-{(S)-4-苄基-2-[(R)-(1，2，3，4-四氢-萘-1-基)氨基甲酰基]-哌 嗪-1-羰基}-2-甲基-丙基氨基甲酰基)-乙基]-甲基-氨基甲酸叔丁酯(12)：在 N2下，将无水DMF(12ml)加入到包含化合物10(245mg，0.547mmol)的 100ml圆底烧瓶中。10分钟后，向烧瓶中加入二异丙基胺(0.476ml， 2.735mmol)。然后，将其在室温下搅拌1小时。然后，向烧瓶中加入Boc-N- 甲基-L-丙氨酸(111.17mg，0.547mmol)并将其再搅拌1小时。向反应物中加 入HBTU(228.22mg，0.602mmol)，然后加入HOBT(82.05mg，0.607mmol)。 然后，将反应混合物在室温下在N2下搅拌过夜，此时LCMS表明反应完 全。然后，将其用EtOAc稀释，随后用1.0M柠檬酸、盐水、饱和碳酸氢 钠、盐水、水和盐水洗涤。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。 将粗品化合物采用己烷和乙酸乙酯梯度溶剂系统、通过快速柱色谱法纯化， 得到294mg(85％)白色泡沫状的所需产物12。
(S)-4-苄基-1-[(S)-3-甲基-2-((S)-2-甲基氨基-丙酰基氨基)-丁酰基]-哌嗪 -2-甲酸[(1R)-1，2，3，4-四氢-萘-1-基]-酰胺
在N2下，将二氯甲烷(9.0ml)加入到包含化合物12(294mg，0.464mmol) 的100ml圆底烧瓶中。向烧瓶中加入TFA(1.89ml，24.58mmol)并将其搅拌 过夜。在LCMS表明反应完全时将反应混合物减压浓缩。减压浓缩。将其 进一步与己烷和乙醚一起共沸，得到灰白色固体。将该粗品化合物采用乙 腈和0.1％TFA水溶液的溶剂系统、通过HPLC纯化，得到最终化合物， 实施例1(290mg，96.5％)。HPLC表明该化合物的纯度高于99％。
化合物H.TFA盐 化合物H.柠檬酸盐
将实施例1-TFA盐(216mg，0.33mmol)溶于EtOAc中并用饱和碳酸氢 钠溶液洗涤两次。水层的pH大约为10。将有机层用盐水洗涤并用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将其进一步在高真空下干燥，以定量收率得到白 色泡沫。然后，将其重新溶于EtOAc(10ml)和EtOH(0.2ml)中。向烧瓶中 加入无水柠檬酸固体(59mg，0.31mmol)并在N2下搅拌1小时。将反应混合 物减压浓缩，得到白色固体。将其在高真空下干燥(225mg，94％)。
药物组合物
本发明还包括包含药物有效量的一种或多种上述化合物作为活性成分 的药物组合物。本发明的药物组合物适于单独或与一种或多种可药用载体 一起经肠(如经口或直肠)施用和经胃肠道外适用于哺乳动物、包括人来治 疗增殖性疾病、包括肿瘤、尤其是癌性肿瘤和其它癌。
本发明的化合物可用于制备具有与经肠或胃肠道外应用的赋形剂或载 体组合或混合的、有效量的化合物的药物组合物。其实例包括片剂和明胶 胶囊，其包含活性成分和(a)稀释剂；(b)润滑剂；(c)粘合剂(片剂)；如果需 要的话，还包含(d)崩解剂；和/或(e)吸收剂、着色剂、矫味剂和甜味剂。 可注射的组合物优选是等张的含水溶液或混悬液，栓剂有利地由脂肪乳剂 或混悬液制得。组合物可以被灭菌和/或包含助剂，如防腐剂、稳定剂、润 湿剂或乳化剂、溶液促进剂、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂。此外，组 合物还可以包含其它有治疗价值的物质。组合物分别根据常规的混合、制 粒或包衣方法来制备，并且优选包含约1至50％的活性成分。
更通常而言，本发明还涉及本发明化合物在制备药物、特别是在制备 用于治疗增殖性疾病的药物中的用途。
还包括上下文的药物组合物用于治疗增殖性疾病的用途。
适宜的制剂还包括用于胃肠道外施用的制剂，例如水性和非水性无菌 注射溶液，其可包含抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂与所需领受者的 血液等张的溶质；和水性和非水性无菌混悬液，其可包含助悬剂和增稠剂。 制剂可以存在于单位剂量或多剂量容器如密封的安瓿和小瓶中，并且可以 在冷冻干燥条件下储存，其仅需要在临用前加入无菌液体载体如注射用水。
临时性注射溶液和混悬液可以由无菌粉末、颗粒和前述类型的片剂来 制备。
药物组合物包含药物有效量的本发明的活性剂和可药用的赋形剂、载 体、填充剂、稀释剂等。本文所用的术语治疗有效量表示施用于宿主以获 得治疗结果、尤其是抗肿瘤作用、例如抑制恶性癌细胞、良性肿瘤细胞或 其它增殖细胞的增殖所必需的量。
如上所讨论的那样，本发明的化合物可用于治疗增殖性疾病。因此， 本发明还涉及治疗增殖性疾病的方法，该方法包括给需要该治疗的哺乳动 物、优选人施用治疗有效量的本发明的化合物。
增殖性疾病主要是肿瘤疾病(或癌症)(和/或任意转移瘤)。
本发明的化合物特别可用于治疗肿瘤，所述肿瘤是乳癌、泌尿生殖器 癌、肺癌、胃肠癌、表皮样癌、黑素瘤、卵巢癌、胰腺癌、成神经细胞瘤、 头和/或颈癌或膀胱癌，或者广义上的肾、脑或胃癌；特别是(i)乳房肿瘤； 表皮样肿瘤，如表皮样头和/或颈肿瘤或口腔肿瘤；肺部肿瘤，例如小细胞 或非小细胞肺肿瘤；胃肠肿瘤，例如结肠直肠肿瘤；或泌尿生殖器肿瘤， 例如前列腺肿瘤(尤其是激素难以治疗的前列腺肿瘤)；或(ii)用其它化疗法 难以治疗的增殖性疾病；或(iii)由于多重耐药性而用其它化疗法难以治疗的 肿瘤。在本发明的广义上，增殖性疾病还可以是过度增殖性病症，如白血 病、超常增殖、纤维化(尤其是肺纤维化，但也可以是其它类型的纤维化， 如肾纤维化)、血管生成、银屑病、动脉粥样硬化和血管平滑肌增殖，如狭 窄或血管成形术后再狭窄。
在提及肿瘤、肿瘤疾病、癌或癌症时，还指最初的器官或组织和/或任 意其它位置中的转移，不管肿瘤和/或转移的位置如何。
本发明的化合物对快速增殖性细胞相对于对正常细胞具有选择性毒性 或毒性更高，特别是在人的癌细胞如癌性肿瘤中，化合物具有显著的抗增 殖作用，促进分化如细胞周期停滞和细胞凋亡。
本发明的化合物可以单独或与其它抗癌剂联合给药，所述的其它抗癌 剂例如是抑制肿瘤血管生成的化合物，如蛋白酶抑制剂、表皮生长因子受 体激酶抑制剂、血管内皮生长因子受体激酶抑制剂等；细胞毒药物，如抗 代谢物，如嘌呤和嘧啶类似物抗代谢物；抗有丝分裂剂如微管稳定药和抗 有丝分裂的生物碱；铂配位复合体；抗肿瘤抗生素；烷化剂，如氮芥和亚 硝基脲；内分泌剂，如肾上腺皮质类固醇类、雄激素药、抗雄激素药、雌 激素药、抗雌激素药、芳香酶抑制剂、促性腺激素释放激素激动剂和促生 长素抑制素类似物以及靶向于过表达和/或在其它方面参与在肿瘤细胞中 失调的特定代谢途径的酶或受体的化合物，例如ATP和GTP磷酸二酯酶 抑制剂、组蛋白脱乙酰酶抑制剂、蛋白激酶抑制剂如丝氨酸、苏氨酸和酪 氨酸激酶抑制剂，例如Abelson蛋白酪氨酸激酶和各种生长因子、它们的 受体和其激酶抑制剂，如表皮生长因子受体激酶抑制剂、血管内皮生长因 子I受体激酶抑制剂、成纤维细胞生长因子抑制剂、胰岛素样生长因子受 体抑制剂和血小板衍生生长因子受体激酶抑制剂等；蛋氨酸氨基肽酶抑制 剂、蛋白酶体抑制剂和环氧合酶抑制剂，例如环氧合酶-1或-2抑制剂。
本发明还涉及在迅速增殖的细胞中促进细胞凋亡的方法，其中所述方 法包括使迅速增殖的细胞与促细胞凋亡有效量的IAP抑制剂(IAPI)接触。 IAPI化合物优选是本发明的式I化合物。
实施例
实施例1
下述化合物采用文献中的方法进行制备，并通过HPLC-MS进行验证。
实施例2.试验
细胞增殖试验
用CellTiter 96AQueous非放射性细胞增殖试验(Promega)对本发明化 合物体外抑制肿瘤细胞生长的能力进行监测。本试验包括新型四唑化合 物[3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑， 内盐；MTS]和电子偶联试剂(吩嗪硫酸甲酯)PMS。MTS被细胞生物还原成 甲产物，其吸收度在490nm下测量。由代谢活性细胞中发现的脱氢酶来 完成MTS向水溶性甲产物的转化。通过490nm吸光度的量测量的甲产 物的量与培养物中活细胞的数目成正比。表1-3中所列化合物在所述细胞 试验中的IC50值范围为＜0.01nM至＞10μM。优选化合物的数值范围为 0.005-10μM。
为了测量本发明化合物与BIR3肽结合袋结合的能力，利用建立在 FMAT或ELISA技术平台上的溶液相试验(solution phase assay)。
Fmat
将生物素化的Smac 7-mer肽(AVPIAQK，赖氨酸ε-氨基被生物素化) 固定在链霉抗生物素涂布的小珠上。使GST-BIR3融合蛋白用FMAT小珠 沉淀，采用荧光标记的抗-GST抗体进行检测。重要的是，未被生物素化的 Smac肽在竞争GST-BIR3使其不结合到FMAT小珠方面十分有效。未被 生物素化的Smac的IC50为400nM。表1-3所列化合物在所述FMAT试 验中的IC50值范围为0.025至高于10μM。
Elisa
将化合物与GST-BIR3融合蛋白和生物素化的SMAC肽(AVPFAQK) 一起在链霉抗生物素涂布的96孔板中进行培养。对于XIAP BIR3 Smac Elisa而言，使用包含得自XIAP的第248-358位氨基酸的GST-BIR3融合。 对于CIAP1 BIR3 Smac Elisa而言，使用包含得自CIAPI的第259-364位 氨基酸的GST-BIR3融合。培养30分钟后，对这些孔进行大量洗涤。用 ELISA试验对剩余的GST-BIR3融合蛋白进行监测，试验包括首先用羊抗 -GST抗体进行培养，然后洗涤和用碱性磷酸酯酶轭合抗羊抗体进行培养。 用Attophos(Promega)扩增信号，并用Cytoflour Ex 450nm/40和Em 580nm进行读数。IC50相当于置换一半GST-BIR3信号的化合物浓度。 未被生物素化的Smac的IC50为400nM。表1-3中所列化合物在所述 ELISA试验中的IC50值范围为0.005μM至高于10μM。
实施例3
系列A化合物对XIAP的IC50值。如实施例2所述在现有技术中建 立能测量Smac肽-(XIAP)BIR3蛋白-蛋白相互作用的破坏的试验。在该试 验中，IAP抑制剂化合物与被固定的Smac肽竞争来占据XIAP的BIR3 结合袋。该策略的原理来源于Caspase 9或Smac与BIR3袋的结合的相互 排斥性质。
进行试验并如下计算IC50值：
IC50计算
输入在固定模上进行3×4μL终止试验，不进行洗涤
背景(3个孔)用H2O代替酶进行试验
阳性对照(4个孔)用3％DMSO代替化合物
浴对照(1个孔)无反应混合物
通过对各化合物在4个浓度(通常从10μM开始的3-或10-倍稀释系列) 下的抑制百分比进行对数回归分析来计算IC50值。在各实验中，对于IC50 值的标准化，采用参比化合物的实际抑制作用作为参比抑制剂的平均值的 基础：
标准化IC50＝测得的平均IC50参比IC50/测得的参比IC50
采用本文所述的和本领域众所周知的化合物的活性测定采用随后的式 (I)测试化合物。如表2所示，系列A测试化合物显示出对XIAP的活性。 本文所用的“活性”被定义为具有对IAP靶标抑制的IC50值低于10μM。 具体而言，在该表中：
“X”表示对XIAP的IC50值低于10μM。
“-”表示对XIAP的IC50值等于或高于10μM。
实施例4
提供了系列B化合物对XIAP而言的IC50值。该试验采用本领域众 所周知的方法如上所述来进行。
采用如本文所述的和如本领域众所周知的测试方法进行的化合物的活 性测定采用式(I)测试化合物来进行。如表3所示，系列B测试化合物显示 出对抗XIAP的活性。如本文所用的“活性”被定义为具有对IAP靶标抑 制的IC50值低于10μM。具体而言，在该表中：
“X”表示对XIAP的IC50值低于10μM。
“-”表示对XIAP的IC50值等于或高于10μM。
等同物
虽然本文已经详细公开了特定的实施方案，但是其仅仅是为了解释说 明的目的，而不意欲限制随后所附的权利要求的范围。具体而言，本发明 的发明人预期，可以在不背离权利要求所定义的本发明的主旨和范围的情 况下对本发明进行各种替代、变动和修改。确信起始材料、合成方法或反 应条件的选择对于了解本文所述的实施方案的普通技术人员而言是常规的 选择。认为其它方面、优点和修改也在随后的权利要求的范围内。
机译： 2-氨基羰基取代的哌嗪或二氮杂循环化合物作为凋亡蛋白抑制剂（IAP）调节剂
机译： 2-氨基羰基取代的哌嗪或二氮杂循环化合物作为凋亡蛋白抑制剂（IAP）调节剂
机译： 2-氨基碳取代的哌嗪或二氮杂循环化合物作为凋亡蛋白抑制剂（IAP）调节剂
