一种化州柚黄酮提取物的膜分离制备方法

摘要

本发明涉及一种化州柚黄酮提取物的膜分离制备方法，其特征在于该方法包含下列步骤：取化州柚药材饮片，煎煮1～3次，每次加水5～30倍量，煎煮10分钟～2小时，滤过，合并水煎液，先以陶瓷膜(孔径0.1～0.8μm)滤过，再以有机膜(截留分子量为2000～8000)滤过，滤液浓缩至相对密度为1.05～1.20，放置析出沉淀，过滤，取沉淀干燥，即得化州柚黄酮提取物，该提取物柚皮苷含量高于60％。

说明书

所属技术领域

本发明涉及一种化州柚黄酮提取物的膜分离制备方法。

背景技术

目前我国中药普遍存在服用量大、质量不稳定的缺点，其根本原因是中药生产过程中提取和分离技术落后，表现为工艺繁杂，成本高，环境污染严重，劳动强度大，且药效成分提取率不高。因此，要把中药真正推向世界市场，必须对传统中药工业进行一场革命性的高技术改造。

膜分离技术是21世纪最有发展前景的分离新技术，它作为现代制药工业技术革新的重要手段，具有分离效率高、设备简单、操作方便和节能等优点，在制药工业中具有良好的应用前景。

化州柚Citrus grandis(L.)Osbeck var.tomentosaHort.又称化州仙橘，系芸香科柑桔属植物，为柚Citrus grandis(L.)Osbeck的栽培变种，主产于广东化州，是广东地道药材。化州柚的未成熟或近成熟的干燥外层果皮经加工即为中药化橘红，习称“毛橘红”，具有化痰、理气、健胃、消食之功效，用于治疗胸中痰滞，咳嗽气喘，呕吐呃逆，饮食积滞等症。黄酮是其活性部位。

本发明的目的是提供一种化州柚黄酮提取物的膜分离制备方法。

发明内容

本发明目的在于提供一种化州柚黄酮提取物的膜分离制备方法。

本发明提供的一种化州柚黄酮提取物的膜分离制备方法包含下列步骤：取化州柚药材饮片，煎煮1～3次，每次加水5～30倍量，煎煮10分钟～2小时，滤过，合并水煎液，先以陶瓷膜(孔径0.1～0.8μm)滤过，再以有机膜(截留分子量为2000～8000)滤过，滤液浓缩至相对密度为1.05～1.20，放置析出沉淀，过滤，取沉淀干燥，即得化州柚黄酮提取物，该提取物柚皮苷含量高于60％。

化州柚提取物中柚皮苷的含量是采用高效液相色谱法测定的，具体测定方法如下：色谱条件：色谱柱：C₁₈柱；流动相：甲醇-醋酸-水(35∶4∶61)；检测波长：283nm；流速：1ml/min。

对照品溶液的制备：精密称取柚皮苷对照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密量取3ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得(每1ml中含柚皮苷60g)。

供试品溶液的制备：精密称取化州柚黄酮提取物30mg，置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密量取3ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

测定法：分别精密吸取对照品溶液51、供试品溶液51，注入液相色谱仪，测定。以外标一点法计算柚皮苷含量。

具体实施方式

以下通过具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1.

取1千克化州柚药材饮片，水煎煮提取3次，每次加水15倍量，每次煎煮1小时，滤过，合并滤液。分别取上述滤液四份，每份8升，用不同孔径的陶瓷膜过滤，结果见表1。不同孔径陶瓷膜均可滤过得到较澄清溶液，但以0.2μm效果最好。

表1不同孔径的陶瓷膜过滤效果

  膜孔径 陶瓷膜过滤后的滤液量(L)  过滤情况  0.1μm  0.2μm  0.5μm  0.8μm 68 67 63 62  较快  快，前后变化不大  初时较快，后来变慢  初时较快，后来变慢

实施例2.平行称取化州柚药材饮片9份，每份1000克，以提取时间(A)、提取次数(B)、加水量(C)、有机膜孔径(D)为考察因素，以黄酮提取物得量为考察指标，用L₉(3⁴)正交表安排试验。在实验中，无机陶瓷膜的孔径固定为0.2μm，最终液体浓缩至相对密度为1.10，放置48小时后取沉淀干燥。试验方案及结果分别见表2、表3。

表2因素、水平表

  水平  因素  提取时间A  提取次数B  加水量(倍)C 有机膜孔径D  1  2  3  10分钟  1小时  2小时  1  2  3  5  10  30 2000 6000 8000

表3正交试验结果

  试验号  因素  黄酮提取物得量  (g)  柚皮苷含量  (％)  A  B  C  D  1  2  3  4  5  6  7  8  9  1  1  1  2  2  2  3  3  3  1  2  3  1  2  3  1  2  3  1  2  3  2  3  1  3  1  2  1  2  3  3  1  2  2  3  1  35.5  55.6  65.5  55.4  83.1  59.0  64.6  61.1  80.2  61.5  64.3  63.3  65.5  64.9  66.2  65.7  64.1  62.5  K₁  K₂  K₃  R  156.6  197.5  205.9  49.3  155.5  199.8  204.7  49.2  155.6  191.2  213.2  57.6  198.8  179.2  182  19.6

实验结果表明：不同条件得到的化州柚黄酮提取物柚皮苷含量均高于60％；直观分析表明：水煎煮提取3次，每次加水10倍量，每次煎煮1小时为佳；有机膜的孔径对实验结果的影响较小。

实施例3

取化州柚药材饮片1千克，加水煎煮提取3次，每次加水10倍量，每次煎煮1小时，合并3次水煎煮提取液，以0.2μm的孔径的陶瓷滤膜滤过，滤液再采用截留分子量为2000的有机超滤膜滤过，滤液浓缩至相对密度为1.05，放置1小时，沉淀析出，过滤，取沉淀干燥，得化州柚黄酮提取物47.2克，经分析该提取物柚皮苷含量为66.3％。

实施例4

取化州柚药材饮片1千克，加水煎煮提取3次，每次加水10倍量，每次煎煮1小时，合并3次水煎煮提取液，以0.2μm的孔径的陶瓷滤膜滤过，滤液再采用截留分子量为2000的有机超滤膜滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20，放置48小时，沉淀析出，过滤，取沉淀干燥，得化州柚黄酮提取物80.3克，经分析该提取物柚皮苷含量为67.4％。

实施例5

取化州柚药材饮片1千克，加水煎煮提取3次，每次加水10倍量，每次煎煮1小时，合并3次水煎煮提取液，以0.2μm的孔径的陶瓷滤膜滤过，滤液再采用截留分子量为8000的有机超滤膜滤过，滤液浓缩至相对密度为1.05，放置48小时，沉淀析出，过滤，取沉淀干燥，得化州柚黄酮提取物60.7克，经分析该提取物柚皮苷含量为64.7％。

实施例6

取化州柚药材饮片1千克，加水煎煮提取3次，每次加水10倍量，每次煎煮1小时，合并3次水煎煮提取液，以0.2μm的孔径的陶瓷滤膜滤过，滤液再采用截留分子量为8000的有机超滤膜滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20，放置48小时，沉淀析出，过滤，取沉淀干燥，得化州柚黄酮提取物88.7克，经分析该提取物柚皮苷含量为66.8％。

实施例7

在上述实验的基础上，进行如下中试放大试验：取化州柚药材饮片50千克，加水煎煮提取3次，每次加水10倍量，每次煎煮1小时，合并3次水煎煮提取液，以0.2μm的孔径的陶瓷滤膜滤过，滤液再采用截留分子量为2000的有机超滤膜滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20，放置48小时，沉淀析出，过滤，取沉淀干燥，得化州柚黄酮提取物3.97千克，经分析该提取物柚皮苷含量为63.2％。