诱导白杨派杨树(窄冠杨)胚性细胞发生技术

摘要

一种诱导白杨派杨树(窄冠杨)胚性细胞发生技术，选取窄冠杨优质组培苗茎段切成0.1～0.2cm作为外植体，接种于脱分化培养基中培养，其中，脱分化培养基为：MS+KT 0－0.4mg/L+2，4－D0.1－0.7mg/L，使外植体器官脱分化，形成愈伤组织，然后，对愈伤组织进行再分化培养。本发明的优点是：通过培养基培养，克服了林木生活周期长，个体大的劣势，获得大量的，具有细胞全能性的窄冠杨胚性细胞，为窄冠杨育种提供帮助，特别适用诱变育种。

说明书

技术领域

本发明涉及一种诱导白杨派杨树胚性细胞发生技术，尤其是窄冠杨(白杨派)的胚性细胞发生技术，包括其激素水平及培养日令。

背景技术

窄冠杨是白杨派树种，基本特征是：尖塔形，树体挺直，冠形优美，窄冠，适合田间林粮间作林网，抗风。其生长速度快，三根二干苗高4.5米，胸径1.85厘米；4年生树高达5.3米，胸径4厘米；7年生树高12.7米，胸径12.6厘米。窄冠杨的适生能力强，较耐寒、耐旱，由于窄冠，覆地面积小，是城乡绿化和农田防护林粮间作的优良新品种。适于年均温度2℃以上的地区栽培。

发明内容

本发明的目的在于提供一种诱导白杨派杨树(窄冠杨)胚性细胞发生技术，为窄冠杨胚性细胞的培育提供重要的参考资料。

为达上述目的，本发明诱导白杨派杨树(窄冠杨)胚性细胞发生技术，选取窄冠杨优质组培苗茎段切成0.1～0.2cm作为外植体，接种于脱分化培养基中培养，其中，脱分化培养基为：MS+KT0-0.4mg/L+2，4-D 0.1-0.7mg/L，使外植体器官脱分化，形成愈伤组织，然后，对愈伤组织进行再分化培养。

所述的脱分化培养72～144小时，培养温度为22～26℃，光照时间为12～14小时/天，光照强度为2000～3000lux。

所述的再分化培养基为：MS+6-BA 0-0.5mg/L+ZT 0-0.3mg/L+IAA0-0.5mg/L。

所述的再分化培养时间为72～120小时，培养温度为22～26℃，光照时间为12～14小时/天，光照强度为2000～3000lux。

利用诱导白杨派杨树(窄冠杨)胚性细胞发生技术，培育出大量白杨派杨树(窄冠杨)胚性细胞，从而通过诱变获得变异体。

本发明的优点是：

通过培养基培养，克服了林木生活周期长，个体大的劣势，获得大量的，具有细胞全能性的窄冠杨胚性细胞，为窄冠杨育种提供帮助。

具体实施方式

一种诱导白杨派杨树(窄冠杨)胚性细胞发生技术，选取窄冠杨——光兆3#杨(Populus×leucopylamidalis Guangzhao No3.)优质组培苗茎段切成0.1～0.2cm作为外植体，接种于脱分化培养基，即MS+KT 0.2mg/L+2，4-D 0.4mg/L中培养，培养温度为22～26℃，光照时间为12～14小时/天，光照强度为2000～3000lux，使外植体器官脱分化，形成愈伤组织。

培养96小时后，将愈伤组织转移至再分化培养基，即MS+6-BA0.2mg/L+ZT 0.1mg/L+IAA 0.2mg/L中进行再分化培养，培养96小时，培养温度为22～26℃，光照时间为12～14小时/天，光照强度为2000～3000lux。此时为胚性细胞发生率最高，为50～80％。

利用该诱导白杨派杨树(窄冠杨)胚性细胞发生技术，培育出大量白杨派杨树(窄冠杨)胚性细胞，从而通过诱变获得变异体。