一种蜘蛛中枢神经细胞培养液

摘要

本发明公开了一种蜘蛛中枢神经细胞培养液，其组成成分及配制1000毫升培养液的用量为：Hepes 10.0－11.5毫摩尔，氯化钠223.0－228.0毫摩尔，氯化钾6.8－7.5毫摩尔；氯化钙8.0－8.6毫摩尔；氯化镁5.1－5.7毫摩尔；蔗糖5.0－5.4毫摩尔；谷氨酰胺1.0－1.2毫摩尔，小牛血清200毫升；青霉素(80万U/2ml)0.2－0.5毫升；链霉素(100万U/2ml)0.1－0.5毫升。余量用双重蒸馏水补齐至1000毫升，用1摩尔/升NaOH调pH值至7.3。制备步骤为：(1)将Hepes、氯化钾、氯化钠、氯化钙和氯化镁五种试剂按剂量置于容器中，向容器中加入约300毫升蒸馏水，于37℃下混合溶解，再加入适量的蒸馏水，混合均匀后待用；(2)取密封在容器中的小牛血清置于容器中，在56℃水浴箱内30分钟灭活，冷却至室温后加入到(1)步骤制得的水溶液中；(3)将蔗糖、谷氨酰胺、青霉素和链霉素，加入到(2)步骤的溶液中，充分混匀，直至全部溶解，用1摩尔/升NaOH调pH值至7.3－7.5，然后用蒸馏水补齐至1000毫升；(4)将上述溶液用滤菌器过滤，即得本发明的培养液。该培养基制作简便，成本低，适用于具混合神经的蜘蛛类动物中枢神经细胞的培养。