一种鉴别苹果原汁的方法

摘要

本发明公开了一种苹果原汁的方法。该方法包括如下步骤：1)检测D－苹果酸；2)测定参数指标，计算苹果酸含量。本发明创造性的应用代表苹果原汁特征的数学模型，通过测定各种参数指标完成对样品中苹果酸的测定，排除了各种环境因素的影响，具有系统性和全面性；检测指标测试方法简单，无需借助更昂贵的仪器，在一般的实验室能够完成；方法准确、迅速、易于操作，克服了已有方法的局限性、不准确性以及难操作性等缺点。

说明书

技术领域

本发明涉及鉴别苹果原汁的方法。

背景技术

果汁是水果的精华，富含多种营养成分，而且色泽鲜亮，风味宜人，倍受消费者的青睐。随着人民生活水平的日益提高与需求的不断变化，人们逐渐以果汁及其饮料代替各种人工合成的饮料，果汁类饮料的消费量愈来愈大，然而由于水果原料及生产能力的限制，水果原汁的生产成本较高，由此促使一些不诚实的生产商在纯果汁中加入便宜果汁或者完全以人工合成物质充做果汁饮料，以此获取赢利，据统计，国际上有50-80％的果汁在不同程度上被掺假。2003年12月，国家工商管理局公布的对果汁最新抽查结果显示，总体合格率为55％，其中产品不合格的原因主要是果汁含量和标签不合格。

苹果汁是果汁饮料的主要品种，我国是苹果生产大国，更是苹果汁出口大国，近几年，浓缩苹果汁发展迅速，我国的苹果汁产业市场潜力非常巨大。由于苹果汁是一种多组分的混合体系，性状又受到许多因素的影响，因此，苹果汁的掺假易于发生，掺假果汁的大量存在，严重的损害了消费者的利益和健康。因此为了维护消费者的利益，保证此类产品的进出口质量，促进苹果汁产业的发展，寻找一种科学而实用的、简单而精确的苹果汁真假检测方法，已经迫在眉睫。

目前报道的苹果汁真假的检测方法有：糖类、有机酸、酚类、无机元素、氨基酸等特定成分辨别法和稳定同位素、光谱法、位置特异性天然同位素分级-核磁共振法等特定仪器分析法以及标准样品比较法，这些方法不仅分析程序复杂，耗时长，费用高，而且需要借助昂贵的分析仪器设备来进行，有些在普通的实验室难以完成；同时由于水果原汁所含成分很多，其所含成分的种类和数量随品种、产地、气候、耕作方法、年份、肥料、农药等因素的变化而变化，而现有的这些方法没有考虑这些因素的影响，缺乏一定的系统性和完整性，在应用上存在各自的局限性，有时结果容易出现误判现象。

发明内容

本发明的目的是提供一种简便、操作性强的鉴定苹果原汁真假的方法。

本发明所提供的鉴别苹果原汁的方法，包括如下步骤：

1)测定样品D-苹果酸的含量，若样品中存在D-苹果酸，则说明样品为掺杂果汁；若样品中不存在D-苹果酸，则进行第二步；

2)利用酸碱滴定法测定样品中总酸值X₁，以g/100ml计，并且0.15g/100mL≤X₁；

利用3，5二硝基水杨酸比色法测定总糖值，得到总糖值/总酸值X₂，并且9.60≤X₂≤99.14；

利用HPLC法测定样品中果糖X₃和葡萄糖/果糖X₄，并且3.34g/100ml≤X₃≤7.93g/100ml，0.33≤X₄≤0.88；

利用HPLC法测定样品中香豆酸X₅，以mg/L计；

测定缓冲容量X₆：用0.1mol/L NaOH滴定果汁样品，用pH计测定pH值，按100ml果汁变化1个pH单位所用NaOH的体积计算缓冲容量X₆，以ml计，并且13ml≤X₆≤50.60ml；

然后，按照公式I计算样品中L-苹果酸Y，以mg/L计；

Y＝12.41+38.76X₁-40.74X₄-2.69X₅-294.27X₁²+35.36X₄²+0.25X₅²-0.089X₆²-1.82X₁*X₂-9.97X₁*X₆-0.026X₂*X₃+0.0127X₂*X₅+0.029X₂*X₆+2.13X₃*X₄-0.042X₃*X₅-0.358X₄*X₆           (公式I)

采用HPLC测定样品中L-苹果酸值Y_A，以mg/ml计，并且1.67mg/mL≤Y_A；

如果Y_A＝Y±0.20，则说明该样品为苹果原汁；反之，为掺杂果汁。

本发明创造性的应用代表苹果原汁特征的数学模型，通过测定各种参数完成对样品中苹果酸的测定，排除了各种环境因素的影响，具有系统性和全面性；检测指标测试方法简单，无需借助更昂贵的仪器，在一般的实验室能够完成；方法准确、迅速、易于操作，克服了已有方法的局限性、不准确性以及难操作性等缺点。

具体实施方式

实施例1、方法验证

1).自制苹果原汁样品，将其置于4℃冰箱中待测备用，利用HPLC法分析测定样品中的D-苹果酸含量为0mg/L，即在待测样品中没有检测到D-苹果酸，继续步骤2操作。

2).利用HPLC法分析测定样品中的苹果酸含量为3.08mg/mL，即样品中L-苹果酸含量为3.08mg/mL，Y_A≥1.67mg/mL；

利用酸碱滴定法测定样品中的总酸(X₁)为0.276g/100mL，X₁≥0.15g/100mL；

利用3，5二硝基水杨酸比色法测定样品中的总糖，得到总糖/总酸(X₂)为36.59，9.60≤X₂≤99.14；

利用HPLC法测定样品中的果糖(X₃)和葡萄糖/果糖(X₄)，得到果糖(X₃)为5.31g/100mL，葡萄糖/果糖(X₄)为0.60，3.34g/100mL≤X₃≤7.93g/100mL，0.33≤X₄≤0.88；

利用HPLC法测定样品中的香豆酸(X₅)为2.94(mg/L)；

准确移取待测果汁样品50ml，用0.1mol/L NaOH滴定，用pH计测定pH值，得到缓冲容量(X₆)为22.76mL，13mL≤X₆≤50.60mL，继续步骤3操作。

3).将以上所测各值代入二项式模型中：

Y＝12.41+38.76X₁-40.74X₄-2.69X₅-294.27X₁²+35.36X₄²+0.25X₅²-0.089X₆²-1.82X₁*X₂+9.97X₁*X₆-0.026X₂*X₃+0.0127X₂*X₅+0.029X₂*X₆+2.13X₃*X₄-0.042X₃*X₅-0358X₄*X₆

计算得到Y＝3.06mg/mL，由于Y_A＝3.08mg/mL，满足Y_A＝Y±0.20条件，证明待测样品为苹果原汁，说明了本发明方法的准确性与可靠性。

实施例2“汇源100％苹果汁”的真假鉴定

1)取市售“汇源100％苹果汁”500mL置于4℃冰箱中待测备用，利用HPLC法分析测定样品中的D-苹果酸含量为0mg/L，即在待测样品中没有检测到D-苹果酸，继续步骤2操作。

2)利用HPLC法分析测定样品中的苹果酸含量为3.41mg/mL，即样品中L-苹果酸含量为3.44mg/mL，Y_A≥1.67mg/mL；

利用酸碱滴定法测定样品中的总酸(X₁)为0.34g/100mL，X₁≥0.15g/100mL；

利用3，5二硝基水杨酸比色法测定样品中的总糖，得到总糖/总酸(X₂)为27.66，9.60≤X₂≤99.14；

利用HPLC法测定样品中的果糖(X₃)和葡萄糖/果糖(X₄)，得到果糖(X₃)为6.57g/100mL，葡萄糖/果糖(X₄)为0.52，3.34g/100mL≤X₃≤7.93g/100mL，0.33≤X₄≤0.88；

利用HPLC法测定样品中的香豆酸(X₅)为0.00(mg/L)；

准确移取待测果汁样品50ml，用0.1mol/L NaOH滴定，用pH计测定pH值，得到缓冲容量(X₆)为13.70mL，13mL≤X₆≤50.60mL，继续步骤3操作。

3).将以上所测各值代入二项式模型中：

Y＝12.41+38.76X₁-40.74X₄-2.69X₅-294.27X₁²+35.36X₄²+0.25X₅²-0.089X₆²-1.82X₁*X₂+9.97X₁*X₆-0.026X₂*X₃+0.0127X₂*X₅+0.029X₂*X₆+2.13X₃*X₄-0.042X₃*X₅-0.358X₄*X₆

计算得到Y＝3.41mg/mL，由于Y_A＝3.44mg/mL，满足Y_A＝Y±0.20条件，可判定“汇源100％苹果汁”为苹果原汁。

实施例3“大湖100％苹果汁”的真假鉴定

1).取市售“大湖100％苹果汁”600mL置于4℃冰箱中待测备用，利用HPLC法分析测定样品中的D-苹果酸含量为0mg/L，即在待测样品中没有检测到D-苹果酸，继续步骤2操作。

2).利用HPLC法分析测定样品中的苹果酸含量为5.11mg/mL，即样品中L-苹果酸含量为5.11mg/mL，Y_A≥1.67mg/mL；

利用酸碱滴定法测定样品中的总酸(X₁)为0.50g/100mL，X₁≥0.15g/100mL；

利用3，5二硝基水杨酸比色法测定样品中的总糖，得到总糖/总酸(X₂)为21.00，9.60≤X₂≤99.14；

利用HPLC法测定样品中的果糖(X₃)和葡萄糖/果糖(X₄)，得到果糖(X₃)为8.06g/100mL，葡萄糖/果糖(X₄)为0.80，3.34g/100mL≤X₃≤7.93g/100mL，0.33≤X₄≤0.88；

利用HPLC法测定样品中的香豆酸(X₅)为2.24(mg/L)；

准确移取待测果汁样品50ml，用0.1mol/L NaOH滴定，用pH计测定pH值，得到缓冲容量(X₆)为20.80mL，13mL≤X₆≤50.60mL，继续步骤3操作。

3).将以上所测各值代入二项式模型中：

Y＝12.41+38.76X₁-40.74X₄-2.69X₅-294.27X₁²+35.36X₄²+0.25X₅²-0.089X₆²-1.82X₁*X₂+9.97X₁*X₆-0.026X₂*X₃+0.0127X₂*X₅+0.029X₂*X₆+2.13X₃*X₄-0.042X₃*X₅-0.358X₄*X₆

计算得到Y＝5.21mg/mL，由于Y_A＝5.11mg/mL，满足Y_A＝Y±0.20条件，可判定“大湖100％苹果汁”为苹果原汁。

实施例4“第五季”苹果汁饮料是否100％苹果原汁的鉴定

取市售“第五季”苹果汁饮料样品600mL，利用HPLC法分析测定样品中的D-苹果酸含量为1579mg/L，在待测样品中检测到了D-苹果酸的存在，说明该样品非真正的100％苹果原汁，为苹果汁饮料，无需进行后续操作。