朱砂根及同属植物中三萜总皂甙及制备方法

摘要

本发明是用乙醇或甲醇回流,经大孔树脂提取朱砂根等中所含有的三萜总皂甙成分制成抗肿瘤中药制剂。紫金牛科紫金牛属植物朱砂根(Ardisia.crenate)、紫金牛(A.japonica)、百两金(A..crispa)、罗金树(A..quinquengona)、九节龙(A.pusilla)等植物中,含有2～5%五环三萜总皂甙类成分。这类成分对小鼠多种移植性肿瘤(体内试验)以及多种人瘤细胞(体外试验)均有明显的肿瘤抑制作用,通过数例肿瘤患者口服试用后,其临床检验结果表明具有一定的抗肿瘤活性。

说明书

本发明属于中药技术领域，特别是涉及一种抗肿瘤中药三萜总皂甙及制备方法，三萜总皂甙来源于紫金牛科紫金牛属植物朱砂根(Ardisia.crenate)、紫金牛(A.japonica)、百两金(A..crispa)、罗金树(A..quinquengona)、九节龙(A.pusilla)。肿瘤是当前世界范围内人类死亡率较高的病种之一，为此人们投入大量人力物力研究开发抗肿瘤的新药。寻找疗效好、毒性小的抗肿瘤药物，国内外广大药物研究者，从植物中分离提取得到了一些化学物质，但是真正能够开发成药品的数量不多，而且筛选费用很高，投入人力物力很大，所以寻找安全有效、成本适当的抗肿瘤药物仍是当前的很重要的任务。

本发明的目的是建立一种能够提取朱砂根及同属植物中抗肿瘤三萜总皂甙的方法，将它研制成为抗肿瘤新药。

朱砂根是紫金牛科紫金牛属植物的根(Ardisia crenatesims)，始载于《本草纲目》，具有清热解毒、散瘀止痛等功效，临床用于上感、扁桃体炎、白喉、丹毒、淋巴结炎、风湿、跌打损伤等疾病。本文在总结民间用药经验的基础上，将朱砂根、紫金牛、百两金、罗金树、九节龙三萜总皂甙进行了多项抗肿瘤实验，结果显示有较强的抗肿瘤活性：体外药效学显示，三萜总皂甙对白血病细胞(HL-60)、肺癌细胞(PG)、口腔上皮癌细胞(KB)有明显抑制作用。小鼠移植性肿瘤实验，使用2mg-200mg/kg剂量，对S₁₈₀-肉瘤、U₁₄-宫颈瘤、肝H₂₂肿瘤、肺癌等均有抑制作用。LD₅₀＝1802mg/kg，是最高有效剂量的10倍，与其它抗肿瘤药物相比其毒性较小，可制成抗肿瘤新药。

三萜总皂甙对小鼠肿瘤瘤重抑制率(％)

  瘤株种类      抑制率S₁₈₀-肉瘤    30～40％U₁₄-宫颈瘤    25～30％肝H₂₂肿瘤    35～50％Lewis肺癌    40～60％三萜总皂甙提取工艺：

将朱砂根或同属植物根洗净，粉碎过20目筛，称取1公斤放入回流提取器内，加入10～100％乙醇或甲醇，加热回流30～60分钟，滤出提取液，残渣按此方法再提取一遍，滤出提取液与第一次提取液合并，将合并提取液减压浓缩至1立升，离心25分钟(3000转/分)倾出上清液，加入到4升大孔树脂(HP-20)柱上，先以清水冲洗25升，再以50--100％乙醇洗脱20升并收集洗脱液，将洗脱液减压浓缩在1.5～1.6升，然后减压真空干燥(55～60℃、0.08Mpa以上)，取出粉碎成细粉，加入细粉的10倍量85～100％乙醇，搅拌溶解放置过夜，离心15分钟(3000rpm)倾出上清液，减压浓缩至90-100ml，减压真空干燥(60～65℃、0.08Mpa以上)，取出粉碎，得朱砂根三萜总皂甙。经过我们多年的试验研究，从朱砂根及同属植物中分离得到总皂甙，是指三萜皂甙(结构式附后)。

                 R₁                      R₂

                 CH₂OH                 

                 CH₂OH                 

                 CHO                      

                 CHO