表达重组IL-2的重组大肠杆菌Nissle 1917及其功能验证方法

摘要

本发明提供了一种表达重组IL‑2的重组大肠杆菌Nissle 1917及其功能验证方法。该技术方案首先将重组IL‑2的编码基因通过酶切酶连的方法与pet28c载体连接，再利用所得的重组质粒转化至大肠杆菌Nissle 1917中，从而得到重组大肠杆菌Nissle 1917。本发明中采用的重组IL‑2去除了天然IL‑2的α亚基，因而避免了毒副作用；在此基础上，利用大肠杆菌Nissle 1917在肿瘤内聚集的特性，使其位点特异性地实现重组IL‑2蛋白的表达，从而更准确地杀伤肿瘤细胞，降低对机体正常细胞的损伤。在此基础上，本发明提供了考察该重组菌抗肿瘤功效的一种实验方法，将活化后的菌株采用尾静脉注射的方式处理黑色素瘤动物模型，再考察其肿瘤体积的变化。