一种灌肠治疗溃疡性结肠炎的复方药物及其制备方法与应用

摘要

本发明公开了一种灌肠治疗溃疡性结肠炎的复方药物，它包括如下重量份数的组分：黄柏15～40份，地榆15～30份，白及6～20份，三七粉1～6份，紫草5～20份，紫珠叶5～20份，乌梅6～20份，五味子6～20份。本发明还公开了上述复方药物的制备方法和应用。本发明提出了从“内疡”学说创新了中医外治法治疗溃疡性结肠炎，并从病机、治法、方药等方面进行了系统的阐述，对本病的治疗起到了理论上的指导作用；为临床治疗溃疡性结肠炎这一难治性疾病提供有效的治疗药物，且经济实用，临床应用前景广阔；灌肠液的制备方法，简单快速、高效，易于操作，方便服用。

说明书

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种灌肠治疗溃疡性结肠炎的复方药物及其制备方法与应用。

背景技术

溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis，UC)是一种主要累及直肠、结肠黏膜的慢性非特异性炎症，以腹痛、腹泻、脓血便为主要表现，属炎症性肠病范畴。其病程特点是慢性、迁延、反复发作，镜下表现为黏膜充血、肿胀、糜烂，形成特征性的隐窝脓肿，从疮疡论治，本病当属“内痈”“内疡”“阴疮”等。《外科发挥》认为：“溃疡为疮疡已出脓者”，现代医学认为脓腐的破溃疮面均为溃疡。“腐”的存在是疮疡难愈的重要原因。《医宗金鉴》提出：“腐者，坏肉也……腐不去则新不生，盖以腐能浸淫好肉也……盖祛腐之药，乃疡科之要药也”。指出了祛腐的必要性，必须先祛除坏死组织，才能加速伤口的愈合。因此，中医外治法在UC的治疗上显示出广阔的前景。

溃疡性结肠炎的病变部位大部分位于直肠及结肠下段，因此中药保留灌肠是目前国内普遍使用的UC局部疗法，作用直接、疗效显著。其优点在于：一方面灌肠给药可使药物直达病所，并使之充分接触病灶，从而快速提高病变部位的血药浓度，使药物迅速被吸收，充分发挥药物的局部治疗作用；另一方面，药物经结直肠吸收后，大部分可不经过肝脏而直接进入体循环，对全身发挥治疗作用，减少了肝脏解毒过程对药效的影响。直肠给药还可以防止胃肠道酸碱和消化酶对药物的破坏。此外，与口服给药相比，避免了口服中药的苦涩感。特别对年老体弱，或同时患有消化系统疾病、不宜口服药物的患者更具有重要意义。

溃疡性结肠炎的中药灌肠外治多参用清热解毒、凉血消痈、托疮排脓、敛疮生机之法，可加快黏膜修复。中药灌肠液多为自拟方或传统方剂的加减运用，主要为经验方，目前尚未形成公认的规范和标准。目前临床上缺乏最佳药物配比的复方药物，尚不能推广运用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种疗效高、副作用小的灌肠治疗溃疡性结肠炎的复方药物。

本发明还要解决的技术问题是提供上述复方药物的制备方法。

本发明最后要解决的技术问题是提供上述复方药物的应用。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种灌肠治疗溃疡性结肠炎的复方药物，它包括如下重量份数的组分：黄柏15～40份，地榆15～30份，白及6～20份，三七粉1～6份，紫草5～20份，紫珠叶5～20份，乌梅6～20份，五味子6～20份。

上述灌肠治疗溃疡性结肠炎的复方药物优选包括如下重量份数的组分：黄柏30份，地榆20份，白及10份，三七粉3份，紫草15份，紫珠叶15份，乌梅10份，五味子10份。

上述灌肠治疗溃疡性结肠炎的复方药物的制备方法，将配方量的黄柏、地榆、白及、三七粉、紫草、紫珠叶、乌梅和五味子混合，加水煎煮1～4次，每次1～3h，合并煎煮液过滤得到滤液，减压浓缩后过滤或者离心，再继续减压浓缩至每ml相当于1克饮片，分装，流通蒸汽灭菌45分钟，灭菌，即得灌肠液。

其中，水的加入重量为中药混合物重量的5～20倍。

上述灌肠治疗溃疡性结肠炎的复方药物的制备方法，还可以根据需要，将配方量的黄柏、地榆、白及、三七粉、紫草、紫珠叶、乌梅和五味子混合，加水煎煮1～4次，每次1～3h，合并煎煮液过滤得到滤液，减压浓缩后过滤或者离心，清液继续减压浓缩至稠膏，干燥，粉碎，灭菌，备用。

上述灌肠治疗溃疡性结肠炎的复方药物在制备治疗溃疡性结肠炎局部灌肠药物中的应用。本发明的复方药物经过多年临床验证，具有清肠化湿、生肌敛疡之功效，用于溃疡性结肠炎局部灌肠治疗。

有益效果：本发明提出了从“内疡”学说创新了中医外治法治疗溃疡性结肠炎，并从病机、治法、方药等方面进行了系统的阐述，对本病的治疗起到了理论上的指导作用；为临床治疗溃疡性结肠炎这一难治性疾病提供有效的治疗药物，且经济实用，临床应用前景广阔；灌肠液的制备方法，简单快速、高效，易于操作，方便服用。

1、理论创新：“内疡”学说与生肌敛疡治疗：提出本病因湿热蕴肠，阻滞气血，损伤肠络，血败肉腐，以致肠膜生疡，是谓“内疡”的观点，这一病机的特点常贯彻病程的终始，故不论病情虚实如何，这一标象始终存在，治疗用药要根据这一特点配合清热消疡的药物，同时在活动期要汲取外科治疮疡的用药经验，采用灌肠法给予袪腐生肌敛疡的治疗，有助于提高临床疗效。

2、组方独特：灌肠治疗参用清热解毒、凉血消痈、托疮排脓、敛疮生肌之法予中药局部灌肠外治，可加快黏膜修复。选用黄柏清热解毒，地榆、凉血消痈，三七化瘀止血药，如，乌梅、五味子涩肠止泻，白及敛疮生肌，紫草、紫珠叶凉血止血。紫草凉血行瘀，用常规凉血药效欠著者，加入紫草、紫珠叶，常获良效。本方集清热解毒、凉血消痈、涩肠止泻、化瘀止血，采用灌肠之法直达病所，修复肠黏膜。

附图说明

图1为动物实验，药物治疗后各组大鼠结肠组织病理形态。

空白对照组大鼠结肠黏膜组织结构完整，未见黏膜糜烂溃疡形成；

模型组大鼠可见大面积溃疡形成，大量中性粒细胞、淋巴细胞等炎性细胞浸润，腺体破坏，结构紊乱，杯状细胞减少。

灌肠组及SASP组较模型组好转，灌肠组表现为中度慢性炎症，黏膜及黏膜下层仍有中等量炎细胞浸润，溃疡基本愈合局部黏膜糜烂。

具体实施方式

根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。

实施例1：

一种灌肠治疗溃疡性结肠炎的复方药物，包括如下重量份数的组分：黄柏30份，地榆20份，白及10份，三七粉3份，紫草15份，紫珠叶15份，乌梅10份，五味子10份。

制备方法：将配方量的黄柏、地榆、白及、三七粉、紫草、紫珠叶、乌梅和五味子混合，加10倍重量的水煎煮2次，每次1h，合并煎煮液过滤得到滤液，减压浓缩至适量，直管式高速离心机离心转速1～2万转/分钟，再继续减压浓缩至每ml相当于1克饮片，分装，流通蒸汽灭菌45分钟，即得灌肠液

实施例2：

一种灌肠治疗溃疡性结肠炎的复方药物，包括如下重量份数的组分：黄柏15份，地榆15份，白及6份，三七粉1份，紫草5份，紫珠叶5份，乌梅6份，五味子6份。

制备方法：将配方量的黄柏、地榆、白及、三七粉、紫草、紫珠叶、乌梅和五味子混合，加20倍重量的水煎煮3h，煎煮液过滤得到滤液，减压浓缩至适量，直管式高速离心机离心转速1～2万转/分钟，再继续减压浓缩至每ml相当于1克饮片，分装，流通蒸汽灭菌45分钟，即得灌肠液。

实施例3：

一种灌肠治疗溃疡性结肠炎的复方药物，包括如下重量份数的组分：黄柏40份，地榆30份，白及20份，三七粉6份，紫草20份，紫珠叶20份，乌梅20份，五味子20份。

制备方法：将配方量的黄柏、地榆、白及、三七粉、紫草、紫珠叶、乌梅和五味子混合，加5倍重量的水煎煮4次，每次1h，合并煎煮液过滤得到滤液，减压浓缩至适量，直管式高速离心机离心转速1～2万转/分钟，再继续减压浓缩至每ml相当于1克饮片，分装，流通蒸汽灭菌45分钟，即得灌肠液。

实施例4：

(1)实验材料

1.1实验动物：健康雄性SD大鼠，体重(220±30)g，由江苏省中医院药理实验室实验动物中心提供，常规饲养。

1.2实验药物：试验组：复方灌肠组(实施例1)；对照组：柳氮磺胺吡啶片(维柳芬)购于海三维制药有限公司。

(2)方法

2.1动物造模及分组给药：40只Balb/c小鼠随机分为3组：复方灌肠组、SASP组、空白对照组，每组10只。造模方法：禁食24h后，10％水合氯醛腹腔注射麻醉；将灌胃针轻轻插入小鼠肛门，并推入TNBS溶液(100mg/kgTNBS+等体积50％乙醇)，捏紧肛门，提尾倒立3min后，自然苏醒，常规饲养。灌肠液浓度3g/ml(6.67ml/kg)，造模24h后各组开始给药。模型组及正常对照组给予等体积生理盐水，每日1次，连续10天。

2.3标本留取：末次给药后禁食24h，处死小鼠，取其结肠组织(约5cm)，沿肠系膜纵轴剪开，用冷生理盐水冲洗干净，留取标本用于指标检测。

(3)统计学处理

应用SPSS 19.0统计软件，数据以x士s表示。计量资料的多组间比较用方差分析,不符合方差齐性及正态分布的采用秩和检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

(4)观察项目

4.1一般情况

造模成功后，每天观察大鼠精神状态、毛发色泽、进食进水量、体质量、大便情况等变化。对大鼠体质量增加百分比进行统计分析。

4.2体质量增加百分比＝(第十天大鼠体质量﹣第一天大鼠体质量)/第一天大鼠体质量*100％

4.3结肠大体形态：

肉眼观察大鼠结肠大体形态，记录其是否有充血、水肿、糜烂、溃疡等情况，并根据参考文献[Strober W，Fuss I J，Blumberg RS.The immunology of mucosal models ofinflammation.Annu Rev Immunol，2002；20:495-549.]进行评分。

①无损伤，0分；

②黏膜充血、水肿、未出现溃疡，1分；

③黏膜充血、水肿、轻度糜烂、无溃疡，2分；

④黏膜充血、水肿、中度糜烂、有单个溃疡，3分；

⑤黏膜充血、水肿、高度糜烂、有多个溃疡，4分；

⑥黏膜充血、水肿、中度糜烂、有>1cm的溃疡，5分

4.4结肠组织病理学检查：

光镜下观察结肠黏膜组织HE染色切片，参照Dieleman LA等的标准进行对溃疡深度、范围、炎症程度进行组织学评分。

表1结肠组织病理学评分标准

4.5ELISA法检测细胞因子IL-17、TGF-β水平

在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100ul，在第一、第二孔中加标准品稀释液50ul混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100ul分别加到第三、第四孔，以此类推直至第九、第十孔，混匀后各取50ul弃掉。分别设空白孔、待测样品孔，待测样品孔中先加样品稀释液40ul，然后再加待测样品10ul，用封板膜封板后，置37℃温育30min。小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满稀释30倍后的洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。除空白孔外，每孔加入酶标试剂50ul。再次温育与洗涤，每孔加入显色剂A50ul，再加入显色剂B50ul，轻轻混匀，37℃避光显色15min。每孔加终止液50ul终止反应(此时蓝色立即转黄色)，以空白孔调零，15min，450nm波长依序测量各孔OD值。

5)统计学处理：

应用SPSS 19.0统计分析软件，计量资料若符合方差齐性及正态分布用t检验，不符合方差齐性或正态分布秩和检验，计数资料用卡方检验或秩和检验。以P<0.05作为所检验的差别有统计学意义，P<0.01作为所检验的差别有显著统计学意义。

6)结果

6.1一般情况：与正常组相比，造模成功后的大鼠均出现不同程度的精神萎靡、倦怠、嗜睡、毛发杂乱无光泽，进食进水量少，大便性状也有所变化。正常组大便多偏干，成粒状。模型组稀便较重，成糊样，恶臭味，有两只在造模第六、八天出现肉眼血便。灌肠组有时稀便，大便多质软成形，未观察到明显血便。

6.2体质量增加百分比

表2各组体质量增加情况(x±s)

注：与模型组比较，^*P＜0.05

正常组与模型组相比，有显著统计学意义(P＜0.01)。灌肠组和SASP组体质量增加与模型组相比，有统计学意义(P＜0.05)。与SASP组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。(见表2)

6.3结肠大体形态：

正常组大鼠结肠组织黏膜光滑平整，皱襞纹理清晰，未见黏膜充血水肿，无溃疡，肠组织间无粘连，肠壁未增厚。模型组大鼠结肠可见广泛充血水肿，伴糜烂，肉眼可见溃疡形成，皱襞消失，肠壁增厚，甚至形成巨结肠，肠道粘连，肠腔积气，组织质地脆，牵拉易断裂。经药物干预后的大鼠结肠病变明显减轻，皱襞较正常，局部黏膜充血水肿，偶见数枚浅溃疡，肠道无粘连，肠腔无明显积气。

表3各组结肠组织大体形态评分(X±s)

注：与模型组比较，^*P＜0.05

正常组与模型组相比，有显著统计学意义(P＜0.01)。灌肠组和SASP组体质量增加与模型组相比，有统计学意义(P＜0.05)。与SASP组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。(见表3)

6.4结肠组织病理学检查：

正常组大鼠结肠组织光镜下组织形态正常，肠壁结构清晰，腺体均匀，未见充血、糜烂、溃疡，可见少量淋巴滤泡形成。模型组大鼠结肠组织溃疡形成，大量急性炎性细胞浸润，杯状细胞减少，腺体扩张，形成隐窝脓肿。灌肠病变明显减轻，部分黏膜及黏膜下层见少量炎性细胞浸润，溃疡愈合，偶有腺体扩张。

表4各组结肠组织病理评分(x±s)

注：与模型组比较，^*P＜0.05

正常组与模型组相比，有显著统计学意义(P＜0.01)。灌肠组和SASP组体质量增加与模型组相比，有统计学意义(P＜0.05)。与SASP组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)(见表4，图1)。

6.5与正常组比较，造模后结肠组织中IL-16水平显著增高(P＜0.05)，TGF-β水平降低(P＜0.05)；与模型组比较，灌肠组和SASP组IL-6水平均明显降低(P＜0.05)，TGF-β水平升高(P＜0.05)。(见表5)

表5治疗第10天各组大鼠结肠组织TGF-β、IL-6、IL-17水平

注：与模型组比较，^*P＜0.05。

3、讨论：

溃疡性结肠炎的中药灌肠外治多参用清热解毒、凉血消痈、托疮排脓、敛疮生机之法，可加快黏膜修复。中药灌肠液多为自拟方或传统方剂的加减运用，主要为经验方，目前尚未形成公认的规范和标准。

本实验结果表明，采用中药复方灌肠治疗后，复方灌肠组大鼠体质量增加优于模型组，结肠大体形态和病理组织学明显优于模型组，提示中药灌肠复方可以修复结肠黏膜从而治疗溃疡性结肠炎。