禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因壳聚糖纳米DNA疫苗的制备方法

摘要

禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因壳聚糖纳米DNA疫苗的制备方法，涉及疫苗的制备方法；根据禽多杀性巴氏杆菌的基因组序列设计用于扩增ptfa基因的两条引物，PCR扩增出禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因；采用限制性核酸内切酶BamHⅠ和XholⅠ酶切禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因和pcDNA3.1(+)质粒，然后构建禽多杀性巴氏杆菌ptfa重组质粒；然后依次加入硫酸钠、无水醋酸钠、月桂基硫酸钠、氯化钙等物质，混合均匀后即为禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因壳聚糖纳米DNA疫苗。本发明方法制备的疫苗不含有活的病原菌，给动物应用后不会由于疫苗本身的原因而引发禽多杀性巴氏杆菌病，免疫保护率为达到85%，而且该疫苗的本质是含重组质粒的纳米颗粒，因此易于保存和运输。