含有口服抗凝药和B族维生素的药物组合物及其用途

摘要

本发明涉及一种含有新型口服抗凝药物和B族维生素的药物组合物，由治疗有效量的口服抗凝药及其药用前体、活性代谢产物或盐类中的一种、治疗有效量的B族维生素的一种或几种、和药学上可接受的载体组成。其中，新型口服抗凝药主要包括达比加群酯、利伐沙班、阿哌沙班、依度沙班，含量为2.5～200mg；B族维生素主要包括叶酸类化合物(优选)、维生素B6、维生素B12，含量为0.1～50mg。本发明还涉及该组合物在制备用于预防房颤患者发生脑卒中的药物中的用途。由本发明提供的药物组合物制成的药物具有更佳的预防脑卒中效果；此外，本发明还可使患者服药方便，增加依从性。

说明书

技术领域

本发明涉及一种含有口服抗凝药和B族维生素的药物组合物，用于在心房颤动患者中预防脑卒中的抗凝治疗。本发明属于药学领域。 

背景技术

心房颤动(房颤)是一种心血管“流行病”。在我国同期心血管住院患者中，房颤患者所占比例接近10％。房颤可能导致多种不良后果，脑卒中是最严重的并发症之一，房颤可使脑卒中发生率至少增高4～5倍【Hu D,et al.Epidemiology,Risk Factors for Stroke,and Management of Atrial Fibrillation in China.J Am Coll Cardiol,2008；52:865】。研究显示，全球每年有多达300万人罹患与房颤有关的脑卒中。房颤相关性卒中的致残程度更严重，致死危险性更大，半数患者在一年内死亡。 

抗凝治疗是降低房颤相关卒中死亡率的关键。我国首部由中华医学会心血管病学分会牵头制定的《心房颤动抗凝治疗中国专家共识》明确指出，若无禁忌证，CHADS₂评分≥2分的房颤患者，卒中风险较高，应进行长期口服抗凝治疗【胡大一，等.心房颤动抗凝治疗中国专家共识.心脑血管病防治，2012；12(3)：173】。 

口服抗凝治疗的经典老药华法林本身有其短板，如治疗窗窄、在降低卒中风险的同时可能导致出血风险、需要频繁监测凝血功能并调整药物剂量、可能与多种食物及药物相互作用等，这都在一定程度上限制了房颤患者抗凝治疗的依从性。科学家一直致力于寻找替代华法林的新型口服抗凝药物，达比加群酯(dabigatran etexilate)和沙班类抗凝药物的相继问市，为房颤患者带来了抗凝治疗的信心和前景。 

达比加群酯是一种直接的凝血酶(因子IIa)抑制剂，是达比加群(dabigatran)的前体药物，而沙班类抗凝药是一类高选择性、可逆地直接抑制凝血因子Xa的药物，已上市的有利伐沙班(rivaroxaban,阿哌沙班(apixaban，和依度沙班(edoxaban，在研的有betrixaban、LY517717、YM150、DU-176b等。这两类药物通过抑制相应的凝血因子而阻断内源性和外源性凝血途径，均适用于房颤患者预防卒中的长期口服抗凝治疗，且与华法林相比具有不需要常规血液学监测及剂量调整、不受食物影响、出血发生风险低等优势【①Miller CS,et  al.Meta-analysis of efficacy and safety of new oral anticoagulants(dabigatran,rivaroxaban,apixaban)versuswarfarin in patients with atrial fibrillation.Am J Cardiol.2012；110:453.②Patel MR,et al.Rivaroxaban versus warfarin in nonvalvular atrial fibrillation.N Engl JMed,2011；365:883】。 

新型口服抗凝药物在临床应用上仍存在一定问题，比较突出的仍旧是治疗过程中不可避免发生的出血倾向，尤其在剂量加大时，出血发生率比较高，因此仍需要进一步改善。对于房颤患者来说，心房血栓形成、脱落固然是引发卒中的直接原因，但其病理过程并非单一，其中可能涉及其它危险因素。流行病学调研显示，我国卒中发病率远高于欧美国家，但居民携带卒中危险因素(高血压、高血脂、肥胖及糖尿病)比率却低于欧美居民，提示我国存在其它重要危险因素；另一方面，从药理协同作用角度看，药物组合物具有临床价值，每种药物的剂量可有所减少，故不良反应可减轻或部分抵消，而药物治疗作用可相加乃至协同。 

B族维生素包括维生素B₁、维生素B₂、维生素PP、维生素B₆、维生素B₁₂、叶酸、泛酸和生物素等，对机体新陈代谢、红细胞形成、保持神经系统和免疫系统功能具有重要作用。B族维生素属于水溶性维生素，经人体肠道吸收，由尿排出体外，在体内存留时间短暂，很少蓄积，所以必须经常从体外摄取以满足机体营养和代谢需要。B族维生素缺乏可导致诸多不良后果，包括肌无力、精神及神经系统紊乱、消化障碍、皮肤皱裂、严重贫血和心脏损害等。其中，叶酸、维生素B₆、维生素B₁₂缺乏时影响人体内同型半胱氨酸(Homocysteine，Hcy)的生化代谢，研究提示血液Hcy水平升高或叶酸水平降低与卒中风险升高呈显著相关【①Wang X,et al.Efficacy of folic acid supplementation in stroke prevention:a meta analysis.Lancet,2007,369:1876.②Sun Y,et al.Use of serum homocysteine to predict stroke,coronary heart disease and death in Ethnic Chinese:a12-year prospective cohort study.Circ J.2009；73:1423】。 

发明内容

本发明的目的是克服新型口服抗凝药物存在的不足，提供一种在抗凝疗效或预防卒中方面优于这些抗凝药物、而毒副作用不增加或减少的药物组合物。 

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案： 

一种药物组合物，包括 

(1)药用剂量的新型口服抗凝药物及其药用前体、活性代谢产物、或盐类中的 一种； 

(2)药用剂量的B族维生素的一种或多种； 

(3)药剂学上可接受的载体。 

上述的“药用剂量”是指具有协同、预防或治疗的药理作用的量。上述新型口服抗凝药物选自达比加群酯、利伐沙班、阿哌沙班、依度沙班、Betrixaban、LY517717、YM150、DU-176b的一种，B族维生素选自维生素B₆、维生素B₁₂和叶酸类化合物的一种或多种，其中维生素B₆包括吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺、磷酸吡哆醇、磷酸吡哆醛、磷酸吡哆胺及上述物质的衍生物和可在体内代谢和/或生成该类化合物的物质，维生素B₁₂包括钴胺素、甲钴胺素、5′-脱氧腺苷钴胺素、羟钴胺素、氰钴胺素及上述物质的衍生物和可在体内代谢和/或生成该类化合物的物质,叶酸类化合物包括叶酸、5-甲基四氢叶酸、甲酰四氢叶酸、亚叶酸、左亚叶酸钙、叶酸可药用盐或叶酸可药用盐的活性代谢产物和可在体内生成叶酸的物质。 

在本发明中，口服抗凝药物的药用剂量范围分别为达比加群酯(50～220mg)、利伐沙班(2.5～20mg)、阿哌沙班(1～10mg)、依度沙班(10～60mg)；这些药物更佳的安全有效剂量分别为达比加群酯(75～175mg)、利伐沙班(5～15mg)、阿哌沙班(2.5～7.5mg)、依度沙班(15～30mg)。 

在本发明中，B族维生素的药用剂量范围分别为维生素B₆(1～50mg)、维生素B₁₂(0.05～2mg)、叶酸类化合物(0.1～5mg)；这些药物更佳的治疗有效量分别为维生素B₆(10～40mg)、维生素B₁₂(0.1～1mg)、叶酸类化合物(0.4～2mg)。 

本研究发现，B族维生素单用(尤其叶酸)对血管内皮具有一定保护作用，与口服抗凝药物合用能增强对血栓形成的抑制作用。 

根据本发明，药物组合物中的活性成分是组合物中的基本组分，其中一个活性成分来自于新型口服抗凝药物中的一种，另一个活性成分为B族维生素的一种或多种，该药物组合物的剂型包括但不限于普通片剂、双层片剂、多层片剂、缓释片剂、单室控释片剂、双室控释片剂、微孔型控释片剂、舌下含片、口腔速崩片、分散片、肠溶片、延迟释放片、定时/位释放片、普通胶囊、肠溶胶囊、缓释胶囊、控释胶囊、含有微丸或小片的胶囊、含有微丸或小片的pH依赖型胶囊、颗粒剂、丸剂、口服液、膜剂或贴剂。 

在本发明中，可药用载体或赋形剂可制成普通口服制剂，包括普通片剂、普通胶 囊、颗粒剂等，制成片剂时所述可药用载体包括有助于将活性化合物配制成药用制剂的赋形剂和辅料，如微晶纤维素、无机盐类、乳糖、氯化钠、柠檬酸、亚硫酸钠、淀粉、纤维素衍生物、预胶化淀粉，羧甲基淀粉钠，羟丙基淀粉，低取代羟丙基纤维素，交联羧甲基淀粉钠，交联聚乙烯吡咯烷酮，蔗糖、糊精、糖粉、葡萄糖等的一种或几种物质的组合物，属于本领域常识。 

在本发明中，可药用载体或赋形剂可制成缓释制剂，包括赋形剂和辅料等。 

在本发明中，可药用载体或赋形剂可制成缓释胶囊、控释胶囊，含有微丸或小片的胶囊，含有微丸或小片的pH依赖型胶囊，二联胶囊等，包括赋形剂和辅料等。 

术语“药用剂量”是指为达到有效控制或治疗疾病的目的，临床医生根据患病个体病情严重程度对患病个体施与药物的剂量。应当理解本发明提供的药物药用剂量不是对本发明的限制，而是对本发明的优选，通常情况下，在该剂量优选范围内，该药物能够对患病个体产生有效的治疗效果。患病个体是指患有疾病的独立存在的生命体，在本发明中，生命体尤指人类。应当理解，现有技术中，人类药用剂量或药用剂量范围可与哺乳动物，如大鼠、小鼠等进行换算以得出适合相应动物适用的药用剂量或剂量范围。 

本发明提供的药物组合物中的化合物在相同的制剂中可以同时施与患病个体，也可分别地相继施与患病个体。若是相继施与患病个体，则第二个(或附加的)活性成分施与的延迟不应当导致活性成分联合带来的有益效果的损失。若是同时施与患病个体，组合物中的化合物可以混合存在于同一个药物制剂形式中，也可以以同样的制剂形式分别独立存在。若是以同样的制剂形式分别独立存在，则药物组合物可以变通的以“组合药盒”形式存在。“组合药盒”是一种盒状容器，内置一种或多种剂量形式的药物组合及其使用说明书，在本发明中优选所述的新型口服抗凝药物中的一种和B族维生素的一种或多种。 

本发明的另一个目的是提供含有药用剂量的新型口服抗凝药物及其活性代谢产物或其盐类中的一种、药用剂量的B族维生素的一种或多种和可药用载体的药物组合物在制备用于房颤患者预防卒中的抗凝治疗中的用途，更具体地说，是提供在制备用于治疗房颤患者、降低卒中发生危险性的药物的用途。 

本发明的优点：本发明提供了含有药用剂量的新型口服抗凝药物及其活性代谢产物或其盐类中的一种、药用剂量的B族维生素的一种或多种和可药用载体的药物组合 物。口服抗凝药物和B族维生素的联合效果并不是各个活性物质的各自作用的简单相加，而是在患者凝血功能得到更佳改善的基础上减少药物副作用、更加有效地降低卒中风险。也就是说，口服抗凝药物和B族维生素联合用药取得了协同治疗效果，因此是更适宜的抗凝治疗药物。 

下面结合具体实施方式对本发明做进一步说明，并非对本发明的限定，凡依照本发明内容进行的任何本领域的等同替换，均属于本发明的保护范围。 

具体实施方式

实施例1.制备复方利伐沙班/叶酸片(1000片量) 

制备方法：取处方量叶酸、利伐沙班按照等量递增法混合均匀，备用；称取处方量的微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、乳糖、十二烷基硫酸钠，与原料药混合粉充分混匀，过80目筛，加入适量5％羟丙甲纤维素溶液制成软材，20目筛制粒，50℃干燥约6h，20目筛整粒，控制颗粒的含水量为2-3％，将干燥后的颗粒与处方量的硬脂酸镁混合均匀，中间体进行检测，压片。制备过程中注意避光，制成的片剂需铝塑泡罩包装。制成的复方片剂中每片含利伐沙班5mg、叶酸0.4mg。 

实施例2.制备复方达比加群酯/叶酸片(1000片量) 

制备方法：取处方量叶酸、达比加群酯按照等量递增法混合均匀，备用；称取处方量的微晶纤维素、乳糖、阿拉伯树胶，与原料药混合粉充分混匀，过80目筛，加入适量二甲基硅油、10％羟丙纤维素溶液制成软材，20目筛制粒，50℃干燥约6h，20目筛整粒，控制颗粒的含水量为2-3％，将干燥后的颗粒与处方量的滑石粉和硬脂酸镁混合均匀，中间体进行检测，压片。制备过程中注意避光，制成的片剂需铝塑泡罩包装，避光保存。制成的复方片剂中每片含达比加群酯75mg、叶酸0.4mg。 

实施例3.制备复方阿哌沙班/5-甲基四氢叶酸片(1000片量) 

制备方法：辅料为直压辅料，干燥备用。取处方量的5-甲基四氢叶酸及微晶纤维素混合均匀，得到混粉中间体1；称取无水乳糖、交联羧甲基纤维素钠、十二烷基硫酸钠，与阿哌沙班充分混匀，得到混粉中间体2；将混粉中间体1和混粉中间体2与处方量的硬脂酸镁按照等量递增法混合均匀，得最终混粉中间体，检测混粉中间体，压片。制成的片剂需铝塑泡罩包装，每片含阿哌沙班2.5mg、5-甲基四氢叶酸0.45mg。 

实施例4.制备复方依度沙班/甲酰四氢叶酸/维生素B₆胶囊(1000粒量) 

制备方法：取处方量甲酰四氢叶酸、维生素B₆、依度沙班按照等量递增法混合均匀，备用；再与微晶纤维素、羧甲淀粉钠混合均匀后，过80目筛，加入5％聚维酮95％乙醇溶液适量，制软材，50℃干燥约6h过24目筛制颗粒，控制颗粒的含水量为2-3％，将干燥后的颗粒与处方量微粉硅胶、硬脂酸镁混合均匀，得到的颗粒中间体进行含量检测，检测合格后，装入空心胶囊即得。制备过程中注意避光，制成的胶囊需铝塑泡罩包装，避光保存。制成的胶囊中每粒含依度沙班15mg、甲酰四氢叶酸0.6mg、维生素B₆10mg。 

实施例5.制备复方达比加群酯/5-MTHF+维生素B₁₂双层片(1000片量) 

达比加群酯颗粒的制备方法：将原料粉碎过80目筛，干燥备用。取75g达比加群酯、62.0g维晶纤维素和18.0g羧甲基淀粉钠，混合均匀，用5％聚维酮K29/30－95％乙醇溶液制成软材，20目筛制粒，50℃干燥约6h，20目筛整粒，控制颗粒的含水量为2-3％，得到达比加群酯层颗粒A； 

维生素层颗粒的制备方法：取0.6g5-MTHF、0.2g维生素B₁₂、50.0g微晶纤维素和25.0g低取代羟丙基纤维素，混合均匀，用5％聚维酮K29/30-95％乙醇溶液制成软 材，20目筛制粒，50℃干燥约6h，20目筛整粒，控制颗粒的含水量为2-3％，得到维生素层颗粒B； 

双层片的制备方法：将干燥后的颗粒A、B分别与硬脂酸镁混合均匀，半成品分别进行检测，测定含量后，分别装入料斗中，用双层片压片机压片。制备过程中注意避光，制成的片剂需铝塑泡罩包装，避光保存。制成的复方片剂中每片含75mg达比加群酯、0.6mg的5-MTF、0.2mg维生素B₁₂。 

实施例6.达比加群酯/叶酸组合物对静脉栓塞家兔模型的抗凝、抗血栓作用 

方法：健康、雄性新西兰兔18只，体重2.8～3.2kg/只，分为3组，每组6只，分别每日灌喂等容积生理盐水(空白对照组)、达比加群酯15mg/kg(阳性对照组)和达比加群酯15mg/kg+叶酸0.08mg/kg(实验组)，连续给药4周，于最后1次灌喂后2小时肌注麻醉，动物仰卧固定，分离左股静脉，插管以备采集血样及必要时补充麻醉。分离双侧颈静脉至颈外静脉与面静脉的分叉点，长度4cm，结扎小侧支。通过夹闭远、近端分离出一段颈静脉，套管排空血液，灌注0.5％聚多卡醇5分钟造成血管内皮损伤(诱导凝血)。抽干液体，生理盐水冲洗。然后，松散结扎远端使管腔直径狭窄至0.8毫米，恢复血流灌注25分钟，分离该静脉段，剥离血凝块，干燥、称重(每个动物血凝块重量取左、右两侧颈静脉内血块重量的平均值)，股静脉采血测定活化部分凝血活酶时间(APTT)。统计学检验方法采用t检验。 

结果：见表1。阳性对照组及实验组APTT延长，显著大于空白对照组(均P<0.01)，表明达比加群酯显著抑制动物体内的凝血过程。阳性对照组及实验组血块重量也明显小于空白对照组(均P<0.01)，达比加群酯叶酸组合物对兔的抗凝作用优于达比加群酯单用(P<0.05)，提示叶酸有辅助抗凝或抗血栓形成作用。 

表1达比加群酯叶酸组合物对兔静脉血栓形成的作用

注：与空白对照组比较，*P<0.01；与达比加群酯组比较，^△P<0.05。 

实施例7.利伐沙班/叶酸组合物对家兔的抗血栓作用 

方法：健康、雄性新西兰兔18只，体重2.7～3.3kg/只，分为3组，每组6只，分别每日灌喂等容积生理盐水(空白对照组)、利伐沙班1mg/kg(阳性对照组)和利伐沙班1mg/kg+叶酸0.08mg/kg(实验组)，连续给药4周，于最后1次灌喂后2小时麻醉动物，仰卧固定，分离左股静脉，插管以备采集血样。分离双侧颈静脉至颈外静脉与面静脉的分叉点，长度4cm。通过夹闭远、近端分离出一段颈静脉，套管排空血液，灌注0.5％聚多卡醇5分钟造成血管内皮损伤。生理盐水冲洗。然后，松散结扎远端使管腔直径狭窄至0.8毫米，恢复血流灌注25分钟，分离该静脉段，剥离血凝块，干燥、称重(每个动物血凝块重量取左、右两侧颈静脉内血块重量的平均值)，股静脉采血测定APTT。统计学检验方法采用t检验。 

结果：见表2。阳性对照组及实验组APTT延长，显著大于空白对照组(均P<0.01)，表明利伐沙班显著抑制动物体内的凝血过程。阳性对照组及实验组血块重量也明显小于空白对照组(均P<0.01)，利伐沙班叶酸组合物对兔的抗凝作用优于利伐沙班单用(P<0.05)，提示叶酸有辅助抗凝或抗血栓形成作用。 

表2利伐沙班叶酸组合物对兔静脉血栓形成的作用

注：与空白对照组比较，*P<0.01；与达比加群酯组比较，^△P<0.05。 

实施例8.阿哌沙班/5-甲基四氢叶酸对大鼠血栓湿重的影响 

方法：SD大鼠30只，雌雄各半，体重250～280g，随机分3组，每组10只。对照组(生理盐水)、阿哌沙班+5-甲基四氢叶酸组(0.5+0.09mg/kg)、阿哌沙班组(0.5mg/kg)，灌胃给药，每日一次，共7天。动物经上述给药方法给药后，禁食12小时不禁水，于次日给药2小时后，用戊巴比妥钠30-40mg/kg腹腔麻醉，仰卧位固定，分离右侧颈总动脉和左侧颈外静脉，在聚乙烯管中放一段长5cm的预先称重的4号丝线，并用肝素生理盐水充满聚乙烯管。当聚乙烯管的一端插入左颈外静脉后，在将聚乙烯管的另一端插入右颈总动脉。打开动脉夹，开放血流15分钟后中断血流，迅速取出丝线称重，总重量减去原丝线重量即为血栓湿重。 

结果：见表3。实验结果表明，与对照组相比，阿哌沙班组和阿哌沙班+5-甲基四氢叶酸组血栓湿重均有明显减小，差异有统计意义。本实验还发现，合用阿哌沙班和5-甲基四氢叶酸对减小血栓大小也强于单独使用阿哌沙班(P<0.05)，提示5-甲基四氢叶酸在抑制血栓的形成中起一定作用(表3)。 

表3阿哌沙班+5-甲基四氢叶酸对大鼠血栓湿重的影响(X±SD，n＝10) 

注：与生理盐水组比较，^*P<0.05，与阿哌沙班组比较，^△P<0.05。