一种多拷贝的金属硫蛋白重组表达载体及其高效表达金属硫蛋白的方法

摘要

本发明提供一种多拷贝的金属硫蛋白重组表达载体及其高效表达金属硫蛋白的方法，属于生物化学技术领域，该方法是构建多拷贝的金属硫蛋白重组表达载体；将构建的重组表达载体转化毕赤酵母GS115或KM71中，在不含组氨酸的培养基上筛选到重组菌；将筛选到的重组菌接种于BMGY培养液，快速振荡培养，离心收集菌体，用培养液重悬，稀释，快速振荡培养至对数期加入甲醇，流加甲醇继续培养；收集菌体，超声破碎，离心收集上清，可从上清中分离纯化到金属硫蛋白。本发明方法克服了传统金属硫蛋白制备方法的不足，有效避免了大量动物资源的浪费、细菌源内毒素污染，降低了生产成本，提高了蛋白产量。