一种从人血浆中提取高密度脂蛋白及分离纯化载脂蛋白apoA-I的方法

摘要

本发明提供一种从正常人血浆中提取高密度脂蛋白（HDL）及分离纯化高纯度载脂蛋白apoA-I的方法。它包括以下步骤：1）用中性盐调节血浆到不同密度，采用序列梯度密度超速离心法，排除杂蛋白，获取高纯度HDL组分；2）获得的高纯HDL组分在低温冷冻状态下用一定比例醇醚溶剂进行流加法脱脂获取脱脂后apoHDL沉淀；3）用含1-8M尿素的TBS缓冲液体系复溶apoHDL沉淀并过滤，滤液先后经过分子筛层析和阴离子交换层析，分离纯化获得高纯度的apoA-I溶液。本发明的方法能够将很难除掉的白蛋白组分与HDL分离，本方法制备的apoA-I具有非常高的纯度和活性，纯度可达98%以上，被倍比稀释64倍后仍能与抗血清发生清晰沉淀反应，且操作安全方便，提取周期短，适于工业化生产。